胃幽门螺杆菌感染后semaphorin 5A和TGF-β1的表达及其相关性研究 被引量：3

1

作者 李庚 何颖 潘国庆 《实用癌症杂志》 2021年第7期1045-1049,共5页

目的观察幽门螺杆菌(Hp)感染对胃粘膜semaphorin 5A和TGF-β1表达的影响,及其介导人胃癌发生的潜在作用研究。方法收集临床胃腺癌蜡块100例,经Giemsa确认感染Hp,分为是否感染2组。再采用免疫组织化学法检测semaphorin 5A和TGF-β1的表达... 目的观察幽门螺杆菌(Hp)感染对胃粘膜semaphorin 5A和TGF-β1表达的影响,及其介导人胃癌发生的潜在作用研究。方法收集临床胃腺癌蜡块100例,经Giemsa确认感染Hp,分为是否感染2组。再采用免疫组织化学法检测semaphorin 5A和TGF-β1的表达,并分析semaphorin 5A及TGF-β1之间表达的相关性。另外,建立Hp国际标准株ATCC26695感染SD大鼠动物的模型,并且设立以3个月为时间节点的实验组,以不加Hp的PBS作为对照组。采用HE,Giemsa和W-S观察胃粘膜及Hp的形态,应用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹测定胃粘膜semaphorin 5A和TGF-β1的表达。结果Hp阳性胃腺癌组织内semaphorin 5A和TGF-β1表达显著高于Hp阴性组,semaphorin 5A和TGF-β1呈正相关(P<0.05)。Hp感染组大鼠胃粘膜semaphorin 5A和TGF-β1的mRNA和蛋白表达显著高于未感染组。结论Hp感染可导致胃粘膜semaphorin 5A和TGF-β1的表达增加,且两者存在显著正相关,Hp感染可能通过促semaphorin 5A、TGF-β1表达介导胃癌发生。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 胃癌 semaphorin 5a TGF-Β1 大鼠

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胃幽门螺杆菌感染后Semaphorin 5A致胃癌可能机制的研究 被引量：25

2

作者 刘涛 李睿 +2 位作者 龚琳 李庚 潘国庆 《分子诊断与治疗杂志》 2019年第3期189-193,共5页

目的研究在幽门螺杆菌(Hp)感染下Semaphorin 5A(sema5a)致胃癌发生发展的可能机制。方法使用免疫组织化学Envision法和Giemsa染色来检测胃癌组织中sema5a的表达及Hp感染情况。免疫印迹(WB)检测胃癌细胞中sema5a及基质金属蛋白酶9(MMP9)... 目的研究在幽门螺杆菌(Hp)感染下Semaphorin 5A(sema5a)致胃癌发生发展的可能机制。方法使用免疫组织化学Envision法和Giemsa染色来检测胃癌组织中sema5a的表达及Hp感染情况。免疫印迹(WB)检测胃癌细胞中sema5a及基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达水平。结果感染Hp的胃癌细胞及胃癌组织中sema5a的表达显著高于未感染组,且Hp感染后MMP9表达上调,胃癌细胞侵袭力增加。结论胃Hp感染与sema5a的表达相关,且能上调胃癌细胞中sema5a与MMP9的表达水平。 展开更多

关键词 semaphorin 5a 胃癌 HP

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Semaphorin 5A在皮肤黑素瘤组织中的表达及与其恶性程度的相关性 被引量：1

3

作者 谢玉燕 张莉 +2 位作者 李凌佳 吴文娟 刘彤云 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第13期65-67,共3页

目的观察Semaphorin 5A在皮肤黑素瘤(CMM)组织中的表达情况,并探讨其与CMM恶性程度的相关性。方法选择20例CMM患者和20例黑素细胞痣者的石蜡包埋组织标本。CMM患者根据Clark(1969)分级方法,Ⅰ级3例(15.00%)、Ⅱ级3例(15.00%)、Ⅲ级4例(2... 目的观察Semaphorin 5A在皮肤黑素瘤(CMM)组织中的表达情况,并探讨其与CMM恶性程度的相关性。方法选择20例CMM患者和20例黑素细胞痣者的石蜡包埋组织标本。CMM患者根据Clark(1969)分级方法,Ⅰ级3例(15.00%)、Ⅱ级3例(15.00%)、Ⅲ级4例(20.00%)、Ⅳ级7例(35.00%)、Ⅴ级有3例(15.00%)。免疫组化法检测Semaphorin 5A在CMM及黑素细胞痣皮损组织中的表达,比较不同病理分级的CMM间Semaphorin 5A表达的差异。结果 Semaphorin 5A在CMM中的阳性表达率(80.00%,16/20)高于黑素细胞痣中的阳性表达率(5.00%,1/20)(P<0.05);且Semaphorin 5A在CMM中的表达与Clark分级呈正相关(P<0.05)。结论Semaphorin 5A在CMM组织中的表达升高,与CMM恶性程度有关。 展开更多

关键词 黑素瘤 semaphorin5a 免疫组织化学

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Expression of semaphorin 5A and its receptor plexin B3 contributes to invasion and metastasis of gastric carcinoma 被引量：5

4

作者 Guo-Qing Pan Hong-Zheng Ren +2 位作者 Shu-Fang Zhang Xi-Mei Wang Ji-Fang Wen 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2009年第22期2800-2804,共5页

AIM:To investigate the protein and mRNA expression of semaphorin 5A and its receptor plexin B3 in gastric carcinoma and explore its role in the invasion and metastasis of gastric carcinoma.METHODS:Expression of semaph... AIM:To investigate the protein and mRNA expression of semaphorin 5A and its receptor plexin B3 in gastric carcinoma and explore its role in the invasion and metastasis of gastric carcinoma.METHODS:Expression of semaphorin 5A and its receptor plexin B3 in 48 samples of primary gastric carcinoma,its corresponding non-neoplastic mucosa,and matched regional lymph node metastasis was assayed by reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR),real-time RT-PCR and Western blotting.RESULTS:The protein and mRNA expression of semaphorin 5A and its receptor plexin B3 increased gradually in non-neoplastic mucosa,primary gastric carcinoma and lymph node metastasis(P<0.05).Moreover,the expression of semaphorin 5A was closely correlated with that of plexin B3.CONCLUSION:Semaphorin 5A and its receptor plexin B3 play an important role in the invasion and metastasis of gastric carcinoma. 展开更多

关键词 semaphorin 5a Plexin B3 Gastric carcinoma INVASION METASTASIS

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Semaphorin 5A(SEMA5A)基因中rs7702187位点的多态性与帕金森病遗传易感性关系的meta分析

5

作者 于璇 石国锋 +2 位作者 郭道骝 张剑平 王枫 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第22期2738-2744,共7页

目的运用meta分析的方法综合评价探讨Semaphorin 5A(SEMA5A)基因中rs7702187位点的多态性与帕金森病(PD)易感性的关系。方法检索PubMed、Medline和Embase,纳入内容涉及SEMA5A基因中rs7702187的多态性与帕金森病易感性的独立病例对照研... 目的运用meta分析的方法综合评价探讨Semaphorin 5A(SEMA5A)基因中rs7702187位点的多态性与帕金森病(PD)易感性的关系。方法检索PubMed、Medline和Embase,纳入内容涉及SEMA5A基因中rs7702187的多态性与帕金森病易感性的独立病例对照研究。各文献符合研究方法相似和有综合的统计指标等纳入标准,语种不限,排除不符合纳入标准和未涉及SEMA5A基因中rs7702187位点的多态性的对照研究。应用RevMan4.2软件进行统计分析。结果 7篇文章共12组不同种族人群纳入分析,共有PD组3 539例,对照组3 250例。在西方人群中,SEMA5A基因rs7702187位点的AA基因型分析:OR=0.99,95%CI=[0.69,1.43],P=0.96;A等位基因分析:OR=0.87,95%CI=[0.79,0.96],P=0.008;T等位基因分析:OR=1.02,95%CI=[0.82,1.27],P=0.88。在东方人群中,AA基因型分析:OR=1.05,95%CI=[0.93,1.52],P=0.16;A等位基因分析:OR=1.05,95%CI=[0.93,1.52],P=0.16;T等位基因分析:OR=0.84,95%CI=[0.70,1.00],P=0.05。结论在东方人群中,SEMA5A基因rs7702187位点的多态性与PD的易感性无关联。在西方人群中,SEMA5A基因rs7702187位点的A等位基因与PD的易感性有关,携带A等位基因的人群患PD的风险增加。 展开更多

关键词 帕金森病 SEMA5a基因 基因多态性 META分析

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Semaphorin 5A基因在胃癌侵袭和转移中的作用 被引量：1

6

作者 许荣芬 潘国庆 张翔凌 《实用癌症杂志》 2012年第6期555-558,共4页

目的探讨Semaphorin 5A基因在胃癌侵袭和转移中的作用机制。方法应用RNA干扰技术,构建Sema-phorin 5A-siRNA、Scrambled-siRNA表达载体,并分别转染胃癌细胞株SGC7901,建立Semaphorin 5A稳定表达抑制的胃癌细胞株SGC7901-Sema5A-si和对照... 目的探讨Semaphorin 5A基因在胃癌侵袭和转移中的作用机制。方法应用RNA干扰技术,构建Sema-phorin 5A-siRNA、Scrambled-siRNA表达载体,并分别转染胃癌细胞株SGC7901,建立Semaphorin 5A稳定表达抑制的胃癌细胞株SGC7901-Sema5A-si和对照组SGC7901-Scram-si胃癌细胞株;采用Western blotting、ELISA和RT-PCR方法,检测MMP2、MMP9在上述2种胃癌细胞株中的表达;应用MMP2、MMP9抗体处理胃癌细胞株,观察其对胃癌细胞株SGC7901-Sema5A-si和Semaphorin 5A侵袭、转移能力的影响。结果 SGC7901-Sema5A-si中MMP9表达水平明显低于SGC7901-Scram-si中的表达水平(P<0.05),MMP2在2种胃癌细胞株中表达水平无明显差异(P>0.05);MMP9抗体能够阻断Semaphorin 5A基因介导的胃癌侵袭和转移,MMP2抗体对Semaphorin 5A基因介导的胃癌侵袭和转移无影响。结论Semaphorin 5A可能通过MMP9表达促进胃癌发生侵袭和转移。 展开更多

关键词 semaphorin 5a基因 胃癌 MMP9基因 侵袭和转移

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2型糖尿病合并甲状腺功能亢进患者血清Sema 5A、IGFBP-3水平与糖代谢指标的相关性分析

7

作者 杨芳 刘旋 +2 位作者 高素文 杨力 李敏 《检验医学与临床》 CAS 2024年第18期2698-2702,共5页

目的分析2型糖尿病合并甲状腺功能亢进(以下简称甲亢)患者血清信号素5A(Sema 5A)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平与糖代谢指标的相关性。方法选取2021年6月至2022年6月邯郸市中心医院收治的73例2型糖尿病合并甲亢患者作为合... 目的分析2型糖尿病合并甲状腺功能亢进(以下简称甲亢)患者血清信号素5A(Sema 5A)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平与糖代谢指标的相关性。方法选取2021年6月至2022年6月邯郸市中心医院收治的73例2型糖尿病合并甲亢患者作为合并组,56例单纯2型糖尿病患者作为糖尿病组,另选取同期在邯郸市中心医院体检的68例健康者作为对照组。比较对照组、糖尿病组、合并组血清Sema 5A、IGFBP-3水平,比较糖尿病组、合并组临床资料[体质量指数、糖尿病病程、空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、胰岛素(FIN)、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c)、三碘甲腺原氨酸(T_(3))、甲状腺素(T_(4))、游离三碘甲腺原氨酸(FT_(3))、游离甲状腺素(FT_(4))、促甲状腺素(TSH)、促甲状腺激素受体抗体(TRAB)及甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAB)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]。采用多因素Logisitic回归分析2型糖尿病并发甲亢的危险因素,采用Pearson相关分析2型糖尿病合并甲亢患者血清Sema 5A、IGFBP-3水平与糖代谢指标的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Sema 5A、IGFBP-3对2型糖尿病合并甲亢的诊断价值。结果合并组血清Sema 5A、IGFBP-3水平高于对照组和糖尿病组,且糖尿病组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。合并组糖尿病病程长于糖尿病组,血清HOMA-IR、FIN、HbA1c、T_(3)、T_(4)、FT_(3)、FT_(4)、TRAB、TPOAB水平高于糖尿病组,TSH水平低于糖尿病组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logisitic回归分析结果显示,HOMA-IR、TPOAB、Sema 5A、IGFBP-3水平升高,TSH水平降低为2型糖尿病并发甲亢的危险因素(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,2型糖尿病并发甲亢患者血清Sema 5A、IGFBP-3水平与HOMA-IR、FBG、2 h PG、FIN、HbA1c、HDL-C水平均呈正相关(P<0.05)。2型糖尿病并发甲亢患者血清Sema 5A、IGFBP-3水平与LDL-C水平呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清Sema 5A、IGFBP-3诊断2型糖尿病合并甲亢的曲线下面积(AUC)分别为0.854、0.804,2项指标联合诊断的AUC为0.900,且2项指标联合诊断的AUC高于Sema 5A、IGFBP-3单独诊断的AUC(Z联合-Sema 5A=2.156,P=0.043;Z联合-IGFBP-3=2.873,P=0.004)。结论2型糖尿病合并甲亢患者血清Sema 5A、IGFBP-3水平升高,且二者与糖代谢指标密切相关。 展开更多

关键词 2型糖尿病合并甲亢 信号素5a 胰岛素样生长因子结合蛋白-3 糖代谢指标 相关性

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semaphorin5A在胃癌中的表达及临床意义 被引量：2

8

作者 许旭 杨淑霞 +1 位作者 詹艳梅 李全福 《中国妇幼健康研究》 2017年第S1期66-67,共2页

目的:探讨semaphorin5A蛋白在胃癌中的表达及临床意义。方法:随机选择胃癌患者80例作为A组,癌旁正常组织45例作为B组。均采用免疫组织化学法检测semaphorin5A表达。结果:胃癌组semaphorin5A阳性率为63.8%,正常组为26.7%,两组间比较差异... 目的:探讨semaphorin5A蛋白在胃癌中的表达及临床意义。方法:随机选择胃癌患者80例作为A组,癌旁正常组织45例作为B组。均采用免疫组织化学法检测semaphorin5A表达。结果:胃癌组semaphorin5A阳性率为63.8%,正常组为26.7%,两组间比较差异有统计学意义。Semaphorin5A蛋白表达与胃癌远处转移,淋巴结转移和肿瘤分化程度具有相关性,与患者的年龄,性别或肿瘤分期无明显相关。结论:semaphorin5A蛋白在大多数胃癌组织中表达升高,其表达与胃癌的浸润程度、TNM分期以及淋巴结转移情况密切有关,可将其作为胃癌的诊断、疗效判断的重要指标。 展开更多

关键词 semaphorin5a 胃癌 表达

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血清Sema 5A、RVE1水平与桥本甲状腺炎患者Th17相关因子、甲状腺功能及相关抗体的相关性研究 被引量：10

9

作者 向慧敏 郑春梅 +2 位作者 李筱 王思繁 饶琴琴 《检验医学与临床》 CAS 2023年第1期76-80,共5页

目的探讨血清神经轴突导向分子5A(Sema 5A)、溶解素E1(RVE1)水平与桥本甲状腺炎(HT)患者辅助性T细胞(Th)17相关因子、甲状腺功能以及甲状腺特异性自身抗体的相关性。方法选择2019年2月至2021年8月该院收治的109例HT患者(HT组),分为甲状... 目的探讨血清神经轴突导向分子5A(Sema 5A)、溶解素E1(RVE1)水平与桥本甲状腺炎(HT)患者辅助性T细胞(Th)17相关因子、甲状腺功能以及甲状腺特异性自身抗体的相关性。方法选择2019年2月至2021年8月该院收治的109例HT患者(HT组),分为甲状腺功能正常组(39例)、亚临床甲减组(47例)、临床甲减组(23例),另选择58例甲状腺功能正常的体检健康者为对照组。检测各组血清Sema 5A、RVE1、甲状腺激素[促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)]、Th17相关因子[白细胞介素(IL)-17、IL-23]以及甲状腺特异性自身抗体[抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)]水平。分析HT患者血清Sema 5A、RVE1水平与TSH、FT3、FT4、IL-17、IL-23、TgAb、TPOAb等的相关性。结果HT组血清Sema 5A、IL-23、IL-17、TSH、TgAb、TPOAb水平,外周血Th17占比高于对照组(P<0.05),血清RVE1、FT3、FT4水平低于对照组(P<0.05)。临床甲减组血清Sema 5A、IL-23、IL-17、TSH、TgAb、TPOAb水平,外周血Th17占比高于亚临床甲减组、甲状腺功能正常组(P<0.05),血清RVE1、FT3、FT4水平低于亚临床甲减组、甲状腺功能正常组(P<0.05)。HT患者血清Sema 5A水平与外周血Th17占比、IL-23、IL-17、TSH、TgAb、TPOAb呈正相关(P<0.05),RVE1与上述指标呈负相关(P<0.05)。结论HT患者血清Sema 5A水平升高,RVE1水平降低,且与TgAb、TPOAb、TSH、外周血Th17占比、IL-17、IL-23水平增加有关。 展开更多

关键词 桥本甲状腺炎 辅助性T细胞17 抗甲状腺球蛋白抗体 甲状腺过氧化物酶抗体 神经轴突导向分子5a 溶解素E1

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SEMA5A基因多态性对幽门螺杆菌感染后胃癌发生风险的影响 被引量：8

10

作者 何颖 雷梓 +4 位作者 李庚 喻意 杨园 刘慧 潘国庆 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第1期12-16,共5页

目的胃癌是消化系统最常见恶性肿瘤之一,死亡率高。研究神经轴突导向分子Semaphorin 5A(SEMA5A)基因多态性对幽门螺旋杆菌(Hp)感染后胃癌发生风险的影响。方法选取昆明医科大学第一附属医院230例胃癌患者为胃癌组,同期健康人群250例为... 目的胃癌是消化系统最常见恶性肿瘤之一,死亡率高。研究神经轴突导向分子Semaphorin 5A(SEMA5A)基因多态性对幽门螺旋杆菌(Hp)感染后胃癌发生风险的影响。方法选取昆明医科大学第一附属医院230例胃癌患者为胃癌组,同期健康人群250例为对照组,使用酶联免疫吸附实验检测研究对象Hp感染情况;通过Taqman探针法对SEMA5A基因6个单核苷酸多态性(SNP)位点进行检测,并用SNaPshot测序法测序进行验证。结果SEMA5A rs805153位点的3种基因型在胃癌组与对照组分布具有统计学意义(P=0.01)。TT基因型在经年龄、性别、Hp感染调整后OR=2.74(95%CI:0.35~3.83,P<0.01);在隐性模型中,与CC基因型相比,TT+TC基因型与患癌风险有关(P<0.01,OR=2.40,95%CI:1.28~2.96),与男性胃癌的发病风险相关,经多因素校正后OR值=1.33(95%CI:0.81~2.23);在感染Hp时,TT+TC基因型也与胃癌的风险有关,经多因素调整后OR值=1.97(95%CI:0.28~1.40)。而rs693487、rs6896702、rs788469、rs1024489、rs2696371这5个SNP位点的基因型在两组间分布均无统计差异。结论SEMA5A基因rs805153位点多态性与胃癌发生风险相关,且与Hp感染存在交互作用。 展开更多

关键词 semaphorin 5a 基因多态性 幽门螺杆菌 胃癌

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类风湿关节炎患者血清神经轴突导向分子Semaphorin5A表达及其对破骨细胞分化的影响 被引量：6

11

作者 杜燕 王加伟 +3 位作者 周美菊 吴新宇 薛静 吴华香 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期661-666,共6页

目的 研究类风湿关节炎（RA）患者血清神经轴突导向分子Semaphorin 5A （Sema 5A）表达及其对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化的作用.方法 （1）选RA患者62例,骨关节炎（OA）患者30例,健康对照者48例,应用酶联免疫吸附（ELIS... 目的 研究类风湿关节炎（RA）患者血清神经轴突导向分子Semaphorin 5A （Sema 5A）表达及其对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化的作用.方法 （1）选RA患者62例,骨关节炎（OA）患者30例,健康对照者48例,应用酶联免疫吸附（ELISA）法检测所有受试者血清Sema5A水平.（2）以不同浓度Sema 5A（0、0.5、1、2.5、5μg/ml）处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,培养7d后行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,采用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测TRAP、组织蛋白酶-K、基质金属蛋白酶-9 mRNA表达水平;（3）以5μg/ml Sema 5A处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞7d,培养基中预先加入薄骨片,显微镜下观察骨吸收陷窝个数.结果 （1）RA患者血清Sema 5A水平显著高于健康对照者和OA患者[（5.24±0.59） μg/L比（2.93±0.34）μg/L比（2.68±0.47）μg/L,P＜0.05）];抗环瓜氨酸多肽（CCP）抗体阳性RA患者血清Sema 5A水平显著高于抗CCP抗体阴性者（P＜0.05）.Sema 5A水平与RA患者以C反应蛋白计算的28个关节疾病活动度（DAS28-CRP）、C反应蛋白、临床疾病活动指数（CDAI）、Sharp评分呈正相关（r值分别为0.273、0.519、0.448、0.292,P＜0.05）;（2）随着Sema 5A浓度增加,TRAP染色阳性细胞数逐渐增多,5μg/ml Sema 5A作用最强.Sema5A能诱导TRAP、组织蛋白酶-K、基质金属蛋白酶-9mRNA表达上调;（3）与空白比,5μg/ml Sema 5A骨吸收陷窝数增多.结论 RA患者血清Sema 5A水平显著升高,与患者的疾病活动度及骨破坏程度相关.Sema 5A可直接诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化. 展开更多

关键词 关节炎 类风湿 semaphorin 5a 破骨细胞

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Semaphorin5A在大肠癌组织中的表达及临床意义 被引量：3

12

作者 史长山 王兴尧 +2 位作者 王晓光 吴德辉 解辉 《解剖科学进展》 2018年第2期146-148,共3页

目的检测神经导向分子Semaphorin5A在大肠癌组织中表达,并探讨其在大肠癌发生发展中的意义。方法选取43例大肠癌组织和22例正常大肠粘膜组织,采用免疫组织化学、Western blot和real-time PCR方法检测Semaphorin5A在大肠癌组织及其正常... 目的检测神经导向分子Semaphorin5A在大肠癌组织中表达,并探讨其在大肠癌发生发展中的意义。方法选取43例大肠癌组织和22例正常大肠粘膜组织,采用免疫组织化学、Western blot和real-time PCR方法检测Semaphorin5A在大肠癌组织及其正常大肠粘膜组织中的表达,并分析其与临床病理特征之间的相关性。结果大肠癌组织中Semaphorin5A的蛋白与mRNA表达水平显著高于正常大肠粘膜组织(P<0.05);Semaphorin5A的表达与大肠癌Dukes分期、淋巴结转移、组织学分型有关,与年龄、性别无关。结论Semaphorin5A可能与大肠癌的发生发展密切相关。 展开更多

关键词 semaphorin5a 大肠癌 DUKES分期 淋巴结转移

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shRNA沉默神经导向分子5A基因对A375细胞系增殖、转移和侵袭能力的影响 被引量：1

13

作者 张莉 李亚东 +4 位作者 陈晨 李凌佳 谢玉燕 刘彤云 寸韡 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期573-577,共5页

目的：探讨慢病毒介导短发夹RNA（shRNA）沉默神经导向分子5A（Semaphorin 5A）基因对恶性黑素瘤A375细胞系生物活性的影响。方法针对Semaphorin 5A设计2对shRNA引物及1对阴性对照引物，构建慢病毒载体，转染至人胚肾上皮HEK293T细胞系... 目的：探讨慢病毒介导短发夹RNA（shRNA）沉默神经导向分子5A（Semaphorin 5A）基因对恶性黑素瘤A375细胞系生物活性的影响。方法针对Semaphorin 5A设计2对shRNA引物及1对阴性对照引物，构建慢病毒载体，转染至人胚肾上皮HEK293T细胞系收获慢病毒，利用慢病毒感染A-375细胞系并通过嘌呤霉素筛选，成功获得稳定转染细胞系，实验分为实验组细胞（A375-shRNA1和A375-shRNA2）、阴性对照组细胞（A375-con）及空白对照组细胞（A375）。通过反转录PCR（RT-PCR）、Western印迹比较实验组细胞、阴性对照组细胞及空白对照组细胞Semaphorin 5A mRNA、蛋白表达水平的差异。噻唑蓝（MTT）检测细胞生长情况；侵袭试验及划痕试验比较转染前后细胞的侵袭运动能力。结果 Semaphorin 5A成功转染A375细胞后，经嘌呤霉素筛选，成功获得稳定转染实验组A375-shRNA2细胞系及对照组A375-con。反转录PCR及Western印迹检测，干扰后实验组A375-shRNA2较对照组A375-con、A375 Semaphorin 5A的转录水平及蛋白表达水平表达下调。MTT实验结果显示，A375-con与A375细胞生长差异无统计学意义（P〉0.05），A375-shRNA2细胞生长明显减慢，与A375和A375-con比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）。划痕实验结果显示，A375-shRNA2划痕处细胞无明显迁移，划痕未得到修复，而A375及A375-con划痕处细胞最终几乎将划痕覆盖。侵袭实验结果显示，A375组与A375-con组穿过的细胞数差异无统计学意义（P〉0.05）；而A375-shRNA2通过小室的细胞明显少于A375及A375-con组，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论慢病毒介导shRNA沉默Semaphorin 5A基因能使A375中的Semaphorin 5A有效下调，并抑制细胞的生长，降低细胞的侵袭以及运动能力。 展开更多

关键词 黑色素瘤 semaphorin 5a 慢病毒属 RNA 小分子干扰 肿瘤侵润

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