目的·探究去唾液酸糖蛋白受体1(asialoglycoprotein receptor 1,ASGR1)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的意义及潜在机制。方法·通过R语言分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中ASGR1在肝癌...目的·探究去唾液酸糖蛋白受体1(asialoglycoprotein receptor 1,ASGR1)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的意义及潜在机制。方法·通过R语言分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中ASGR1在肝癌患者中的表达情况并绘制相关生存曲线。利用人类蛋白质图谱(The Human Protein Atlas,HPA)数据库获得人体正常肝组织和肝癌组织的免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)数据来分析ASGR1的蛋白表达情况。利用流体动力学尾静脉注射(hydrodynamic tail vein injection,HTVI)递送方法,在免疫完全的小鼠肝脏中敲除Asgr1探究其在体内的致瘤功能,并通过蛋白免疫印迹法(Western blotting,WB)验证基因敲除效率。利用R语言进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析及相关性分析,利用基因探针富集(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)软件进行GSEA hallmark相关通路分析,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)在小鼠肝癌组织中验证糖酵解关键基因表达水平。结果·ASGR1在肝癌组织中显著低表达,在肝癌患者中ASGR1的低表达与患者较差的总体生存期(overall survival,OS)、无疾病间隔(disease free interval,DFI)、无进展间隔期(progression free interval,PFI)和疾病特异性生存期(disease specific survival,DSS)相关;肿瘤分级程度越高的肝癌患者ASGR1基因表达水平越低。人体正常肝组织ASGR1蛋白的表达显著高于肝癌组织。在免疫完全的肝细胞癌小鼠模型中,小鼠内源性Asgr1敲除可增加肝组织中肿瘤结节的大小和数量。TCGA数据库中ASGR1低表达组肝癌患者富集到多条癌症及代谢相关通路,ASGR1表达与部分糖酵解关键基因表达呈负相关,Asgr1敲除组的小鼠肝癌组织中糖酵解水平高于对照组,提示ASGR1低表达很可能促进肝癌的生长发展,加强代谢重编程促进肿瘤的合成代谢发展。结论·ASGR1在肝癌患者中表达显著降低,与患者的预后呈正相关;小鼠体内敲除Asgr1可促进肝细胞癌的发生发展;ASGR1可以作为肝癌预后不良的潜在生物标志物和潜在治疗新靶点。展开更多
目的:利用Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路报告系统,探讨Wnt/β-catenin信号通路活性与前列腺癌干细胞的关系。方法:通过免疫荧光染色法检测Wnt/β-catenin信号通路在前列腺癌中的激活情况;应用脂质体法将携带有T细胞特异性转录因...目的:利用Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路报告系统,探讨Wnt/β-catenin信号通路活性与前列腺癌干细胞的关系。方法:通过免疫荧光染色法检测Wnt/β-catenin信号通路在前列腺癌中的激活情况;应用脂质体法将携带有T细胞特异性转录因子(T cell speci c transcription factor,TCF)结合位点和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green uorescent protein,eGFP)的Wnt/β-catenin信号通路报告质粒7TGP稳定转入前列腺癌PC3和DU145细胞,并采用FCM法分选技术,分选出GFP表达最高(GFP^+)和最低(GFP^-)5%的细胞群体。采用蛋白质印迹法比较GFP^+和GFP^-细胞群细胞核中激活的β-catenin表达量的差异;实时荧光定量PCR法检测GFP^+和GFP^-细胞群Wnt信号通路下游靶基因表达的变化;采用细胞成球实验和实时荧光定量PCR法比较GFP^+和GFP^-细胞群的干性强弱。结果:大部分前列腺癌细胞中经典Wnt信号通路呈现低激活状态,β-catenin未被激活进入细胞核内,然而少部分细胞中经典Wnt信号通路呈现高激活状态,β-catenin被激活转移进入细胞核的量显著增高。与各自对应的GFP-细胞(PC3-GFP-和DU145-GFP-细胞)相比,PC3-GFP^+细胞和DU145-GFP^+细胞核中β-catenin蛋白的表达量明显上调(P值均<0.05),且Wnt信号通路下游靶基因轴蛋白抑制因子2(Axis inhibition protein 2,AXIN2)mRNA水平上调(P值均<0.05)。与各自对应的GFP-细胞相比,干性相关基因多梳复合蛋白B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插入位点1(B-cell-speci c moloney leukemia virusinsert site-1,BMI-1)和乙醛脱氢酶1A1(aldehyde dehydrogenase family 1 member A1,ALDH1A1)mRNA在PC3-GFP^+细胞中表达上调(P值均<0.05),ALDH1A3和CD44 mRNA在DU145-GFP^+细胞中表达上调(P值均<0.05)。与各自对应的GFP^-细胞相比,PC3-GFP^+细胞和DU145-GFP^+细胞的成球能力均明显上调(P值均<0.05)。结论:Wnt/β-catenin信号通路活性高的前列腺癌细胞群体展现出更高的干细胞的特性。展开更多
含SET结构域蛋白2(SET domain-containing protein 2,SETD2)基因是表观遗传调节中的一个重要基因,其编码的SETD2蛋白是唯一一个参与组蛋白3第36位赖氨酸甲基化修饰的三甲基转移酶;对基因组的研究表明,SETD2基因在多种恶性肿瘤中发生突...含SET结构域蛋白2(SET domain-containing protein 2,SETD2)基因是表观遗传调节中的一个重要基因,其编码的SETD2蛋白是唯一一个参与组蛋白3第36位赖氨酸甲基化修饰的三甲基转移酶;对基因组的研究表明,SETD2基因在多种恶性肿瘤中发生突变。最初,SETD2在肾透明细胞癌、脑胶质瘤和乳腺癌等实体瘤中被发现。近年来,越来越多的研究表明SETD2可能在调节造血干细胞的功能以及造血系统正常发育过程中也起着重要的作用,其失活突变可促进多种血液系统恶性肿瘤(如髓系、淋巴系白血病以及淋巴瘤)的发生和发展以及耐药的产生。因此,阐明SETD2促进血液系统疾病的分子作用机制,对于血液系统疾病的诊断及治疗具有重大意义。本文就SETD2在血液系统恶性疾病的研究进展进行综述。展开更多
文摘目的·探究去唾液酸糖蛋白受体1(asialoglycoprotein receptor 1,ASGR1)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的意义及潜在机制。方法·通过R语言分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中ASGR1在肝癌患者中的表达情况并绘制相关生存曲线。利用人类蛋白质图谱(The Human Protein Atlas,HPA)数据库获得人体正常肝组织和肝癌组织的免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)数据来分析ASGR1的蛋白表达情况。利用流体动力学尾静脉注射(hydrodynamic tail vein injection,HTVI)递送方法,在免疫完全的小鼠肝脏中敲除Asgr1探究其在体内的致瘤功能,并通过蛋白免疫印迹法(Western blotting,WB)验证基因敲除效率。利用R语言进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析及相关性分析,利用基因探针富集(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)软件进行GSEA hallmark相关通路分析,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)在小鼠肝癌组织中验证糖酵解关键基因表达水平。结果·ASGR1在肝癌组织中显著低表达,在肝癌患者中ASGR1的低表达与患者较差的总体生存期(overall survival,OS)、无疾病间隔(disease free interval,DFI)、无进展间隔期(progression free interval,PFI)和疾病特异性生存期(disease specific survival,DSS)相关;肿瘤分级程度越高的肝癌患者ASGR1基因表达水平越低。人体正常肝组织ASGR1蛋白的表达显著高于肝癌组织。在免疫完全的肝细胞癌小鼠模型中,小鼠内源性Asgr1敲除可增加肝组织中肿瘤结节的大小和数量。TCGA数据库中ASGR1低表达组肝癌患者富集到多条癌症及代谢相关通路,ASGR1表达与部分糖酵解关键基因表达呈负相关,Asgr1敲除组的小鼠肝癌组织中糖酵解水平高于对照组,提示ASGR1低表达很可能促进肝癌的生长发展,加强代谢重编程促进肿瘤的合成代谢发展。结论·ASGR1在肝癌患者中表达显著降低,与患者的预后呈正相关;小鼠体内敲除Asgr1可促进肝细胞癌的发生发展;ASGR1可以作为肝癌预后不良的潜在生物标志物和潜在治疗新靶点。
文摘目的:利用Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路报告系统,探讨Wnt/β-catenin信号通路活性与前列腺癌干细胞的关系。方法:通过免疫荧光染色法检测Wnt/β-catenin信号通路在前列腺癌中的激活情况;应用脂质体法将携带有T细胞特异性转录因子(T cell speci c transcription factor,TCF)结合位点和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green uorescent protein,eGFP)的Wnt/β-catenin信号通路报告质粒7TGP稳定转入前列腺癌PC3和DU145细胞,并采用FCM法分选技术,分选出GFP表达最高(GFP^+)和最低(GFP^-)5%的细胞群体。采用蛋白质印迹法比较GFP^+和GFP^-细胞群细胞核中激活的β-catenin表达量的差异;实时荧光定量PCR法检测GFP^+和GFP^-细胞群Wnt信号通路下游靶基因表达的变化;采用细胞成球实验和实时荧光定量PCR法比较GFP^+和GFP^-细胞群的干性强弱。结果:大部分前列腺癌细胞中经典Wnt信号通路呈现低激活状态,β-catenin未被激活进入细胞核内,然而少部分细胞中经典Wnt信号通路呈现高激活状态,β-catenin被激活转移进入细胞核的量显著增高。与各自对应的GFP-细胞(PC3-GFP-和DU145-GFP-细胞)相比,PC3-GFP^+细胞和DU145-GFP^+细胞核中β-catenin蛋白的表达量明显上调(P值均<0.05),且Wnt信号通路下游靶基因轴蛋白抑制因子2(Axis inhibition protein 2,AXIN2)mRNA水平上调(P值均<0.05)。与各自对应的GFP-细胞相比,干性相关基因多梳复合蛋白B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插入位点1(B-cell-speci c moloney leukemia virusinsert site-1,BMI-1)和乙醛脱氢酶1A1(aldehyde dehydrogenase family 1 member A1,ALDH1A1)mRNA在PC3-GFP^+细胞中表达上调(P值均<0.05),ALDH1A3和CD44 mRNA在DU145-GFP^+细胞中表达上调(P值均<0.05)。与各自对应的GFP^-细胞相比,PC3-GFP^+细胞和DU145-GFP^+细胞的成球能力均明显上调(P值均<0.05)。结论:Wnt/β-catenin信号通路活性高的前列腺癌细胞群体展现出更高的干细胞的特性。
文摘含SET结构域蛋白2(SET domain-containing protein 2,SETD2)基因是表观遗传调节中的一个重要基因,其编码的SETD2蛋白是唯一一个参与组蛋白3第36位赖氨酸甲基化修饰的三甲基转移酶;对基因组的研究表明,SETD2基因在多种恶性肿瘤中发生突变。最初,SETD2在肾透明细胞癌、脑胶质瘤和乳腺癌等实体瘤中被发现。近年来,越来越多的研究表明SETD2可能在调节造血干细胞的功能以及造血系统正常发育过程中也起着重要的作用,其失活突变可促进多种血液系统恶性肿瘤(如髓系、淋巴系白血病以及淋巴瘤)的发生和发展以及耐药的产生。因此,阐明SETD2促进血液系统疾病的分子作用机制,对于血液系统疾病的诊断及治疗具有重大意义。本文就SETD2在血液系统恶性疾病的研究进展进行综述。
