子痫前期孕妇血清hTERT和Sirt6水平表达与疾病严重程度及妊娠结局评估中的价值研究

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作者 张雅 杨春荣 +2 位作者 袁峰 韩曦 刘晓红 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第3期142-146,188,共6页

目的检测子痫前期孕妇血清中人端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、沉默信息调节因子6(silent information regulator 6,Sirt6)表达,并探究hTERT,Sirt6水平表达与疾病严重程度及妊娠结局评估中的价值。方... 目的检测子痫前期孕妇血清中人端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、沉默信息调节因子6(silent information regulator 6,Sirt6)表达,并探究hTERT,Sirt6水平表达与疾病严重程度及妊娠结局评估中的价值。方法选取2018年1月~2022年12月在陕西省人民医院进行诊治的300例子痫前期孕妇作为子痫前期组,孕妇均符合《妊娠期高血压疾病诊治指南(2015)》中子痫前期诊断标准,选取同时期孕检的300例健康孕妇为对照组,根据病情严重程度将子痫前期组分为轻症子痫前期组(n=180)和重症子痫前期组(n=120),根据是否发生不良妊娠结局将子痫前期组分为正常妊娠组(n=165)和不良妊娠组(n=135)。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)法检测血清中hTERT和Sirt6水平,Spearman相关性分析血清中hTERT和Sirt6水平与子痫前期孕妇病情严重程度的相关性,利用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估血清hTERT和Sirt6水平在子痫前期诊断及妊娠结局预测中的价值。结果与对照组比较,子痫前期组血清hTERT(22.15±5.82 ng/ml vs 30.12±9.56 ng/ml),Sirt6(5.26±1.62 ng/ml vs 7.06±2.29 ng/ml)水平降低,差异具有统计学意义(t=12.334,11.114,均P<0.001)。与轻症子痫前期组比较,重症子痫前期组孕妇血清hTERT(18.28±4.11 ng/ml vs 24.73±6.96 ng/ml),Sirt6(4.03±1.17 ng/ml vs 6.08±1.92 ng/ml)水平降低,差异具有统计学意义(t=9.142,10.469,均P<0.001)。与正常妊娠组比较,不良妊娠组子痫前期孕妇血清中hTERT(17.75±4.61 ng/ml vs 25.75±6.81 ng/ml),Sirt6(4.06±0.96 ng/ml vs 6.24±2.16 ng/ml)水平降低,差异具有统计学意义(t=11.639,10.878,均P<0.001)。Spearman相关性分析显示,血清hTERT,Sirt6水平与子痫前期孕妇疾病严重程度均呈负相关(r=-0.562,-0.604,均P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,血清hTERT,Sirt6诊断子痫前期的曲线下面积(95%置信区间)[AUC(95%CI)]分别为0.711(0.673~0.747),0.727(0.689~0.762),两者联合诊断子痫前期的AUC(95%CI)为0.788(0.753~0.820),高于两者单独诊断(Z=2.719,2.154,P=0.007,0.031);血清hTERT,Sirt6预测子痫前期不良妊娠结局的AUC(95%CI)分别为0.786(0.735~0.831),0.783(0.732~0.829),两者联合预测子痫前期不良妊娠结局的AUC(95%CI)为0.849(0.804~0.888),高于两者单独预测(Z=1.855,1.861,P=0.032,0.031)。结论hTERT和Sirt6在子痫前期孕妇血清中水平较低,与子痫前期孕妇疾病严重程度均呈负相关,并对妊娠结局具有一定的评估价值。 展开更多

关键词 子痫前期 人端粒酶反转录酶 沉默信息调节因子6 妊娠结局

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血清SIRT3、SIRT6与脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征及预后的关系研究

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作者 尚红亮 李鹏 吕艳超 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第4期385-391,共7页

目的探讨血清沉默信息调节因子2相关酶(SIRT)3、SIRT6与脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)及预后的关系。方法选取2020年3月至2022年2月保定市第一中心医院收治的68例脓毒症并发ARDS患者为研究对象,根据轻度、中度和重度ARDS标准将其... 目的探讨血清沉默信息调节因子2相关酶(SIRT)3、SIRT6与脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)及预后的关系。方法选取2020年3月至2022年2月保定市第一中心医院收治的68例脓毒症并发ARDS患者为研究对象,根据轻度、中度和重度ARDS标准将其分为轻度组、中度组、重度组;根据28 d内预后情况将患者分为生存组和死亡组。采用酶联免疫吸附试验检测血清SIRT3、SIRT6水平。比较各组序贯器官功能衰竭评估(SOFA)评分、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、血清SIRT3、SIRT6水平。收集患者的临床资料,采用单因素及多因素Logistic回归分析脓毒症并发ARDS患者死亡的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SIRT3、SIRT6对脓毒症并发ARDS患者死亡的预测价值。结果中度组、重度组血清SIRT3、SIRT6水平低于轻度组,SOFA评分和APACHEⅡ评分高于轻度组,重度组血清SIRT3、SIRT6水平低于中度组,SOFA评分和APACHEⅡ评分高于中度组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组年龄、机械通气时间、乳酸、动脉氧合指数[动脉血氧分压(PaO2)/吸入氧浓度(FiO2)]、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-6、SIRT3、SIRT6、SOFA评分、APACHEⅡ评分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。机械通气时间较长、乳酸较高、CRP较高、IL-6较高、SOFA评分较高和APACHEⅡ评分较高均为脓毒症并发ARDS患者28 d内死亡的危险因素,PaO2/FiO2较大、SIRT3较高、SIRT6较高则为保护因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清SIRT3、SIRT6水平、SOFA评分、APACHEⅡ评分单独及联合应用时曲线下面积及95%CI分别为0.706(0.493~0.922)、0.722(0.497~0.954)、0.753(0.570~0.922)、0.710(0.442~0.952)、0.872(0.761~0.976)。结论脓毒症并发ARDS患者血清SIRT3、SIRT6水平降低,且随着病情加重,血清SIRT3、SIRT6水平越低,两者可辅助预测脓毒症并发ARDS患者的预后。 展开更多

关键词 脓毒症 急性呼吸窘迫综合征 沉默信息调节因子2相关酶3 沉默信息调节因子2相关酶6 预后

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血清沉默信息调节因子6、人激肽释放酶抑制剂对急性心肌梗死伴心力衰竭预后的预测价值

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作者 孙孟华 侯永茂 +3 位作者 刘军利 闫航 罗进光 李涛 《安徽医药》 CAS 2024年第11期2222-2226,共5页

目的探讨急性心肌梗死伴心力衰竭病人血清沉默信息调节因子6(SIRT6)、人激肽释放酶抑制剂(Kallistatin)的表达水平对预后的预测价值。方法选择2021年1月至2023年1月安阳市人民医院收治的急性心肌梗死伴心力衰竭病人123例作为疾病组,治疗... 目的探讨急性心肌梗死伴心力衰竭病人血清沉默信息调节因子6(SIRT6)、人激肽释放酶抑制剂(Kallistatin)的表达水平对预后的预测价值。方法选择2021年1月至2023年1月安阳市人民医院收治的急性心肌梗死伴心力衰竭病人123例作为疾病组,治疗90 d后将其分为预后不佳组(n=77)和预后良好组(n=46),选取同一时期进行健康体检的123例志愿者作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISE)检测血清SIRT6、Kallistatin表达水平,收集入选者心功能指标[左室收缩末期容积指数(LVESVI)、左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期容积指数(LVEDVI)];采用Pearson法分析急性心肌梗死伴心力衰竭病人血清SIRT6、Kallistatin与LVESVI、LVEF、LVEDVI的相关性;运用ROC曲线评估血清SIRT6、Kallistatin水平对急性心肌梗死伴心力衰竭病人预后不佳的预测价值。结果与对照组相比,急性心肌梗死伴心力衰竭病人LVEF[(56.98±8.29)%比(68.21±10.12)%]、血清SIRT6[(5.08±0.87)μg/L比(7.12±1.26)μg/L]、Kallistatin[(6.51±1.01)mg/L比(8.24±1.38)mg/L]水平较低(P<0.05),LVEDVI、LVESVI较高(均P<0.05),且病人血清SIRT6、Kallistatin与LVEF呈正相关,与LVEDVI、LVESVI呈负相关性(均P<0.01)。与预后良好组相比,预后不佳组血清SIRT6、Kallistatin水平均明显较低(P<0.05);血清SIRT6、Kallistatin预测急性心肌梗死伴心力衰竭病人预后不佳的AUC分别为0.860、0.884,血清SIRT6、Kallistatin联合检测预测预后不佳的AUC(0.945)高于单独检测(Z_(二者联合-SIRT6)=2.72、Z_(二者联合-Kallistatin)=2.18,P=0.007、0.029)。结论急性心肌梗死伴心力衰竭病人血清SIRT6、Kallistatin水平明显降低,二者联合对急性心肌梗死伴心力衰竭病人预后具有较好的预测价值。 展开更多

关键词 心肌梗死 心力衰竭 沉默信息调节因子6 人激肽释放酶抑制剂 预测价值

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SIRT6在肝纤维化形成进程中的作用及其机制

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作者 林夏萍 黄仙玉 +5 位作者 孙健 李映莹 徐云燕 黄波 杨媛 吴芹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1652-1659,共8页

目的:探讨沉默信息调节因子6(silent information regulator 6,SIRT6)对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导的小鼠肝纤维化作用和机制,以及肝星状细胞在SIRT6沉默后其下游通路的表达变化。方法:将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分... 目的:探讨沉默信息调节因子6(silent information regulator 6,SIRT6)对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导的小鼠肝纤维化作用和机制,以及肝星状细胞在SIRT6沉默后其下游通路的表达变化。方法:将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(n=6)和模型组(造模2、4、8、12周,n=24),采用腹腔注射CCl_(4)制备肝纤维化小鼠模型,每周2次,持续12周。检测各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)含量评估肝损伤;HE、Masson染色观察小鼠肝脏病理学改变;免疫组织化学染色检测小鼠肝脏α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达;Western blot检测肝脏α-SMA、SIRT6、第9位赖氨酸乙酰化的组蛋白H3(acetyl histone H3 at Lys9,H3K9ac)、第56位赖氨酸乙酰化的组蛋白H3(acetyl histone H3 at Lys56,H3K56ac)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-18蛋白的表达。将大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells-T6,HSC-T6)进行SIRT6基因沉默,分为NC siRNA组和SIRT6 siRNA组。Western blot检测SIRT6、H3K9ac和H3K56ac蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠血清中ALT和AST含量均显著升高(P<0.05);HE染色和Masson结果显示,模型组肝脏病理变化逐渐加重,胶原纤维沉积逐渐增多;免疫组织化学染色与Western blot均显示,在8和12周模型组中肝脏α-SMA表达显著增加(P<0.05);Western blot检测结果显示,CCl_(4)造模后各组小鼠肝脏中SIRT6蛋白表达均低于正常对照组(P<0.05),并随肝纤维化的加重逐渐降低;同时模型组小鼠肝脏H3K9ac、H3K56ac、IL-1β和IL-18表达水平在8、12周时明显升高(P<0.05);SIRT6沉默后,与NC siRNA组比较,SIRT6 siRNA组中的H3K9ac和H3K56ac显著增加(P<0.05)。结论:SIRT6缺乏通过H3K9ac和H3K56ac的异常增多使得IL-1β和IL-18的表达升高,加剧炎症反应而促进肝纤维化进程,提示SIRT6的表达异常参与了肝纤维化进程的发展。 展开更多

关键词 肝纤维化 四氯化碳 肝星状细胞 沉默信息调节因子6 炎症因子

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lncRNA H19和SIRT6在人胃癌组织中的表达及其与临床病理的相关性 被引量：1

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作者 寇耀 贾映东 +2 位作者 杨宁波 杨学军 张刘平 《西部医学》 2023年第7期1006-1010,共5页

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19和沉默信息调节因子6(SIRT6)在人胃癌组织中的表达及其与临床病理的相关性。方法 选取2018年1月—2021年1月在本院接受手术治疗的96例胃癌患者作为研究对象,收集患者胃癌组织和癌旁正常组织(距离胃癌... 目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19和沉默信息调节因子6(SIRT6)在人胃癌组织中的表达及其与临床病理的相关性。方法 选取2018年1月—2021年1月在本院接受手术治疗的96例胃癌患者作为研究对象,收集患者胃癌组织和癌旁正常组织(距离胃癌组织>5 cm)标本,比较人胃癌组织和癌旁正常组织中lncRNA H19、SIRT6表达情况,并分析lncRNA H19、SIRT6表达与胃癌患者临床病理特征的关系。结果 人胃癌组织中lncRNA H19 mRNA表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.05);人胃癌组织中SIRT6 mRNA表达水平和SIRT6蛋白阳性表达率显著低于癌旁正常组织(P<0.05);lncRNA H19 mRNA表达水平与胃癌患者分化程度、浸润深度、肿瘤TNM分期以及淋巴结转移呈正相关(P<0.05);SIRT6 mRNA和SIRT6蛋白表达与胃癌患者分化程度、浸润深度、肿瘤TNM分期以及淋巴结转移呈负相关(P<0.05)。结论 lncRNA H19在人胃癌组织中上调表达,SIRT6在人胃癌组织中下调表达,lncRNA H19、SIRT6表达与胃癌患者临床病理特征存在一定的相关性。 展开更多

关键词 长链非编码RNA H19 沉默信息调节因子6 胃癌 临床病理特征

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血清Beclin1、SIRT6水平与ST段抬高型心肌梗死患者PCI术后缺血再灌注损伤的关系 被引量：2

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作者 陈作强 李洲剑 +2 位作者 衣帕尔古力·阿布拉 巩丽华 张慧敏 《山东医药》 CAS 2023年第34期6-10,共5页

目的探讨血清苄氯素1(BECN1)、沉默信息调节因子6(SIRT6)水平与ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠脉介入治疗(PCI)术后缺血再灌注损伤(IRI)的关系。方法选取150例STEMI患者为STEMI组,根据PCI术后是否发生IRI分为IRI组和非IRI组,另选... 目的探讨血清苄氯素1(BECN1)、沉默信息调节因子6(SIRT6)水平与ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠脉介入治疗(PCI)术后缺血再灌注损伤(IRI)的关系。方法选取150例STEMI患者为STEMI组,根据PCI术后是否发生IRI分为IRI组和非IRI组,另选取同期68例健康体检志愿者为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清BECN1、SIRT6水平。分析STEMI患者术后IRI的影响因素,绘制血清BECN1、SIRT6水平诊断STEMI患者术后发生ISI的受试者工作特征(ROC)曲线。结果与对照组比较,STEMI组血清BECN1、SIRT6水平降低(P均<0.05)。150例STEMI患者PCI术后IRI发生率为38.00%(57/150)。多因素Logistic回归分析显示,年龄增加(OR=1.094,95%CI:1.019~1.174)与白蛋白(OR=0.826,95%CI:0.723~0.943)、BECN1(OR=0.880,95%CI:0.830~0.933)和SIRT6(OR=0.338,95%CI:0.204~0.558)升高为STEMI患者术后IRI的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清BECN1、SIRT6水平联合[曲线下面积(AUC)=0.872,95%CI:0.808~0.921]预测STEMI患者术后IRI的AUC大于BECN1(AUC=0.782,95%CI:0.707~0.845)、SIRT6(AUC=0.783,95%CI:0.708~0.846)单独预测(P均<0.05)。结论STEMI患者血清BECN1、SIRT6水平降低与术后IRI密切相关,血清BECN1、SIRT6水平联合预测STEMI患者术后IRI的价值较高,可作为STEMI患者术后IRI的辅助预测指标。 展开更多

关键词 ST段抬高型心肌梗死 苄氯素1 沉默信息调节因子6 经皮冠状动脉介入治疗 缺血再灌注损伤

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血清SIRT6、FBLN1水平与腹膜透析患者腹主动脉钙化的关系 被引量：1

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作者 王林琳 王晴岚 +1 位作者 林玉洁 李剑恺 《山东医药》 CAS 2023年第31期10-14,共5页

目的探讨患者血清沉默信息调节因子6(SIRT6)、腓骨蛋白1(FBLN1)水平与腹膜透析(PD)患者腹主动脉钙化(AAC)的关系。方法选取132例PD患者为PD组,同期另选取46名健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附法检测两组血清SIRT6、FBLN1;收集PD患... 目的探讨患者血清沉默信息调节因子6(SIRT6)、腓骨蛋白1(FBLN1)水平与腹膜透析(PD)患者腹主动脉钙化(AAC)的关系。方法选取132例PD患者为PD组,同期另选取46名健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附法检测两组血清SIRT6、FBLN1;收集PD患者病历资料;根据AAC积分将PD患者分为AAC组53例、非AAC组79例。用Spearman相关法分析AAC患者血清SIRT6、FBLN1水平与AAC积分的相关性;用多因素Logistic回归分析PD患者AAC的影响因素;用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SIRT6、FBLN1水平对PD患者AAC的评估价值。结果PD组血清SIRT6水平低于对照组,FBLN1水平高于对照组(P均<0.05)。Spearman相关法分析显示,AAC患者AAC积分与血清SIRT6水平呈负相关,与FBLN1水平呈正相关(r_(s)分别为-0.793、0.796,P均<0.05)。透析龄延长和全段甲状旁腺素、FBLN1升高为PD患者AAC的独立危险因素,SIRT6升高为独立保护因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清SIRT6、FBLN1水平单独与联合评估PD患者AAC的曲线下面积分别为0.781、0.780、0.866,二者联合评估的曲线下面积高于单独指标评估(P均<0.05)。结论血清SIRT6水平降低、FBLN1水平升高与PD患者AAC密切相关,血清SIRT6联合FBLN1评估PD患者AAC的价值较高。 展开更多

关键词 腹主动脉钙化 腹膜透析 沉默信息调节因子6 腓骨蛋白1

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枸杞多糖对高糖干预的人晶状体上皮细胞中SIRT1及SIRT6表达的影响

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作者 伏等弟 白文帆 +3 位作者 郭玉 罗明秀 芦晓红 姚青 《宁夏医科大学学报》 2023年第6期541-546,共6页

目的研究枸杞多糖(LBP)对高糖干预的人晶状体上皮(HLEB3)细胞中沉默信息调节因子1(SIRT1)及沉默信息调节因子6(SIRT6)表达水平的影响。方法将对数生长期的HLEB3细胞随机分为对照组(CON组,5.5 mmol·L^(-1))、高糖组(HG组,55.5 mmol&... 目的研究枸杞多糖(LBP)对高糖干预的人晶状体上皮(HLEB3)细胞中沉默信息调节因子1(SIRT1)及沉默信息调节因子6(SIRT6)表达水平的影响。方法将对数生长期的HLEB3细胞随机分为对照组(CON组,5.5 mmol·L^(-1))、高糖组(HG组,55.5 mmol·L^(-1))、HG+12.5 mg·L^(-1) LBP组、HG+25 mg·L^(-1) LBP组、HG+50 mg·L^(-1) LBP组,培养24 h后,分别用相应培养基干预48 h,用显微镜观察各组细胞的形态及密度变化;采用CCK-8试剂盒检测各组细胞的存活率;采用免疫荧光法对各组细胞中SIRT1和SIRT6蛋白进行定位检测;采用Western blot法测定各组细胞中SIRT1与SIRT6蛋白的表达水平。结果光镜下观察发现,CON组HLEB3细胞主要呈梭形贴壁生长,HG组细胞形态呈不规则状,细胞密度降低;与HG组相比,HG+12.5 mg·L^(-1) LBP组、HG+25 mg·L^(-1) LBP组、HG+50 mg·L^(-1) LBP组细胞密度依次增加。CCK-8检测结果显示,与CON组相比,HG组HLEB3细胞活性降低(P<0.05);与HG组相比,HG+50 mg·L^(-1) LBP组HLEB3细胞活性增加(P<0.05)。免疫荧光结果显示,HLEB3细胞中SIRT1蛋白主要在细胞核中表达,细胞质中有少量表达;SIRT6蛋白表达定位在细胞核。Western blot结果显示,与CON组相比,HG组HLEB3细胞中SIRT1和SIRT6蛋白表达均下调(P均<0.05);与HG组相比,HG+50 mg·L^(-1) LBP组HLEB3细胞中SIRT1和SIRT6蛋白表达均上调(P均<0.01)。结论LBP可以增加高糖干预的HLEB3细胞的增殖活性,并上调SIRT1和SIRT6蛋白的表达。 展开更多

关键词 人晶状体上皮细胞 高糖 沉默信息调节因子1 沉默信息调节因子6 枸杞多糖

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LncRNAGAS5通过miR-137/SIRT6轴抑制糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的机制研究

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作者 王庆军 王天宇 胡鹏飞 《心脑血管病防治》 2023年第11期11-17,共7页

目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录因子5(LncRNA GAS5)对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌细胞凋亡的影响及其分子机制。方法通过高糖高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射构建大鼠DCM模型,分为假手术(Sham)组和DCM组。苏木素-伊红(HE)染色... 目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录因子5(LncRNA GAS5)对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌细胞凋亡的影响及其分子机制。方法通过高糖高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射构建大鼠DCM模型,分为假手术(Sham)组和DCM组。苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织的病理变化;Masson染色检测大鼠心肌纤维化程度;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测心肌组织LncRNA GAS5的表达情况。大鼠心肌细胞(H9c2)随机分为对照组、高糖组、高糖+GAS5组、高糖+miR-137 mimics组、高糖+miR-137 mimics+GAS5组、高糖+沉默调节蛋白6(SIRT6)组、高糖+SIRT6+miR-137 mimics组并进行相应处理。qRT-PCR检测LncRNA GAS5、miR-137的表达量;Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、SIRT6蛋白表达量;流式细胞术检测细胞凋亡情况;细胞计数试剂盒8检测细胞活力;双荧光素酶报告基因实验验证LncRNAGAS5与miR-137、miR-137与SIRT6的靶向作用。结果HE染色和Masson染色结果显示,与Sham组相比,DCM组心肌细胞肥大,排列紊乱,胶原纤维增多,大量炎性细胞浸润。与Sham组比较,DCM组LncRNAGAS5表达降低(P<0.01)。与对照组比较,高糖组LncRNAGAS5表达水平随高糖培养时间延长逐渐降低(P<0.01)。与高糖组比较,高糖+GAS5组LncRNAGAS5表达量、细胞活力、Bcl-2表达增加(P<0.05);miR-137、细胞凋亡比例、Bax表达降低(P<0.05)。与高糖组比较,高糖+miR-137 mimics组miR-137、Bax蛋白表达量、细胞凋亡率增加(P<0.05);细胞活力、SIRT6、Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.05)。与高糖+miR-137 mimics组相比,高糖+GAS5+miR-137 mimics组细胞活力、Bcl-2表达增加(P<0.01);细胞凋亡比例、Bax表达降低(P<0.05)。与高糖组比较,高糖+SIRT6组细胞活力、Bcl-2、SIRT6蛋白表达增加(P<0.01);细胞凋亡比例、Bax表达降低(P<0.01)。与高糖+SIRT6组比较,高糖+SIRT6+miR-137 mimics组细胞凋亡率、Bax蛋白表达量升高;细胞活力、Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实LncRNA GAS5和miR-137、miR-137和SIRT6存在靶向关系。结论过表达LncRNAGAS5可通过内源性竞争机制减少miR-137与SIRT6的结合,促进SIRT6表达抑制DCM大鼠心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 糖尿病心肌病 长链非编码RNA生长停滞特异性转录因子5 miR-137 沉默调节蛋白6 凋亡

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右美托咪定通过沉默信息调节因子1/核转录因子信号通路调控脑梗死大鼠海马组织炎症机制研究 被引量：1

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作者 李显碧 刘尚升 +2 位作者 肖兵 廖华 张杨 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第1期23-27,共5页

目的:探究右美托咪定(Dex)干预对脑梗死大鼠的治疗效果及潜在治疗机制。方法:将60只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、右美托咪定低剂量组、右美托咪定高剂量组,每组各12只。除对照组、假手术组外,其余各组选用Longa... 目的:探究右美托咪定(Dex)干预对脑梗死大鼠的治疗效果及潜在治疗机制。方法:将60只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、右美托咪定低剂量组、右美托咪定高剂量组,每组各12只。除对照组、假手术组外,其余各组选用Longa线栓法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,假手术组仅剥离肌肉血管。Dex治疗组分别腹腔注射盐酸右美托咪定溶液,其余各组注射等量0.9%氯化钠溶液。比较各组大鼠缺血脑组织的沉默信息调节因子1(SIRT1)、核转录因子(NK-κB)信使RNA(mRNA)和蛋白的相对表达水平及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,同时检测各组大鼠海马区炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果:与对照组大鼠比较,Dex治疗组大鼠SIRT1mRNA和蛋白水平降低、NF-κBmRNA和蛋白水平升高,经Dex治疗后两组大鼠的SIRT1mRNA、蛋白水平升高,且Dex高剂量组更高;同时NF-κBmRNA、蛋白水平下降,且Dex高剂量组低于Dex低剂量组;与对照组、假手术组大鼠比较,其余各组大鼠TNF-α、IL-6、MDA水平升高,SOD水平下降,经Dex治疗后两组大鼠的炎性因子和氧化应激水平降低,且Dex高剂量组TNF-α、IL-6、MDA水平低于Dex低剂量组,同时SOD水平升高,且Dex高剂量组更高,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:右美托咪定可能通过激活SIRT1/NF-kB信号通路,减轻炎性反应,缓解氧化应激,进而发挥脑保护作用。 展开更多

关键词 右美托咪定 沉默信息调节因子1/核转录因子 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-6 氧化应激 机制

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炎症微环境对大鼠间充质干细胞增殖及Sirt6表达水平的影响 被引量：2

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作者 王开 荆得宝 +1 位作者 于素平 刘雪阳 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2020年第3期150-155,共6页

目的:分析沉默信息调控因子6(silent information regulator 6,Sirt6)在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中的表达情况,以及炎症微环境对其表达水平的影响,为研究Sirt6在牙周炎症条件下骨形成中的作用... 目的:分析沉默信息调控因子6(silent information regulator 6,Sirt6)在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中的表达情况,以及炎症微环境对其表达水平的影响,为研究Sirt6在牙周炎症条件下骨形成中的作用提供理论依据。方法:根据实验分为脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导组、对照组和LPS过表达Sirt6组。经10μg/mL LPS刺激6、12、24、48、72 h,建立细胞的炎症微环境;CCK-8法检测细胞的增殖水平;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达;免疫荧光技术检测Sirt6的分布情况;通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术、蛋白质印迹法(western blot)检测Sirt6在大鼠BMSCs中信使RNA(mRNA)及蛋白的表达水平。结果:10μg/mL LPS刺激BMSCs后,成功建立炎症微环境;与对照组相比较,CCK-8法检测到炎症微环境中BMSCs的增殖速率由增高逐渐趋于下降,炎症因子抑制了BMSCs的增殖速率(P<0.05),而过表达Sirt6则升高BMSCs的增殖速率(P<0.05);ELISA结果显示,随着时间的推移,炎症微环境中的TNF-α、IL-1β、IL-6含量逐渐下降(P<0.05),表明BMSCs对炎性因子具有调控作用;炎症微环境中,免疫荧光染色显示Sirt6的表达未受到明显抑制;RT-PCR结果显示,LPS过表达Sirt6组中,Sirt6的mRNA表达水平显著升高,且在不同时间点内Sirt6的mRNA表达水平呈现显著性升高;Western blot结果显示,同一时间点LPS诱导组中Sirt6蛋白的表达均出现下降,差异具有统计学意义(P<0.05),而且随着时间的推移,Sirt6的蛋白表达并没有出现显著性下降,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:炎症因子可以通过抑制Sirt6蛋白的表达影响BMSCs的增殖作用,BMSCs中Sirt6也具有调控炎症因子的作用。 展开更多

关键词 炎症微环境 大鼠间充质干细胞 沉默信息调控因子6 细胞增殖

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亚精胺通过改善心脏线粒体能量代谢缓解压力超负荷小鼠心力衰竭 被引量：1

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作者 张晓亮 赵晓玲 +2 位作者 耿静 胡朗 李妍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期193-203,共11页

目的:探讨亚精胺(spermidine,SPD)对小鼠压力超负荷心肌肥大和心力衰竭的缓解作用及其机制。方法:(1)将8周龄的雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组:假手术(sham)组、sham+SPD喂养组、主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction,TAC)组和TAC... 目的:探讨亚精胺(spermidine,SPD)对小鼠压力超负荷心肌肥大和心力衰竭的缓解作用及其机制。方法:(1)将8周龄的雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组:假手术(sham)组、sham+SPD喂养组、主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction,TAC)组和TAC+SPD组。TAC术后,sham+SPD组和TAC+SPD组小鼠经饮水喂养SPD(3 mmol/L);Western blot检测心肌组织沉默信息调节因子6(silent information regulator 6,SIRT6)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator-1,PGC-1)和线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,MFN2)表达量;分离成年小鼠心肌细胞,观察细胞长度和宽度;麦胚凝集素染色观察心肌细胞面积;Masson染色评估心肌纤维化面积;心脏超声检查心功能及心肌肥大情况;透射电镜观察心肌线粒体形态;采用Oxygraph-2k高分辨呼吸能量代谢仪检测心肌线粒体耗氧量。(2)用血管紧张素II(angiotensin II,Ang II;1μmol/L)处理原代大鼠心室肌细胞,建立心肌细胞肥大模型。将这些心肌细胞分为对照(control,Con)组、Con+SPD(1 mmol/L)组、Ang II组、Ang II+SPD组和Ang II+SPD+SIRT6 siRNA(siSIRT6)组。共聚焦显微镜观察心肌细胞面积和线粒体。结果:(1)与sham组比较,TAC组小鼠心功能显著降低(P<0.05),病理性心肌肥大程度显著升高(P<0.05),心肌组织SIRT6、PGC-1和MFN2表达水平显著降低(P<0.05)。相比于TAC组,TAC+SPD组小鼠心肌组织SIRT6、PGC-1和MFN2表达水平显著升高(P<0.05),病理性心肌肥大程度减轻(P<0.05),心肌细胞肥大缓解(P<0.05),线粒体数目和线粒体嵴密度增多(P<0.05),线粒体功能有所改善(P<0.05),心肌纤维化减轻(P<0.05),心脏收缩功能改善(P<0.05)。(2)细胞实验中,相比于Con组,Ang II组心肌细胞SIRT6、PGC-1和MFN2表达水平显著降低(P<0.05),心肌细胞肥大程度显著增加(P<0.05);与Ang II组相比,Ang II+SPD组心肌细胞SIRT6、PGC-1和MFN2表达水平显著升高(P<0.05),细胞肥大缓解(P<0.05),线粒体动力学改善(P<0.05),而Ang II+SPD+siSIRT6组SIRT6、PGC-1和MFN2表达量无显著差异,心肌细胞肥大程度和线粒体动力学亦无显著差异。结论:SPD可以促进SIRT6、PGC-1和MFN2的表达,改善压力超负荷小鼠线粒体功能,减轻心肌肥大,从而缓解心力衰竭。 展开更多

关键词 亚精胺 心肌肥大 心力衰竭 线粒体能量代谢 沉默信息调节因子6 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1 线粒体融合蛋白2

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SIRT6调控细胞糖代谢对非小细胞肺癌A549细胞放射敏感性的影响 被引量：1

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作者 蔡勇 王季颖 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第12期1073-1079,共7页

目的探讨沉默信息调节蛋白6(SIRT6)调控细胞糖代谢对非小细胞肺癌A549细胞放射敏感性的影响。方法构建过表达SIRT6的腺病毒载体Ad-SIRT6,采用荧光实时定量PCR(QPCR)检测经不同转染强度(0、25、50、100、200pfu/细胞)Ad-SIRT6转染24 h后... 目的探讨沉默信息调节蛋白6(SIRT6)调控细胞糖代谢对非小细胞肺癌A549细胞放射敏感性的影响。方法构建过表达SIRT6的腺病毒载体Ad-SIRT6,采用荧光实时定量PCR(QPCR)检测经不同转染强度(0、25、50、100、200pfu/细胞)Ad-SIRT6转染24 h后的SIRT6 mRNA水平;根据实验设计分为对照组、空载体(Ad-null)组及过表达(Ad-SIRT6)组,Ad-null组和Ad-SIRT6组的病毒浓度均为200 pfu/细胞;采用克隆形成实验检测3组经0、2、4、6、8和10 Gy X线照射后的存活分数(SF),根据多靶单击模型绘制细胞存活曲线并计算增敏比(SER);流式细胞术检测3组经4 Gy X线照射48 h的细胞周期和凋亡情况;采用QPCR检测经4 Gy X线照射48 h各组丙酮酸激2(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和己糖激酶(HK)的表达水平;葡萄糖试剂盒检测转染12、24、36、48 h后的培养基葡萄糖消耗水平。结果 QPCR检测显示,在25~200 pfu/细胞的范围内,随转染强度的增加,A549细胞的SIRT6 mRNA水平升高(P<0.001),0、25、50、100、200 pfu/细胞对应的SIRT6mRNA水平依次为1.012±0.016、1.356±0.185、2.243±0.695、4.887±1.169和7.241±1.425,50、100、200 pfu/细胞对应的SIRT6 mRNA水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。后续实验选择过表达效果最强的200 pfu/细胞转染量。克隆形成实验显示,Ad-null组和对照组经0、2、4、6、8、10 Gy X线照射后SF的差异无统计学意义(P>0.05);而Ad-SIRT6组经4~10 Gy X线照射后的SF均低于Ad-null组和对照组(P<0.05)。多靶单击模型拟合细胞存活曲线提示SER为1.76。与对照组和Ad-null组比较,Ad-SIRT6组的G0/G1期细胞比例和凋亡率升高,S期细胞比例及PKM2、LDHA和HK mRNA水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);Ad-SIRT6组转染12、24、36、48 h的葡萄糖消耗量降低,低于对照组和Ad-null组(P<0.05)。结论SIRT6过表达可抑制A549细胞糖酵解过程中关键酶生成来抑制糖酵解过程,同时具有放射增敏作用,并可导致G0/G1期阻滞和细胞凋亡。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 沉默信息调节蛋白6(SIRT6) 放射敏感性 糖酵解

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黄芩素通过miR-141-3p/sirt7介导的线粒体自噬发挥帕金森病神经保护作用的机制研究

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作者 李耀杨 金旭东 高玉峰 《脑与神经疾病杂志》 CAS 2024年第5期290-296,共7页

目的探讨黄芩素(Baicalein)对帕金森病(PD)神经保护的可能机制。方法在本研究中,采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导小鼠的PD模型,研究黄岑素的保护作用机制。首先,对黄芩素干预后的PD模型小鼠进行神经学评分,高效液相色谱电化学法检测纹状... 目的探讨黄芩素(Baicalein)对帕金森病(PD)神经保护的可能机制。方法在本研究中,采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导小鼠的PD模型,研究黄岑素的保护作用机制。首先,对黄芩素干预后的PD模型小鼠进行神经学评分,高效液相色谱电化学法检测纹状体多巴胺含量,TUNEL和Fluoro-Jade B染色检测凋亡细胞及神经元。采用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制PD模型小鼠线粒体自噬,通过Jc-1染色检测黄芩素干预后的PD模型小鼠的线粒体膜电位,通过Western blot检测自噬相关蛋白LC3、P62。在PD模型体内转染agomiR-141-3p,通过qRT-PCR检测转染效率,通过Jc-1和Wb检测线粒体膜电位和自噬相关蛋白的变化情况。通过Starbase网站(https://starbase.sysu.edu.cn/)、双荧光素酶切报告实验在293T细胞中分析miR-141-3p和SIRT7的靶向关系,qRT-PCR检测SIRT7在PD模型体内的表达水平。结果PD严重影响了小鼠的神经功能,下调了线粒体膜电位水平及线粒体自噬相关蛋白LC3的表达水平、上调了P62的表达水平。而黄芩素提高了PD模型小鼠的神经学评分,一定程度上还原了多巴胺与神经元的数目,恢复了线粒体膜电位水平及LC3和P62的表达水平;黄芩素抑制了PD小鼠miR-141-3p的表达,上调miR-141-3p可以逆转黄芩素促线粒体膜电位上升、LC3 z-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上升及P62表达下降;而miR-141-3p可以靶向负调控SIRT7,通过下调SIRT7同样可以逆转黄芩素促线粒体膜电位上升、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调及P62表达下调;黄芩素可以使SIRT7表达上调,而过表达miR-141-3p可以抑制SIRT7的表达。结论黄芩素通过下调miR-141-3p靶向负调控SIRT7介导线粒体自噬,从而对PD神经发生保护。 展开更多

关键词 帕金森病 黄芩素 微小核糖核酸-141-3p 沉默调节蛋白7 线粒体自噬 6-羟基多巴胺 靶向调控

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柴胡皂苷b2通过调控沉默信息调节因子6介导的糖代谢通路减轻二乙基亚硝胺诱导的小鼠原发性肝癌 被引量：3

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作者 有曼 张虹 +3 位作者 何广宏 孟璐 李瑞芳 王红伟 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2022年第10期739-745,共7页

目的探讨柴胡皂苷b2(SSb2)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的原发性肝癌小鼠的肝癌抑制作用及对沉默信息调节因子6(SIRT6)介导的糖代谢通路的影响。方法BALB/c小鼠随机分为正常对照组、肝癌模型组(DEN 50 mg·kg^(-1))、模型+SSb21.5,3.0和... 目的探讨柴胡皂苷b2(SSb2)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的原发性肝癌小鼠的肝癌抑制作用及对沉默信息调节因子6(SIRT6)介导的糖代谢通路的影响。方法BALB/c小鼠随机分为正常对照组、肝癌模型组(DEN 50 mg·kg^(-1))、模型+SSb21.5,3.0和6.0 mg·kg^(-1)组及模型+多柔比星(DOX)1 mg·kg^(-1)组。除正常对照组外,其余组小鼠ip给予DEN 50 mg·kg^(-1),每周2次;第5周开始DEN给药减为每周1次,同时按分组给予SSb2和DOX,正常对照组在建模期间给予等体积生理盐水,给药持续19周。第19周末,收集小鼠血清和肝。计算肝指数,采用HE染色观察肝组织病理变化,试剂盒检测血清中谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、乳酸脱氢酶(LDH)和甲胎蛋白(AFP)水平;Western印迹法检测肝组织中SIRT6、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、丙酮酸脱氢酶激酶同工酶1(PDK1)和乳酸脱氢酶A(LDHA)蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠肝指数明显升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2各剂量组和模型+DOX组小鼠肝指数显著降低(P<0.01)。HE染色结果显示,模型组肝细胞异形性明显,癌巢组织多发,模型+SSb26.0 mg·kg^(-1)组和模型+DOX组细胞坏死增多,异形核及癌巢减少。血清指标结果显示,与正常对照组相比,模型组血清中GOT,GPT,LDH和AFP水平均显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb23.0和6.0 mg·kg^(-1)组及模型+DOX组小鼠血清中GOT,GPT,LDH和AFP水平均显著降低(P<0.01),模型+SSb21.5 mg·kg^(-1)组GOT,LDH和AFP水平显著降低(P<0.01)。Western印迹结果显示,与正常对照组相比,模型组肝组织中SIRT6蛋白的表达显著降低(P<0.01),HIF-1α,GLUT1,PDK1和LDHA蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2各剂量组和模型+DOX组肝组织SIRT6蛋白的表达显著升高(P<0.01),而模型+SSb23.0和6.0 mg·kg^(-1)组及模型+DOX组肝组织HIF-1α,GLUT1,PDK1和LDHA蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),模型+SSb21.5 mg·kg^(-1)组HIF-1α,GLUT1和LDHA蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论SSb2对DEN诱导的原发性肝癌小鼠的肝癌发展有抑制作用,其作用与其调控SIRT6介导的糖代谢通路有关。 展开更多

关键词 柴胡皂苷b2 原发性肝癌 沉默信息调节因子6 糖代谢

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SIRT6对小鼠米色脂肪细胞适应性产热功能的影响 被引量：2

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作者 韩在祺 崔佰吉 +1 位作者 冯波 姚璐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1827-1833,共7页

目的:探索沉默信息调节因子6(SIRT6)对小鼠米色脂肪细胞适应性产热功能的影响及其机制。方法:利用Seahorse能量代谢分析仪和real-time PCR检测SIRT6对小鼠原代米色脂肪细胞线粒体呼吸的调控作用及产热基因表达的情况;在HEK293A细胞和小... 目的:探索沉默信息调节因子6(SIRT6)对小鼠米色脂肪细胞适应性产热功能的影响及其机制。方法:利用Seahorse能量代谢分析仪和real-time PCR检测SIRT6对小鼠原代米色脂肪细胞线粒体呼吸的调控作用及产热基因表达的情况;在HEK293A细胞和小鼠原代米色脂肪细胞中利用免疫共沉淀(Co-IP)实验检测SIRT6和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的相互作用;利用免疫沉淀(IP)实验检测SIRT6对PGC-1α乙酰化水平的影响,并通过双萤光素酶报告基因实验检测SIRT6对PGC-1α转录辅激活活性的调控作用。结果:过表达SIRT6可增加小鼠原代米色脂肪细胞的氧气消耗速率,上调产热基因的表达,Co-IP实验说明SIRT6与PGC-1α存在相互作用,IP实验表明SIRT6会去乙酰化PGC-1α,双萤光素酶报告基因实验证实SIRT6会协同增强PGC-1α的转录辅激活活性。结论:SIRT6通过去乙酰化PGC-1α增强小鼠原代米色脂肪细胞的适应性产热,从而促进能量消耗。 展开更多

关键词 沉默信息调节因子6 米色脂肪细胞 能量代谢 适应性产热 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α

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沉默信号调节蛋白6在溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中的表达及意义 被引量：1

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作者 于佳卉 毛光兰 +1 位作者 王庆志 熊熙文 《新乡医学院学报》 CAS 2021年第9期806-811,共6页

探讨沉默信号调节蛋白(SIRT)6在溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中的表达及意义。方法将22只14日龄清洁级无病原体C57BL6/J野生型(WT)小鼠分为WT对照组(n=6)和WT-葡聚糖硫酸钠(WT-DSS)组(n=16),将13只肠道上皮细胞敲除SIRT6基因(SIRT6^(IK... 探讨沉默信号调节蛋白(SIRT)6在溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中的表达及意义。方法将22只14日龄清洁级无病原体C57BL6/J野生型(WT)小鼠分为WT对照组(n=6)和WT-葡聚糖硫酸钠(WT-DSS)组(n=16),将13只肠道上皮细胞敲除SIRT6基因(SIRT6^(IKO))小鼠分为SIRT6^(IKO)对照组(n=3)和SIRT6^(IKO)-DSS组(n=10)。WT对照组和SIRT6^(IKO)对照组小鼠给予正常蒸馏水喂养,WT-DSS组和SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠给予25 g·L^(-1) DSS间断性喂养(每日5 mL,连续7 d,然后更换正常饮用水喂养14 d为1个循环,共3个循环)建立UC模型。每天称小鼠体质量,观察小鼠大便性状、肉眼血便,计算小鼠疾病活动度指数(DAI)评分。于造模第3个循环末,将各组小鼠采用颈椎脱臼法处死,取新鲜结肠组织,应用苏木精-伊红(HE)染色观察WT-DSS组和SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠黏膜损伤的病理学变化并进行评分,Western blot法检测WT对照组,SIRT6^(IKO)对照组和WT-DSS组小鼠结肠组织中SIRT6蛋白表达来判断基因敲除效率,免疫组织化学法检测WT-DSS组和SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠组织中巨噬细胞特异性标志物F4/80的表达,实时荧光定量聚合酶链反应法检测WT-DSS组和SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠组织中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达水平。结果SIRT6^(IKO)对照组小鼠结肠组织中SIRT6蛋白相对表达量显著高于WT对照组(P<0.05)。WT对照组小鼠结肠组织中SIRT6蛋白相对表达量显著高于WT-DSS组(P<0.05)。造模第3个循环末,WT-DSS组和SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠体质量均显著低于第1、2个循环末(P<0.05);2组小鼠造模第1循环末与第2个循环末体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);造模第1、2个循环末,SIRT6^(IKO)-DSS组与WT-DSS组小鼠体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);造模第3个循环末,SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠体质量显著低于WT-DSS组(P<0.05)。造模第3个循环末,WT-DSS组和SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠DAI评分均显著高于第1、2个循环末(P<0.05);WT-DSS组小鼠造模第2个循环末与第1个循环末DAI评分比较差异无统计学意义(P>0.05);造模第2个循环末,SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠DAI评分显著高于第1个循环末(P<0.05);造模第2、3个循环末,SIRT6IKO-DSS组小鼠DAI评分显著高于WT-DSS组(P<0.05)。SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠组织组织学损伤指数显著低于WT-DSS组(P<0.05)。SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠组织F4/80表达评分显著高于WT-DSS组(P<0.05)。SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠组织中IL-6、TNF-αmRNA相对表达量显著高于WT-DSS组(P<0.05)。结论UC小鼠结肠组织中SIRT6呈低表达,结肠组织中SIRT6缺失会加重结肠组织的炎症反应和损伤,增加UC易感性。 展开更多

关键词 沉默信号调节蛋白6 溃疡性结肠炎 葡聚糖硫酸钠 黏膜损伤

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广西巴马地区长寿人群沉默信号调节蛋白6基因mRNA的表达

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作者 蒋梅玉 黄倩倩 +6 位作者 施礼威 夏天龙 梁雪 何敏 张志勇 覃健 韦霄 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第4期548-551,共4页

目的：分析广西巴马有长寿家族史人群外周血沉默信号调节蛋白6（SIRT6）基因的mRNA表达水平,探讨其与SIRT6基因多态性及其蛋白的关系。方法：选取广西巴马地区有长寿家族史者（长寿家族史组）137例（年龄30~106岁,男70例,女67例,汉族占6... 目的：分析广西巴马有长寿家族史人群外周血沉默信号调节蛋白6（SIRT6）基因的mRNA表达水平,探讨其与SIRT6基因多态性及其蛋白的关系。方法：选取广西巴马地区有长寿家族史者（长寿家族史组）137例（年龄30~106岁,男70例,女67例,汉族占6.57%,壮族和瑶族占93.43%）,无长寿家族史者（无长寿家族史组）91例（年龄22~89岁,男51例,女40例,均为壮族和瑶族）。采用实时荧光定量RT-PCR方法检测两组人群外周血SIRT6基因mRNA的表达水平。结果：长寿家族史组总体和女性人群外周血SIRT6 mRNA表达水平均高于无长寿家族史组（P〈0.05）。长寿家族史组SIRT6基因rs350846位点GG、CG基因型及G等位基因携带者（GG、CG）的SIRT6 mRNA水平均高于无长寿家族史组（P〈0.05）。长寿家族史组SIRT6 mRNA表达水平与血清中SIRT6蛋白无相关关系（P〉0.05）。结论：SIRT6基因mRNA表达水平与广西巴马人群家庭聚集性长寿相关,且G等位基因携带者的SIRT6 mRNA高表达更有利于长寿。 展开更多

关键词 巴马 长寿 沉默信号调节蛋白6 M RNA

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过表达和敲除沉默信息调节蛋白6质粒的构建及稳定肺癌A549细胞株的筛选

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作者 吴爱鲁 梁世雄 +5 位作者 宋晓 付佳美 周子洋 宋晓婷 赵志鹏 张春燕 《广西医学》 CAS 2018年第8期934-938,943,共6页

目的构建过表达和敲除沉默信息调节蛋白6(SIRT6)基因质粒,并筛选过表达和敲除稳定肺癌A549细胞株。方法采用PCR技术扩增SIRT6基因序列,通过中间质粒p SK连接在慢病毒质粒CD513B上,鉴定正确后进行慢病毒包装,收集含慢病毒颗粒的上清感染A... 目的构建过表达和敲除沉默信息调节蛋白6(SIRT6)基因质粒,并筛选过表达和敲除稳定肺癌A549细胞株。方法采用PCR技术扩增SIRT6基因序列,通过中间质粒p SK连接在慢病毒质粒CD513B上,鉴定正确后进行慢病毒包装,收集含慢病毒颗粒的上清感染A549细胞,加入嘌呤霉素筛选出过表达SIRT6基因的稳定细胞株,蛋白质印迹法检测细胞SIRT6蛋白表达水平。利用规律成簇间隔短回重复/Cas9基因编辑技术敲除SIRT6基因,确定敲除靶点位置为SIRT6基因的第一外显子和第二外显子,分别构建第一个显子,第二外显子的SIRT6-小向导RNA(sgRNA),将SIRT6-sgRNA连接到有Cas9的质粒CD513B上后转染A549细胞,加入嘌呤霉素筛选出转染成功的细胞,通过无限稀释法筛选出SIRT6敲除基因的A549细胞系,蛋白印迹法检测细胞SIRT6蛋白表达情况。结果 A549细胞的感染荧光效率接近100%,蛋白质印迹法检测过表达SIRT6基因A549细胞的SIRT6蛋白呈高表达。DNA测序检测敲除SIRT6基因A549细胞系有移码突变,蛋白质印迹法检测无SIRT6蛋白表达。结论成功构建过表达和敲除SIRT6基因质粒,并筛选出过表达和敲除SIRT6基因的稳定肺癌A549细胞株。 展开更多

关键词 沉默信息调节蛋白6 基因过表达 基因敲除 肺癌A549细胞

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高糖对人晶状体上皮细胞沉默信号调节蛋白6(SIRT6)表达的影响 被引量：2

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作者 蔡莲君 李欢 +5 位作者 徐丽珲 郭玉 芦晓红 罗明秀 张茜 姚青 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第10期920-924,共5页

目的观察高浓度葡萄糖对人晶状体上皮细胞(SRA01/04)活性及沉默信号调节蛋白6(SIRT6)表达的影响。方法将SRA01/04细胞在不同葡萄糖浓度(5.5 mmol·L^-1、15.5 mmol·L^-1、25.5 mmol·L^-1、35.5 mmol·L^-1、45.5 mmol... 目的观察高浓度葡萄糖对人晶状体上皮细胞(SRA01/04)活性及沉默信号调节蛋白6(SIRT6)表达的影响。方法将SRA01/04细胞在不同葡萄糖浓度(5.5 mmol·L^-1、15.5 mmol·L^-1、25.5 mmol·L^-1、35.5 mmol·L^-1、45.5 mmol·L^-1、55.5 mmol·L^-1、75.5 mmol·L^-1)培养基中培养48 h后,用光镜观察SRA01/04细胞形态;CCK-8试剂盒检测各组细胞的活性;Western blot检测各组细胞SIRT6蛋白的表达水平。然后将SRA01/04细胞用55.5 mmol·L^-1葡萄糖干预,培养不同时间(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h)后,Western blot检测不同时间SRA01/04细胞SIRT6蛋白表达水平。免疫荧光技术检测对照组(5.5 mmol·L^-1葡萄糖)和高糖组(55.5 mmol·L^-1葡萄糖)细胞的SIRT6蛋白表达情况。结果随着葡萄糖浓度增加,SRA01/04细胞的数量逐渐降低。CCK-8检测结果显示,与5.5 mmol·L^-1葡萄糖组相比,随着葡萄糖浓度增加,SRA01/04细胞的活性逐渐降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,SRA01/04细胞的SIRT6蛋白表达与葡萄糖呈浓度和时间依赖性,45.5 mmol·L^-1、55.5 mmol·L^-1、75.5 mmol·L^-1葡萄糖组与5.5 mmol·L^-1葡萄糖组比较,以及24 h组、48 h组和72 h组与0 h组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。细胞免疫荧光结果显示,SRA01/04细胞中的SIRT6蛋白主要在细胞核表达,高糖组SRA01/04细胞中SIRT6蛋白表达较对照组显著降低(P<0.05),且高糖组细胞核出现明显的核固缩和核碎裂现象。结论高浓度葡萄糖可以降低SRA01/04细胞的增殖活性,降低SIRT6蛋白的表达水平。 展开更多

关键词 高浓度葡萄糖 晶状体上皮细胞 沉默信号调节蛋白6

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