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原核表达载体pKpL5的构建及应用研究
1
作者
张仁刚
敬保迁
张洁
《川北医学院学报》
CAS
2008年第1期8-12,共5页
目的构建基因工程生产用高效原核融合表达质粒载体。方法在原核表达质粒pKpL4起始密码下游嵌入人工合成的六聚组氨酸编码区、16s RNA3端互补区、凝血酶识别位点编码区接头,构建成原核表达质粒pKpL5,并将人生存素单体、双体及利什曼原虫L...
目的构建基因工程生产用高效原核融合表达质粒载体。方法在原核表达质粒pKpL4起始密码下游嵌入人工合成的六聚组氨酸编码区、16s RNA3端互补区、凝血酶识别位点编码区接头,构建成原核表达质粒pKpL5,并将人生存素单体、双体及利什曼原虫LACK抗原基因编码区分别克隆入pQE32、pKpL4和pKpL5进行表达,SDS-PAGE电泳分析各目的蛋白的表达量。结果人生存素单体、双体及利什曼原虫LACK抗原基因读码框在pQE32和pKpL4质粒载体内均不表达,而在pKpL5内,其目的蛋白表达量分别占细菌总蛋白量的5.1%,19%和35%。结论pKpL5可用作通用原核高效表达质粒载体表达各种目的基因。
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关键词
原核表达
质粒
pkpl5
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职称材料
题名
原核表达载体pKpL5的构建及应用研究
1
作者
张仁刚
敬保迁
张洁
机构
川北医学院分子生物学研究室
出处
《川北医学院学报》
CAS
2008年第1期8-12,共5页
基金
国家自然科学基金(No:30571636)
四川省科学基金(No:02SG022-29)
文摘
目的构建基因工程生产用高效原核融合表达质粒载体。方法在原核表达质粒pKpL4起始密码下游嵌入人工合成的六聚组氨酸编码区、16s RNA3端互补区、凝血酶识别位点编码区接头,构建成原核表达质粒pKpL5,并将人生存素单体、双体及利什曼原虫LACK抗原基因编码区分别克隆入pQE32、pKpL4和pKpL5进行表达,SDS-PAGE电泳分析各目的蛋白的表达量。结果人生存素单体、双体及利什曼原虫LACK抗原基因读码框在pQE32和pKpL4质粒载体内均不表达,而在pKpL5内,其目的蛋白表达量分别占细菌总蛋白量的5.1%,19%和35%。结论pKpL5可用作通用原核高效表达质粒载体表达各种目的基因。
关键词
原核表达
质粒
pkpl5
Keywords
Prokaryotic expression
Plasmid
pkpl5
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
原核表达载体pKpL5的构建及应用研究
张仁刚
敬保迁
张洁
《川北医学院学报》
CAS
2008
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