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基因干扰Sirtuin3后对缺氧预处理的影响 被引量:1
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作者 李超英 胡俊 +3 位作者 赵嘉 王莹 陶玉倩 李玲 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期1-7,共7页
【目的】探讨基因干扰Sirtuin3(SIRT3)后对缺氧预处理的影响。【方法】使用空白载体pGCSIL-GFP进行预实验,筛选适合的感染复数(MOI)。正式实验使用pGCSIL-PUR-SIRT3转染PC12细胞。成功构建空白载体(empty vector)及SIRT3-/-稳定细胞株后... 【目的】探讨基因干扰Sirtuin3(SIRT3)后对缺氧预处理的影响。【方法】使用空白载体pGCSIL-GFP进行预实验,筛选适合的感染复数(MOI)。正式实验使用pGCSIL-PUR-SIRT3转染PC12细胞。成功构建空白载体(empty vector)及SIRT3-/-稳定细胞株后,将两种细胞分别分为对照组(control);缺氧预处理+缺氧组(Hyp+OGD);单纯缺氧组(OGD);MTT测定细胞活性。ATP荧光检测试剂盒测定胞内的ATP水平。Western Blot法测定各组细胞内SIRT3、过氧化物酶体增生激活受体-γ的共刺激因子-1α(PGC-1α),锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的蛋白表达水平。【结果】OGD后SIRT3-/-组(0.430±0.009)与Vector组(0.562±0.140)相比,细胞活性下降更明显(P<0.05),经预处理后SIRT3-/-组细胞活性增加,且与Vector组间差异无统计学意义(P=0.311>0.05)。OGD后SIRT3-/-组(0.334±0.006)与Vector组(0.453±0.015)相比,ATP下降更明显(P<0.05)。经预处理后SIRT3-/-组ATP水平增加,且与Vector组间差异无统计学意义(P=0.866>0.05)。SIRT3-/-3组细胞间PGC-1α及MnSOD蛋白的表达与Vector组对应的3组比较明显下降(P<0.05),Hyp+OGD及OGD相对于各自control组均上调(P<0.05),且预处理组的上调更明显(与OGD组比较,P<0.05)【结论】干扰SIRT3基因后PGC-1α及MnSOD的表达下降,SIRT3为预处理或缺氧处理上调PGC-1α及MnSOD的其中一条途径,干扰SIRT3后其他的途径仍然在预处理中发挥重要的细胞保护作用。 展开更多
关键词 缺氧预处理 sirtuin3 过氧化物酶体增生激活受体-γ的共刺激因子-1α 锰超氧化物歧化酶 SIRNA干扰
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Sirtuin3通过线粒体途径保护软骨细胞的研究进展
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作者 张宇标 金文意 +2 位作者 蔡文翔 钟瑜健 彭昊 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期189-191,共3页
骨关节炎是最常见的退行性关节疾病。软骨细胞的线粒体功能障碍已被证明与骨关节炎有关。在sirtuin家族成员中,Sirtuin 3(Sirt3)主要位于线粒体中,主要发挥其脱乙酰活性来调节线粒体功能。线粒体相关功能的稳定可以维持细胞氧化还原稳态... 骨关节炎是最常见的退行性关节疾病。软骨细胞的线粒体功能障碍已被证明与骨关节炎有关。在sirtuin家族成员中,Sirtuin 3(Sirt3)主要位于线粒体中,主要发挥其脱乙酰活性来调节线粒体功能。线粒体相关功能的稳定可以维持细胞氧化还原稳态,以防止细胞代谢中过多的氧化应激。本综述讨论Sirt3介导的线粒体内稳态对骨关节炎产生的影响和对软骨细胞潜在的保护机制。 展开更多
关键词 骨关节炎 sirtuin3 线粒体 软骨细胞
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Sirtuin 3在中枢神经系统退行性疾病中的研究进展
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作者 张昊阜子 岳康异 +2 位作者 邹鹏 罗鹏 蒋晓帆 《空军军医大学学报》 CAS 2024年第4期455-460,共6页
Sirtuin 3(Sirt3)是一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖的蛋白脱乙酰基酶,主要参与线粒体代谢过程,包括能量合成、三羧酸循环和氧化应激。更多的科学研究证实,Sirt3具有抗氧化应激、抗细胞凋亡以及保持代谢稳态的作用,在能量代谢、肿瘤、衰... Sirtuin 3(Sirt3)是一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖的蛋白脱乙酰基酶,主要参与线粒体代谢过程,包括能量合成、三羧酸循环和氧化应激。更多的科学研究证实,Sirt3具有抗氧化应激、抗细胞凋亡以及保持代谢稳态的作用,在能量代谢、肿瘤、衰老等过程中起着重要作用。最近的研究发现,在神经退行性疾病中,Sirt3激活可以减缓或抑制线粒体功能障碍,从而显示出显著的神经保护作用。本文综述了Sirt3在神经退行性疾病中的保护作用及其可能机制。 展开更多
关键词 sirtuin3 阿尔茨海默症 帕金森病 亨廷顿病 肌萎缩侧索硬化症 多发性硬化症 中枢神经系统
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Sirtuin3在神经相关疾病发生中的作用研究现状 被引量:2
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作者 蒋德旗 王勇 +1 位作者 李明星 陈晓白 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期493-496,共4页
神经退行性疾病、脑损伤与线粒体功能障碍、氧化应激关系密切。Sirtuin3(SIRT3)主要定位于线粒体,具有去乙酰化酶活性。SIRT3在神经退行性疾病、脑损伤中的神经保护作用机制主要与其改善线粒体功能、调节氧化应激与能量代谢、活性氧(ROS... 神经退行性疾病、脑损伤与线粒体功能障碍、氧化应激关系密切。Sirtuin3(SIRT3)主要定位于线粒体,具有去乙酰化酶活性。SIRT3在神经退行性疾病、脑损伤中的神经保护作用机制主要与其改善线粒体功能、调节氧化应激与能量代谢、活性氧(ROS)产生减少、三磷酸腺苷(ATP)生成增加、抑制凋亡及炎性因子表达等相关,阐明SIRT3在这些神经疾病中的分子保护机制,可为SIRT3作为治疗靶点提供足够的证据。本文对近年来报道的SIRT3在神经退行性疾病阿尔茨海默病(AD)、亨廷顿病(HD)、帕金森病(PD)及脑损伤等神经相关疾病中作用进行综述。 展开更多
关键词 神经退行性疾病 sirtuin3 氧化应激 线粒体功能障碍 脑损伤 去乙酰化
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锌指E盒结合同源盒1通过抑制sirtuin3影响结肠癌细胞能量代谢和转移复发的机制 被引量:1
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作者 严冰冰 吴华星 +1 位作者 韩嘉晟 袁胜春 《中国药物经济学》 2022年第11期41-47,共7页
目的探讨锌指E盒结合同源盒1通过抑制sirtuin3影响结肠癌细胞能量代谢和转移复发的机制。方法使用慢病毒介导的方法沉默锌指E盒结合同源盒1(ZEB1),并使用海马细胞通量分析仪测量ZEB1和甲基CpG结合域蛋白1(MBD1)对有氧糖酵解的影响,反应... 目的探讨锌指E盒结合同源盒1通过抑制sirtuin3影响结肠癌细胞能量代谢和转移复发的机制。方法使用慢病毒介导的方法沉默锌指E盒结合同源盒1(ZEB1),并使用海马细胞通量分析仪测量ZEB1和甲基CpG结合域蛋白1(MBD1)对有氧糖酵解的影响,反应性氧种类和线粒体膜电位。ZEB1和MBD1之间的相互作用通过免疫共沉淀和免疫荧光测定法进行评估。ZEB1和MBD1相互作用对sirtuin 3(SIRT3)表达的影响通过定量聚合酶链反应、Western印迹、双荧光素酶和染色质免疫沉淀法验证。结果ZEB1是胰腺癌中有氧糖酵解的正向调节剂。ZEB1通过与MBD1的相互作用使SIRT3转录沉默。结论SW620癌细胞中的ZEB1通过与MBD1相互作用沉默SIRT3表达,从而导致线粒体能量代谢功能障碍,最终影响细胞转移复发,可能是细胞对治疗更加敏感的治疗策略。 展开更多
关键词 结肠癌 能量代谢 转移复发 锌指E盒结合同源盒1 sirtuin3
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环维黄杨星D对醛固酮诱导型心肌肥厚和凋亡的保护作用及机制
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作者 蒋丹 刘斌 +3 位作者 付凌云 徐旖旎 陶玲 沈祥春 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第2期169-178,共10页
目的 探讨环维黄杨星D (CVB-D)对醛固酮(ALD)诱导的心肌肥厚和凋亡的保护作用及机制。方法 在C57BL/6小鼠和原代新生大鼠心肌细胞(PNRCMs)中用ALD构建心肌肥厚模型,分为对照组(Control组)、模型组(ALD组)、CVB-D低剂量组(CVB-D.L组)、CV... 目的 探讨环维黄杨星D (CVB-D)对醛固酮(ALD)诱导的心肌肥厚和凋亡的保护作用及机制。方法 在C57BL/6小鼠和原代新生大鼠心肌细胞(PNRCMs)中用ALD构建心肌肥厚模型,分为对照组(Control组)、模型组(ALD组)、CVB-D低剂量组(CVB-D.L组)、CVB-D高剂量组(CVB-D.H组)及阳性药螺内酯组(Spir.组);通过超声心动图检测心功能指标左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS),采用HE、Masson和小麦胚芽凝集素荧光(WGA)染色观察小鼠心脏病理变化,MTT检测PNRCMs的细胞活力,吉姆萨染色和乳酸脱氢酶(LDH)检测PNRCMs损伤,cTnT染色观察PNRCMs的表面积,Western blot检测肥厚相关蛋白ANP和BNP、凋亡相关蛋白Bax、Bcl2和Caspase3、Sirt3及PPARγ蛋白的表达水平;使用Sirt3的过表达载体(Ad-Sirt3)进一步分析肥厚ANP、BNP与凋亡相关蛋白Bax、Bcl2及Caspase3的表达。结果 与Control组相比,ALD组小鼠心功能受损,LVEF和LVFS均下降,心脏组织纤维排列紊乱、胶原沉积,心肌细胞活力降低,表面积增大,ANP、BNP、Bax、Caspase3蛋白的表达增加(P<0.05),Sirt3、PPARγ和Bcl2蛋白的表达降低(P<0.05);与ALD组相比,CVB-D显著增强心功能,改善心脏病理变化,提高细胞活力(P<0.05),降低心肌细胞表面积,下调ANP、BNP、Bax、Caspase3蛋白的表达(P<0.05),上调Sirt3、PPARγ和Bcl2蛋白的表达(P<0.05);进一步使用Ad-Sirt3的结果表明Ad-Sirt3能促进CVB-D逆转肥厚和凋亡相关蛋白的表达(P<0.05)。结论 CVB-D减轻ALD诱导的心肌肥厚,抑制心肌细胞凋亡,其机制可能与调节Sirt3/PPARγ信号通路相关。 展开更多
关键词 环维黄杨星D 醛固酮 心肌肥厚 细胞凋亡 沉默信息调节因子3 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ
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低氧在Erastin诱导的胰腺导管腺癌细胞铁死亡中的作用及其机制
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作者 高钦玥 宋廉 +5 位作者 吴琪炜 魏士杰 刘赛 龚爱华 朱海涛 王冬青 《中国医药导报》 CAS 2021年第18期22-25,39,共5页
目的研究低氧在Erastin诱导的胰腺导管腺癌(PDAC)细胞铁死亡中的作用及机制。方法PDAC细胞分为四组,常氧DMSO组、常氧Erastin组(5.0μmol/L Erastin溶液)、低氧DMSO组、低氧Erastin组(5.0μmol/L Erastin溶液)。孵育72 h用CCK-8法检测... 目的研究低氧在Erastin诱导的胰腺导管腺癌(PDAC)细胞铁死亡中的作用及机制。方法PDAC细胞分为四组,常氧DMSO组、常氧Erastin组(5.0μmol/L Erastin溶液)、低氧DMSO组、低氧Erastin组(5.0μmol/L Erastin溶液)。孵育72 h用CCK-8法检测细胞活性;全波长酶标仪检测还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量;RT-qPCR检测去乙酰酶Sirtuin3(SIRT3)的mRNA的表达水平;动物皮下成瘤实验检测体内低氧对铁死亡影响。结果低氧Erastin组PANC1细胞活性,还原型GSH相对含量,SIRT3的mRNA相对表达水平均高于常氧Erastin组,差异有统计学意义(P<0.05)。低氧Erastin组MDA相对含量低于常氧Erastin组(P<0.05)。常氧Erastin组的肿瘤体积小于常氧DMSO组,差异有统计学意义(P<0.05)。低氧Erastin组肿瘤体积与低氧DMSO组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论低氧抑制Erastin诱导的PDAC细胞铁死亡,SIRT3表达水平增高是其机制之一。 展开更多
关键词 胰腺导管腺癌 低氧 Erastin 铁死亡 sirtuin3
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大蒜素通过调控SIRT3/PPARγ信号通路促进心衰大鼠血管再生和心功能改善 被引量:4
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作者 赵静 赵颖 李晗 《中国循证心血管医学杂志》 2021年第8期1011-1014,共4页
目的探究大蒜素通过调控Sirtuins3(SIRT3)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)信号通路促进心力衰竭(HF)大鼠血管再生和心功能改善的机制。方法HF大鼠模型通过腹主动脉结扎得到。将HF模型大鼠随机分为HF组、HF+低剂量大蒜素组和HF+... 目的探究大蒜素通过调控Sirtuins3(SIRT3)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)信号通路促进心力衰竭(HF)大鼠血管再生和心功能改善的机制。方法HF大鼠模型通过腹主动脉结扎得到。将HF模型大鼠随机分为HF组、HF+低剂量大蒜素组和HF+高剂量大蒜素组(n=15)。同期健康大鼠15只作为对照组。大蒜素的灌胃剂量分别为15 mg/kg·d和30 mg/kg·d。分析大蒜素对HF大鼠心肌损伤、纤维化、凋亡和血管生成的影响。比较各组SIRT3和PPARγmRNA和蛋白的表达量。结果四组大鼠的上述指标比较差异显著(P<0.05)。HF组的射血分数、血管数目、SIRT3和PPARγmRNA水平显著低于对照组(P<0.05);左室舒张末期内径(LVEDD)和左室收缩末期内径(LVESD)、纤维化水平、凋亡指数显著高于对照组(P<0.05)。HF+低剂量大蒜素组的射血分数、血管数目、SIRT3和PPARγmRNA水平显著高于HF组;LVEDD和LVESD、纤维化水平、凋亡指数显著低于HF组(P<0.05)。HF+高剂量大蒜素组的射血分数、血管数目、SIRT3和PPARγmRNA水平显著高于HF组和HF+低剂量大蒜素组;LVEDD和LVESD、纤维化水平、凋亡指数显著低于HF组和HF+低剂量大蒜素组(P<0.05)。结论大蒜素可能通过剂量依赖性的诱SIRT3/PPARγ通路促进血管生成,从而抑制心肌细胞凋亡和纤维化,提高心脏射血功能。 展开更多
关键词 心力衰竭 大蒜素 Sirtuins3/过氧化物酶体增殖物激活受体γ 血管生成
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E-cadherin/β-catenin影响胰腺癌PANC-1细胞糖酵解效应的实验研究 被引量:6
9
作者 秦毅 梁丁孔 +7 位作者 施思 吉顺荣 张波 许文彦 刘江 徐近 倪泉兴 虞先濬 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期81-86,共6页
背景与目的:钙黏附蛋白E(E-cadherin)低表达与癌细胞的高侵袭转移潜能密切相关,但其与癌细胞葡萄糖代谢的关系鲜见报道。该研究旨在探讨E-cadherin与胰腺癌PANC-1细胞糖酵解效应的关系。方法:通过转化生长因子β(transforming growth fa... 背景与目的:钙黏附蛋白E(E-cadherin)低表达与癌细胞的高侵袭转移潜能密切相关,但其与癌细胞葡萄糖代谢的关系鲜见报道。该研究旨在探讨E-cadherin与胰腺癌PANC-1细胞糖酵解效应的关系。方法:通过转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)引起E-cadherin低表达、敲减与E-cadherin相互作用的β-连环蛋白(β-catenin)的基因以及过表达E-cadherin等方法,检测PANC-1细胞通过糖酵解效应吸收葡萄糖和生成乳酸能力的变化以及糖酵解通路中关键基因的表达。结果:E-cadherin可以负向调控PANC-1细胞的糖酵解效应,抑制肿瘤细胞吸收葡萄糖和分泌乳酸的能力(P<0.05)。而与其相互作用的β-catenin可以正向调控PANC-1细胞的糖酵解效应,促进葡萄糖的吸收和乳酸的生成,结果差异有统计学意义(P<0.05)。同时糖酵解效应的关键调控分子去乙酰化酶3(sirtuin 3,SIRT3)也可以引起PANC-1细胞中E-cadherin表达的改变。结论:PANC-1细胞中E-cadherin低表达可以引起葡萄糖代谢模式的转化,促进PANC-1细胞的糖酵解效应,同时通过导入糖酵解效应的关键调控分子SIRT3也可以引起E-cadherin表达的改变。这些结果为研究胰腺癌侵袭转移过程中糖代谢模式的转化提供了重要线索,为通过改变糖酵解效应进而影响胰腺癌的侵袭转移潜能提供了干预模式。 展开更多
关键词 钙黏附蛋白E Β-连环蛋白 去乙酰化酶3 糖酵解
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海带多糖通过促进Sirt3/MnSOD表达来改善受照射后小鼠的下颌下腺损伤
10
作者 张思琴 敖翩 +5 位作者 陈少勇 柴溶 王绍军 韦力 徐杨 陈晨 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期264-270,共7页
为了评估海带多糖(laminaria japonica polysaccharide,LJP)对辐射诱导的唾液腺功能损伤的影响及其作用机制,对8周龄的雌性昆明小鼠给予^(60)Coγ射线(一次性单次照射,剂量15 Gy,剂量率1250 cGy/min)照射和LJP干预,于照射后28 d进行唾... 为了评估海带多糖(laminaria japonica polysaccharide,LJP)对辐射诱导的唾液腺功能损伤的影响及其作用机制,对8周龄的雌性昆明小鼠给予^(60)Coγ射线(一次性单次照射,剂量15 Gy,剂量率1250 cGy/min)照射和LJP干预,于照射后28 d进行唾液流量检测和苏木精-伊红染色,并通过免疫组化和RT-qPCR等实验方法来分析下颌下腺组织中与抗氧化应激有关的重要基因——沉默信息调节因子3(Sirtuin3,Sirt3)和锰超氧化物歧化酶(Manganese superoxide dismutase,MnSOD)的表达。实验结果显示,LJP能改善受照射后小鼠的唾液流量和颌下腺结构的损伤,并上调其组织中Sirt3及MnSOD的表达。这表明LJP可能通过激活下颌下腺组织中Sirt3/MnSOD的表达来改善辐射诱导的下颌下腺功能损伤。 展开更多
关键词 海带多糖 下颌下腺 沉默信息调节因子3 锰超氧化物歧化酶 放射性口干
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天麻素对少突胶质前体细胞糖氧剥夺损伤的保护作用
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作者 张晓丽娜 杨雪珂 +2 位作者 陈澍雨 吴春云 袁云 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2022年第3期327-333,共7页
目的:探索天麻素对少突胶质前体细胞系OLN93细胞糖氧剥夺(OGD)损伤后血管紧张素受体1(AT1)、NADPH氧化酶2(NOX2)和组织沉默调节蛋白3(Sirt3)表达的影响。方法:将OLN93细胞随机分为对照组(control)、糖氧剥夺组(OGD)和天麻素预处理组(OGD... 目的:探索天麻素对少突胶质前体细胞系OLN93细胞糖氧剥夺(OGD)损伤后血管紧张素受体1(AT1)、NADPH氧化酶2(NOX2)和组织沉默调节蛋白3(Sirt3)表达的影响。方法:将OLN93细胞随机分为对照组(control)、糖氧剥夺组(OGD)和天麻素预处理组(OGD+G),通过CCK-8观察天麻素对细胞活力的影响;免疫荧光双标染色与Western Blot检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及AT1/NOX2/Sirt3的表达变化。结果:CCK8-kit结果显示:与control相比,OGD组OLN93细胞活力明显下降(P<0.05);GAS组OLN93细胞糖氧剥夺损伤后细胞活力明显有所提高(P<0.05)。Western Blot结果显示:与control相比,OGD组OLN93细胞TNF-α、AT1、NOX2蛋白表达明显增加(P<0.05);GAS明显降低OLN93细胞OGD损伤后TNF-α、AT1、NOX2蛋白表达,进一步促进Sirt3蛋白表达(P<0.05)。免疫荧光双重染色结果显示:GAS预处理显著降低OLN93细胞OGD损伤后TNF-α、AT1、NOX2表达,进一步增强Sirt3表达(P<0.05)。结论:GAS可通过调节AT1/NOX2/Sirt3对少突胶质前体细胞系OLN93细胞糖氧剥夺损伤发挥保护作用。 展开更多
关键词 天麻素 血管紧张素受体1 组织沉默调节蛋白3 NADPH氧化酶2 少突胶质前体细胞
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胰腺癌细胞PANC-1中LSD1负向调控抑癌基因SIRT3的实验研究 被引量:5
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作者 徐近 秦毅 +5 位作者 张波 吉顺荣 许文彦 施思 刘江 虞先濬 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期87-92,共6页
背景与目的:组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)是重要的染色质修饰蛋白之一,可以通过调节染色质的结构调节基因的转录调控,进而影响肿瘤的发生、发展、侵袭、转移以及代谢异常等恶性潜能,是判断肿瘤预后的... 背景与目的:组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)是重要的染色质修饰蛋白之一,可以通过调节染色质的结构调节基因的转录调控,进而影响肿瘤的发生、发展、侵袭、转移以及代谢异常等恶性潜能,是判断肿瘤预后的生物标志物。Sirtuins家族去乙酰化酶3(sirtuin3,SIRT3)基因是位于线粒体内的抑癌基因,通过调控肿瘤代谢异常以及氧化损伤行使抑癌基因的功能。本研究通过基因转录调控的手段,研究胰腺癌细胞PANC-1中LSD1与SIRT3的关系。方法:通过RNA干扰(RAN interference,RNAi)、免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,CoIP)、染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP)及启动子活性分析等分子生物学实验手段,探讨LSD1与SIRT3在PANC-1细胞中的关系。结果:通过RNAi的手段干扰LSD1的表达,发现SIRT3基因转录水平和蛋白水平明显上升;通过蛋白相互作用的手段,发现LSD1可以与SIRT3转录调控的重要转录因子过氧化物酶增殖体激活受体辅激动子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,coactivator 1 alpha,PGC-1α)相互作用;通过ChIP方法,发现LSD1与PGC-1α共同募集到SIRT3基因的启动子区域染色质上;通过启动子活性分析,发现LSD1基因可以显著抑制PGC-1α对SIRT3基因的转录调控。结论:LSD1可以表观遗传调控抑癌基因SIRT3的转录,为深入研究LSD1与肿瘤代谢异常以及氧化应激提供了理论依据。 展开更多
关键词 胰腺癌 PANC-1 组蛋白赖氨酸去甲基化酶1 过氧化物酶增殖体激活受体辅激动子-1α sirtuins家族去乙酰化酶3 表观遗传调控
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沉默信息调节因子3对舌癌细胞凋亡的影响
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作者 袁玮 周骥驰 +4 位作者 李曼 程龙 杨金锁 殷博雅 黄欣 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2020年第2期74-79,共6页
目的:探讨沉默信息调节因子3(sirtuin3,SIRT3)对舌癌细胞凋亡的影响。方法:采用小干扰RNA(small interfere RNA,siRNA)沉默舌癌细胞中的SIRT3。MTT法检测SIRT3沉默对舌癌细胞增殖活力的影响;TUNEL染色检测SIRT3沉默对舌癌细胞凋亡的影响... 目的:探讨沉默信息调节因子3(sirtuin3,SIRT3)对舌癌细胞凋亡的影响。方法:采用小干扰RNA(small interfere RNA,siRNA)沉默舌癌细胞中的SIRT3。MTT法检测SIRT3沉默对舌癌细胞增殖活力的影响;TUNEL染色检测SIRT3沉默对舌癌细胞凋亡的影响;酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测SIRT3沉默对舌癌细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性的影响;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测SIRT3沉默对舌癌细胞Caspase-3和多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)表达的影响。结果:SIRT3沉默有效,在SIRT3沉默后观察到舌癌细胞的增殖活力降低,细胞凋亡增加,Caspase-3活性增加,Caspase-3和PARP表达增加。沉默SIRT3前后,舌癌细胞的增殖活力、TUNEL阳性细胞比例、Caspase-3的活性值以及Caspase-3和PARP表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SIRT3沉默可促进舌癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 沉默信息调节因子3 舌鳞状细胞癌 细胞凋亡
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Green Tea Polyphenols Prevent Early Vascular Aging Induced by High-Fat Diet via Promoting Autophagy in Young Adult Rats
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作者 Xiang-tian XIAO Shui-qing HE +3 位作者 Nan-nan WU Xue-chun LIN Jing ZHAO Chong TIAN 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2022年第5期981-990,共10页
Objective Epidemiology studies indicate that green tea polyphenols(GTP)perform a protective effect on cardiovascular diseases,but the underlying mechanisms are complex.The present study aimed to investigate the effect... Objective Epidemiology studies indicate that green tea polyphenols(GTP)perform a protective effect on cardiovascular diseases,but the underlying mechanisms are complex.The present study aimed to investigate the effect of GTP on high-fat diets(HFD)induced-early vascular aging.Methods Six-week young adult Wistar rats were fed with standard chow or HFD in the presence and absence of GTP(200 mg/kg body weight)for 18 weeks.In vitro experiment,human umbilical vascular endothelial cells(HUVECs)were treated with palmitic acid(PA)and GTP.Results The results showed that GTP alleviated the disorganized arterial wall and the increased intima-media thickness induced by HFD.In addition,the vascular oxidative injury was suppressed following GTP treatment.Furthermore,GTP elevated the ratio of LC3-II/LC3-I and suppressed expression of p62/SQSTM1,and restored SIRT3 expression in the aorta of HFD rats.Consistently,in cultured HUVECs,GTP inhibited cell senescence indicated by SA-β-gal and promoted endothelial autophagy compared with the PA treatment group.The activity of SIRT3 was specifically inhibited by 3-TYP,and the protective effect of GTP was consequently abolished.Conclusion The findings indicated that GTP protected against early vascular senescence in young HFD rats via ameliorating oxidative injury and promoting autophagy which was partially regulated by the SIRT3 pathway. 展开更多
关键词 high-fat diets green tea polyphenols early vascular aging AUTOPHAGY Sirtuin 3
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糖痹康颗粒调控AMPK/PGC-1α/SIRT3信号通路抑制糖尿病大鼠坐骨神经氧化应激反应
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作者 刘港 张亚奇 +6 位作者 秦灵灵 张程斐 张秋娥 白惠中 赵毅 刘铜华 穆晓红 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期75-82,共8页
目的:探讨糖痹康颗粒通过调节腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α/线粒体Sirtuins3(AMPK/PGC-1α/SIRT3)信号通路对糖尿病大鼠坐骨神经氧化应激的影响。方法:采用ZDF大鼠建立自发性肥胖型2型糖尿病模型。... 目的:探讨糖痹康颗粒通过调节腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α/线粒体Sirtuins3(AMPK/PGC-1α/SIRT3)信号通路对糖尿病大鼠坐骨神经氧化应激的影响。方法:采用ZDF大鼠建立自发性肥胖型2型糖尿病模型。成模后随机分为糖痹康颗粒高、中、低剂量组(2.5、1.25、0.625 g·kg^(-1)·d^(-1))及硫辛酸组(0.0268 g·kg^(-1)·d^(-1)),并设立正常组。成模后持续给药干预12周。分别检测干预前及干预后第4、8、12周大鼠血糖。第12周检测各组大鼠运动神经传导速度(MNCV)、感觉神经传导速度(SNCV)、神经血流速度、机械痛阈及热痛阈并取材坐骨神经进行苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态;透射电镜观察坐骨神经超微结构变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测坐骨神经中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠坐骨神经组织AMPKα、AMPKβ、PGC-1α、SIRT3 mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠各时间点空腹血糖升高(P<0.01),机械痛阈降低(P<0.05),热板潜伏时间延长(P<0.01),MNCV、SNCV、神经血流速度减慢(P<0.05),SOD表达降低(P<0.01),MDA、IL-1β、TNF-α表达升高(P<0.01),AMPKα、AMPKβ、PGC-1α、SIRT3 mRNA表达均降低(P<0.01);模型组大鼠坐骨神经纤维结构松散、排列混乱、脱髓鞘改变明显。与模型组比较,糖痹康颗粒高剂量组大鼠在干预8、12周空腹血糖降低(P<0.01),机械痛阈升高(P<0.05),热板潜伏时间缩短(P<0.01),MNCV、SNCV、神经血流速度(Flux)增快(P<0.05),SOD表达升高(P<0.01),MDA、IL-1β、TNF-α表达降低(P<0.01),AMPKα、AMPKβ、PGC-1α、SIRT3 mRNA表达升高(P<0.01);糖痹康颗粒高剂量组大鼠坐骨神经纤维结构更紧密、排列更整齐,仅有少部分脱髓鞘改变。糖痹康颗粒高、中、低剂量组有明显的量效趋势。结论:糖痹康颗粒可能部分通过调控AMPK/PGC-1α/SIRT3信号通路发挥抗氧化应激作用,改善糖尿病大鼠坐骨神经功能。 展开更多
关键词 糖痹康颗粒 糖尿病周围神经病变 氧化应激 腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK) 过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α) 线粒体Sirtuins3(SIRT3)
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Sirt3通过抑制肺上皮细胞凋亡减轻重症急性胰腺炎相关肺损伤
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作者 李文迁 张浩 +1 位作者 孙敏莉 缪长虹 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2023年第12期1258-1264,共7页
目的探讨沉默调节蛋白3(Sirtuin3, Sirt3)在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)诱发急性肺损伤(acute lung injury, ALI)中对肺上皮细胞凋亡的影响及其相关分子机制。方法野生型小鼠和基因敲除小鼠(靶向突变删除Sirt3等位... 目的探讨沉默调节蛋白3(Sirtuin3, Sirt3)在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)诱发急性肺损伤(acute lung injury, ALI)中对肺上皮细胞凋亡的影响及其相关分子机制。方法野生型小鼠和基因敲除小鼠(靶向突变删除Sirt3等位基因)各35只。各取34只腹腔注射雨蛙素50 μg/kg和内毒素10 mg/kg构建SAP-ALI模型, 记录野生型小鼠和基因敲除小鼠注射后12、24、36、48、72 h的生存率, 采用H-E染色观察野生型小鼠和基因敲除小鼠注射后12 h肺组织炎症水平, Western blot法比较野生型小鼠和基因敲除小鼠注射前及注射后8、12、24 h肺组织胱天蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase, caspase)-3、caspase-9及X-连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(X-linked inhibitor of apoptosis-associated factor, Xaf1)蛋白水平。剩余野生型小鼠和基因敲除小鼠各1只处死取肺组织, 免疫组化染色观察肺组织Xaf1表达水平。取MLE12细胞分为4组(每组1孔):空白对照1组(A组)、TNF-α 20 μg/L刺激36 h组(B组)、细胞干扰+TNF-α 20 μg/L刺激36 h组(C组)、细胞过表达+TNF-α 20 μg/L刺激36 h组(D组), 流式细胞术检测4组细胞凋亡率。另取MLE12细胞分为3组(每组1孔):空白对照2组(E组)、细胞干扰Sirt3+TNF-α 20 μg/L刺激36 h组(F组)、细胞干扰Sirt3和Xaf1+TNF-α 20 μg/L刺激36 h组(G组), 比较E组、F组和G组细胞Xaf1干扰后caspases-3、caspase-9蛋白水平及酶活性。结果基因敲除小鼠注射后12、24、36、48、72 h生存率均低于野生型小鼠(P<0.05)。与野生型小鼠比较, 注射后12 h基因敲除小鼠肺组织炎症细胞浸润和间质水肿更加明显。基因敲除小鼠注射后8、12、24 h肺组织caspase-3、caspase-9蛋白水平均高于野生型小鼠(P<0.05), Xaf1蛋白水平均高于野生型小鼠(P<0.05)。A组、B组、C组、D组细胞凋亡率依次为11%、21%、33%、7%。F组细胞caspase-3、caspase-9蛋白水平高于E组(P<0.05), caspase-3、caspase-9活性高于E组(P<0.05);G组细胞caspase-3蛋白水平低于F组(P<0.05), caspase-3、caspase-9活性低于F组(P<0.05)。结论 Sirt3可通过调控Xaf1的表达, 抑制SAP应激状态下的肺上皮细胞凋亡, 并降低SAP-ALI的死亡率。 展开更多
关键词 沉默调节蛋白3 X-连锁凋亡抑制蛋白相关因子1 重症急性胰腺炎 急性肺损伤 细胞凋亡
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Sirtuin 3下调在高铁负荷导致骨骼肌损伤中的作用
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作者 赵国阳 马安培 王思远 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期424-429,共6页
目的观察体外高铁细胞培养环境以及小鼠铁蓄积状态下骨骼肌Sirtuin 3(SIRT3)表达的变化,探讨SIRT3下调在高铁负荷导致骨骼肌损伤中的作用。方法以梯度浓度的枸橼酸铁铵(ferric ammonium citrate,FAC)干预小鼠成肌细胞C2C12,检测细胞增... 目的观察体外高铁细胞培养环境以及小鼠铁蓄积状态下骨骼肌Sirtuin 3(SIRT3)表达的变化,探讨SIRT3下调在高铁负荷导致骨骼肌损伤中的作用。方法以梯度浓度的枸橼酸铁铵(ferric ammonium citrate,FAC)干预小鼠成肌细胞C2C12,检测细胞增殖、凋亡,观察细胞形态,检测SIRT3 mRNA、蛋白以及活性水平;ICR小鼠随机分为对照组,FAC干预组以及FAC+去铁胺(deferoxamine,DFO)组。对照组予生理盐水干预;FAC组以FAC干预,再以生理盐水干预;FAC+DFO组在FAC后再以DFO干预,检测骨骼肌非血红素铁、SIRT3蛋白水平,测定肌细胞原位凋亡,观察骨骼肌形态。结果C2C12细胞分化后在FAC的干预下,细胞的增殖活性下降(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),SIRT3 mRNA、蛋白以及生物活性均下降(P<0.05),细胞形态逐渐萎缩,肌管长度、数目逐渐减少。在在体研究中,FAC组小鼠骨骼肌非血红素铁含量与对照组相比增加(P<0.05),FAC+DFO组与FAC组相比减少(P<0.05);FAC组小鼠骨骼肌SIRT3蛋白含量与对照组相比减少(P<0.05),FAC+DFO组与FAC组相比增加(P<0.05);FAC组小鼠骨骼肌细胞凋亡指数与对照组相比上升,FAC+DFO组与FAC组相比下降(P<0.05);FAC组骨骼肌组织较对照组相比,细胞排列紊乱,伴有脂肪沉积和炎细胞浸润,该病理改变在FAC+DFO组降铁干预后减轻。结论高铁负荷可导致骨骼肌损伤,其机制可能与SIRT3水平下调有关。 展开更多
关键词 铁蓄积 骨骼肌 Sirtuin 3
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吡格列酮通过调控Sirt3改善高血压引起的心肌纤维化机制 被引量:3
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作者 严芳英 单晓兰 +4 位作者 李静媛 张杰 闫雪芳 杨奕 卜培莉 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第5期13-18,共6页
目的探讨吡格列酮对高血压引起的心肌纤维化的作用及可能机制。方法提取新生SD大鼠心肌成纤维细胞,分为空白对照组、单纯刺激组(血管紧张素Ⅱ1μmol/L)、单纯药物组(吡格列酮10μmol/L)、刺激+药物组、沉默信息调节相关因子3(Sirt3)小干... 目的探讨吡格列酮对高血压引起的心肌纤维化的作用及可能机制。方法提取新生SD大鼠心肌成纤维细胞,分为空白对照组、单纯刺激组(血管紧张素Ⅱ1μmol/L)、单纯药物组(吡格列酮10μmol/L)、刺激+药物组、沉默信息调节相关因子3(Sirt3)小干扰+刺激组和Sirt3小干扰+刺激+药物组,采用Western blotting法检测平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、β-链蛋白(β-catenin)、胶原I(COL I)和Sirt3等蛋白含量;采用RT-PCR法检测a-SMA、Sirt3、β-catenin和COL I等mRNA表达量;采用细胞免疫荧光法检测COL I表达。结果与空白对照组相比,单纯刺激组a-SMA和COL I的mRNA和蛋白表达明显增加,Sirt3表达减少,β-catenin表达增加,COL I绿色荧光增强,心肌纤维化明显(P<0.05);与单纯刺激组相比,刺激+药物组a-SMA和COL I的mRNA和蛋白表达明显减少,Sirt3表达增加,β-catenin表达减少,COL I绿色荧光减弱,心肌纤维化明显改善(P<0.05);与药物+刺激组相比,Sirt3小干扰+药物+刺激组a-SMA、COL I的mRNA和蛋白表达增加,Sirt3表达减少,β-catenin表达增多,COL I绿色荧光增强(P<0.05)。单纯药物组与药物+刺激组相比,a-SMA、COL I、β-catenin和Sirt3的mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05);Sirt3小干扰+刺激组和Sirt3小干扰+药物+刺激组相比,a-SMA、COL I、β-catenin、Sirt3的mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论吡格列酮能改善高血压心肌纤维化,其作用机制可能与Sirt3激活和β-catenin抑制有关。 展开更多
关键词 吡格列酮 高血压 心肌纤维化 沉默信息调节相关因子3 Β-链蛋白
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沉默信息调节因子相关酶3在自发性高血压大鼠心肌高表达与左心室肥厚相关 被引量:3
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作者 王莉 巩会平 +3 位作者 杜贻萌 魏峰涛 阎莉 鹿庆华 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期457-463,共7页
目的观察沉默信息调节因子相关酶3(sirtuin3)在自发性高血压大鼠(SHR)心肌中的表达,并探讨sirtuin3在高血压所致左心室肥厚(LVH)中的作用。方法 24只29周龄SHR随机分为SHR30周龄组(喂养1周,n=11)和SHR38周龄组(喂养9周,n=13),另选20只2... 目的观察沉默信息调节因子相关酶3(sirtuin3)在自发性高血压大鼠(SHR)心肌中的表达,并探讨sirtuin3在高血压所致左心室肥厚(LVH)中的作用。方法 24只29周龄SHR随机分为SHR30周龄组(喂养1周,n=11)和SHR38周龄组(喂养9周,n=13),另选20只29周龄Wistar-Kyoto(WKY)大鼠随机分为WKY30周龄组(喂养1周,n=10)和WKY38周龄组(喂养9周,n=10)作为正常对照。各组测定尾动脉收缩压和左心室质量(LVM)/体质量。Masson染色法分析左心室肌间质纤维化程度,心脏超声测定心功能。采用免疫组化,Western-blot及实时荧光定量PCR来检测心肌组织中sirtuin3的蛋白及mRNA表达。结果与WKY30、38周龄组大鼠比较,SHR30、38周龄组的收缩压[30周龄(189.0±6.8)比(103.4±3.6)mmHg;38周龄(205.6±10.9)比(116.3±4.3)mmHg]、LVM/体质量[30周龄(2.94±0.11)比(2.56±0.21);38周龄(3.21±0.15)比(2.68±0.24)]、左心室收缩末期内径[30周龄(4.27±0.13)比(3.59±0.08)mm;38周龄(5.46±0.14)比(4.21±0.08)mm]、舒张末期室间隔厚度[30周龄(2.63±0.15)比(2.09±0.06)mm;38周龄(2.82±0.09)比(2.35±0.08)mm]、舒张末期左心室后壁厚度[30周龄(2.78±0.12)比(2.15±0.09)mm;38周龄(2.99±0.12)比(2.44±0.07)mm]、sirtuin3mRNA和蛋白表达升高(均P<0.05);左心室短轴缩短率、左心室舒张末期内径降低(均P<0.05),SHR大鼠表现出左心室明显肥厚,左心室收缩及舒张功能明显减低,并随着周龄的延长,心肌肥厚及心功能障碍加重(P<0.05)。结论心肌组织sirtuin3高表达与左心室肥厚密切相关。 展开更多
关键词 高血压 沉默信息调节因子相关酶3 左心室肥厚 自发性高血压大鼠
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Sirt3对人脐静脉内皮细胞衰老的影响 被引量:1
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作者 刘辉 陈桐帅 +3 位作者 李娜 王舒健 李静媛 卜培莉 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2015年第5期41-45,共5页
目的探讨沉默信息调节因子相关酶3(Sirt3)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响。方法体外培养HUVECs,合成Sirt3-siRNA序列,Western blotting法筛选出抑制效率最高的序列。将实验分为对照组、Sirt3-siRNA组,Western blotting法检测Sirt... 目的探讨沉默信息调节因子相关酶3(Sirt3)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响。方法体外培养HUVECs,合成Sirt3-siRNA序列,Western blotting法筛选出抑制效率最高的序列。将实验分为对照组、Sirt3-siRNA组,Western blotting法检测Sirt3和细胞衰老相关蛋白P16和P21的表达水平,β-半乳糖苷酶染色法检测内皮细胞衰老状态,2',7'-二氯二氢荧光素二乙酯(DCFH-DA)法测定血管内皮细胞活性氧(ROS)的释放。结果与对照组比较,Sirt3-siRNA组β-gal阳性染色率明显增多,Sirt3的蛋白表达量减少,P16和P21的蛋白表达量升高(P<0.05),ROS释放明显增多。结论 Sirt3抑制HUVECs衰老,其作用机制可能是通过调节ROS的释放而实现的。 展开更多
关键词 沉默信息调节因子相关酶3 人脐静脉内皮细胞 细胞衰老 P16蛋白 P21蛋白 活性氧
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