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面向医学本科生的风湿病临床教学方式探讨 被引量:5
1
作者 张巍 《基础医学教育》 2012年第12期989-990,共2页
风湿病是内科学的一个特殊分支,目前采用的风湿病传统临床教学法存在诸多弊端。应用PBL教学法并引入标准化病人有助于克服传统教学的弊端,其优点在于激发学生学习主动性、变抽象知识灌输为直观临床场景体验。在此基础上结合风湿病的临... 风湿病是内科学的一个特殊分支,目前采用的风湿病传统临床教学法存在诸多弊端。应用PBL教学法并引入标准化病人有助于克服传统教学的弊端,其优点在于激发学生学习主动性、变抽象知识灌输为直观临床场景体验。在此基础上结合风湿病的临床特点,充分利用多媒体教学手段、结合临床案例介绍等使教学效果得到提高。 展开更多
关键词 风湿病 临床教学 标准化病人 PBL
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类风湿关节炎的治疗策略与管理——2015ACR类风湿关节炎治疗推荐意见(草案)解读 被引量:4
2
作者 叶霜 《浙江医学》 CAS 2015年第3期179-181,210,共4页
近期,美国风湿病学会(ACR)对2012年类风湿关节炎(RA)治疗意见进行了更新,其草案已在今年波士顿ACR年会上首次公布,新推荐意见将于2015年春季正式发布(以下简称“新推荐意见”)。新推荐意见继续延续了当前的RA 目标治疗策略(Tr... 近期,美国风湿病学会(ACR)对2012年类风湿关节炎(RA)治疗意见进行了更新,其草案已在今年波士顿ACR年会上首次公布,新推荐意见将于2015年春季正式发布(以下简称“新推荐意见”)。新推荐意见继续延续了当前的RA 目标治疗策略(Treat-to-Target),与2012年老版推荐意见相比,采用评级方法(GRADE)取代兰德公司-美国加利福尼亚大学洛杉矶分校(RAND-UCLA)适用性检验方法(用以评价具体临床方案的适当程度);扩大了RA药物治疗选择,在传统缓解病情的抗风湿药物(DMARD)和生物制剂的基础上,新增托法替尼和糖皮质激素的指导意见;更新多项RA患者的用药安全性考虑;还就当前备受关注的药物减量等问题提供了推荐。本文将对其中的重要内容通过循证医学实例予以解读,望对临床医生有所助益。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 目标治疗 解读 美国加利福尼亚大学 美国风湿病学会 RA患者 管理 药物治疗
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风湿病患者咋补钙
3
作者 李欠欠 吕良敬 《家庭用药》 2021年第10期60-61,共2页
风湿病患者为什么要补钙很多风湿免疫病都会累及骨骼系统,引起骨质沉积和钙磷代谢异常,即疾病本身就是骨质疏松的高危因素。此外,许多风湿免疫病患者的治疗方案中都含有糖皮质激素。糖皮质骨质疏松症(GIOP)是临床应用糖皮质激素常见的... 风湿病患者为什么要补钙很多风湿免疫病都会累及骨骼系统,引起骨质沉积和钙磷代谢异常,即疾病本身就是骨质疏松的高危因素。此外,许多风湿免疫病患者的治疗方案中都含有糖皮质激素。糖皮质骨质疏松症(GIOP)是临床应用糖皮质激素常见的不良反应之一,也是继发性骨质疏松症最常见的原因。 展开更多
关键词 风湿病患者 风湿免疫病 钙磷代谢异常 糖皮质激素 继发性骨质疏松症 高危因素 骨质疏松 骨骼系统
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孕妈妈患风湿病,咋用药
4
作者 杨邵英 吕良敬 《家庭用药》 2022年第3期68-69,共2页
风湿病包括类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、未分化结缔组织病、抗磷脂综合征等,好发于妊娠期女性。一般来说,对于女性患者而言,须在病情控制稳定足够长时间后,且经医生评估、许可后,才可考虑备孕。
关键词 病情控制 抗磷脂综合征 系统性红斑狼疮 类风湿关节炎 风湿病 妊娠期女性 未分化结缔组织病 女性患者
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风湿病患者需要无麸质饮食吗
5
作者 杨邵英 吕良敬 《家庭用药》 2022年第6期64-64,共1页
风湿病门诊上很多患者都对日常饮食非常关注,其中,无麸质饮食就是经常被咨询的一种饮食习惯。总有患者问:“医生,我听说麦麸会加重狼疮,我们红斑狼疮患者最好无麸质饮食,是不是这样呀?”那么,红斑狼疮患者是否需要无麸质饮食呢?
关键词 风湿病患者 红斑狼疮患者 日常饮食 无麸质饮食 饮食习惯 狼疮
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系统性红斑狼疮继发肺动脉高压35例患者的2年随访结果 被引量:12
6
作者 张巍 鲍春德 +2 位作者 顾越英 戴青 杨程德 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期612-614,共3页
目的了解影响系统性红斑狼疮(SLE)继发肺动脉高压(PAH)患者预后的因素,并探讨治疗策略。方法对35例SLE继发PAH患者随访2年,观察生存结果,并采用COX回归法对患者的临床资料进行分析,找出对患者预后有显著意义的影响因子。结果35例SLE继发... 目的了解影响系统性红斑狼疮(SLE)继发肺动脉高压(PAH)患者预后的因素,并探讨治疗策略。方法对35例SLE继发PAH患者随访2年,观察生存结果,并采用COX回归法对患者的临床资料进行分析,找出对患者预后有显著意义的影响因子。结果35例SLE继发PAH患者,2年内共有12例患者死亡,病死率为34.3%。最终进入回归方程的变量为初诊时肺动脉收缩压值、应用环磷酰胺冲击治疗和感染3项(P值均<0.05)。结论SLE继发重度PAH患者预后恶劣,合并肺部感染者预后不良,每月规则环磷酰胺冲击治疗对延长患者生存期具有积极意义。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 肺动脉高压 环磷酰胺 预后
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系统性红斑狼疮肾炎患者妊娠的前瞻性观察(附47例报告) 被引量:3
7
作者 张巍 陈顺乐 +2 位作者 鲍春德 顾越英 张春燕 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期332-334,共3页
目的了解系统性红斑狼疮(SLE)肾炎患者妊娠的母婴风险。方法前瞻性观察我院1998—2006年47例SLE肾炎患者的妊娠结果,依据妊娠前SLE病情,将患者分为SLE缓解期妊娠(A组,37例)、非SLE缓解期妊娠(B组,6例)和妊娠期初发SLE(C组,4例),分别观... 目的了解系统性红斑狼疮(SLE)肾炎患者妊娠的母婴风险。方法前瞻性观察我院1998—2006年47例SLE肾炎患者的妊娠结果,依据妊娠前SLE病情,将患者分为SLE缓解期妊娠(A组,37例)、非SLE缓解期妊娠(B组,6例)和妊娠期初发SLE(C组,4例),分别观察妊娠期及产后半年内母亲的SLE病情和胎儿结局。结果共45例患者分娩活婴(1例分娩双胎),2例患者因疾病活动而中止妊娠。无自然流产和死胎,无母婴死亡。A组中,妊娠期SLE肾炎活动7例,肾功能损害1例;中止妊娠1例,早产10例,足月产26例。B组中,妊娠期SLE肾炎活动5例,肾功能损害1例;中止妊娠1例,早产4例,足月产1例。C组中,妊娠期内无肾功能损害,早产2例,足月产2例。B组患者妊娠期SLE肾炎活动构成比显著低于A组(P<0.01)。结论SLE肾炎患者妊娠的关键在于妊娠时机的选择,疾病缓解期妊娠可有效降低母婴风险。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 系统性红斑狼疮肾炎 妊娠 胎儿
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伴抗中性粒细胞胞质抗体的感染性心内膜炎患者临床特点分析 被引量:4
8
作者 姚冬婷 杨程德 +1 位作者 丁慧华 应春妹 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1482-1485,1496,共5页
目的分析临床感染性心内膜炎(IE)抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)阳性和阴性患者的临床特点。方法对39例确诊为IE的患者,采用ELISA法检测血清ANCA,根据检测结果将患者分为ANCA阳性组和阴性组。回顾性分析患者的临床特点(一般情况、易感因素... 目的分析临床感染性心内膜炎(IE)抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)阳性和阴性患者的临床特点。方法对39例确诊为IE的患者,采用ELISA法检测血清ANCA,根据检测结果将患者分为ANCA阳性组和阴性组。回顾性分析患者的临床特点(一般情况、易感因素、临床表现、实验室检测指标和受累瓣膜等),并比较两组患者各项指标的差异。结果 39例IE患者中,13例ANCA阳性,阳性率达33.3%,均为PR3-ANCA阳性;26例为ANCA阴性患者。37例患者为自然瓣膜心内膜炎,其中34例有器质性心脏病,3例无基础心脏疾病。ANCA阳性组和阳性组间各种易感因素发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。患者的主要临床表现包括贫血(66.7%)、脾脏肿大(38.5%)、肾病变(28.2%)、关节肿痛(23.1%)、下肢水肿(17.9%)等,其中ANCA阳性组患者下肢水肿发生率明显高于阴性组(38.5%vs 7.7%)(P<0.05)。实验室检测指标显示,所有患者出现C反应蛋白(CRP)水平升高现象,89.7%的患者红细胞沉降率(ESR)加快,66.7%的患者血红蛋白(Hb)水平下降,53.8%的患者出现蛋白尿,50.0%的患者出现血尿,但两组间各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。37例患者进行了血培养,其中15例(40.5%)血培养阳性,ANCA阳性组血培养阳性率高于阴性组(69.2%vs 25.0%)(P<0.05)。共分离出17株致病菌,其中14株为链球菌。ANCA阳性组3例患者死亡,其中2例被误诊为ANCA相关小血管炎(AAV);阴性组无死亡病例。结论 ANCA在IE中有一定的阳性率,临床上将IE误诊为AAV存在一定的比例。因此,IE伴ANCA阳性的现象应引起临床高度重视。 展开更多
关键词 抗中性粒细胞胞质抗体 感染性心内膜炎 血管炎
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DNA甲基化与系统性红斑狼疮 被引量:7
9
作者 袁敏 沈南 +1 位作者 唐元家 罗晓兵 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2217-2220,2224,共5页
Systemic lupus erythematosus (SLE) is an archetypical systemic,autoimmune inflammatory disease,of which the mechanism still not unveiled. Studies on epigenetics in SLE have long been the subject of investigation and a... Systemic lupus erythematosus (SLE) is an archetypical systemic,autoimmune inflammatory disease,of which the mechanism still not unveiled. Studies on epigenetics in SLE have long been the subject of investigation and as part of epigenetics. DNA methylation has been confirmed to play a role in the pathogenesis of SLE. The high autoreactivity of CD4+T cell from SLE patients is associated with DNA hypomethylation. DNA hypomethylation is crucial to induce SLE-like autoimmune disease in SLE-non-susceptible mice. The reactivation of inactive X chromosome by hypomethylation may lead to high incidence of SLE in women. Drug-induced SLE is also connected with DNA hypomethylation. To understand the role of DNA methylation in the onset of SLE comprehensively,we review the findings reported in the literatures about DNA methylation and SLE. 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 DNA甲基化 CPG岛 X染色体
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IRF7表达与系统性红斑狼疮的相关性 被引量:2
10
作者 缪倩 唐元家 +3 位作者 黄新芳 钱晓霞 黄秀琴 沈南 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期111-117,共7页
探讨了干扰素调节因子7(IRF7)的表达与中国汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)的相关性.运用实时荧光定量聚合酶链式反应的方法分别测定疾病患者与正常对照组外周血IRF7mRNA的表达水平,并与血清中干扰素水平、干扰素积分以及SLEDAI积分作相关... 探讨了干扰素调节因子7(IRF7)的表达与中国汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)的相关性.运用实时荧光定量聚合酶链式反应的方法分别测定疾病患者与正常对照组外周血IRF7mRNA的表达水平,并与血清中干扰素水平、干扰素积分以及SLEDAI积分作相关性分析.结果发现,患者外周血IRF7mRNA的表达水平较正常对照组的明显增高,且其与血清中干扰素水平、干扰素积分以及SLEDAI积分均呈正相关.由此可知,IRF7表达的增高可能促使干扰素通路异常激活,从而导致系统性红斑狼疮的发生. 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 干扰素调节因子7 表达
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CRISPR/Cas9介导的同源重组在非编码区疾病相关位点功能研究中的应用 被引量:1
11
作者 徐宁 周甜 +2 位作者 侯国俊 沈南 唐元家 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期8-15,共8页
目的·以全基因组关联研究报道的系统性红斑狼疮相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs1978421为例,利用规律成簇间隔短回文重复序列/相关蛋白9[clustered regularly interspaced short palindromic repeat... 目的·以全基因组关联研究报道的系统性红斑狼疮相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs1978421为例,利用规律成簇间隔短回文重复序列/相关蛋白9[clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR associated protein 9,CRISPR/Cas9]系统建立非编码区疾病相关的遗传突变位点功能的研究策略。方法·针对SNP rs1978421位点设计单链导向RNA(single guide RNA,sgRNA),利用T7核酸内切酶Ⅰ(T7 endonucleaseⅠ,T7EⅠ)实验在HEK293T细胞中验证sgRNA对靶点的切割效率。以电穿孔转染的方式将融合Cas9-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和sgRNA的表达质粒及同源重组的模板转染至U-937细胞内,通过流式分选得到单个的GFP阳性U-937细胞,培养14 d后进行基因型鉴定。筛选得到同源重组的细胞克隆后,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)对rs1978421上下游2 Mbp范围内的基因及miR-146a进行定量,分析rs1978421不同等位基因对miR-146a及其周围基因的表达影响。结果·T7EⅠ实验表明,约有24%的HEK293T细胞中的rs1978421位点发生切割。在U-937细胞内进行的同源重组实验中,共计得到141个细胞株;其中6个同源重组成功,成功率为4.3%。qPCR结果显示,在野生型TT与同源重组成功CC的U-937细胞中,miR-146a及所检测基因的表达情况均无显著变化(均P>0.05)。结论·SNP rs1978421对其周围2 Mb范围内的基因及miR-146a并无调控作用,但该研究证明了CRISPR介导的同源重组技术用于非编码区SNP位点功能研究的可行性。 展开更多
关键词 规律成簇间隔短回文重复序列 同源重组 全基因组关联研究 单核苷酸多态性
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自身免疫性结缔组织病相关肺动脉高压的诊治 被引量:1
12
作者 张巍 鲍春德 《内科理论与实践》 2008年第6期391-394,共4页
正常人体肺动脉平均压(mean pulmonary arterial pressure,mPAP)约为12-16mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),静息状态下mPAP〉25mm Hg或活动状态下〉30mm Hg时称为肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)。按2003年WHO威尼斯... 正常人体肺动脉平均压(mean pulmonary arterial pressure,mPAP)约为12-16mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),静息状态下mPAP〉25mm Hg或活动状态下〉30mm Hg时称为肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)。按2003年WHO威尼斯分类,PAH的一个大类为“其他疾病相关性PAH”,其中“结缔组织病相关性PAH”排在首位。 展开更多
关键词 自身免疫性结缔组织病 肺动脉高压 系统性硬化症 系统性红斑狼疮 机制 病理
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长链非编码RNA AC073046.25在系统性红斑狼疮易感基因TET3表达调节中的作用
13
作者 徐宁 周甜 +2 位作者 侯国俊 沈南 唐元家 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1030-1035,共6页
目的·探究长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)AC073046.25在单核细胞中对Tet 甲基胞嘧啶双加氧酶3(Tet methylcytosine dioxygenase 3,TET3)表达的调控作用,分析其作为系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)诊... 目的·探究长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)AC073046.25在单核细胞中对Tet 甲基胞嘧啶双加氧酶3(Tet methylcytosine dioxygenase 3,TET3)表达的调控作用,分析其作为系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)诊断的生物标志物的可行性。方法·通过表观遗传学修饰及胞浆胞核定位对AC073046.25的细胞特异性及功能进行预测。在U-937细胞中利用反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)对AC073046.25进行敲低(knock down),通过实时荧光定量PCR分析ASO敲低AC073046.25后对TET3表达水平的影响。收集健康志愿者(n=32)与SLE患者(n=46)的单核细胞,通过皮尔逊系数分析AC073046.25与TET3表达水平之间的相关性。将健康志愿者记为健康对照组,同时按系统性红斑狼疮疾病活动指数(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)评分标准将SLE患者分为疾病稳定组和疾病活跃组,采用非配对双侧student's t检验比较AC073046.25与TET3在健康对照组及不同疾病活动组间的差异。结果·表观遗传学数据及胞浆胞核定位实验提示,AC073046.25可能在单核细胞中参与TET3的表达调控。在U-937细胞中,ASO敲低AC073046.25后,TET3表达水平降低(ASO组均P=0.002)。相关性分析显示,原代单核细胞中AC073046.25与TET3的表达呈正相关(r=0.650,P=0.000)。非配对双侧student's t检验结果显示,分别与健康对照组和疾病稳定组相比,AC073046.25在疾病活跃组中的表达水平降低(P=0.002,P=0.000)。结论·在单核细胞中AC073046.25能够调控TET3的表达,在疾病活动度较高的SLE患者单核细胞中其表达水平显著降低;继而提示,AC073046.25可作为活跃性SLE的生物标志物辅助疾病活动性诊断。 展开更多
关键词 长链非编码RNA Tet甲基胞嘧啶双加氧酶3 系统性红斑狼疮 易感基因
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系统性红斑狼疮患者的生活质量及影响因素的研究进展 被引量:9
14
作者 吴肖倩 奚慧琴 +1 位作者 袁晓玲 曹莎莎 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1163-1166,共4页
随着医学技术的不断发展与进步,系统性红斑狼疮(SLE)患者的生存时间不断延长,生活质量已成为在SLE临床治疗和护理研究中的重要评价指标。该文对SLE患者的生活质量现状进行综述,主要分析了疾病相关因素(疾病活动性、疼痛和疲劳感)、个体... 随着医学技术的不断发展与进步,系统性红斑狼疮(SLE)患者的生存时间不断延长,生活质量已成为在SLE临床治疗和护理研究中的重要评价指标。该文对SLE患者的生活质量现状进行综述,主要分析了疾病相关因素(疾病活动性、疼痛和疲劳感)、个体因素(年龄、性别、受教育程度和收入)、心理状况以及社会支持对患者生活质量的影响。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 生活质量 影响因素
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PBX1基因对系统性红斑狼疮易感基因IFI16表达的影响 被引量:5
15
作者 徐宗怡 黄新芳 +5 位作者 唐元家 倪旭鸣 黄秀琴 钱其军 吴慧 沈南 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期306-309,共4页
探讨PBX1基因转染人单核细胞系THP1后,对IFI16基因表达的影响。以携带人PBX1基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(pDC315-PBX1-EGFP)转染THP1细胞后,采用实时定量PCR(RT-PCR)和Western blot技术分别在mRNA水平和蛋白水平检测PBX1和IF... 探讨PBX1基因转染人单核细胞系THP1后,对IFI16基因表达的影响。以携带人PBX1基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(pDC315-PBX1-EGFP)转染THP1细胞后,采用实时定量PCR(RT-PCR)和Western blot技术分别在mRNA水平和蛋白水平检测PBX1和IFI16表达的变化。结果,pDC315-PBX1-EGFP转染THP1细胞后,PBX1基因的表达水平都增高,同时发现IFI16基因的表达水平降低。PBX1作为一种转录因子,能调节干扰素诱导蛋白IFI16的表达。 展开更多
关键词 PBX1基因 IFI16基因 人单核细胞系THP1细胞 表达
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运动干预对改善系统性红斑狼疮患者疲乏的Meta分析 被引量:4
16
作者 袁书琪 王会儒 +3 位作者 钱丽萍 李挺 沈怿雯 袁晓玲 《解放军护理杂志》 CSCD 北大核心 2021年第7期20-24,共5页
目的系统评价运动干预对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者疲乏的改善效果。方法计算机检索PubMed、Web of science、Embase、CINAHL、Cochrane Library、中国知网数据库、万方数据库、维普中文期刊数据库和中国生... 目的系统评价运动干预对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者疲乏的改善效果。方法计算机检索PubMed、Web of science、Embase、CINAHL、Cochrane Library、中国知网数据库、万方数据库、维普中文期刊数据库和中国生物医学文献数据库,纳入自建库起至2020年3月关于运动干预对SLE患者疲乏效果的试验研究。由2名研究员独立进行文献筛选、资料提取,并对文献进行偏倚风险评估。采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果最终纳入8项研究,其中5项研究进入Meta分析,共343例患者。结果显示,≥12周的运动干预对SLE患者疲乏改善有显著意义[SMD=-0.62,95%CI(-0.85,-0.39),P<0.001]。5项研究为每次至少30 min、每周至少3次的中等强度有氧运动,运动不良事件发生率和样本流失率较高。结论持续时间≥12周的有氧运动有助改善SLE患者疲乏症状;未来研究建议进一步规范干预方案策略,以促进运动安全性和依从性。 展开更多
关键词 运动干预 系统性红斑狼疮 疲乏 META分析
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应用磁共振成像诊断和评估骶髂关节炎的专家共识 被引量:3
17
作者 戴生明 鲍春德 +11 位作者 邹和建 杨程德 何东仪 姜林娣 管剑龙 叶霜 陈盛 薛愉 吴歆 顾晓丽 李跃华 徐沪济 《内科理论与实践》 2023年第2期65-69,共5页
中轴型脊柱关节炎(spondyloarthritis,SpA)是一类常见的以骶髂关节炎、附着点炎(肌腱端炎)和脊柱炎为特点的慢性炎症性风湿性疾病,主要侵犯中轴关节,以骶髂关节炎为标志。早期诊断和早期治疗是改善中轴型SpA预后的关键,但既往仅关注有... 中轴型脊柱关节炎(spondyloarthritis,SpA)是一类常见的以骶髂关节炎、附着点炎(肌腱端炎)和脊柱炎为特点的慢性炎症性风湿性疾病,主要侵犯中轴关节,以骶髂关节炎为标志。早期诊断和早期治疗是改善中轴型SpA预后的关键,但既往仅关注有明显放射学异常的中轴型SpA,即强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)。长期以来AS的诊断仍采用1984年修订的纽约标准[1],该标准基于临床表现及骶髂关节X线平片检查,致AS的诊断滞后8~11年[2],错过最佳的治疗窗口期。因此骶髂关节X线平片检查明显不能满足临床诊断早期AS或中轴型SpA的需要。 展开更多
关键词 中轴型脊柱关节炎 强直性脊柱炎 骶髂关节炎 磁共振成像 影像学
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构建诱导型CRISPR/Cas9系统用于小鼠免疫细胞基因功能研究 被引量:1
18
作者 赵艳娜 邱荣 +1 位作者 沈南 唐元家 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期297-301,共5页
目的·结合Dox诱导型单链导向RNA(single guide RNA,sgRNA)表达载体和Cas9转基因小鼠,构建诱导型CRISPR/Cas9系统用于小鼠免疫细胞基因功能研究。方法·根据四环素诱导表达系统原理,基因合成U6-TetO-sgRNA和EF1α-T2A-Puro-BFP-... 目的·结合Dox诱导型单链导向RNA(single guide RNA,sgRNA)表达载体和Cas9转基因小鼠,构建诱导型CRISPR/Cas9系统用于小鼠免疫细胞基因功能研究。方法·根据四环素诱导表达系统原理,基因合成U6-TetO-sgRNA和EF1α-T2A-Puro-BFP-T2ATetR片段。通过同源重组将2个片段组装进反转录病毒载体骨架,获得Dox诱导型sgRNA反转录病毒载体。为了验证系统有效性,分离Cas9转基因小鼠骨髓细胞并诱导其向巨噬细胞方向分化。设计对照(non-targeting control,NC)组和实验组(靶向F4/80)的sgRNA,利用反转录病毒感染细胞,分化条件设置添加Dox组(Dox^(+))和不添加Dox组(Dox^(-))。通过流式细胞术和T7核酸内切酶Ⅰ(T7 endonucleaseⅠ,T7EⅠ)实验检测基因敲除效果。结果·①成功构建Dox诱导型sgRNA反转录病毒表达载体和Cas9转基因小鼠。②流式结果显示,在NC Dox^(-)组、NCDox^(+)组和F4/80 Dox^(-)组中,几乎无F4/80阴性细胞群体;而在F4/80 Dox^(+)组中,F4/80阴性细胞群体高达50%。③T7EⅠ结果显示,在F4/80 Dox^(-)组中,DNA条带完整,而在F4/80 Dox^(+)组中发生基因突变,DNA条带被切开。结论·结合Dox诱导型sgRNA表达载体和Cas9转基因小鼠,成功构建诱导型CRISPR/Cas9系统。利用该系统成功在小鼠免疫细胞中实现可诱导性基因敲除。 展开更多
关键词 诱导型CRISPR/Cas9系统 Dox诱导型sgRNA表达载体 造血干细胞 基因编辑 巨噬细胞
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构建反转录病毒小向导RNA表达载体用于小鼠T细胞基因功能研究 被引量:1
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作者 赵艳娜 邱荣 +1 位作者 沈南 唐元家 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1585-1590,共6页
目的·构建反转录病毒小向导RNA(small guide RNA,sgRNA)表达载体,用于小鼠T细胞分化调控及其基因功能的研究。方法·表达短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的反转录病毒载体(MSCV-LTR-miR30-PIG,LMP)经过Xho1和Sal1双酶切后... 目的·构建反转录病毒小向导RNA(small guide RNA,sgRNA)表达载体,用于小鼠T细胞分化调控及其基因功能的研究。方法·表达短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的反转录病毒载体(MSCV-LTR-miR30-PIG,LMP)经过Xho1和Sal1双酶切后,回收得到反转录病毒载体骨架。以慢病毒sgRNA表达载体为模版,通过PCR扩增获得U6-sgRNA-PGK-Puro-BFP片段。利用同源重组将U6-sgRNA-PGK-Puro-BFP片段组装进反转录病毒载体骨架。为了验证系统的有效性,设计靶向Il17a、Rorc和Irf4的sgRNA序列并进行克隆。分离Cas9转基因小鼠CD4 T细胞分别进行sgRNA反转录病毒感染,诱导其向Th17细胞分化。细胞因子染色,流式检测Il17a阳性细胞比例。2组独立样本数据比较采用非配对t检验。结果·①成功构建反转录病毒sgRNA载体。②利用反转录病毒载体向小鼠CD4 T细胞递送sgRNA并实现Il17a基因敲除。③Rorc-sgRNA和Irf4-sgRNA阳性群体中,Il17a阳性群体比率显著降低(P<0.05)。结论·利用sgRNA反转录病毒载体成功向目的细胞递送sgRNA并实现基因敲除。Rorc和Irf4基因敲除结果提示该系统可用于小鼠T细胞基因功能研究。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 Cas9转基因小鼠 反转录病毒载体 TH17细胞分化
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基于肽抗原的间接酶联免疫吸附法检测抗水通道蛋白4抗体在神经精神狼疮中的临床意义
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作者 曹芸 陆晓晔 +4 位作者 陈晓翔 钱洁 赵江峰 顾越英 叶霜 《中国临床医学》 2010年第4期601-603,共3页
目的:建立抗水通道蛋白4(AQ-4)抗体的检测方法,评估抗AQ-4抗体在神经精神狼疮(NPSLE)中的临床意义。方法:用3段AQ-4细胞外肽段包板,建立基于肽抗原的间接酶联免疫吸附(ELISA)检测方法,检测49例健康人、54例其他风湿病患者(32例多肌炎/... 目的:建立抗水通道蛋白4(AQ-4)抗体的检测方法,评估抗AQ-4抗体在神经精神狼疮(NPSLE)中的临床意义。方法:用3段AQ-4细胞外肽段包板,建立基于肽抗原的间接酶联免疫吸附(ELISA)检测方法,检测49例健康人、54例其他风湿病患者(32例多肌炎/皮肌炎,10例干燥综合征和12例类风湿关节炎患者)、105例系统性红斑狼疮(SLE)患者和103例NPSLE患者的血清中的抗AQ-4抗体;检测22例非风湿病患者、31例SLE患者、96例NPSLE、27例合并结核感染的SLE患者和8例隐球菌脑膜炎患者的脑脊液标本中抗AQ-4抗体。结果:以健康人(对照组)的平均光密度(OD)+3标准差(SD)为临界值,血清标本阳性率在其他风湿病组为1.8%(1/54);SLE组为14.3%(15/105);NPSLE组为22.3%(23/103)。脑脊液标本阳性率在对照组为0%;SLE组为12.9%(4/31);NPSLE组为29.2%(28/96);SLE合并结核性脑膜炎者为37%(10/27);SLE合并隐球菌脑膜炎者为0%(0/8)。SLE组合并NPSLE组患者的血清和脑脊液中的抗AQ-4抗体显著增加(P<0.01),SLE组血清和脑脊液中的抗AQ-4抗体水平相似(P>0.05)。NPSLE组脑脊液中的抗体检出率(29.2%)较血清中抗体检出率(22.3%)增高(P<0.01)。在SLE合并TB组的脑脊液中,抗AQ-4抗体的检出显著增高(P<0.01)。结论:抗AQ-4抗体在SLE和NPSLE患者的血清和脑脊液中显著升高,尤其是脑脊液中。SLE合并结核性脑膜炎患者的抗AQ-4抗体显著升高,提示抗AQ-4抗体是狼疮合并结核性脑病的易患因素。 展开更多
关键词 抗体 系统性红斑狼疮 抗原
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