量子点微球荧光免疫层析定量检测水产、畜禽肉组织中恩诺沙星

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作者 卢礼生 张志芳 +4 位作者 陈媛 罗凯 刘文娟 袁美芳 万萍 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第7期54-61,共8页

目的建立一种快速定量检测水产、畜禽肉组织中恩诺沙星的新方法学。方法以量子点荧光微球为新型标记探针,通过参数优化,制备获得量子点荧光微球免疫层析试纸条;进一步以T/C比值法建立定量检测恩诺沙星的新方法。结果在最优条件下,该试... 目的建立一种快速定量检测水产、畜禽肉组织中恩诺沙星的新方法学。方法以量子点荧光微球为新型标记探针,通过参数优化,制备获得量子点荧光微球免疫层析试纸条;进一步以T/C比值法建立定量检测恩诺沙星的新方法。结果在最优条件下,该试纸条检测缓冲液中恩诺沙星半数抑制浓度为1.04 ng/mL,检出限为0.13 ng/mL;检测水产、畜禽肉组织中恩诺沙星的定量检测范围为8.75~560.00μg/kg,半数抑制浓度为72.45μg/kg,加标回收实验显示该方法定量检测组织样本中恩诺沙星的回收率在83.03%~124.00%之间,变异系数小于15.00%,检测15个实际含有恩诺沙星的水产以及畜禽肉组织样本,其结果与液相色谱-串联质谱法检测结果高度一致;此外,加速保存实验结果显示该试纸条在室温下可保存一年。结论本研究以量子点荧光微球为新型标记探针,构建了高灵敏定量检测恩诺沙星的新方法,实现了水产、畜禽肉组织中恩诺沙星的简单、快速、定量分析。 展开更多

关键词 量子点微球 恩诺沙星 免疫层析试纸条 定量检测

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基于流式量子点微球技术的甲乙型流感病毒抗原检测方法的建立和初步应用分析

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作者 夏成静 李宝花 +3 位作者 郭燕妳 周小合 张润玲 牛英波 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第1期126-130,共5页

目的建立基于流式量子点微球技术的甲型流感病毒(FluA)和乙型流感病毒(FluB)抗原联检方法,为常见呼吸道病毒抗原多重检测打下基础。方法分别使用自制的不同量子点编码微球和小鼠抗FluA/FluB核蛋白(NP)单克隆抗体进行偶联,在流式细胞仪... 目的建立基于流式量子点微球技术的甲型流感病毒(FluA)和乙型流感病毒(FluB)抗原联检方法,为常见呼吸道病毒抗原多重检测打下基础。方法分别使用自制的不同量子点编码微球和小鼠抗FluA/FluB核蛋白(NP)单克隆抗体进行偶联,在流式细胞仪上对已知浓度的甲乙型流感病毒抗原分别和同时进行检测,对检测条件进行优化,建立甲乙型流感病毒抗原联检方法,利用此方法对临床样本进行检测,与实时荧光定量PCR法(quantitative real-time PCR,qPCR)进行比对,验证此方法的临床性能。结果建立了甲乙型流感病毒抗原联检方法,该方法的甲乙型流感病毒抗原的检出限分别为26.1 pg/ml和10.7 pg/ml,测量范围均为15.3~250000 pg/ml。对临床样本检测,与qPCR比对一致性良好,阳性符合率为57.4%,阴性符合率为100%,总符合率71.6%,并优于临床常用胶体金试剂(阳性符合率为56.49%,阴性符合率为99.75%)。结论此流式量子点微球多重检测方法可以用于甲乙型流感病毒抗原的联检,其灵敏度较高、特异度好、检测范围广,可以为呼吸道常见病毒多重检测打下良好基础,在临床上具有应用前景。 展开更多

关键词 甲型流感病毒 乙型流感病毒 量子点编码微球 液相蛋白芯片

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荧光免疫及磁免疫层析法检测莱克多巴胺的研究 被引量：8

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作者 王松柏 张彦 +3 位作者 卫艳丽 安文汀 王宇 双少敏 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第11期3100-3104,共5页

分别将量子点和超顺纳米磁珠作为荧光探针和磁信号探针应用于免疫反应中,构建了检测莱克多巴胺的荧光免疫和磁免疫层析的分析方法,并成功应用于尿液中莱克多巴胺的检测。两种方法均基于免疫竞争模式,在荧光免疫分析方法中,量子点偶联上... 分别将量子点和超顺纳米磁珠作为荧光探针和磁信号探针应用于免疫反应中,构建了检测莱克多巴胺的荧光免疫和磁免疫层析的分析方法,并成功应用于尿液中莱克多巴胺的检测。两种方法均基于免疫竞争模式,在荧光免疫分析方法中,量子点偶联上识别莱克多巴胺的抗体,样品中莱克多巴胺和包被在ELISA板上莱克多巴胺的完全抗原竞争结合量子点,样品中莱克多巴胺的浓度越高,ELISA板上吸附的量子点越少,所测荧光强度值越低,该方法的检出限为1ng·mL-1,检测时间为4h。在磁免疫层析方法中,检测线上特异性捕获的纳米磁珠颜色的深浅和尿液中莱克多巴胺浓度成反比例关系,即莱克多巴胺的浓度越高,检测线的颜色越浅,该方法的定性检出限为10ng·mL-1,检测时间为15min。两种方法各有优缺点,基于量子点的荧光免疫分析法在痕量检测和定量分析方面具有优势,而磁免疫层析法更适合于现场快速检测。 展开更多

关键词 量子点 荧光免疫分析 磁珠 磁免疫层析 莱克多巴胺

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免疫磁珠荧光量子点技术检测结核分枝杆菌 被引量：4

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作者 马慧 王祎龙 +8 位作者 胡忠义 秦莲花 陈海珍 陆俊梅 王洁 柏文娟 郭琪 高诗会 杨华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期466-471,共6页

目的筛选结核分枝杆菌(MTB)免疫磁珠荧光量子点检测方法的最佳配体组合。方法将本室筛选获得的MTB结合肽H8和商业化抗MTB多克隆抗体(Pab)与纳米磁珠偶联,多肽H8、商业化抗MTB单克隆抗体(Mab)和抗热休克蛋白65单克隆抗体(Mabc)与荧光量... 目的筛选结核分枝杆菌(MTB)免疫磁珠荧光量子点检测方法的最佳配体组合。方法将本室筛选获得的MTB结合肽H8和商业化抗MTB多克隆抗体(Pab)与纳米磁珠偶联,多肽H8、商业化抗MTB单克隆抗体(Mab)和抗热休克蛋白65单克隆抗体(Mabc)与荧光量子点偶联,分别获得2种免疫磁珠和三种功能化荧光量子点,两两组合用于MTB检测,通过显微镜下观察荧光信号以及激光诱导荧光仪测量荧光值,判断不同配体组合与MTB的亲和性及特异性,获得最佳组合及其检测下限。结果偶联Mabc的荧光量子点与免疫磁珠MNP-Pab组合检测MTB结果为阴性,其余5组均为阳性。测量荧光值,检测效果较好的两组组合分别是MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8,阳性荧光值与阴性对照组比值分别是4.394和3.956,检测下限均是102条菌/mL。6组组合与12种非结核分枝杆菌(NTM)的亲和性各异,而与3种非分枝杆菌均不结合。结论 MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8两组检测效果较好,与MTB亲和性较高,特异性较好,可作为MTB免疫磁珠荧光量子点检测技术的最佳配体组合。 展开更多

关键词 免疫磁珠 荧光量子点 分枝杆菌 结核 检测 配体

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应用量子点及磁微粒技术快速检测阴道毛滴虫抗原 被引量：4

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作者 李蒙 蒲晓允 +1 位作者 李玲 余娟春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期740-743,共4页

目的以阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis,Tv)检测为切入点,构建以量子点和磁微粒技术为基础的夹心法快速检测抗原技术,为同步多项抗原检测作准备。方法针对Tv特异性黏附蛋白AP33制备其抗体,以碳二亚胺交联法,分别连接抗体-量子点及抗体... 目的以阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis,Tv)检测为切入点,构建以量子点和磁微粒技术为基础的夹心法快速检测抗原技术,为同步多项抗原检测作准备。方法针对Tv特异性黏附蛋白AP33制备其抗体,以碳二亚胺交联法,分别连接抗体-量子点及抗体-磁微粒加入待测抗原AP33结合后,在荧光显微镜下观测结果。结果确立了本检测系统的最优条件,对AP33的检测与几种阴道常见病原菌无交叉反应,检测限为0.05μg/ml。结论成功构建了量子点磁微粒检测技术,对Tv抗原检测,特异度为90%,准确率为88%。 展开更多

关键词 量子点 磁微粒 阴道毛滴虫 抗原检测

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集成微流体驱动泵的微流控微珠阵列芯片用于基因突变检测的研究 被引量：4

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作者 张何 傅昕 朱振军 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期473-480,共8页

建立了一种基于微泵集成微流控微珠阵列芯片及三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)介导的等位基因特异性延伸的基因突变检测方法。将微流控芯片、引物修饰微珠阵列及基于毛细和蒸发作用的微流体驱动泵集成构建检测芯片,待测目标序列流过装配的... 建立了一种基于微泵集成微流控微珠阵列芯片及三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)介导的等位基因特异性延伸的基因突变检测方法。将微流控芯片、引物修饰微珠阵列及基于毛细和蒸发作用的微流体驱动泵集成构建检测芯片,待测目标序列流过装配的微球阵列并与微球表面延伸引物杂交,在Apyrase和去除外切酶活性的Klenow DNA聚合酶协同作用下,引物3'末端碱基与目标序列包含的基因突变检测位点匹配则能够发生延伸,并将生物素化的dCTP掺入到引物的延伸序列中并固定在微球表面,链霉亲和素修饰量子点能与微球表面引物延伸序列中的生物素结合并提供荧光信号,而引物3'末端与目标序列存在单碱基不匹配则不能发生延伸。结果表明:采用这种单碱基识别技术,微泵驱动的芯片内可以检测0.2 pmol/L目标序列(信背比>3),液压驱动的芯片内能识别0.5 pmol/L目标序列,而芯片外检测只能识别0.1 nmol/L目标序列,微泵集成芯片在检测基因突变时其灵敏度较芯片外基因突变分析提高了500倍,并在0.5～30 pmol/L目标序列浓度范围内待测序列浓度与检测信号呈良好的线性关系。测定了一个人基因组样本中多药耐药蛋白基因1(MDR1)的两个多态性位点C3435T及G2677T,结果显示该样本具有3435CT及2677TT的基因型组合,此结果与DNA测序结果一致。本方法用于基因突变分析,具有良好的特异性、灵敏性及稳定性。 展开更多

关键词 微泵 微流控微珠阵列 三磷酸腺苷双磷酸酶 基因突变 量子点

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量子点流式微球技术定量检测血清胃癌相关抗原MG7的方法学建立及评价 被引量：3

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作者 胡晓璐 段荣 +1 位作者 柯江维 王占科 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期894-897,共4页

目的建立一种基于量子点流式微球技术检测胃癌相关抗原MG7的方法,并对该方法进行评价。方法将兔抗人MG7多克隆抗体与5μm聚苯乙烯微球耦联,与MG7结合,加入鼠抗人MG7单克隆抗体,最后加入生物素化羊抗鼠Ig G和链霉亲合素化量子点,通过流... 目的建立一种基于量子点流式微球技术检测胃癌相关抗原MG7的方法,并对该方法进行评价。方法将兔抗人MG7多克隆抗体与5μm聚苯乙烯微球耦联,与MG7结合,加入鼠抗人MG7单克隆抗体,最后加入生物素化羊抗鼠Ig G和链霉亲合素化量子点,通过流式细胞仪检测量子点平均荧光强度（mean fluorescent intensity,MFI）。对该方法的灵敏度、线性范围、精密度、干扰实验、阳性临界值等指标进行初步评价,并检测19例胃癌、23例胃溃疡、25例浅表性胃炎、21例萎缩性胃炎/增生患者和25例体检健康者血清MG7水平。结果聚苯乙烯微球粒径均一性好,2 h为最佳耦联时间,耦联率为67.43%。方法检测灵敏度为0.21 ng/m L,线性范围为0.39~100 ng/m L。体检健康者混合血清及胃癌组混合血清的变异系数分别为10.43%和7.87%。低浓度胆固醇（6.50 mmol/L）、胆红素（0.15 mmol/L）和三酰甘油（18.00 mmol/L）对检测干扰较小。ROC曲线下面积（AUCROC）为0.922,最佳临界值为15.00 ng/m L。胃癌组血清MG7浓度显著高于体检健康组、浅表性胃炎组、胃溃疡组、萎缩性胃炎/增生组（P均〈0.01）;萎缩性胃炎/增生组MG7浓度显著高于体检健康组、浅表性胃炎组、胃溃疡组（P均〈0.01）;胃溃疡组MG7浓度高于体检健康组（P〈0.05）;以15.00 ng/m L为临界值时,胃癌阳性检出率为73.68%。结论本实验建立的量子点流式微球技术可用于血清胃癌相关抗原MG7的定量测定,其检测性能良好,检测结果与临床疾病发展规律相符合。 展开更多

关键词 量子点 流式微球技术 MG7 平均荧光强度

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量子点快速检测弓形虫IgG抗体方法的建立及初步应用 被引量：1

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作者 李玲 刘琳琳 +2 位作者 蒲晓允 纽琴 余娟春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1057-1059,共3页

目的建立一种简便、快速的人弓形虫(Toxoplasma,TOXO)IgG抗体检测新方法,并在临床初步应用。方法应用TOXO抗原包被羧基磁珠作为固相载体,量子点标记羊抗人IgG作为检测抗体,建立TOXO IgG检测方法,同时优化检测条件;对255份临床血清标本... 目的建立一种简便、快速的人弓形虫(Toxoplasma,TOXO)IgG抗体检测新方法,并在临床初步应用。方法应用TOXO抗原包被羧基磁珠作为固相载体,量子点标记羊抗人IgG作为检测抗体,建立TOXO IgG检测方法,同时优化检测条件;对255份临床血清标本进行了检测,并与意大利DiaSorin TOXO IgG ELISA试剂进行比较。结果检测最佳条件为:抗原包被浓度100μg/ml,量子点标记二抗工作浓度为1∶200,待测血清稀释度为1∶100。本方法的诊断敏感性、特异性分别为93.3%、96.7%,与进口试剂盒的总符合率为96.5%。结论基于量子点标记及免疫磁珠技术检测TOXOIgG,操作简便、快速,具有较高的特异性、敏感性和有较好的临床应用价值。 展开更多

关键词 量子点 免疫磁珠 弓形虫

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量子点流式微球技术检测抗胰岛素抗体方法学建立 被引量：2

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作者 胡晓璐 王占科 李剑 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期985-989,共5页

目的将量子点荧光探针应用于流式微球技术,创建出量子点流式微球技术检测人抗胰岛素抗体的方法并对其偶联率、精密度、线性范围、灵敏度进行初步评价。方法将胰岛素与羧基化微球偶联制备免疫诊断微球,与血清或标准品中人抗胰岛素抗体结... 目的将量子点荧光探针应用于流式微球技术,创建出量子点流式微球技术检测人抗胰岛素抗体的方法并对其偶联率、精密度、线性范围、灵敏度进行初步评价。方法将胰岛素与羧基化微球偶联制备免疫诊断微球,与血清或标准品中人抗胰岛素抗体结合后,加入兔抗人IgG抗体,最后加入生物素化的羊抗兔IgG抗体和链霉亲和素化的量子点,使微球表面呈现荧光,并通过流式细胞仪检测平均荧光强度(mean fluorescent intensity,MFI)并记录。结果羧基化微球偶联胰岛素的性能显著强于空白微球,偶联0.5～3 h为最佳偶联反应时间,偶联成功的免疫诊断微球放置4℃冰箱至少可稳定50 d。微球偶联微球表面所携带荧光MFI与所测抗胰岛素抗体浓度成正比,量子点流式微球技术检测同一标本的灵敏度(3.74 pg/ml)、精密度(8.24%)、线性范围(3.74～5 000 pg/ml)都优于酶联免疫吸附试验所测得灵敏度(24.53 pg/ml)、精密度(12.31%)、线性范围(24.53～2 500 pg/ml)。结论本实验创建的量子点流式微球技术可用于人血清抗胰岛素抗体测定,其检测性能良好。 展开更多

关键词 量子点 流式微球技术 抗胰岛素抗体 平均荧光强度

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一种快速检测阪崎肠杆菌的新方法——免疫磁性分离荧光标记 被引量：16

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作者 支援 孟瑾 +4 位作者 郑小平 韩奕奕 李敏 顾鸣 沈鹤柏 《乳业科学与技术》 2010年第5期231-233,245,共4页

阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种,是人和动物肠道内寄生的一种革兰氏阴性无芽胞杆菌。我国于2005年8月批准了阪崎肠杆菌检测的行业标准,此标准改进了美国FDA的推荐方法。本文论述了一种基于免疫磁珠磁性分离、免疫量子点荧光标记联合应用的... 阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种,是人和动物肠道内寄生的一种革兰氏阴性无芽胞杆菌。我国于2005年8月批准了阪崎肠杆菌检测的行业标准,此标准改进了美国FDA的推荐方法。本文论述了一种基于免疫磁珠磁性分离、免疫量子点荧光标记联合应用的检测方法,本方法可灵敏、快速、高特异性的检出乳制品中的阪崎肠杆菌。 展开更多

关键词 免疫磁珠 量子点 阪崎肠杆菌 快速检测

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荧光编码微球—流式细胞和生化分析技术及其最新发展 被引量：11

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作者 牟颖 金钦汉 《生命科学仪器》 2003年第1期31-36,共6页

简述了流式细胞术的发展历史和工作原理。对该技术与荧光编码微球技术相结合而发展起来的高通量细胞和生化分析技术及其最新发展作了评述。流式细胞术是一种对流动液体中排成单列的细胞逐个进行检测的技术 通过检测得到相应细胞的光散... 简述了流式细胞术的发展历史和工作原理。对该技术与荧光编码微球技术相结合而发展起来的高通量细胞和生化分析技术及其最新发展作了评述。流式细胞术是一种对流动液体中排成单列的细胞逐个进行检测的技术 通过检测得到相应细胞的光散射和荧光信号 进而测定细胞的大小、形状、DNA、RNA、表面受体、酶活性、膜通透性和钙流量等 在癌症和爱滋病研究 新药开发、干细胞和基因治疗、遗传学、家畜性别选择、农作物新品种开发等方面部有广泛应用。采用顺序进样技术,则可不必加压而实现少量样品的自动分析和作亚秒水平分子相互作用的动力学测量。将该技术与近年发展起来的荧光染料编码微球技术相结合,则成为一种可以与生物芯片技术相媲美的多组分同时分析技术。采用微流控芯片技术和发光半导体量子点编码微球技术 进一步改善了方法的适用性,某些主要性能甚至超过了生物芯片技术,有望从研究实验室逐步进入临床实验室,最终进入病房和寻常百姓家 成为防病、诊断和监护病人的重要手段。 展开更多

关键词 流式细胞术 荧光编码微球 生化分析 发光量子点 微流控芯片

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聚合物微珠与量子点复合物的制备及性能

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作者 田红叶 贺蓉 古宏晨 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1807-1810,1815,共5页

在有机体系中通过软化学方法制备出荧光量子点,该方法简单、新颖,且原料成本低;利用种子乳液聚合法合成了粒径为60～70 nm的具有特殊功能团的聚合物微珠,该微珠具有水溶性,具备一些与生物分子偶联的基团,相对μm级的聚合物微球有很大优... 在有机体系中通过软化学方法制备出荧光量子点,该方法简单、新颖,且原料成本低;利用种子乳液聚合法合成了粒径为60～70 nm的具有特殊功能团的聚合物微珠,该微珠具有水溶性,具备一些与生物分子偶联的基团,相对μm级的聚合物微球有很大优势;通过物理溶胀的方法将量子点嵌入带有特殊功能团的聚合物微珠,为制备量子点与生物分子连接中的荧光探针奠定基础.通过紫外吸收光谱(UV-Vis)、荧光发射光谱(PL)、透射电子显微镜(TEM)、红外光谱(FTIR)、激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)、电导滴定等手段对制备的样品进行了表征.实验结果表明,成功地将荧光量子点嵌入聚合物微珠,打破了只有水相合成的量子点才能与生物分子相连的限制. 展开更多

关键词 量子点 聚合物微珠 荧光 种子乳液 溶胀

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量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测玉米中赭曲霉毒素A 被引量：18

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作者 周耀锋 熊斯诚 +3 位作者 江湖 段宏 熊勇华 Andrew Wang 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1837-1843,共7页

采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)法将抗赭曲霉毒素A(OTA)腹水与量子点荧光微球偶联制备荧光探针,以牛血清白蛋白-OTA偶联物及驴抗鼠二抗喷涂硝酸纤维膜形成试纸条检测线(T线)和质控线(C线),建立了基于T/C荧光强度(FI_T/FI_C... 采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)法将抗赭曲霉毒素A(OTA)腹水与量子点荧光微球偶联制备荧光探针,以牛血清白蛋白-OTA偶联物及驴抗鼠二抗喷涂硝酸纤维膜形成试纸条检测线(T线)和质控线(C线),建立了基于T/C荧光强度(FI_T/FI_C)比值法免疫层析试纸条高灵敏度、快速定量检测玉米中OTA的新方法。量子点荧光微球试纸条定量检测OTA线性范围为0.05~1.0ng/mL(Y=0.259lnX+0.897,R^2=0.995),半数抑制浓度(IC_(50))为(0.215±0.023)ng/mL(n=5),玉米提取液中OTA的检出限为0.05 ng/mL,单个样品检测时间10min。加标回收实验表明,3个OTA加标浓度的平均回收率为107.2%-125.5%,相对标准偏差均小于10%。40个实际玉米样品检测结果表明,量子点荧光微球试纸条与酶联免疫吸附分析方法检测OTA的结果具有良好的相关性(R^2=0.975)。 展开更多

关键词 量子点荧光微球 免疫层析试纸条 赭曲霉毒素A 定量检测

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基于量子点荧光探针的高灵敏蛋白质检测方法 被引量：1

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作者 吴思敏 贾春平 +5 位作者 刘莉芬 郜晚蕾 景奉香 金庆辉 张红锋 赵建龙 《华东师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期144-152,共9页

通过制备量子点荧光检测探针，构建了一种基于量子点探针和免疫磁珠的蛋白质检测方法，实现了对蛋白肿瘤标志物癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，cEA）的高灵敏定量检测．在该检测体系中，若存在有靶标蛋白，其与量子点检测探针以... 通过制备量子点荧光检测探针，构建了一种基于量子点探针和免疫磁珠的蛋白质检测方法，实现了对蛋白肿瘤标志物癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，cEA）的高灵敏定量检测．在该检测体系中，若存在有靶标蛋白，其与量子点检测探针以及捕获探针之间会发生免疫反应形成三明治结构，利用磁力分离器对免疫复合物进行富集后，通过检测富集在磁珠表面的量子点荧光信号，可实现对靶标蛋白的定量．该方法的检测灵敏度为38pg／mL，线性范围为0．39～50ng／mL，临床质控样本检验结果表明，该方法准确度高，可重复性好，可应用于临床样本检测．该量子点探针检测体系具有灵敏度高、特异性好、样品消耗量低等优点，在疾病早期诊断方面具有广阔的应用前景． 展开更多

关键词 量子点 免疫荧光分析 免疫磁珠 肿瘤标志物

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一种新型检测大肠杆菌O157∶H7的免疫磁珠-量子点纳米颗粒的制备和应用 被引量：3

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作者 文湘郡 滕鑫 +3 位作者 丁星宇 佘竹欣 李壹 熊晓辉 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第13期48-54,共7页

研究建立了免疫磁珠和荧光量子点标记的抗体检测大肠杆菌O157∶H7的方法。采用溶剂热法制备了Fe_( 3)O_( 4)纳米颗粒,并用SiO_(2)、羧基和大肠杆菌O157∶H7抗体依次包覆制得免疫磁珠。游离的大肠杆菌O157∶H7首先与免疫磁珠结合,然后由... 研究建立了免疫磁珠和荧光量子点标记的抗体检测大肠杆菌O157∶H7的方法。采用溶剂热法制备了Fe_( 3)O_( 4)纳米颗粒,并用SiO_(2)、羧基和大肠杆菌O157∶H7抗体依次包覆制得免疫磁珠。游离的大肠杆菌O157∶H7首先与免疫磁珠结合,然后由量子点标记的抗体与大肠杆菌结合,形成一个三明治结构;随后分析磁分离采集的磁珠的荧光强度(激发/发射波长为370 nm/472 nm)。SiO_(2)壳结构的引入,减少了传统免疫磁珠的非特异性吸附,提高了对目标菌的选择性,同时有效的阻止了三明治结构中量子点因电子转移至Fe_(3)O_(4)而引起的荧光猝灭,保证了分析方法的可行性。动态范围为10~10^(8) CFU/mL,检出限为10 CFU/mL。牛肉、牛奶和蜂蜜样品中大肠杆菌O157∶H7的平均加样回收率分别为95%~104%、90%~94%和90%~110%;相对标准偏差分别为2.1%~3.8%、3.2%~7.8%和5.8%~6.3%。 展开更多

关键词 大肠杆菌O157∶H7 免疫磁珠 量子点 SiO_(2)

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微流控芯片中磁免疫荧光法检测新城疫病毒

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作者 李安珺 张瑞巧 +1 位作者 庞代文 张志凌 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期445-448,共4页

建立了一种基于微流控芯片的磁免疫荧光方法,并用于新城疫病毒(NDV)的高灵敏检测。该方法基于抗原抗体免疫识别作用,采用免疫磁珠实现了对NDV的高效捕获和分离,并利用量子点的荧光作为检出信号,提高方法的灵敏度。在优化条件下,NDV的检... 建立了一种基于微流控芯片的磁免疫荧光方法,并用于新城疫病毒(NDV)的高灵敏检测。该方法基于抗原抗体免疫识别作用,采用免疫磁珠实现了对NDV的高效捕获和分离,并利用量子点的荧光作为检出信号,提高方法的灵敏度。在优化条件下,NDV的检测限为1ng/mL,线性范围为1～10ng/mL。利用免疫磁珠捕获分离病毒,可用于家禽肝脏、肺、粪便等实际样品中病毒的检测。该方法可以在1h内完成对NDV的检测,操作简单、特异性强,灵敏度高,重现性好。本文为NDV的检测提供了一种快速、准确的方法。 展开更多

关键词 新城疫病毒 微流控芯片 磁珠 量子点

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量子点流式微球技术用于DNA的检测研究 被引量：1

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作者 蔡冰洁 熊晓庆 《中国现代医学杂志》 CAS 2020年第13期1-5,共5页

目的构建一种基于新型纳米材料量子点的流式微球技术,用于高通量的DNA检测,实现DNA的快速、低成本检测。方法将能与靶DNA一端杂交的探针DNA(P1)标记在微球表面,与DNA配对杂交后,加入能与靶DNA另一端杂交的量子点标记的探针DNA(P2),组装... 目的构建一种基于新型纳米材料量子点的流式微球技术,用于高通量的DNA检测,实现DNA的快速、低成本检测。方法将能与靶DNA一端杂交的探针DNA(P1)标记在微球表面,与DNA配对杂交后,加入能与靶DNA另一端杂交的量子点标记的探针DNA(P2),组装成一种流式微球-探针P1、靶DNA、量子点-探针P2的夹心复合结构,通过测定杂交前后平均荧光强度的变化检测DNA的浓度。结果该新型检测方法可以区分出完全互补、单碱基错配及完全非互补的DNA(P<0.05),且随着DNA浓度的升高,检测到的平均荧光强度逐渐增强(P<0.05),对DNA的最低检出限可达0.2 nmol/L。结论新型量子点流式微球技术检测DNA具有高敏感性和高特异性、分析速度快、操作简单等优点,是一种非常重要的具有潜力的新型临床检测方法。 展开更多

关键词 量子点流式微球技术 DNA 快速检测

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基于多色量子点和免疫磁珠技术检测沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌 被引量：7

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作者 李倩倩 陈萍 +2 位作者 王静 张帅 闫金星 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期660-663,共4页

目的建立基于量子点和免疫磁珠技术检测沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌的方法。方法利用水相法合成多色的CdSe量子点,通过共价交联法将三色量子点与抗沙门菌、抗志贺菌和抗金黄色葡萄球菌的特异性抗体偶联,利用紫外吸收光谱和SDS-PAGE... 目的建立基于量子点和免疫磁珠技术检测沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌的方法。方法利用水相法合成多色的CdSe量子点,通过共价交联法将三色量子点与抗沙门菌、抗志贺菌和抗金黄色葡萄球菌的特异性抗体偶联,利用紫外吸收光谱和SDS-PAGE电泳证明偶联是否成功。利用免疫磁珠富集,量子点标记,通过荧光显微成像法对沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌进行检测。结果多色量子点与3种菌的特异性抗体偶联成功,通过选用3种不同颜色不同发射波长的量子点作标记,利用免疫磁珠富集3种菌,在同一反应体系中同时检测3种菌,检测时间在2h之内。对模拟感染目标菌的样品直接检测,检测限为103CFU/ml。结论该方法能够快速、特异性地检测沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌。 展开更多

关键词 免疫磁珠 量子点 沙门菌 志贺菌 金黄色葡萄球菌

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免疫磁珠荧光量子点技术检测结核分枝杆菌的方法学研究和初步评估 被引量：1

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作者 马慧 胡忠义 +4 位作者 王祎龙 秦莲花 陈海珍 陆俊梅 杨华 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期100-105,共6页

目的建立免疫磁珠荧光量子点技术检测MTB的方法，探讨最佳检测条件并进行初步评估。方法以MTB标准株H37Rv、12种非结核分枝杆菌（NTM）标准株及3种非分枝杆菌为检测对象，免疫磁珠和功能化荧光量子点作用为对照组。利用湿化学方法制备... 目的建立免疫磁珠荧光量子点技术检测MTB的方法，探讨最佳检测条件并进行初步评估。方法以MTB标准株H37Rv、12种非结核分枝杆菌（NTM）标准株及3种非分枝杆菌为检测对象，免疫磁珠和功能化荧光量子点作用为对照组。利用湿化学方法制备纳米磁珠和荧光量子点，分别与MTB结合肽H8偶联，获得同时与H37Rv作用的免疫磁珠和功能化荧光量子点，形成三元复合物结构，通过测量荧光值及荧光显微镜观察判定样品中是否存在MTB，建立纳米技术检测MTB的新方法，进一步探讨免疫磁珠和功能化荧光量子点的最佳检测浓度及作用时间。利用菌悬液和模拟痰标本，对该检测方法的检测下限和特异度进行初步评估。结果偶联的免疫磁珠和功能化荧光量子点均能与H37Rv结合，镜下可见其与H37Rv作用的三元复合物，实验组与对照组的荧光值比值约为4：1；免疫磁珠和功能化荧光量子点最佳检测浓度均为100mg／L，最佳作用时间为2h；H37Rv菌悬液和模拟痰标本检测下限均为10。CFU／ml；特异度检测结果，3种非分枝杆菌在显微镜下均未见红色荧光，荧光值小于对照组，为阴性；12种NTM菌悬液和模拟痰标本检测时，仅副偶发分枝杆菌、金色分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和偶发分枝杆菌在显微镜下可见红色荧光，荧光值与对照组的比值均〉2，判断为阳性，其余均为阴性。结论免疫磁珠荧光量子点技术检测技术有可能成为检测MTB的新方法，但其临床应用价值尚有待进一步评估。 展开更多

关键词 分枝杆菌 结核 量子点 免疫磁珠

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基于量子点和磁珠的大肠埃希菌O157∶H7检测研究 被引量：3

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作者 张燕辉 谢服役 陈效黎 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第9期1366-1368,共3页

目的构建一种基于量子点和磁珠的大肠埃希菌O157∶H7的检测方法。方法以亲和素化磁珠结合生物素化的抗体制备修饰有大肠埃希菌O157∶H7抗体的磁珠,该磁珠可从检测体系中捕获大肠埃希菌O157∶H7,依次加入生物素化大肠埃希菌O157∶H7抗体... 目的构建一种基于量子点和磁珠的大肠埃希菌O157∶H7的检测方法。方法以亲和素化磁珠结合生物素化的抗体制备修饰有大肠埃希菌O157∶H7抗体的磁珠,该磁珠可从检测体系中捕获大肠埃希菌O157∶H7,依次加入生物素化大肠埃希菌O157∶H7抗体、亲和素化Cd Se量子点后,分别经磁分离弃去未结合的分子,通过溶液的荧光吸收光谱的改变定量检测该菌。结果该方法特异性好,只有大肠埃希菌O157∶H7呈阳性反应,其余对照菌株均无明显反应;随着大肠埃希菌O157∶H7浓度的增大,655 nm处荧光值也逐步升高;并在1 h内实现对104cfu/ml的菌液的检测。结论本实验建立的这种方法检测时间短,结果易于判断,具有良好的临床应用前景。 展开更多

关键词 量子点 磁珠 大肠埃希菌O157∶H7 荧光

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