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周期蛋白G1反义硫代脱氧寡核苷酸对白血病细胞增殖的调控 被引量:2
1
作者 贾晋松 徐世荣 +5 位作者 贾存荣 马劼 哈森 姚银荣 王毅 石翠英 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第1期48-54,共7页
为了探讨脂质体转染细胞周期蛋白 (cyclin)G1反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对HL 6 0细胞增殖调控的作用 ,用针对cyclinG1mRNA 5′端编码区起始密码子 (ATG/AUG)的ASON ,通过脂质体导入HL 6 0细胞共培养后 ,用免疫组织化学法和RT PCR分别检测c... 为了探讨脂质体转染细胞周期蛋白 (cyclin)G1反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对HL 6 0细胞增殖调控的作用 ,用针对cyclinG1mRNA 5′端编码区起始密码子 (ATG/AUG)的ASON ,通过脂质体导入HL 6 0细胞共培养后 ,用免疫组织化学法和RT PCR分别检测cyclinG1和mRNA水平的表达 ,用电镜、细胞原位凋亡检测法 (POD)、流式细胞术(FCM)及DNA凝胶电泳等方法检测细胞凋亡。结果表明 :cyclinG1ASON组与SON及空白对照组相比 ,ASON能特异地抑制cyclinG1及mRNA水平的表达 ,当ASON的浓度达到一定程度时 ,HL 6 0细胞的增殖及集落形成率均明显受抑制 ,出现细胞凋亡 ,并且此作用随ASON浓度的升高而增强。结论 :cyclinG1的特异反义脱氧寡核苷酸能封闭其蛋白及mRNA水平的表达 ,对白血病细胞的增殖有抑制作用 ,并可促使细胞凋亡 ,且有浓度依赖性。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白G1 反义脱氧寡核苷酸 脂质体 白血病
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核转录因子-κB反义核酸对肾小球硬化细胞炎性反应的干预 被引量:7
2
作者 李敏 纪泽泉 陈永达 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第15期1190-1192,共3页
目的检测大鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB),血清IL-6、TNF-α的表达,探讨NF-κB与多柔比星肾病大鼠肾小球细胞炎性反应的关系及反义核酸的干预作用。方法SD雄性大鼠30只分为5组,A组(假手术组),B组(硬化组),C组(正义核酸组),D组(无义核... 目的检测大鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB),血清IL-6、TNF-α的表达,探讨NF-κB与多柔比星肾病大鼠肾小球细胞炎性反应的关系及反义核酸的干预作用。方法SD雄性大鼠30只分为5组,A组(假手术组),B组(硬化组),C组(正义核酸组),D组(无义核酸组),E组(反义核酸组),每组6只。采用右肾切除加尾静脉注射多柔比星法作肾小球硬化动物模型。第8周各组大鼠予不同药物干预,给药3 d及7 d,分别检测各组大鼠24 h尿蛋白,HE染色观察其肾组织形态学变化,利用图像分析系统计算肾小球硬化指数(GI),应用免疫组织化学、酶联免疫吸附法检测其肾组织NF-κB p65,血清IL-6、TNF-α的表达。采用SPSS 10.0软件进行统计学分析。结果在不同的时间点,E组尿蛋白、GI、NF-κB p65、IL-6、TNF-α的表达与B组比较均显著降低,在7 d时间点,反义核酸的干预效应较3 d时间点强。结论NF-κB与肾小球硬化、细胞炎性反应存在密切关系。NF-κB反义核酸通过肾动脉给药可直接抑制肾组织NF-κB的翻译、表达,抑制肾小球系膜细胞的炎性反应,从而延缓肾小球硬化进程。 展开更多
关键词 肾小球硬化症 病灶性 寡核苷酸类 反义 核转录因子-ΚB 细胞炎性反应
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核因子κB反义寡核苷酸对肾小球硬化Caspase-3表达的影响 被引量:4
3
作者 李敏 纪泽泉 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第17期1302-1304,共3页
目的探讨核转录因子κB(NF-κB)反义寡核苷酸(ODN)对局灶性节段性肾小球硬化大鼠肾组织半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-3)、NF-κB表达影响。方法SD雄性大鼠分成3大组:假手术组(A组)、硬化组(B组)各6只,干预组(C组)9只;C组再分成... 目的探讨核转录因子κB(NF-κB)反义寡核苷酸(ODN)对局灶性节段性肾小球硬化大鼠肾组织半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-3)、NF-κB表达影响。方法SD雄性大鼠分成3大组:假手术组(A组)、硬化组(B组)各6只,干预组(C组)9只;C组再分成3小组:正义ODN组(C1组)、无义ODN组(C2组)、反义ODN组(C3组)各3只。采用右肾切除加尾静脉注射多柔比星制成肾小球硬化模型。8周后各组分别予不同的药物干预,应用免疫组织化学检测肾组织Caspase-3、NF-κBp65表达。结果反义ODN干预d7,C3组大鼠尿蛋白、肾小球硬化指数、肾组织Caspase-3、NF-κBp65蛋白表达较B、C1、C2组明显减少,差异有统计学意义(Pa<0.05);C3组与A组比较,NF-κBp65蛋白表达无显著差异(P>0.05)。结论NF-κBODN能抑制肾小球NF-κB活性及Caspase-3表达,从而延缓肾小球硬化及细胞凋亡进程。 展开更多
关键词 肾小球硬化症 病灶性 寡核苷酸类 反义 核因子ΚB Caspase-3
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细胞周期素A的特异反义脱氧寡核苷酸对白血病细胞增殖的调控作用
4
作者 马劼 徐世荣 +4 位作者 贾存荣 贾晋松 王毅 石翠英 赖永榕 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期772-775,共4页
目的:探讨细胞周期素A(cyclinA)的特异反义脱氧寡核苷酸(ASON)对HL60细胞及原代白血病细胞增殖的调控作用。方法:采用反义技术将cyclinA特异的ASON与HL60细胞及原代白血病细胞共同培养,用流式细胞术及RT-PCR等方法检测cyclinA蛋白及mRN... 目的:探讨细胞周期素A(cyclinA)的特异反义脱氧寡核苷酸(ASON)对HL60细胞及原代白血病细胞增殖的调控作用。方法:采用反义技术将cyclinA特异的ASON与HL60细胞及原代白血病细胞共同培养,用流式细胞术及RT-PCR等方法检测cyclinA蛋白及mRNA表达水平,用苔盼蓝拒染法检测细胞生长曲线、软琼脂培养法检测CFU-HL60的集落形成情况。结果:在HL60及原代白血病细胞中,cyclinA的ASON能特异地抑制其mRNA的表达及其蛋白合成,与cyclinA的正义脱氧寡核苷酸(SON)组及对照组相比,有显著性差异(P<0.01);而且当ASON的浓度达到一定程度时,白血病细胞的增殖及其CFU-L的集落形成率均明显受抑制(P<0.01)。结论:cyclinA的ASON通过封闭cyclinA的mRNA水平,使cyclinA蛋白合成减少,能抑制白血病细胞增殖,即cyclinA是调控白血病细胞增殖的关键因子。 展开更多
关键词 细胞周期素A 反义悦氧寡核苷酸 白血病 增殖
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核因子-κB诱骗寡核苷酸抑制大鼠视网膜缺血再灌注损伤
5
作者 毛俊峰 闫元奎 +1 位作者 艾育德 刘双珍 《国际眼科杂志》 CAS 2007年第1期73-75,共3页
目的:研究核因子-κB诱骗寡核苷酸(nuclear factor-κB decoy oligodeoxynucleotide,NF-κBdecoy ODN)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用。方法:设计、合成NF-κBdecoy ODN和错配NF-κBdecoyODN的核苷酸序列。采用升高眼内压的方法... 目的:研究核因子-κB诱骗寡核苷酸(nuclear factor-κB decoy oligodeoxynucleotide,NF-κBdecoy ODN)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用。方法:设计、合成NF-κBdecoy ODN和错配NF-κBdecoyODN的核苷酸序列。采用升高眼内压的方法建立大鼠视网膜缺血再灌注模型。缺血前10min,玻璃体内注射NF-κB decoy ODN或错配NF-κB decoy ODN。再灌注24h后,观察视网膜的组织学变化,测定视网膜的髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活力。检测缺血前10min和再灌注24h的闪光视网膜电图(flash electroretinography,F-ERG),计算其b波振幅恢复率。结果:缺血的大鼠视网膜再灌注24h后,视网膜明显充血、水肿,有许多白细胞浸润,神经节细胞和内核层细胞减少,且视网膜MPO活力增加(P<0.05)、b波振幅恢复率下降(P<0.05)。玻璃体注射NF-κB decoy ODN的大鼠,视网膜的损伤性组织学改变减轻,MPO活力降低,b波振幅恢复率增加。而玻璃体注射错配NF-κB decoy ODN则无此作用。结论:玻璃体注射NF-κB decoy ODN能有效抑制大鼠视网膜缺血再灌注损伤,保护视网膜功能。 展开更多
关键词 NF-ΚB 诱骗寡核苷酸 视网膜 再灌注损伤 大鼠
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HER-2癌基因反义寡核苷酸对乳腺癌细胞化疗敏感性的影响
6
作者 谢娟 谭诗生 +1 位作者 徐洋 王化明 《贵州医药》 CAS 2008年第1期1-4,共4页
目的研究HER-2癌基因反义寡脱氧核苷酸联合叶酸对乳腺癌细胞SK-Br-3化疗敏感性的影响。方法通过叶酸受体将HER-2反义寡脱氧核苷酸导入乳腺癌细胞,给予不同剂量的阿霉素和顺铂,用四氮唑盐(MTT)方法检测细胞存活率。结果反义寡脱氧核苷酸... 目的研究HER-2癌基因反义寡脱氧核苷酸联合叶酸对乳腺癌细胞SK-Br-3化疗敏感性的影响。方法通过叶酸受体将HER-2反义寡脱氧核苷酸导入乳腺癌细胞,给予不同剂量的阿霉素和顺铂,用四氮唑盐(MTT)方法检测细胞存活率。结果反义寡脱氧核苷酸-叶酸(ASODN-FA)显著增加SK-Br-3细胞对阿霉素和顺铂的敏感性,使细胞存活率明显降低。结论HER-2反义寡脱氧核苷酸能增加乳腺癌细胞对阿霉素和顺铂的化疗敏感性。 展开更多
关键词 HER-2原癌基因 反义寡脱氧核苷酸 乳腺癌细胞 化疗敏感性
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Smad4反义寡核苷酸对高糖培养的人肾小球系膜细胞分泌纤连蛋白、层黏连蛋白的影响
7
作者 吴丹丹 王秋月 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期10-13,18,共5页
目的观察Smad4反义寡核苷酸(antioligodeoxynucleotide,antiODN)对体外高糖培养的人肾小球系膜细胞(human glomerular mesangial cells,HGMC)分泌纤连蛋白(fibronectin,FN),层黏连蛋白(laminin,LN)的影响。方法用脂质体法将正义、反义... 目的观察Smad4反义寡核苷酸(antioligodeoxynucleotide,antiODN)对体外高糖培养的人肾小球系膜细胞(human glomerular mesangial cells,HGMC)分泌纤连蛋白(fibronectin,FN),层黏连蛋白(laminin,LN)的影响。方法用脂质体法将正义、反义、错义Smad4寡核苷酸瞬时转染体外培养的HGMC,并进行高糖培养,同时设立正常糖组、高糖组、甘露醇组、脂质体组为对照组,用ELISA法检测培养上清液中FN、LN的含量,进行统计学分析。结果转染Smad4反义寡核苷酸的HGMC分泌的FN、LN量与正常对照组相比无统计学意义(P>0.05),而与高糖组、正义组、错义组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论随着高糖作用的时间延长,体外培养的HGMC分泌的FN、LN量逐渐增加,而转染Smad4 antiODN可以抑制高糖的刺激,减少FN、LN的表达,从而减少系膜细胞细胞外基质的堆积,为延缓肾脏纤维化提供了新的途径。 展开更多
关键词 SMAD4 寡核苷酸 纤连蛋白 层黏连蛋白
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Hepatic artery infusion of antisense oligodeoxynucleotide and lipiodol mixture transfect liver cancer in rats 被引量:5
8
作者 Han-PingWu Gan-ShengFeng YuanTian 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第16期2408-2412,共5页
AIM: To study the distribution and stability of antisense oligodeoxynucleotide (ASODN) in Walker-256 cells and their distribution in liver, lung and kidney tissues after being infused alone or mixed with lipiodol via ... AIM: To study the distribution and stability of antisense oligodeoxynucleotide (ASODN) in Walker-256 cells and their distribution in liver, lung and kidney tissues after being infused alone or mixed with lipiodol via hepatic artery in a rat liver tumor model.METHODS: 5'-Isothiocyananate (FITC)-labeled vascular endothelial growth factor (VEGF) ASODN was added into Walker-256 cell culture media. Its distribution in cells was observed by fluorescence microscope at different time points. Walker-256 carcinosarcoma was transplanted into Wistar rat liver to establish a liver cancer model. 5'-FITC-labeled VEGF ASODN mixed with (mixed group, n = 6) or without (TAI group, n = 6)ultra-fluid lipiodol was administrated via hepatic artery.Frozen samples of liver, lung and kidney tissue were taken from rats after 1, 3 and 6 d, respectively. The distribution of ASODN was observed under fluorescent microscope.RESULTS: ASODN could enter cytoplasm within 2 h and nuclei within 6 h. Accumulation of ASODN reached the peak point in nuclei at 12 h, and then disappeared gradually. No fluorescence could be seen in cells at 48 h. In vivo experiment, on d 1 and 3 the fluorescence staining in liver was stronger in mixed group than in TAI group and more fluorescence could be detected in lung and kidney in TAI group than in mixed group. On d 6, no fluorescence could be detected in TAI group, but faint fluorescence could be seen in mixed group. ASODN could be seen in cancer cells and normal hepatic cells. In mixed group, ASODN was mainly distributed in liver tumor tissues.CONCLUSION: ASODN can transfect Walker-256 cells.ASODN mixed with lipiodol infusion via hepatic artery can be used in the treatment of HCC. 展开更多
关键词 肝动脉 动脉灌注 缺氧再灌注损伤 肝癌 病毒转染 小鼠 动物实验
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Smad2反义寡核苷酸抑制高糖培养大鼠系膜细胞细胞外基质的分泌 被引量:4
9
作者 郁胜强 赖凌云 +2 位作者 马骥 顾勇 林善锬 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期103-107,共5页
目的观察Smad2反义寡核苷酸(ODN)对高糖培养的系膜细胞分泌纤连蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的影响,探讨Smad2在肾小球硬化中的作用,寻找延缓肾小球硬化的新方法。方法设计、合成Smad2起始密码子部位的正义、反义和随机ODN,用脂质体法将OD... 目的观察Smad2反义寡核苷酸(ODN)对高糖培养的系膜细胞分泌纤连蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的影响,探讨Smad2在肾小球硬化中的作用,寻找延缓肾小球硬化的新方法。方法设计、合成Smad2起始密码子部位的正义、反义和随机ODN,用脂质体法将ODN瞬时转染大鼠系膜细胞,并进行高糖培养。观察Smad2mRNA及蛋白的表达及其对系膜细胞细胞外基质(ECM)分泌的影响。结果转染Smad2反ODN义的大鼠系膜细胞,其Smad2mRNA及蛋白表达均降低,与高糖组、正义组和随机组相比差异有统计学意义(P<0郾05),与正常对照组相比无统计学意义(P>0.05)。高糖组、反义组、正义组和随机组培养上清液中FN含量(ng/ml)分别为84.19±6.81、57.65±5.05、78.72±9.13、77.13±7.36;ColⅣ含量(ng/ml)分别为55.27±4.75、22.31±3.24、46.23±2.02、45.92±1.21。反义ODN组FN、ColⅣ的含量均减少,与高糖、正义、随机ODN组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论反义Smad2ODN可抑制高糖刺激引起的系膜细胞Smad2FN和Col的表达上调,该研究结果为延缓肾脏纤维化提供了新的思路和治疗途径。 展开更多
关键词 Smad2反义寡核苷酸 高糖培养大鼠 系膜细胞 细胞外基质 分泌 肾脏纤维化
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