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绵羊肺炎支原体核糖体蛋白30S rpsE基因的原核表达及多克隆抗体的制备
1
作者
刘晓艳
王永飞
+3 位作者
邓博文
哈尔勒哈·阿曼太
蔡江
李有文
《畜牧与兽医》
CAS
北大核心
2024年第7期78-84,共7页
旨在了解绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)30S rpsE蛋白的生物学特性及其蛋白免疫原性。用在线分析软件预测30S rpsE蛋白的理化性质、B细胞抗原表位、糖基化位点、二级结构及三级结构等;采用PCR方法从病羊鼻拭子样品中扩增得到...
旨在了解绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)30S rpsE蛋白的生物学特性及其蛋白免疫原性。用在线分析软件预测30S rpsE蛋白的理化性质、B细胞抗原表位、糖基化位点、二级结构及三级结构等;采用PCR方法从病羊鼻拭子样品中扩增得到30S rpsE基因片段,经NdeⅠ、XhoⅠ酶切纯化后,将其连接到pET-42b载体上,构建原核表达载体pET-42b-30S rpsE,使用不同浓度IPTG诱导蛋白在大肠杆菌BL21中表达;重组蛋白通过SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,用镍层析法纯化蛋白后,与弗氏佐剂1∶1混合注射免疫家兔,然后采取全血,检测血清抗体效价及特异性。结果:经预测30S rpsE蛋白是亲水无信号肽的膜外蛋白,无跨膜结构域,有一个糖基化位点;成功构建了原核表达载体pET-42b-30S rpsE,表达的重组蛋白分子量约为25.9 ku,以包涵体和可溶性的形式存在;免疫家兔后血清抗体效价为1∶25 600,证实30S rpsE蛋白具有较好的免疫原性。
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关键词
肺炎支原体
30S
rpse基因
原核表达
多克隆抗体
下载PDF
职称材料
淋球菌rpsE基因突变与大观霉素耐药性的研究
被引量:
1
2
作者
朱文
蒋法兴
+2 位作者
苏晓红
乐文静
王娜
《中华皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期611-614,共4页
目的 探讨淋球菌rpsE基因突变与淋球菌大观霉素耐药的相关性.方法 对临床分离的4株大观霉素耐药的淋球菌株(MIC128 μg/ml、256 μg/ml)的rpsE基因进行PCR扩增测序分析,寻找可能的突变位点,通过DNA转化技术将含有突变基因的细菌基因组...
目的 探讨淋球菌rpsE基因突变与淋球菌大观霉素耐药的相关性.方法 对临床分离的4株大观霉素耐药的淋球菌株(MIC128 μg/ml、256 μg/ml)的rpsE基因进行PCR扩增测序分析,寻找可能的突变位点,通过DNA转化技术将含有突变基因的细菌基因组DNA转化入敏感的淋球菌株,检测转化成功的淋球菌的MIC并进行PCR扩增测序,分析发现的突变位点与淋球菌大观霉素耐药的相关性.结果 4株大观霉素耐药的菌株均发现rpsE基因A70C(Thr24Pro)突变,而16S rRNA大观霉素耐药决定区(SRDR)未发现任何突变;大观霉素敏感菌株的16S rRNA和rpsE基因均未发现突变.转化后获得的大观霉素耐药淋球菌中亦发现了同样的rpsE基因突变.结论 rpsE基因单点突变与淋球菌对大观霉素耐药相关.
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关键词
淋病奈瑟球菌
点突变
大观霉素
抗药性
原文传递
题名
绵羊肺炎支原体核糖体蛋白30S rpsE基因的原核表达及多克隆抗体的制备
1
作者
刘晓艳
王永飞
邓博文
哈尔勒哈·阿曼太
蔡江
李有文
机构
塔里木大学动物科学与技术学院
新疆生产建设兵团南疆动物疫病诊断与防控工程实验室
出处
《畜牧与兽医》
CAS
北大核心
2024年第7期78-84,共7页
基金
新疆生产建设兵团区域创新基金项目(2021BB014)
塔里木大学校长基金项目(TDZKCX202305)。
文摘
旨在了解绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)30S rpsE蛋白的生物学特性及其蛋白免疫原性。用在线分析软件预测30S rpsE蛋白的理化性质、B细胞抗原表位、糖基化位点、二级结构及三级结构等;采用PCR方法从病羊鼻拭子样品中扩增得到30S rpsE基因片段,经NdeⅠ、XhoⅠ酶切纯化后,将其连接到pET-42b载体上,构建原核表达载体pET-42b-30S rpsE,使用不同浓度IPTG诱导蛋白在大肠杆菌BL21中表达;重组蛋白通过SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,用镍层析法纯化蛋白后,与弗氏佐剂1∶1混合注射免疫家兔,然后采取全血,检测血清抗体效价及特异性。结果:经预测30S rpsE蛋白是亲水无信号肽的膜外蛋白,无跨膜结构域,有一个糖基化位点;成功构建了原核表达载体pET-42b-30S rpsE,表达的重组蛋白分子量约为25.9 ku,以包涵体和可溶性的形式存在;免疫家兔后血清抗体效价为1∶25 600,证实30S rpsE蛋白具有较好的免疫原性。
关键词
肺炎支原体
30S
rpse基因
原核表达
多克隆抗体
Keywords
Mycoplasma ovipneumoniae
30S
rpse
gene
prokaryotic expression
polyclonal antibody
分类号
S852.62 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
淋球菌rpsE基因突变与大观霉素耐药性的研究
被引量:
1
2
作者
朱文
蒋法兴
苏晓红
乐文静
王娜
机构
安徽医科大学附属省立医院皮肤科
中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所
出处
《中华皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期611-614,共4页
基金
安徽省自然科学基金(0904131430)
文摘
目的 探讨淋球菌rpsE基因突变与淋球菌大观霉素耐药的相关性.方法 对临床分离的4株大观霉素耐药的淋球菌株(MIC128 μg/ml、256 μg/ml)的rpsE基因进行PCR扩增测序分析,寻找可能的突变位点,通过DNA转化技术将含有突变基因的细菌基因组DNA转化入敏感的淋球菌株,检测转化成功的淋球菌的MIC并进行PCR扩增测序,分析发现的突变位点与淋球菌大观霉素耐药的相关性.结果 4株大观霉素耐药的菌株均发现rpsE基因A70C(Thr24Pro)突变,而16S rRNA大观霉素耐药决定区(SRDR)未发现任何突变;大观霉素敏感菌株的16S rRNA和rpsE基因均未发现突变.转化后获得的大观霉素耐药淋球菌中亦发现了同样的rpsE基因突变.结论 rpsE基因单点突变与淋球菌对大观霉素耐药相关.
关键词
淋病奈瑟球菌
点突变
大观霉素
抗药性
Keywords
基因
,
rpse
Neisseria gonorrhoeae
Genes,
rpse
Point mutation
Spectinomycin
Drug resistance
分类号
R378.16 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绵羊肺炎支原体核糖体蛋白30S rpsE基因的原核表达及多克隆抗体的制备
刘晓艳
王永飞
邓博文
哈尔勒哈·阿曼太
蔡江
李有文
《畜牧与兽医》
CAS
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
淋球菌rpsE基因突变与大观霉素耐药性的研究
朱文
蒋法兴
苏晓红
乐文静
王娜
《中华皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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