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RUNX1对奶牛乳腺上皮细胞间质转化的调节作用
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作者 王宽 杨博文 +8 位作者 王菊玉 邓健明 许慧 杨阳 陈洪剑 代飞燕 顾小龙 曲伟杰 张立梅 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 2024年第2期500-512,共13页
[目的]探究Runt相关转录因子1(RUNX1)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)发生上皮细胞间质转化(EMT)的作用及机制。[方法]通过CCK-8法检测不同感染复数的热灭活金黄色葡萄球菌处理后对MAC-... [目的]探究Runt相关转录因子1(RUNX1)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)发生上皮细胞间质转化(EMT)的作用及机制。[方法]通过CCK-8法检测不同感染复数的热灭活金黄色葡萄球菌处理后对MAC-T细胞活力的影响;通过倒置显微镜观察经金黄色葡萄球菌处理后MAC-T细胞的形态变化。通过实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测金黄色葡萄球菌处理MAC-T细胞后,细胞中EMT标志分子(E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)、α平滑肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin))、TGF/Smad通路信号分子(TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4)和RUNX1的表达量变化情况;并比较了分别使用RUNX1和TGF-β特异性抑制剂前后细胞EMT标志分子、TGF/Smad通路信号分子和RUNX1的表达水平变化。[结果]不同浓度热灭活金黄色葡萄球菌处理72 h后,MAC-T细胞活力较24和48 h组均极显著下降(P<0.01),通过显微镜观察发现此时细胞出现漂浮死亡现象。因此后续观察细胞形态变化时设置时间为12、24、36和48 h。当用感染复数(MOI)为100热灭活金黄色葡萄球菌处理MAC-T细胞48 h后,细胞形态由上皮细胞典型的“鹅卵石”样转变为间质细胞的“长梭状”;实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果发现,与正常细胞相比,EMT标志分子E-cadherin mRNA表达量极显著下调(P<0.01),Vimentin、α-SMA、N-cadherin、TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4和RUNX1 mRNA表达量显著或极显著上调(P<0.01);且Vimentin、α-SMA、P-Smad2和RUNX1蛋白表达量明显上调。经LY2109761抑制剂处理后,与感染组相比,2个抑制剂组MAC-T细胞中Smad2、Smad3、Smad4、N-cadherin、Vimentin、α-SMA和RUNX1的mRNA表达量均极显著下调(P<0.01),E-cadherin mRNA表达量极显著上调(P<0.01);经抑制剂Ro5-3335处理后,MAC-T细胞形态未出现显著的间质细胞样变化;与感染组相比,2个抑制剂Ro5-3335组细胞中E-cadherin的mRNA表达量极显著上调(P<0.01),N-cadherin、Vimentin、α-SMA(除10μmol/L Ro5-3335抑制剂组α-SMA外)、TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad4的mRNA表达水平均极显著降低(P<0.01)。[结论]热灭活金黄色葡萄球菌处理MAC-T细胞48 h可激活TGF/Smad通路诱导MAC-T细胞发生EMT变化;RUNX1可通过介导TGF/Smad通路调节金黄色葡萄球菌诱导的MAC-T细胞EMT过程。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 上皮细胞间质转化(EMT) Runt相关转录因子1(RUNX1)
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长链非编码RNA BC002811对胃癌细胞活性、细胞间质转化及p27kip1活化的影响
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作者 陈娟 徐涛 +2 位作者 薛建波 孔阳 梅倩 《解剖学杂志》 CAS 2023年第3期190-196,F0002,共8页
目的:探究长链非编码RNA(LncRNA) BC002811对胃癌细胞活性、细胞间质转化及p27kip1活化的影响。方法 :收集本院原发性胃癌手术切除样本50例,采用TaqMan RNA试剂盒检测BC002811的相对表达量。将胃癌细胞株HGC-27细胞培养及转染后分为HGC... 目的:探究长链非编码RNA(LncRNA) BC002811对胃癌细胞活性、细胞间质转化及p27kip1活化的影响。方法 :收集本院原发性胃癌手术切除样本50例,采用TaqMan RNA试剂盒检测BC002811的相对表达量。将胃癌细胞株HGC-27细胞培养及转染后分为HGC-27组(无转染的HGC-27细胞)、BC002811-NC组(HGC-27细胞+BC002811 siRNA-NC)、BC002811组(HGC-27细胞+BC002811 siRNA);HGC-27组、空载体组(HGC-27细胞+p27kip1空质粒)、p27kip1组(HGC-27细胞+p27kip1质粒);HGC-27组、BC002811+空载体组(HGC-27细胞转染BC002811+p27kip1空质粒)、BC002811+p27kip1组(HGC-27细胞转染BC002811+p27kip1)。Transwell分别检测各组HGC-27细胞侵袭、转移能力,采用免疫印迹检测HGC-27细胞vimentin、E-cadherin蛋白表达,采用qRT-PCR检测HGC-27细胞BC002811、p27kip1表达。结果 :与胃癌组织比较,癌旁组织BC002811的表达显著降低。与HGC-27组比较,BC002811组HGC-27细胞侵袭、迁移能力及E-cadherin表达水平显著降低,vimentin表达水平升高,HGC-27组与BC002811-NC组差异无统计学意义。与HGC-27组比较,p27kip1组HGC-27细胞的侵袭、迁移能力及E-cadherin表达水平显著降低,vimentin表达水平升高,HGC-27组与空载体组差异无统计学意义。与HGC-27组比较,BC002811+空载体组HGC-27细胞侵袭、迁移能力及E-cadherin表达水平显著降低,vimentin表达水平升高;与BC002811+空载体组比较,BC002811+p27kip1组HGC-27细胞侵袭、迁移能力及E-cadherin表达水平显著降低,vimentin表达水平升高。Pearson相关分析结果显示,在HGC-27细胞侵袭、迁移中,BC002811与vimentin水平呈负相关性,与E-cadherin水平呈正相关;vimentin与E-cadherin水平呈负相关性。结论 :在胃癌细胞中BC002811-siRNA激活p27kip1水平、抑制胃癌细胞的迁移及侵袭,其作用机制可能与调控胃癌细胞间质转化蛋白表达相关。 展开更多
关键词 长链非编码RNA BC002811 P27KIP1 胃癌 细胞间质转化
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RhoGTP酶活化蛋白在上皮细胞间质转化中作用的研究进展
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作者 徐倩 段华 +1 位作者 甘露 刘麒薇 《基础医学与临床》 2023年第2期301-305,共5页
上皮细胞间质转化(EMT)是指上皮细胞在形态上发生向间(充)质细胞表型的转变,并获得迁移能力,其在肿瘤细胞侵袭及纤维化疾病的形成中起着重要作用。RhoGTP酶活化蛋白(RhoGAP)可以通过参与调控细胞表面受体同肌动蛋白细胞骨架的信号传导,... 上皮细胞间质转化(EMT)是指上皮细胞在形态上发生向间(充)质细胞表型的转变,并获得迁移能力,其在肿瘤细胞侵袭及纤维化疾病的形成中起着重要作用。RhoGTP酶活化蛋白(RhoGAP)可以通过参与调控细胞表面受体同肌动蛋白细胞骨架的信号传导,影响EMT相关的肿瘤转移及组织纤维化转归,为后续寻找抗肿瘤及抗纤维化的治疗靶点提供分子诊疗思路。 展开更多
关键词 RhoGTP酶活化蛋白 上皮细胞间质转化 肌动蛋白细胞骨架 肿瘤转移 纤维化疾病
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黄芪葛根汤与远志汤合方抑制糖尿病动脉粥样硬化大鼠主动脉内皮细胞间质化的作用机制 被引量:1
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作者 李茂宸 范颖 +3 位作者 李洪洲 毕东雨 林庶茹 刘倩 《安徽中医药大学学报》 CAS 2023年第4期61-66,共6页
目的基于转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad信号通路探究黄芪葛根汤与远志汤合方抑制糖尿病动脉粥样硬化大鼠血管内皮细胞间质化的作用机制。方法将70只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照... 目的基于转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad信号通路探究黄芪葛根汤与远志汤合方抑制糖尿病动脉粥样硬化大鼠血管内皮细胞间质化的作用机制。方法将70只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(糖脉康颗粒)、黄芪葛根汤与远志汤合方1组(简称“合方1组”)、黄芪葛根汤与远志汤合方2组(简称“合方2组”)。空白对照组喂食普通饲料,第29天给予大鼠一次性腹腔注射柠檬酸缓冲液;其他组喂食高脂饲料,第29天给予大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素诱导2型糖尿病动脉粥样硬化模型,连续灌胃49 d。苏木精—伊红染色法观察主动脉的组织形态。检测各组大鼠血糖和血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin A1c,HbA1c)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)水平;采用酶联免疫吸附试验检测血清波形蛋白(Vimentin)、Twist1、TGF-β、锌指转录因子1(Snail1)水平;采用Western blot法检测肝脏固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element-binding protein-1c,SREBP-1c)和主动脉Smad-2、Smad-3蛋白表达水平;采用qRT-PCR法检测葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter-4,Glut-4)、Vimentin、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、SREBP-1c mRNA表达水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血糖、HbA1c、TG、LDL-C、Vimentin、Twist1、TGF-β、Snail1、SREBP-1c、Smad-2、Smad-3表达水平显著升高(P<0.05),HDL-C、Glut-4、AMPK表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,合方1组、合方2组大鼠血糖、HbA1c、TG、TC、LDL-C、Vimentin、SREBP-1c、Twist1、TGF-β、Snail1、Smad-2、Smad-3水平显著降低(P<0.05),HDL-C、Glut-4、AMPK水平显著升高(P<0.05)。结论黄芪葛根汤与远志汤合方抑制主动脉内皮细胞间质化的作用与其参与主动脉TGF-β/Smad信号通路有关。 展开更多
关键词 糖尿病动脉粥样硬化 内皮细胞间质 黄芪葛根汤 远志汤 转化生长因子-β Smad 信号通路
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中医胃癌痰证理论与细胞间质相关性探讨 被引量:20
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作者 魏品康 余志红 +3 位作者 许玲 秦志丰 施俊 孙大志 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期309-310,312,共3页
痰是津液的变异和转化,细胞间质是肿瘤细胞赖以生存的微环境、物质代谢和信号交换的场所,是津液转化的桥梁和痰液生成的枢纽。这种病理生理学特征与中医“痰证理论”存在相关性。对肿瘤细胞间质成分和代谢过程的认识,是中胃癌痰本质研... 痰是津液的变异和转化,细胞间质是肿瘤细胞赖以生存的微环境、物质代谢和信号交换的场所,是津液转化的桥梁和痰液生成的枢纽。这种病理生理学特征与中医“痰证理论”存在相关性。对肿瘤细胞间质成分和代谢过程的认识,是中胃癌痰本质研究新的切入点,有助于阐明中医胃癌痰病因的特性、特点,为研究中医肿瘤“痰本质”奠定基础。 展开更多
关键词 痰证理论 肿瘤细胞间质 中西医结合肿瘤病因学说 理论探讨 中医 胃癌
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Hedgehog信号通路通过上皮细胞间质转分化调控乳腺癌细胞侵袭 被引量:8
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作者 任徽 郭华 +3 位作者 陈明伟 魏光兵 樊林 李徐奇 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期48-52,共5页
目的研究Hedgehog信号通路对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及其可能机制。方法通过Western blot和Real-time RT-PCR,检测人乳腺癌细胞MDA-231和人正常乳腺上皮细胞MCF-10A中SHH、SMO和Gli-1蛋白和mRNA表达。通过小干扰RNA转染MDA-231,以未... 目的研究Hedgehog信号通路对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及其可能机制。方法通过Western blot和Real-time RT-PCR,检测人乳腺癌细胞MDA-231和人正常乳腺上皮细胞MCF-10A中SHH、SMO和Gli-1蛋白和mRNA表达。通过小干扰RNA转染MDA-231,以未转染细胞为正常对照组,转染siRNA Control为阴性对照组,Western blot和RT-PCR法检测靶向沉默SMO基因的效果,Transwell小室侵袭试验检测各组MDA-231细胞的侵袭能力,Western blot检测Gli-1、Snail、MMP-9、E-cadherin和Vimentin的表达变化。结果人乳腺癌细胞MDA-231高表达SHH、SMO和Gli-1。通过RNA干扰技术靶向沉默MDA-231细胞SMO基因,其细胞侵袭能力显著下调,其Gli-1、Snail、MMP-9、Vimentin表达下调,E-cadherin表达增强。结论 Hedgehog通路的异常激活与乳腺癌细胞侵袭相关,其机制可能与诱导乳腺癌上皮细胞间质转分化有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 侵袭 肿瘤 HEDGEHOG通路 上皮细胞间质转分化
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Vimentin及E-Cadherin在子宫颈癌中的表达及其与上皮细胞间质化的相关性 被引量:11
7
作者 申震 周颖 +3 位作者 赵卫东 程勇 徐汉杰 杨春梅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第5期505-508,共4页
目的探讨子宫颈鳞癌组织中E-Cadherin和Vimen-tin的表达及其与上皮细胞间质化(EMT)的相关性。方法采用免疫组化SP法检测42例子宫颈鳞癌组织中E-Cadherin和Vimentin的表达,并分析两者与EMT之间的相关性。结果子宫颈鳞癌组织中E-Cadherin... 目的探讨子宫颈鳞癌组织中E-Cadherin和Vimen-tin的表达及其与上皮细胞间质化(EMT)的相关性。方法采用免疫组化SP法检测42例子宫颈鳞癌组织中E-Cadherin和Vimentin的表达,并分析两者与EMT之间的相关性。结果子宫颈鳞癌组织中E-Cadherin和Vimentin的表达率分别为52.2%和24.4%;在转移淋巴结组织中E-Cadherin的表达率为28.2%,而Vimentin的表达率为39.6%;在指状侵袭中,E-Cadherin的阳性表达率为88.3%,而在播散状侵袭中,E-Cadherin的阳性表达率为36.1%;而在指状侵袭中,Vimentin的阳性表达率为26.3%,而在播散状侵袭中,Vim-entin的阳性表达率为68.2%。在E-Cadherin表达阳性的子宫颈鳞癌组织中,Vimentin的阳性率为10.9%,在E-Cadher-in表达阴性的子宫颈鳞癌组织中,Vimentin的阳性率为78.5%,两者呈负相关。结论 E-Cadherin的表达降低和Vimentin的表达升高与子宫颈鳞癌的侵袭方式密切相关,E-Cadherin和Vimentin参与了EMT过程,在子宫颈鳞癌转移中具有重要作用。 展开更多
关键词 子宫颈癌 E-CADHERIN VIMENTIN 上皮细胞间质
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RNA干扰抑制Slug表达在TGF-β1诱导的肾小管细胞间质转分化中的抑制作用 被引量:7
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作者 陶光利 张璟 +2 位作者 卓文磊 黄云剑 周保尚 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期872-875,882,共5页
目的观察Slug在TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞向间质细胞转分化中的表达及对黏附分子E-cadherin表达的影响。方法构建能表达针对Slug的小干扰RNA(Small interferingRNA,siRNA)的干扰载体(SlugsiRNAvector)和表达不针对任何已知mRNA的si... 目的观察Slug在TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞向间质细胞转分化中的表达及对黏附分子E-cadherin表达的影响。方法构建能表达针对Slug的小干扰RNA(Small interferingRNA,siRNA)的干扰载体(SlugsiRNAvector)和表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照RNA干扰载体(Control siRNA vector),并用脂质体转染法瞬时转染HKC细胞。用TGF-β1分别处理HKC、siSlug和siC,刺激48h后,分别采用PT-PCR和Western blot技术检测各组Slug、α-SMA(alpha-smooth muscleactin)、和E-cadherin的表达水平。结果 TGF-β1刺激后Slug表达水平增高,E-cadherin表达水平降低;通过siRNA干扰后Slug表达减弱,而E-cadherin的表达增强。结论在TGF-β1诱导的HKC细胞EMT过程中,Slug表达与E-cadherin呈负相关,且RNAi阻滞Slug表达能有效地抑制TGF-β1诱导EMT,提示Slug是介导TGF-β1有效地诱导EMT的重要分子。 展开更多
关键词 SLUG 上皮细胞间质转分化 RNA干扰
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降钙素基因相关肽对大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞间质转分化的作用及机制 被引量:7
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作者 李先伟 蒋莉莉 +2 位作者 左东泽 郝伟 吴海龙 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期249-253,共5页
目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)的作用并探讨其机制。方法:实验设Control组、TGF-β1(5 ng/ml)、CGRP(1、10、100 nmol/L)组、CGRP8-37(1μmol/L)+CGRP(100nmol/L)组。每组设9个复孔。细胞分别用CGR... 目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)的作用并探讨其机制。方法:实验设Control组、TGF-β1(5 ng/ml)、CGRP(1、10、100 nmol/L)组、CGRP8-37(1μmol/L)+CGRP(100nmol/L)组。每组设9个复孔。细胞分别用CGRP或加CGRP8-37预处理1 h,再用转化生长因子β1(TGF-β1)处理48 h。MTT法检测大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞(RLE-6TN细胞)活性。分别采用Real-time PCR和Western blot检测细胞E-cadherin、α-SMA、e IF3a、Notch1和collagenⅢmRNA及蛋白表达。结果:与TGF-β1(5 ng/ml)相比,不同剂量CGRP(1、10、100 nmol/L)均可明显提高RLE-6TN细胞活性,显著抑制e IF3a、Notch1、α-SMA及collagenⅢ胶原的表达,上调E-cadherin的表达,而CGRP的这些作用可以被CGRP阻断剂CGRP8-37所取消。结论:CGRP对EMT具有一定的抑制作用,其机制可能与其抑制Notch1、e IF3a表达有关。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 上皮细胞间质转分化 eIF3a NOTCH1 大鼠
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姜黄素对肝细胞生长因子诱导的前列腺癌细胞上皮细胞间质化的逆转作用 被引量:11
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作者 胡惠军 陈新来 +4 位作者 潘勇权 邹伟文 周文泉 古彩红 刘浩 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第7期1425-1429,共5页
目的:探讨姜黄素对肝细胞生长因子诱导前列腺癌DU145细胞上皮细胞间质化的影响及可能机制。方法:将DU145细胞分为3组:正常对照组、HGF组、HGF联合姜黄素组。分组干预48小时后,显微镜观察细胞形态变化,划痕试验及Transwell试验检测细胞... 目的:探讨姜黄素对肝细胞生长因子诱导前列腺癌DU145细胞上皮细胞间质化的影响及可能机制。方法:将DU145细胞分为3组:正常对照组、HGF组、HGF联合姜黄素组。分组干预48小时后,显微镜观察细胞形态变化,划痕试验及Transwell试验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测上皮细胞表面标志E-Cadherin和间质细胞表面标志Vimentin的变化,以及HGF/c-Met信号通路分子的表达情况。Real time RT-PCR检测c-Met mRNA的表达变化。结果:分组处理48h,HGF处理组细胞较正常对照组细胞迁移能力显著增强,HGF联合姜黄素处理组细胞迁移能力与HGF处理组相比明显下降;Western blot结果发现,相对于正常对照组,HGF处理组E-cadherin表达水平下降而Vimentin表达水平上升,而姜黄素能明显逆转HGF诱导的EMT相关蛋白表达的改变。进一步研究发现姜黄素能显著下调c-Met mRNA和蛋白水平,进而抑制HGF/c-Met信号下游p-AKT和p-ERK信号以及Snail的表达。结论:姜黄素可逆转HGF诱导的前列腺癌细胞DU145迁移能力,可能与其抑制c-Met的表达和上皮细胞间质化有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 姜黄素 细胞生长因子 上皮细胞间质
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两种不同前列腺癌上皮细胞间质转化模型转录调控因子的比较及意义 被引量:4
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作者 吴开杰 曾津 +5 位作者 朱国栋 张栋 薛艳 陈玉乐 王新阳 贺大林 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期137-141,共5页
目的:初步筛选、对比决定两种不同前列腺癌上皮细胞间质转化(EMT)模型(LNCaP/HIF1α细胞模型、ARCaP细胞模型)表型的转录因子,为利用这两个模型深入研究前列腺癌转移机制奠定基础。方法:分别体外培养LNCaP/HIF1α细胞模型中的LNCaP细胞... 目的:初步筛选、对比决定两种不同前列腺癌上皮细胞间质转化(EMT)模型(LNCaP/HIF1α细胞模型、ARCaP细胞模型)表型的转录因子,为利用这两个模型深入研究前列腺癌转移机制奠定基础。方法:分别体外培养LNCaP/HIF1α细胞模型中的LNCaP细胞、稳定高表达缺氧诱导因子HIF1α的LNCaP细胞和ARCaP细胞模型中的IF11细胞、IA8细胞,提取总RNA行RT-PCR,检测目前发现的决定EMT表型的5种转录因子(Snail、Slug、ZEB1、SIP1、Twist1),对比两种模型的差异。结果:LNCaP/HIF1α细胞模型中的两种细胞均不同程度地表达5种转录因子,其中Slug、Twist1有差异,表型转化后Slug表达升高,而Twist1表达降低(P<0.05);ARCaP细胞模型中的两种细胞均不同程度地表达Snail、Slug、ZEB1、SIP1,不表达Twist1,其中ZEB1、Slug有差异,表型转化后ZEB1、Slug表达升高(P<0.05)。结论:决定不同来源的前列腺癌EMT模型表型转化的转录调控机制各不相同,Slug可能是决定HIF1α诱导LNCaP细胞EMT表型转化的关键转录因子,而ZEB1、Slug则可能在ARCaP细胞EMT表型转化中起决定作用。 展开更多
关键词 前列腺癌 LNCaP/HIF1α模型 ARCaP模型 上皮细胞间质转化 转录因子
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多种转移潜能不同的人前列腺癌细胞“上皮细胞间质转化态”特性鉴定及其意义 被引量:11
12
作者 罗勇 贺大林 宁亮 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第8期696-700,共5页
目的:对多种转移潜能不同的人前列腺癌细胞“上皮细胞间质转化态”(EMT)特性进行鉴定,并从粘附因素和细胞骨架蛋白角度分析其骨转移潜能获得的分子机制。方法:用W estern印迹法鉴定LNCaP及其亚细胞系C4、C4-2和ArCaP亚细胞系IF11、IA8,... 目的:对多种转移潜能不同的人前列腺癌细胞“上皮细胞间质转化态”(EMT)特性进行鉴定,并从粘附因素和细胞骨架蛋白角度分析其骨转移潜能获得的分子机制。方法:用W estern印迹法鉴定LNCaP及其亚细胞系C4、C4-2和ArCaP亚细胞系IF11、IA8,以及PC-3、Du145等细胞中上皮型钙粘素(E-cadherin)、神经型钙粘素(N-cadherin)和波形纤维蛋白(V im entin)的表达差异情况,并分析其在前列腺癌转移过程中的作用。结果:E-cad-herin在PC-3、LNCaP、C4、C4-2中表达较高,但在Du145、IF11、IA8中表达极低;而V im entin的表达情况恰恰与E-cadherin相反;N-cadherin在IF11、IA8细胞中呈现显著的高表达状态。结论:转移潜能不同的人前列腺癌细胞株之间存在EMT表型的表达差异,其中PC-3、LNCaP、C4、C4-2是未发生EMT改变的细胞,Du145、IF11、IA8却是EMT化的细胞。EMT表型差异蛋白在解释前列腺癌转移机制方面占据着重要地位。 展开更多
关键词 前列腺癌 上皮细胞间质转化态 上皮型钙粘素 神经型钙粘素 波形纤维蛋白
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肺泡上皮细胞间质转化及其信号转导途径在肺纤维化中的作用 被引量:12
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作者 黄振杰 郑金旭 +3 位作者 汤艳 曾彤华 蔡文华 李斐 《临床肺科杂志》 2011年第6期823-826,共4页
目的以TGF-β1诱导A549细胞出现上皮细胞-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),探讨EMT过程及其信号转导途径在肺纤维化中的作用。方法体外培养A549细胞,以TGF-β1进行干预,收集不同时段的细胞,用荧光实时定量PCR检测... 目的以TGF-β1诱导A549细胞出现上皮细胞-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),探讨EMT过程及其信号转导途径在肺纤维化中的作用。方法体外培养A549细胞,以TGF-β1进行干预,收集不同时段的细胞,用荧光实时定量PCR检测上皮及间质细胞标志物的mRNA表达,Western blot检测上皮及间质细胞的标志物以及信号转导蛋白P-Smad2/3、Snail1、Snail2的表达,应用倒置相差显微镜观察TGF-β1干预前后细胞形态学的变化。结果 TGF-β1干预后,A549细胞上皮细胞标志物的mRNA和蛋白表达下调(P<0.05),间质细胞标志物的mRNA和蛋白表达上调(P<0.05);信号转导蛋白P-Smad2/3、Snail1上调(P<0.05),snail2弱表达(P>0.05);倒置相差显微镜观察到TGF-β1干预后A549细胞由鹅卵石状变为梭形,形态如同肌纤维母细胞。结论 TGF-β1可以在体外诱导肺泡上皮细胞向间质细胞转化,其机制与Smad 2/3、Snail1信号转导途径相关,提示肺泡上皮细胞向间质细胞的转化是肺纤维化发生的直接原因,而Smad 2/3、Snail1信号转导途径很可能是关键环节。通过诱导或促进肺泡上皮细胞向间质细胞转化,可以促使肺纤维化的发病,而通过阻断这一过程及其下游的信号转导通路有望治疗肺纤维化。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 A549细胞 上皮细胞间质转化 肺纤维化
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上皮细胞间质化与肿瘤的转移 被引量:10
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作者 赵荣志(综述) 吴志浩(审校) 周清华(审校) 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第7期620-624,共5页
恶性肿瘤的转移是指肿瘤从原发部位转移到远隔器官,是恶性肿瘤患者致死的常见原因。肿瘤细胞侵润周围组织,侵润血管,在转移部位侵出血管并形成新的转移灶,这一过程需要很多的分子机制参与。上皮细胞间质化在胚胎发育以及成人的损伤修复... 恶性肿瘤的转移是指肿瘤从原发部位转移到远隔器官,是恶性肿瘤患者致死的常见原因。肿瘤细胞侵润周围组织,侵润血管,在转移部位侵出血管并形成新的转移灶,这一过程需要很多的分子机制参与。上皮细胞间质化在胚胎发育以及成人的损伤修复、组织再生、器官纤维化以及肿瘤进展等方面发挥重要作用。上皮细胞间质化是恶性肿瘤侵润转移的首要步骤。随着我们对于上皮细胞间质化分子机制了解的深入,使得我们更好地知晓肿瘤及其进展的过程,并为恶性肿瘤的治疗干预提供有效的方法。 展开更多
关键词 上皮细胞间质 肿瘤侵润 转移
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HMGA2与胃癌上皮细胞间质转化的相关性及临床意义 被引量:9
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作者 查郎 王子卫 +1 位作者 张能 黄镇 《生命科学研究》 CAS CSCD 2011年第1期61-65,共5页
探讨HMGA2、E-cadherin及N-cadherin在胃癌组织中差异性表达的临床意义及其与上皮细胞间质转化的关系.应用RT-PCR方法检测20例胃癌组织及对应的正常胃粘膜组织HMGA2 mRNA的表达,应用免疫组织化学法检测71例胃癌组织及癌旁组织中HMGA2、E... 探讨HMGA2、E-cadherin及N-cadherin在胃癌组织中差异性表达的临床意义及其与上皮细胞间质转化的关系.应用RT-PCR方法检测20例胃癌组织及对应的正常胃粘膜组织HMGA2 mRNA的表达,应用免疫组织化学法检测71例胃癌组织及癌旁组织中HMGA2、E-cadherin及N-cadherin的表达情况,与临床资料做统计学分析.HMGA2 mRNA在胃癌组织和癌旁组织中的表达存在显著性差异(P<0.01),在胃癌组织中HMGA2、E-cadherin及N-cadherin的阳性表达率分别为64.7%、29.6%和43.7%,HMGA2和E-cadherin的表达成负相关(P<0.05),和N-cadherin的表达成正相关(P<0.05),HMGA2表达和胃癌患者淋巴结转移及临床分期有显著相关性(P<0.05).HMGA2高表达的胃癌组织中有明显的上皮细胞间质转化表型,其表达与胃癌侵润转移有一定的相关性. 展开更多
关键词 胃癌 高迁移率族蛋白A2(HMGA2) 上皮细胞表形标志物E-cadherin 表型标志物N-cadherin 上皮细胞间质化(EMT)
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1,25二羟维生素D_3在甲状腺未分化癌肿瘤干细胞增殖和上皮细胞间质转化中的作用 被引量:5
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作者 王丽 彭雯 +1 位作者 陈小罗 吴晨光 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2016年第5期375-379,共5页
目的:研究1,25二羟维生素D_3在甲状腺未分化癌肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)的增殖及上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法:以甲状腺未分化癌细胞株HTh74为研究对象,采用体外细胞增殖实验观察1... 目的:研究1,25二羟维生素D_3在甲状腺未分化癌肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)的增殖及上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法:以甲状腺未分化癌细胞株HTh74为研究对象,采用体外细胞增殖实验观察1,25二羟维生素D_3对野生型HTh74及其多柔比星耐药株的作用。采用细胞球形成实验观察1,25二羟维生素D_3对甲状腺CSCs增殖能力的作用。实时荧光定量PCR检测HTh74野生型细胞、HTh74类CSCs以及1,25二羟维生素D_3干预后的HTh74类CSCs中EMT相关基因的表达。结果:1,25二羟维生素D_3抑制HTh74野生型和多柔比星耐药株细胞的增殖,并且对耐药株具有更明显的生长抑制作用。1,25二羟维生素D_3抑制HTh74类CSCs的增殖,并显著下调HTh74类CSCs中EMT相关基因N-钙黏蛋白和Slug的表达(P<0.05)。E-钙黏蛋白在HTh74类CSCs中未检出。结论:1,25二羟维生素D_3抑制甲状腺CSCs的增殖,并抑制甲状腺CSCs的EMT过程。 展开更多
关键词 1 25二羟维生素D3 甲状腺癌 肿瘤干细胞 上皮细胞间质转化
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晚期非小细胞肺癌中上皮细胞间质转型和表皮生长因子受体的检测及其相关性研究 被引量:6
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作者 柴春香 王晓敏 +1 位作者 郭文君 孙永红 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期34-38,共5页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中上皮细胞间质转型(EMT)与表皮生长因子受体(EGFR)的相关性。方法免疫组织化学法(En Vision)检测78例晚期NSCLC组织和16例正常肺组织中的EGFR、E-钙黏素(E-cadherin)和波蛋白(Vimentin)的表达... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中上皮细胞间质转型(EMT)与表皮生长因子受体(EGFR)的相关性。方法免疫组织化学法(En Vision)检测78例晚期NSCLC组织和16例正常肺组织中的EGFR、E-钙黏素(E-cadherin)和波蛋白(Vimentin)的表达。EGFR 18~21号外显子聚合酶链反应(PCR)扩增及基因测序。结果78例NSCLC中,EGFR、E-cadherin和Vimentin在NSCLC中阳性表达率分别为61.5%(48/78)、43.6%(34/78)和56.4%(44/78),EGFR基因突变率为24.4%(19/78),正常组为阴性。EGFR野生型组的EMT发生率高(67.8%vs 21.1%),EGFR蛋白与EMT呈正相关性(r=0.236,P=0.037)。结论 E-cadherin降低或全部丢失及EGFR通过信号传导通路可以促进EMT的发生。 展开更多
关键词 晚期非小细胞肺癌 上皮细胞间质转型 表皮生长因子受体
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姜黄素对缺氧诱导肝癌细胞HepG2上皮细胞间质转分化(EMT)的逆转作用 被引量:5
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作者 常远鸿 江梅 刘凯歌 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第9期1763-1767,共5页
目的:探讨姜黄素对缺氧诱导下人原发性肝癌细胞HepG2上皮细胞间质转分化的影响和可能机制。方法:将HepG2细胞分为3组:正常对照组、CoCl2组、CoCl2+姜黄素组。分组干预48小时后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,相差显微镜观察细... 目的:探讨姜黄素对缺氧诱导下人原发性肝癌细胞HepG2上皮细胞间质转分化的影响和可能机制。方法:将HepG2细胞分为3组:正常对照组、CoCl2组、CoCl2+姜黄素组。分组干预48小时后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,相差显微镜观察细胞形态变化,划痕试验检测细胞迁移能力,Real-time RT-PCR检测HIF1-αmRNA的表达变化,Western blot检测HIF1-α蛋白,上皮细胞表面标志E-Cadherin和间质细胞表面标志vimentin的变化。结果:分组干预48h,CoCl2组细胞增殖较对照组增高,而CoCl2+姜黄素组增殖较正常组降低;CoCl2组较正常对照组迁移能力显著增强,CoCl2+姜黄素组细胞迁移能力与CoCl2组相比明显下降;Real-time RT-PCR显示3组细胞HIF1-αmRNA的表达无明显差异;但是Western blot结果发现,相对于正常对照组,CoCl2组HIF1-α蛋白明显上调,CoCl2+姜黄素组HIF1-α蛋白变化不大;同时,CoCl2组E-cadherin表达水平下降而vimentin表达水平上升,CoCl2+姜黄素组无明显变化。结论:姜黄素可逆转缺氧诱导的肝癌细胞HepG2增殖和迁移能力增加,可能与其抑制缺氧诱导的HIF1-α蛋白上调和上皮细胞间质转分化有关。 展开更多
关键词 细胞 侵袭 缺氧 上皮细胞间质转分化 姜黄素
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甲状腺未分化癌耐药和转移中肿瘤干细胞和上皮细胞间质的转化作用 被引量:2
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作者 郑帅 王晓东 +3 位作者 崔岱 许馨予 杨涛 郑旭琴 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1627-1631,1637,共6页
目的 :探讨甲状腺未分化癌耐药和转移中肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)和上皮细胞间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的作用。方法 :以甲状腺未分化癌细胞株SW1736为研究对象,采用流式荧光激活分选技术从SW1736细胞... 目的 :探讨甲状腺未分化癌耐药和转移中肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)和上皮细胞间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的作用。方法 :以甲状腺未分化癌细胞株SW1736为研究对象,采用流式荧光激活分选技术从SW1736细胞株中分选出具有干细胞特性的侧群(side population,SP)细胞。用阿霉素诱导非侧群(non-SP)细胞耐药。在SP、nonSP及non-SP耐药细胞中,采用体外克隆形成试验检测克隆形成能力;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测阿霉素对增殖的影响;realtime PCR比较干细胞标志nestin、ABCG2,肿瘤耐药基因MDR1,EMT标记物E-cadherin、β-catenin、vimentin、slug、N-cadherin表达情况。结果:SW1736细胞中存在0.8%左右的SP细胞,SP细胞克隆形成率明显高于non-SP细胞。non-SP耐药细胞的半数抑制浓度明显高于non-SP细胞,且non-SP耐药细胞流式分选不能获得SP细胞,只能得到non-SP细胞。real-time PCR结果显示,SP较non-SP细胞高表达nestin、ABCG2、MDR1、N-cadherin、β-catenin、vimentin及slug;non-SP耐药细胞较non-SP细胞MDR1、slug表达上调;均未检出E-cadherin。结论 :阿霉素诱导耐药不能将非肿瘤干细胞(non-SP细胞)转化为获得性肿瘤干细胞(SP细胞),但可导致EMT的异常激活。SP细胞可能是肿瘤耐药、复发、转移的根源。 展开更多
关键词 甲状腺 肿瘤干细胞 侧群细胞 上皮细胞间质转化 耐药
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TGF-β_1诱导肺泡上皮细胞间质转化 被引量:6
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作者 黄振杰 郑金旭 +4 位作者 莫凯天 苏石芳 许世锋 汤艳 石益海 《吉林医学》 CAS 2010年第29期5062-5064,共3页
目的:通过观察TGF-β1诱导下A549细胞出现的细胞形态学和E-cad表达的变化,探讨上皮细胞-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程在肺纤维化发病机制中的作用。方法:体外培养A549细胞,以TGF-β1进行干预,收集不同时段... 目的:通过观察TGF-β1诱导下A549细胞出现的细胞形态学和E-cad表达的变化,探讨上皮细胞-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程在肺纤维化发病机制中的作用。方法:体外培养A549细胞,以TGF-β1进行干预,收集不同时段的细胞,应用荧光实时定量PCR(RT-PCR)检测TGF-β1干预前后E-cad的mRNA表达变化;倒置相差显微镜观察细胞形态学的变化;间接免疫荧光观察E-cad蛋白表达的变化。结果:倒置相差显微镜观察到TGF-β1干预后A549细胞由鹅卵石状变为梭形,形态如同肌纤维母细胞。间接免疫荧光显示A549细胞的E-cad表达(红色荧光染色)随时间延长逐渐减少。RT-PCR显示E-cad的mRNA表达下调(P<0.05)。结论:TGF-β1在体外诱导肺泡上皮细胞向间质细胞转化,肺泡上皮细胞间质转化是肺纤维化的重要发病机制之一。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 A549细胞 上皮细胞间质转化 肺纤维化
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