为筛选出青鲫不同组织中的最适内参基因,本研究利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测β肌动蛋白(β-actin)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、18S核糖体RNA(18S r RNA)和核糖体蛋白L13(...为筛选出青鲫不同组织中的最适内参基因,本研究利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测β肌动蛋白(β-actin)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、18S核糖体RNA(18S r RNA)和核糖体蛋白L13(RPL13)4个候选内参基因在青鲫脑、鳃、性腺、肾脏、肝脏、肌肉和脾脏7个组织中的表达情况,并利用ge Norm、NormFinder和BestKeeper等程序分析候选基因的表达稳定性。结果显示,4个内参基因在各组织的Ct值高低顺序依次为:β-actin>GAPDH>18S r RNA>RPL13;4个内参基因在不同组织的稳定性有所不同,综合评价分析显示其稳定性排序为RPL13>18S r RNA>β-actin>GAPDH,RPL13适合作为青鲫不同组织qRT-PCR分析的内参基因。本研究结果可为后续青鲫功能基因表达特征的研究提供技术支撑。展开更多
文摘为筛选出青鲫不同组织中的最适内参基因,本研究利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测β肌动蛋白(β-actin)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、18S核糖体RNA(18S r RNA)和核糖体蛋白L13(RPL13)4个候选内参基因在青鲫脑、鳃、性腺、肾脏、肝脏、肌肉和脾脏7个组织中的表达情况,并利用ge Norm、NormFinder和BestKeeper等程序分析候选基因的表达稳定性。结果显示,4个内参基因在各组织的Ct值高低顺序依次为:β-actin>GAPDH>18S r RNA>RPL13;4个内参基因在不同组织的稳定性有所不同,综合评价分析显示其稳定性排序为RPL13>18S r RNA>β-actin>GAPDH,RPL13适合作为青鲫不同组织qRT-PCR分析的内参基因。本研究结果可为后续青鲫功能基因表达特征的研究提供技术支撑。
