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LDH法检测pcDNA-HPV16L1免疫小鼠CTL活性的研究
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作者 高慧 王琴 +2 位作者 成蓓 朱晓芳 毕志刚 《山东医药》 CAS 北大核心 2007年第11期4-6,共3页
目的观察pcDNA-HPV16L1免疫BALB/c小鼠细胞毒性T细胞(CTL)活性变化,建立简便易行的CTL检测体系,为人乳头瘤病毒(HPV)疫苗免疫中CTL作用的研究奠定基础。方法用pcDNA-HPV16L1转染的小鼠黑色素瘤B16细胞作为靶细胞,用pcDNA-HPV16L1免疫BAL... 目的观察pcDNA-HPV16L1免疫BALB/c小鼠细胞毒性T细胞(CTL)活性变化,建立简便易行的CTL检测体系,为人乳头瘤病毒(HPV)疫苗免疫中CTL作用的研究奠定基础。方法用pcDNA-HPV16L1转染的小鼠黑色素瘤B16细胞作为靶细胞,用pcDNA-HPV16L1免疫BALB/c小鼠(观察组)并以乳酸脱氢酶(LDH)法检测其CTL活性,设空质粒组与空白组作为对照(分别肌注空质粒和葡萄糖)。结果与空质粒组和空白组比较,观察组CTL活性显著增强。结论pcDNA-HPV16L1免疫小鼠的CTL活性增强,LDH法可稳定检测。 展开更多
关键词 pcdna-人乳头瘤病毒16L1 乳酸脱氢酶 细胞毒性T淋巴细胞 BALB/C小鼠
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重组鸡Igλ轻链真核细胞分泌表达及其单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 张红 张改平 +4 位作者 章金刚 杨艳艳 易明林 李姣 韩鸿鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期260-262,共3页
目的:构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链,制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb)。方法:PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因,限制性酶切消化后,定向克隆于真核表达载体pcDNA3,构建具有6×His标签、分泌表达的重组载... 目的:构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链,制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb)。方法:PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因,限制性酶切消化后,定向克隆于真核表达载体pcDNA3,构建具有6×His标签、分泌表达的重组载体pcDNA-λ。重组载体转染COS7细胞后,SDS-PAGE分析真核表达载体pcDNA-λ在COS7细胞的分泌表达。用2×106个雏鸡B淋巴细胞免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞融合,分别采用细胞免疫荧光和间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆。结果:成功构建分泌表达鸡Igλ轻链的重组载体,SDS-PAGE分析表明在COS7细胞上清有目的蛋白的分泌表达。杂交瘤细胞经筛选与鉴定,获得2株分泌抗鸡Igλ轻链mAb的杂交瘤细胞株,Western blot检测到该mAb对重组鸡Igλ轻链的反应性。结论:构建了重组表达载体pcDNA-λ并在COS7细胞上清分泌表达了重组鸡Igλ轻链。并用淋巴细胞杂交瘤技术成功筛选出抗鸡Igλ轻链mAb。为深入研究鸡Igλ轻链的结构与功能奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡Igλ轻链 pcdna-λ COS7细胞 真核分泌表达 单克隆抗体
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