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龟板抑制破骨分化改善骨质疏松性骨折
1
作者 张鹏 陈弘林 +10 位作者 伍子贤 余思瑶 招文华 尚奇 何嘉辉 陈桂锋 余富勇 梁德 江晓兵 任辉 余翔 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2024年第1期17-22,共6页
目的基于网络药理学和实验验证探讨龟板(plastrum testudinis,PT)治疗骨质疏松性骨折(osteoporotic fracture,OF)的潜在机制。方法借助BATMAN数据库得到PT成分及其对应靶标,检索GeneCards、OMIM数据库获得OF相关靶点,在STRING数据库输... 目的基于网络药理学和实验验证探讨龟板(plastrum testudinis,PT)治疗骨质疏松性骨折(osteoporotic fracture,OF)的潜在机制。方法借助BATMAN数据库得到PT成分及其对应靶标,检索GeneCards、OMIM数据库获得OF相关靶点,在STRING数据库输入交集靶点得到蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)信息,借助Cytoscape3.7.2软件进行PPI网络及“龟板-活性成分-靶标-骨质疏松性骨折”网络的构建,使用Cytoscape3.7.2软件、R软件进行GO功能富集分析及KEGG通路富集分析。此外,为了验证网络药理学研究结果的可靠性,还进行体内实验验证龟板改善OF的作用,并通过体外实验探究了龟板干预下的人外周血单核细胞(human peripheral blood monocytes,HPBMs)表型。结果获得龟板6个活性成分,342个作用靶标,其中与OF相关靶标34个,GO功能富集分析共有802个结果(P<0.05),KEGG富集分析有67个结果,其中相关信号通路有22条(P<0.05),主要涉及TNF、MAPK、Estrogen、NF-κB等信号通路。值得一提的是,体内实验证实龟板可有效治疗OF模型大鼠的骨缺损;体外实验发现龟板能抑制RANKL诱导的HPBMs破骨分化。结论龟板可能通过多种化合物、靶点和通路调节炎症反应、激素代谢及细胞周期来治疗OF,其中抑制破骨分化可能是龟板抗骨质疏松性骨折的重要机制。 展开更多
关键词 骨质疏松性骨折 龟板 网络药理学 实验验证 破骨分化
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龟板提取物抑制细胞衰老缓解SOP小鼠骨量丢失及海马退变
2
作者 伍子贤 方志超 +8 位作者 林锋 尚奇 招文华 陈弘林 张鹏 江晓兵 任辉 梁德 张学来 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2024年第3期318-326,共9页
目的探讨龟板提取物(Plastrum testudinis extract,后简称PTE)通过抑制细胞衰老缓解SOP小鼠的骨量丢失及海马退变的作用。方法动物实验:应用传统半乳糖皮下注射+去势法建立老年性骨质疏松症(senile osteoporosis,SOP)模型,将C57/BL6小... 目的探讨龟板提取物(Plastrum testudinis extract,后简称PTE)通过抑制细胞衰老缓解SOP小鼠的骨量丢失及海马退变的作用。方法动物实验:应用传统半乳糖皮下注射+去势法建立老年性骨质疏松症(senile osteoporosis,SOP)模型,将C57/BL6小鼠分为雌性或雄性的CON组、SOP组、SOP+PTE组;SOP+PTE组在造模过程中用PTE 0.5 g/mL灌胃干预4周,取材前1周进行行为学实验,后取大脑、L4椎体,检测骨和海马组织形态学;细胞实验:利用过氧叔丁醇(TBHP)诱导MC3T3/HT22细胞衰老,分别观察诱导后HT22半乳糖苷酶染色、衰老标志物和MC3T3成骨、衰老标志物的变化及PTE相应的治疗效果。结果MicroCT提示雌雄小鼠中,与CON组相比,SOP组骨量丢失,SOP+PTE组骨量则得到了恢复;骨HE切片结果与MicroCT结果相符;海马组织切片提示,与CON组相比,SOP组海马出现退变,而SOP+PTE组退变则得到缓解。在新物体识别实验和时序实验中,与CON、SOP组相比,雄性SOP+PTE组记忆能力明显恢复;但雌雄小鼠旷场实验均无明显变化。②TBHP可诱导MC3T3衰老,降低成骨能力及增加衰老蛋白表达,而当加入PTE后,均能逆转TBHP导致的成骨能力降低与蛋白下降;TBHP亦可增加HT22半乳糖苷酶染色区域,增加衰老蛋白表达,而加入PTE后,上述变化均得到逆转。结论PTE通过抑制前成骨细胞与海马神经元细胞的衰老,缓解SOP小鼠的骨量丢失和海马衰老退变。 展开更多
关键词 龟板提取物 细胞衰老 老年性骨质疏松 骨量丢失 海马组织退变
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龟甲炮制工艺研究
3
作者 张义生 袁明洋 +6 位作者 杨柳 王薇 孙晓静 李力 李婷 解小霞 田永强 《中国现代中药》 CAS 2023年第12期2583-2587,共5页
目的:探索龟甲最优炮制工艺。方法:以18种氨基酸总含量和总多酚含量为评价指标,采用L_(9)(3^(4))正交试验优化转速、砂烫温度、砂烫时间,并进行验证实验。结果:在转速为20 r·min^(-1)、砂烫温度为240℃、砂烫时间为2 min条件下炮... 目的:探索龟甲最优炮制工艺。方法:以18种氨基酸总含量和总多酚含量为评价指标,采用L_(9)(3^(4))正交试验优化转速、砂烫温度、砂烫时间,并进行验证实验。结果:在转速为20 r·min^(-1)、砂烫温度为240℃、砂烫时间为2 min条件下炮制龟甲,炮制品质地酥脆、总氨基酸和总多酚溶出度较高,3批炮制品的氨基酸平均总质量分数和总多酚平均质量分数分别为19.67%、50.74 mg·kg^(-1)(RSD分别为1.06%、0.87%)。结论:优化的龟甲炮制工艺稳定可行,可为龟甲工业化生产工艺研究提供参考。 展开更多
关键词 龟甲 氨基酸 总多酚 炮制工艺
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龟板体外抗氧化活性的研究 被引量：28
4
作者 谢学明 李熙灿 +4 位作者 钟远声 黄春花 杜少辉 李伊为 陈东风 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2006年第18期1368-1370,共3页
目的研究龟板的体外抗氧化活性,为抗衰老药物的筛选提供参考。方法将龟板分别用石油醚、乙酸乙酯、95%乙醇等极性依次递增的溶剂进行提取得不同提取部位溶出物,用DPPH法进行体外抗氧化活性检测,并与抗坏血酸进行比较。结果龟板95%乙醇... 目的研究龟板的体外抗氧化活性,为抗衰老药物的筛选提供参考。方法将龟板分别用石油醚、乙酸乙酯、95%乙醇等极性依次递增的溶剂进行提取得不同提取部位溶出物,用DPPH法进行体外抗氧化活性检测,并与抗坏血酸进行比较。结果龟板95%乙醇提取部位溶出物与石油醚、乙酸乙酯部位提取物相比抗氧化活性均存在显著性差异(P<0.01),且以95%乙醇提取部位溶出物体外抗氧化活性最强,其EC50与抗坏血酸比较相差2.38个数量级。结论龟板95%乙醇提取部位溶出物具有很强的体外抗氧化活性,可作进一步研究。 展开更多
关键词 龟板 DPPH 抗氧化活性
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龟板对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化的影响 被引量：40
5
作者 黎晖 周健洪 +4 位作者 陈东风 杜少辉 李伊为 邓汝东 张赛霞 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 2005年第3期159-161,共3页
目的探讨益肾中药龟板对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)体外向成骨分化的影响。方法使用密度梯度法分离成年大鼠骨髓间充质干细胞,观察在培养液中添加不同浓度龟板血清条件下MSCs的成骨变化。应用形态学、碱性磷酸酶... 目的探讨益肾中药龟板对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)体外向成骨分化的影响。方法使用密度梯度法分离成年大鼠骨髓间充质干细胞,观察在培养液中添加不同浓度龟板血清条件下MSCs的成骨变化。应用形态学、碱性磷酸酶组织化学染色、VonKossa染色、骨钙素测定等方法观察细胞成骨活性。结果形态学表明,MSCs贴壁细胞呈集落生长,有成纤维细胞外观。龟板组碱性磷酸酶、钙化结节、骨钙素明显升高,与对照组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论MSCs受龟板诱导高效地向成骨细胞分化,可以为体内骨组织工程提供种子细胞。 展开更多
关键词 龟板 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 药理学
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龟板醇提物对大鼠骨髓间充质干细胞氧化损伤的修复及其抗脂质过氧化作用 被引量：18
6
作者 李熙灿 谢学明 +4 位作者 黄春花 钟远声 李伊为 周健洪 陈东风 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1043-1046,共4页
目的研究龟板95%乙醇提取物(醇提物)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)氧化损伤修复及其抗脂质过氧化作用。方法使用密度梯度法分离大鼠MSC进行培养,经CD44鉴定后以H2O2作用于MSC3h,建立MSC氧化损伤模型,通过MTT法检测不同质量浓度龟板醇提物... 目的研究龟板95%乙醇提取物(醇提物)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)氧化损伤修复及其抗脂质过氧化作用。方法使用密度梯度法分离大鼠MSC进行培养,经CD44鉴定后以H2O2作用于MSC3h,建立MSC氧化损伤模型,通过MTT法检测不同质量浓度龟板醇提物(0.166、0.833、1.66、3.32、4.98mg/mL)对MSC损伤的修复。50只SD大鼠,随机分为5组,受试组分别ig0.01、0.03、0.09g/(kg.d)龟板醇提物;阳性对照组ig维生素E200mg/(kg.d);对照组ig等量的蒸馏水。每天1次,共7d,分别用TBA比色法、亚硝酸盐法测定大鼠肝中丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果与H2O2(1∶10)损伤组比较,龟板醇提物各组具有显著性差异(P<0.01、0.05);与对照组比较,龟板醇提物低、中、高剂量组MDA水平均明显降低(P<0.01),同时能明显提高SOD活力(P<0.01、0.05)。结论龟板醇提物对大鼠MSC氧化损伤具有明显修复作用,同时,具有抗脂质过氧化作用。 展开更多
关键词 龟板醇提物 HO2O 骨髓间充质干细胞(MSC) 脂质过氧化
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龟板抗Parkinson病大鼠多巴胺能神经元凋亡的作用 被引量：16
7
作者 邓汝东 李伊为 +8 位作者 陈东风 黎晖 张赛霞 赵丹 孟令杰 周健洪 盂冬雪 张瑞 张海玲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期301-306,共6页
为探讨补肾中药龟板抗Parkinson病大鼠模型黑质神经元凋亡的作用,本研究用6-羟基多巴胺(6-OHDA,0.2%)于大鼠左侧黑质致密带注射2μl造成Parkinson病(PD)模型,同时设立龟板组(灌胃补肾中药龟板2g/次,2次/d,连续12周)、模型组和正常对照组... 为探讨补肾中药龟板抗Parkinson病大鼠模型黑质神经元凋亡的作用,本研究用6-羟基多巴胺(6-OHDA,0.2%)于大鼠左侧黑质致密带注射2μl造成Parkinson病(PD)模型,同时设立龟板组(灌胃补肾中药龟板2g/次,2次/d,连续12周)、模型组和正常对照组,观察其行为改变,再用HE、TH染色或DIG-dUTP染色观察黑质神经元的变化,免疫组化染色检测Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果显示:龟板组PD大鼠的旋转行为改善明显,黑质致密部的TH染色阳性神经元增多,DIG-dUTP染色阳性率降低,Bcl-2蛋白表达增加和Bax蛋白表达减少。本文结果提示,长期龟板治疗对PD模型大鼠多巴胺能神经元凋亡具有明显的保护作用,且该作用可能与龟板升高Bcl-2和降低Bax的表达有关。 展开更多
关键词 龟板 PARKINSON病 多巴胺能神经元 凋亡 大鼠
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龟板对局灶性脑缺血后神经干细胞的作用 被引量：58
8
作者 陈东风 杜少辉 +2 位作者 李伊为 张进 黎晖 《广州中医药大学学报》 CAS 2001年第4期328-331,共4页
【目的】探讨补肾中药龟板对局灶性脑缺血后神经干细胞的作用。【方法】采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血大鼠模型 ,应用免疫组织化学技术检测神经上皮干细胞蛋白 (Nestin)的表达 ,观察龟板对脑缺血后神经上皮干细胞蛋白的影响。... 【目的】探讨补肾中药龟板对局灶性脑缺血后神经干细胞的作用。【方法】采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血大鼠模型 ,应用免疫组织化学技术检测神经上皮干细胞蛋白 (Nestin)的表达 ,观察龟板对脑缺血后神经上皮干细胞蛋白的影响。【结果】龟板可降低神经病评分和增强脑缺血后Nestin表达。【结论】提示补肾中药龟板可减轻神经损伤症状和对局灶性脑缺血后神经干细胞有促进增殖作用。 展开更多
关键词 龟甲 药理学 脑缺血 中药疗法 神经干细胞 药物作用
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龟板含药血清对大鼠骨髓间质干细胞体外增殖的影响 被引量：48
9
作者 周健洪 陈东风 +4 位作者 黎晖 杜少辉 李伊为 邓汝东 张赛霞 《广州中医药大学学报》 CAS 2005年第1期35-38,共4页
[目的]观察益肾中药龟板血清对大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)体外增殖的影响。[方法]使用密度梯度法分离大鼠骨髓间质干细胞进行培养,经5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记和CD44染色及两者双重染色鉴定后,分别从光学显微镜下... [目的]观察益肾中药龟板血清对大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)体外增殖的影响。[方法]使用密度梯度法分离大鼠骨髓间质干细胞进行培养,经5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记和CD44染色及两者双重染色鉴定后,分别从光学显微镜下的形态学特征、免疫细胞化学染色后的MSC表型特征、四甲基偶氯唑盐(MTT)染色后MSC的吸光值以及以Brdu、增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色后MSC的阳性细胞数变化等角度观察在培养液中添加不同浓度龟板血清条件下MSC的生长变化。[结果]不同浓度的龟板血清均以浓度依赖方式促进MSC增殖活力和增加Brdu、PCNA阳性细胞数,与对照组比较具有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。[结论]龟板血清可促进MSC的增殖而有利于细胞脱氧核糖核酸(DNA)合成,推测这可能是龟板补肾的机理之一。 展开更多
关键词 龟板/药理学 补肾 骨髓祖代细胞 细胞培养 免疫组织化学
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中药龟板提取物化学成分及其调控鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)增殖活性的实验研究 被引量：29
10
作者 陈薇 曾和平 +2 位作者 王春燕 王婷婷 陈东风 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第3期265-270,共6页
中药龟板提取物浸膏经硅胶柱层析,用石油醚-乙酸乙酯作洗脱剂,梯度洗脱,得到16个组分;采用MTT法和流式细胞技术研究了它们对鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)的增殖作用,实验结果显示组分Ts-12具有促进rMSCs增殖的作用(p<0.05),而组分Ts-4... 中药龟板提取物浸膏经硅胶柱层析,用石油醚-乙酸乙酯作洗脱剂,梯度洗脱,得到16个组分;采用MTT法和流式细胞技术研究了它们对鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)的增殖作用,实验结果显示组分Ts-12具有促进rMSCs增殖的作用(p<0.05),而组分Ts-4则表现出抑制rMSCs增殖的作用(p<0.05),其它样品对rMSCs的增殖作用不显著(p>0.05),不具统计学意义.采用了GC-MS分析各组分化学成分,并用HPLC和9个标准物质鉴定确证了组分Ts-12中含有十六酸甲酯(S-1)、十六酸乙酯(S-3)、十八酸甲酯(S-4)和甾醇(S-7)以及十四酸甾醇酯(S-8),组分Ts-4主要含有十八酸(S-5).对标准品也采用了MTT法和流式细胞仪研究了它们对rMSCs的增殖作用,结果表明十四酸甾醇酯和十六酸甲酯具有促进rMSCs增殖的作用,而十八酸具有抑制作用. 展开更多
关键词 龟板有效成分 柱层析 气质联用 高效液相 鼠骨髓间充质干细胞
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龟板对植入大鼠损伤脊髓内骨髓间充质干细胞分化为神经元的影响 被引量：13
11
作者 陈东风 黎晖 +5 位作者 杜少辉 周健洪 李伊为 张立群 邓汝东 张赛霞 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期233-237,共5页
应用密度梯度法分离大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)进行培养,经5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记和CD44(celldifferentiation protein44)染色及BrdU/CD44双标染色鉴定,将标记有BrdU的MSCs分别植入脊髓损伤体内和龟板治疗脊... 应用密度梯度法分离大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)进行培养,经5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记和CD44(celldifferentiation protein44)染色及BrdU/CD44双标染色鉴定,将标记有BrdU的MSCs分别植入脊髓损伤体内和龟板治疗脊髓损伤体内。于移植后1周、2周、3周、4周和6周取损伤脊髓组织,对BrdU、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)进行免疫组化染色及BrdU/NF和BrdU/GFAP双标染色检测移植后MSCs的存活和分化。结果发现:移植后1周,两组在移植区内都可见BrdU单位、BrdU/NF双标细胞,移植后2周达到高峰。龟板组可使BrdU单位和BrdU/NF双标细胞持续高表达至移植后6周,而脊髓损伤组BrdU单位和BrdU/NF双标细胞表达减少至移植后4周,组间比较差别有显著性。结果提示益肾龟板能促进脊髓损伤移植MSCs存活和分化为神经元。 展开更多
关键词 龟板 骨髓间充质干细胞 脊髓损伤 神经元
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龟板调控BMSCs增殖、迁移和成骨分化及其抗骨质疏松症的研究进展 被引量：10
12
作者 余翔 任辉 +8 位作者 沈耿杨 张鹏 余富勇 尚奇 汤凯 张志达 招文华 梁德 江晓兵 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1847-1851,共5页
近年来,中医药在抗骨质疏松症方面显示出独特优势。龟板被证实可通过miRNA及其靶基因、信号通路及相关因子调控BMSCs功能,从而抗骨质疏松症。本文对龟板调控BMSCs增殖、迁移和成骨分化及其抗骨质疏松症的研究进展进行综述,发现龟板体外... 近年来,中医药在抗骨质疏松症方面显示出独特优势。龟板被证实可通过miRNA及其靶基因、信号通路及相关因子调控BMSCs功能,从而抗骨质疏松症。本文对龟板调控BMSCs增殖、迁移和成骨分化及其抗骨质疏松症的研究进展进行综述,发现龟板体外可通过调节BMP-4、VDR、RARα、Id1等表达调控BMSCs增殖;可上调HGF/c-met轴、SDF-1/CXCR4轴促进BMSCs迁移;可通过调节成骨相关因子、miRNAs和信号通路调控BMSCs成骨分化。此外,龟板体内可有效抗PMOP、GIOP和SOP。本文旨在为中医药防治骨质疏松症提供相关参考。 展开更多
关键词 中医药 龟板 骨质疏松症 干细胞 综述
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龟板含药血清促进骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白4的表达 被引量：8
13
作者 黎晖 李春 +7 位作者 陈东风 李伊为 杜少辉 周健洪 邓汝东 张赛霞 孙景波 胡斌 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期304-309,共6页
目的龟板有促大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖作用,本研究观察龟板含药血清对MSCs中骨形态发生蛋白4(BMP4)表达的影响。方法使用密度梯度法分离大鼠骨髓间充质干细胞进行培养,传代纯化,在基础培养液中添加不同浓度龟板含药血清和对照血... 目的龟板有促大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖作用,本研究观察龟板含药血清对MSCs中骨形态发生蛋白4(BMP4)表达的影响。方法使用密度梯度法分离大鼠骨髓间充质干细胞进行培养,传代纯化,在基础培养液中添加不同浓度龟板含药血清和对照血清,用荧光定量PCR和原位杂交方法检测BMP4 mRNA表达,用ELISA、免疫组织化学和免疫荧光组织化学法结合激光扫描共聚焦显微镜技术检测BMP4蛋白表达的变化。结果BMP4蛋白和mRNA表达相一致,龟板含药血清以浓度依赖方式促进MSC的BMP4 mRNA及其蛋白表达。结论龟板含药血清以时效和量效依赖性促进BMP4在MSCs的表达,可能与龟板促MSCs增殖作用有关。 展开更多
关键词 龟板 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白4 原位杂交 大鼠
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脂肪酸甲酯调控鼠骨髓间质干细胞增殖作用的研究 被引量：9
14
作者 张越华 曾和平 陈东风 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1400-1404,共5页
龟板浸膏采用石油醚、乙醚、二氯甲烷依次提取,将提取物进行甲酯化处理。用MTT(商品名为噻唑蓝,化学名为3-(4,5)-2-唑噻-(2,5)-二苯基溴化四氮唑蓝)法及流式细胞仪,研究了甲酯化产物调控鼠骨髓间充质干细胞活性,采用气质联用和高效液相... 龟板浸膏采用石油醚、乙醚、二氯甲烷依次提取,将提取物进行甲酯化处理。用MTT(商品名为噻唑蓝,化学名为3-(4,5)-2-唑噻-(2,5)-二苯基溴化四氮唑蓝)法及流式细胞仪,研究了甲酯化产物调控鼠骨髓间充质干细胞活性,采用气质联用和高效液相色谱技术研究了龟板浸膏提取物甲酯化产物的化学成分,结果表明,3个甲酯化样品都能促进干细胞增殖,而且都含有十六烷酸甲酯,当十六烷酸甲酯浓度为0.15μg/μL时能促进干细胞增殖,由此初步推断龟板浸膏甲酯化产物促进干细胞增殖与十六烷酸甲酯有关。这为中医药调控干细胞的研究提供重要的参考。 展开更多
关键词 龟板 干细胞 增殖 脂肪酸 甲酯化
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龟甲提取物对骨髓间充质干细胞增殖过程中核受体的影响 被引量：12
15
作者 宋述财 许华 +4 位作者 周健洪 黎晖 李伊为 杜少辉 陈东风 《广州中医药大学学报》 CAS 2006年第2期95-99,111,共6页
【目的】观察龟甲(也称龟版或龟板)提取物对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖过程中核受体 (nuclear receptor,NR)表达的影响。【方法】采用密度梯度法分离大鼠MSC进行培养,经5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记和 CD44免疫组... 【目的】观察龟甲(也称龟版或龟板)提取物对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖过程中核受体 (nuclear receptor,NR)表达的影响。【方法】采用密度梯度法分离大鼠MSC进行培养,经5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记和 CD44免疫组化染色鉴定后,分别以高、中、低剂量的龟甲提取物(3 333、333．3、33．33μg／mL)加入到体外培养的MSC中, 与龟甲提取物作用12、24、72、120 h后,采用免疫组化法和免疫荧光细胞化学法检测MSC的视黄酸受体(retinoic acid receptor-α,RARα)、维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)、雌激素受体(estrogen reeepror,ER)、糖皮质激素受体 (glucocorticoid receptor,GR)、甲状腺激素受体(thyroid hormone receptor-α,TRα)和过氧化物酶体增殖物活化受体(peroxisome proliferator activated receptor-δ,PPARδ)的表达。【结果】高、中、低剂量龟甲提取物组的MSC的RARα、VDR表达阳性细胞均高于对照组(P<0．05或P<0．01),且呈剂量依赖性;作用24 h后RARα表达达峰值,作用72 h后VDR表达达峰值。未检测到ER、GR、PPARδ、TRα阳性反应细胞。【结论】视黄酸受体α和维生素D受体可能为龟甲提取物促MSC增殖的药理靶点。 展开更多
关键词 龟甲提取物/药理学 骨髓间充质干细胞/药物作用 细胞增殖 核受体/病理学 细胞培养 大鼠
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龟板含药血清体外诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元 被引量：36
16
作者 陈东风 杜少辉 +1 位作者 李伊为 黎辉 《广州中医药大学学报》 CAS 2003年第3期224-226,共3页
[目的]观察龟板含药血清体外诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元的能力。[方法]采用龟板含药血清体外定向诱导第五代骨髓间充质干细胞,免疫组化鉴定神经丝蛋白(NFP)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。[结果]成年大鼠骨髓间充质干... [目的]观察龟板含药血清体外诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元的能力。[方法]采用龟板含药血清体外定向诱导第五代骨髓间充质干细胞,免疫组化鉴定神经丝蛋白(NFP)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。[结果]成年大鼠骨髓间充质干细胞受龟板血清诱导后神经元样细胞NF表达阳性,诱导后12 h,神经元样细胞NF阳性表达达到高峰。[结论]龟板含药血清可以在体外诱导成年大鼠骨髓间充质分化为神经元。 展开更多
关键词 龟板 体外诱导 成年大鼠 骨髓间充质干细胞 细胞分化 神经元 超微结构 含药血清
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两种不同产地龟板抗氧化活性研究 被引量：5
17
作者 黄春花 钟远声 +2 位作者 谢学明 李熙灿 陈东风 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2007年第5期828-830,共3页
[目的]研究两种不同产地龟科动物乌龟Chinemys reeresii(Gray)腹甲提取物的抗氧化活性。[方法]采用DPPH法分别测定两种不同产地龟板的石油醚、乙酸乙酯、95%乙醇等不同极性溶剂提取物的抗氧化活性。[结果]不同产地龟板95%乙醇提取物抗... [目的]研究两种不同产地龟科动物乌龟Chinemys reeresii(Gray)腹甲提取物的抗氧化活性。[方法]采用DPPH法分别测定两种不同产地龟板的石油醚、乙酸乙酯、95%乙醇等不同极性溶剂提取物的抗氧化活性。[结果]不同产地龟板95%乙醇提取物抗氧化活性均最强;海南产龟板抗氧化活性比湖北汉阳产龟板强,差异有统计学意义(P﹤0.01)。[结论]不同产地的龟板所含抗氧化成分存在一定的差异。 展开更多
关键词 龟板 DPPH 抗氧化活性
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龟板组份及配伍对体外培养骨髓间充质干细胞增殖的影响 被引量：6
18
作者 周健洪 曾和平 +4 位作者 陈东风 黎晖 李熙灿 李伊为 杜少辉 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期452-455,共4页
目的:观察龟板组份及配伍对体外培养骨髓间充质干细胞增殖的影响,筛选龟板组份中进MSC增殖的药效成分方法:从龟板提取物分离出10个组份,以不同浓度(2μl,5μl,10μl,20μl)组份及配伍加入体外培养的MSC中,培养3 d后,MTT法测定细胞活性... 目的:观察龟板组份及配伍对体外培养骨髓间充质干细胞增殖的影响,筛选龟板组份中进MSC增殖的药效成分方法:从龟板提取物分离出10个组份,以不同浓度(2μl,5μl,10μl,20μl)组份及配伍加入体外培养的MSC中,培养3 d后,MTT法测定细胞活性。结果:与对照组比较,A、B、H、I 20μl浓度组和C、F(10μl～20μl)浓度组和J(5μl～0μl)浓度组细胞活性显著提高,与J组份配伍细胞活性提高(P<0．05);E(2μl-20μl)浓度组细胞活性显著降低,与E组份配伍组细胞活性显著降低;D和G组细胞活性没有影响。结论:7个组分均促进MSC增殖,以J组份最强,与J组份配伍作用提高;E组份抑制MSC增殖,与E组份配伍作用降低;D和G组份无效。 展开更多
关键词 龟板组份 骨髓间充质干细胞 细胞增殖
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龟板含药血清对骨髓间充质干细胞增殖细胞核抗原表达的影响 被引量：9
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作者 郑庆元 余伟吉 +4 位作者 杜少辉 周健洪 黎晖 李伊为 陈东风 《中华中医药学刊》 CAS 2008年第2期268-270,共3页
目的:观察益肾龟板血清对大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)体外增殖过程的增殖细胞核抗原(Proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法:使用密度梯度法分离大鼠骨髓间质干细胞进行培养,经Brdu标记和CD44... 目的:观察益肾龟板血清对大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)体外增殖过程的增殖细胞核抗原(Proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法:使用密度梯度法分离大鼠骨髓间质干细胞进行培养,经Brdu标记和CD44染色及两者双重染色鉴定后,观察在培养液中添加不同浓度龟板血清条件下MSC增殖过程。用免疫组织化学方法和原位杂交方法检测MSC的PCNA及其mRNA表达;免疫荧光细胞化学法结合激光扫描共聚焦显微镜技术检测PCNA蛋白表达的变化。结果:龟板血清以浓度依赖方式促进MSC的PC-NA及其mRNA表达阳性细胞数和PCNA蛋白表达,与对照组比较有显著性(P<0.05)。结论:龟板血清促MSC增殖作用可能与上调PCNA表达有关。 展开更多
关键词 龟板 骨髓间质干细胞 增殖细胞核抗原 大鼠
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龟板提取物对PC12细胞凋亡的影响及其机制 被引量：4
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作者 刘洋 伍艺灵 +3 位作者 曹佳会 陈东风 周健洪 邓汝东 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期400-403,共4页
目的:探讨龟板提取物(Plastrum testudinis Extracts,PTE)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:采用无血清培养PC12细胞同时100μmol/mL 6-OHDA损伤24 h的方法建立PC12细胞凋亡模型。细胞分为正常对照组... 目的:探讨龟板提取物(Plastrum testudinis Extracts,PTE)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:采用无血清培养PC12细胞同时100μmol/mL 6-OHDA损伤24 h的方法建立PC12细胞凋亡模型。细胞分为正常对照组、6-OHDA组及PTE 3、30μg/mL组四组。在施加处理因素24 h后,MTT比色分析测定细胞光密度值,Ammexin V/PI双染流式细胞术测定细胞凋亡率,Western blot检测BCL-X/L的表达水平。用Bio-Rad Quantity One凝胶分析系统对条带进行半定量分析。结果:MTT与流式细胞术结果显示PTE能提高PC12细胞活力,降低PC12细胞凋亡率,并呈剂量依赖性,PTE 3、30μg/mL组与模型组比较,差异具有统计学意义。Western blot结果显示龟板提取物使BCL-X/L表达增强,并呈剂量依赖性。结论:龟板提取物具有抑制6-羟基多巴胺诱导PC12细胞凋亡的作用,其作用机制可能与上调BCL-X/L的表达有关。 展开更多
关键词 龟板提取物 BCL-X/L PC12细胞 凋亡
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