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重组新城疫病毒rL-RVG通过p53-YAP1-ACSL4通路诱导肺腺癌细胞铁死亡
1
作者 何瑛珏 李洋 +2 位作者 田仪督 贡克文 严玉兰 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第1期14-22,共9页
目的旨在探究重组新城疫病毒rL-RVG是否通过p53-YAP1-ACSL4通路影响肺腺癌细胞铁死亡。方法体外培养人肺腺癌细胞系A549、PC9,将处于对数增殖期的细胞分为对照组(NC组)、新城疫病毒感染组(NDV组)、重组新城疫病毒感染组(rL-RVG组)、铁... 目的旨在探究重组新城疫病毒rL-RVG是否通过p53-YAP1-ACSL4通路影响肺腺癌细胞铁死亡。方法体外培养人肺腺癌细胞系A549、PC9,将处于对数增殖期的细胞分为对照组(NC组)、新城疫病毒感染组(NDV组)、重组新城疫病毒感染组(rL-RVG组)、铁死亡诱导剂组(Erastin组)及铁死亡抑制剂组(NAC组)。在病毒感染和铁死亡诱导剂、抑制剂干预后,通过CCK-8、划痕实验和Transwell来检测细胞的功能学变化,包括细胞活力、迁移能力和侵袭能力;光学显微镜观察细胞形态改变。使用流式细胞术和荧光显微镜来测定细胞中ROS的含量,用酶标仪对MDA含量进行测定,通过Western blot和实时荧光定量PCR来检测铁死亡相关蛋白p53、YAP1及ACSL4的表达。结果与NC组相比,rL-RVG组细胞生长、迁移及侵袭能力明显下降(P<0.01);ROS及MDA水平升高且与铁死亡诱导剂组相比含量显著提高(P<0.01),铁死亡抑制剂干预后含量均减少(P<0.01);铁死亡关键蛋白p53、YAP1、ACSL4表达量明显升高(P<0.01);Si-RNA敲减YAP1和ACSL4后相应蛋白的表达量减少(P<0.01),并且ROS和MDA含量均减少(P<0.01)。结论rL-RVG可以有效地阻止肺腺癌细胞的增殖、迁移和扩散,并且能够通过p53-YAP1-ACSL4轴增加脂质过氧化物和细胞活性氧的含量,最终诱导肿瘤细胞铁死亡。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒 肺腺癌 铁死亡 YAP1 ACSL4
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重组新城疫病毒rL-RVG抑制人肺腺癌细胞系增殖 被引量：1
2
作者 张珍珍 李洋 +2 位作者 高生宝 夏德鑫 严玉兰 《基础医学与临床》 2023年第10期1549-1556,共8页
目的探讨表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒rL-RVG抑制人肺腺癌细胞系A549和PC9增殖。方法体外培养人肺腺癌细胞系A549、PC9,将处于对数增殖期的细胞分为对照组、新城疫病毒感染组(NDV)、重组新城疫病毒感染组(rL-RVG)、铁死亡诱导剂... 目的探讨表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒rL-RVG抑制人肺腺癌细胞系A549和PC9增殖。方法体外培养人肺腺癌细胞系A549、PC9,将处于对数增殖期的细胞分为对照组、新城疫病毒感染组(NDV)、重组新城疫病毒感染组(rL-RVG)、铁死亡诱导剂组(Erastin)和重组新城疫病毒联合铁死亡诱导剂组(rL-RVG+Erastin)。病毒及药物感染细胞24 h后,光学显微镜下观察细胞形态,CCK-8法检测细胞增殖能力,划痕试验检测细胞迁移能力,细胞毒性检测试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)含量,Western blot检测铁死亡相关蛋白p53、SLC7A11、GPX4的表达。结果与对照组相比,NDV组、rL-RVG组、Erastin组细胞数、细胞增殖能力及迁移的距离明显降低(P均<0.001),LDH释放量和总ROS水平显著提高(P<0.01),p53蛋白表达明显增加(P<0.001),而SLC7A11、GPX4蛋白表达明显降低(P<0.001)。rL-RVG组与NDV组相比上述结果更明显(P<0.05),rL-RVG+Erastin组与rL-RVG组和Erastin组相比细胞数、细胞增殖能力及迁移的距离明显减少(P<0.05),LDH释放量和总ROS水平显著提高(P<0.05),P53蛋白表达明显增加(P<0.001),而SLC7A11、GPX4蛋白表达明显降低(P<0.001)。结论rL-RVG可以发挥类似Erastin抑制肿瘤细胞增殖的作用,且其效果远远强于NDV。这为rL-RVG诱导的细胞死亡提供了新的见解,并强调了病毒在治疗肿瘤中的关键作用。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒 新城疫病毒 Erastin 细胞增殖 肺腺癌
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重组新城疫病毒rl-RVG抑制A549荷瘤鼠的瘤体生长 被引量：1
3
作者 严玉兰 贾丽娟 +4 位作者 刘洋 张金 张杰 梁冰 步雪峰 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第11期1537-1542,共6页
目的探讨稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒疫苗对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制及其可能促凋亡机制。方法将rl-RVG感染到成功建立的A549荷瘤鼠瘤体内,检测对瘤体生长抑制率;RT-PCR检测NDV HN基因及RVG基因的表达;TUNEL检测... 目的探讨稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒疫苗对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制及其可能促凋亡机制。方法将rl-RVG感染到成功建立的A549荷瘤鼠瘤体内,检测对瘤体生长抑制率;RT-PCR检测NDV HN基因及RVG基因的表达;TUNEL检测肿瘤细胞的凋亡;蛋白印迹法测caspase系列、Bax、Bcl-2表达;NDV及PBS作为对照。结果与对照组相比,rl-RVG组荷瘤鼠瘤体增长明显缓慢;RVG及NDV基因表达;rl-RVG组肿瘤细胞凋亡明显增加(P<0.05);rl-RVG组caspase-3,8和9高表达(P<0.01),Bax/Bcl-2比值明显高于对照组(P<0.01)。结论 rl-RVG成功感染至A549荷瘤鼠,其对A549荷瘤鼠瘤体生长有着明显的抑制作用,且可能与rl-RVG激活机体的Bcl-2和caspase家族诱导凋亡相关。 展开更多
关键词 rl-rvg 肺癌 凋亡
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重组新城疫病毒rl-RVG抑制人肺腺癌A549系细胞迁移及相关机制 被引量：3
4
作者 金惠 步雪峰 +2 位作者 王穆彬 苏春香 严玉兰 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第4期508-513,共6页
目的观察表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(rl-RVG)对人肺癌细胞系A549的迁移影响,初步探讨其可能的机制。方法重组新城疫病毒rl-RVG直接感染A549细胞为rl-RVG实验组,新城疫病毒La Sota株处理的A549细胞组及未感染病毒的A549细胞组... 目的观察表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(rl-RVG)对人肺癌细胞系A549的迁移影响,初步探讨其可能的机制。方法重组新城疫病毒rl-RVG直接感染A549细胞为rl-RVG实验组,新城疫病毒La Sota株处理的A549细胞组及未感染病毒的A549细胞组作为对照组。Western blot法检测NDV-HN蛋白及狂犬病毒糖蛋白(RVG),细胞增殖实验测定新城疫病毒使用的最佳作用浓度;划痕实验及Transwell法测A549迁移;Western blot法及免疫荧光法检测E-cadherin,MMP2蛋白表达。结果空白对照组无NDV、rl-RVG表达,rl-RVG仅在感染rl-RVG细胞组有表达,NDV在感染rl-RVG细胞组及感染NDV细胞组皆有表达;与空白对照组相比,rl-RVG及NDV稀释浓度大于5×10-5对细胞的增殖有抑制作用(P<0.05);rl-RVG组迁移的距离及细胞数明显减少(P<0.05)。与空白对照组及NDV感染组相比,rl-RVG组E-cadherin蛋白表达水平上调(P<0.05),MMP2蛋白表达水平减弱(P<0.05)。结论重组新城疫病毒rl-RVG能抑制人肺癌细胞系A549的迁移,并可能通过影响肺腺癌A549上皮细胞-间质转化(EMT)过程中的调控因子E-cadherin,MMP2蛋白而对细胞迁移而作用。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒RVG 肺癌 迁移 上皮细胞-间质转化
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重组新城疫病毒疫苗rl-RVG对A_(549)荷瘤小鼠瘤体生长的抑制作用
5
作者 贾丽娟 杜苏丰 《陕西医学杂志》 CAS 2019年第1期6-9,共4页
目的:探讨稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(NDV)疫苗(rl-RVG)对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制及其可能的免疫机制。方法:建立A_(549)荷瘤鼠模型并随机分为rlRVG组、NDV组和对照组,每组10只,分别于瘤体注射rl-RVG,NDV和PBS,... 目的:探讨稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(NDV)疫苗(rl-RVG)对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制及其可能的免疫机制。方法:建立A_(549)荷瘤鼠模型并随机分为rlRVG组、NDV组和对照组,每组10只,分别于瘤体注射rl-RVG,NDV和PBS,每周2次,共3周。测量三组瘤体体积;PCR法测NDV及狂犬病毒糖蛋白(RVG)的表达,蛋白印迹法检测皮下瘤体组织RVG、NDV蛋白表达;流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏自然杀伤细胞(NK)细胞数。结果:与对照组相比,rl-RVG组及NDV组荷瘤鼠瘤体增长明显缓慢;NDV在rl-RVG组和NDV组中均有表达,而RVG在rl-RVG组中表达,对照组未见二者表达;rl-RVG组及NDV组瘤体NK细胞数明显增多,且rl-RVG组明显高于NDV组。结论:rl-RVG成功转染至A549荷瘤鼠,对其瘤体生长有着明显的抑制作用,可能与rl-RVG激活机体的免疫反应相关。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒 肺癌 生长抑制 免疫 动物实验 小鼠
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稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠瘤体生长的影响 被引量：3
6
作者 贾丽娟 刘洋 +3 位作者 张金 梁冰 张杰 严玉兰 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2014年第2期105-109,113,共6页
目的:探讨重组稳定表达狂犬病毒糖蛋白的新城疫病毒疫苗(recombinant avirulent newcastle disease virus LaSota strain expressing the rabies virus glycoprotein,rl-RVG)对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制作用及其可能的免疫机制... 目的:探讨重组稳定表达狂犬病毒糖蛋白的新城疫病毒疫苗(recombinant avirulent newcastle disease virus LaSota strain expressing the rabies virus glycoprotein,rl-RVG)对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制作用及其可能的免疫机制。方法:建立A549荷瘤鼠模型并随机分为rl-RVG组、新城疫病毒(NDV)组和对照组,每组10只,分别于瘤体注射rl-RVG,NDV和PBS,每周2次,共3周。测量3组瘤体体积;免疫组织化学法测NDV及狂犬病毒糖蛋白(rabies virus glycoprotein,RVG)的表达;HE染色观察荷瘤小鼠的瘤体、脾、肺等组织病理改变;流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏NK细胞数。结果:与对照组相比,rl-RVG组及NDV组荷瘤鼠瘤体增长缓慢;NDV在rl-RVG组和NDV组中均有表达,而RVG仅在rl-RVG组中表达;rl-RVG组及NDV组瘤体出现大量凋亡坏死组织、脾脏多核巨细胞明显增多、肺组织炎症反应明显;rl-RVG组和NDV组NK细胞数明显增多,且rl-RVG组明显高于NDV组。结论:rl-RVG成功转染至A549荷瘤鼠,对其瘤体生长有着明显的抑制作用,可能与rl-RVG激活机体的免疫反应相关。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒 肺癌 免疫反应
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