自身免疫性眼病是一类由自身免疫反应引起的炎症性眼病,主要包括自身免疫性葡萄膜炎、甲状腺相关眼病、干燥综合征相关型干眼症、视神经脊髓炎谱系障碍等。这类疾病发病机制复杂,可累及眼表、眼内和眼眶。传统治疗方法主要包括糖皮质激...自身免疫性眼病是一类由自身免疫反应引起的炎症性眼病,主要包括自身免疫性葡萄膜炎、甲状腺相关眼病、干燥综合征相关型干眼症、视神经脊髓炎谱系障碍等。这类疾病发病机制复杂,可累及眼表、眼内和眼眶。传统治疗方法主要包括糖皮质激素治疗和免疫抑制剂治疗,其有效率低且不良反应较大,因此需要对自身免疫性眼病发病机制做更加深入的研究以期寻找到治疗靶点进行对因治疗。程序性死亡蛋白-1 (programmed death 1,PD-1)已被证实与许多自身免疫性疾病相关,它与程序性死亡蛋白配体1 (programmed death ligand 1,PD-L1)组成的信号通路对于调节免疫反应起关键作用。PD-1/PD-L1通路的失活可能导致自身免疫性T细胞的异常活化,从而导致自身免疫性疾病的发生发展。该综述系统总结了现阶段已研究发现的PD-1/PD-L1通路的免疫调节机制,以及其在自身免疫性眼病中的作用,并对未来靶向治疗的潜在可能提出展望。展开更多
作为眼球的外部屏障,由角膜、结膜、眼睑及其上面的睑板腺、泪腺组成的眼表组织暴露于环境当中。在维持角膜光滑和湿润的同时,眼表组织还具有丰富的免疫细胞及相关因子;它们通过先天性免疫反应和适应性免疫反应对抗病原体,以及通过多种...作为眼球的外部屏障,由角膜、结膜、眼睑及其上面的睑板腺、泪腺组成的眼表组织暴露于环境当中。在维持角膜光滑和湿润的同时,眼表组织还具有丰富的免疫细胞及相关因子;它们通过先天性免疫反应和适应性免疫反应对抗病原体,以及通过多种调节机制防止针对自身或无害抗原的不必要或者过度的炎症反应。免疫调节发生障碍是许多眼表疾病的基础。调节性T细胞(regulatory T cell,Treg细胞)作为眼表微环境的重要组成部分,通过多种机制积极地参与抑制针对自身、微生物和环境抗原的异常或过度的免疫反应,在诱导免疫耐受、调节机体免疫平衡方面起着重要作用。Treg细胞的功能受损和数量减少,会破坏眼表免疫稳态,进而导致或促进多种眼表疾病的发生。近年来,越来越多的研究着眼于Treg细胞在眼表疾病发生发展中的作用及相关的分子机制。部分临床前研究显示Treg细胞相关免疫疗法在眼表疾病中具有巨大的潜力。因此,该文就Treg细胞的生物学功能及其在干眼症、眼表过敏性疾病、眼表感染性疾病、角膜移植排斥和眼表组织修复方面发挥的作用进行简要综述,探讨Treg细胞疗法在眼表疾病领域的广阔应用前景。展开更多
目的·研究F-box蛋白38(F-box only protein 38,FBXO38)对眼部黑色素瘤增殖的作用以及潜在的调控通路。方法·使用FBXO38短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)和FBXO38过表达质粒构建FBXO38敲低以及过表达的人皮肤黑色素瘤A375...目的·研究F-box蛋白38(F-box only protein 38,FBXO38)对眼部黑色素瘤增殖的作用以及潜在的调控通路。方法·使用FBXO38短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)和FBXO38过表达质粒构建FBXO38敲低以及过表达的人皮肤黑色素瘤A375和葡萄膜黑色素瘤OMM2.3细胞系,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和Western blotting在转录和蛋白水平验证FBXO38的敲低和过表达效率。通过克隆形成实验、BrdU免疫荧光染色和CCK8细胞增殖实验,探究FBXO38对黑色素瘤细胞增殖的影响。使用肿瘤基因组图谱计划数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA),分析FBXO38高表达和低表达组中的差异表达基因,并进行京都基因与基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集,揭示与FBXO38相关的信号通路。进一步通过CCK8细胞增殖实验检测信号通路抑制剂对不同FBXO38表达量细胞的抑制率。同时通过qRT-PCR和Western blotting,验证在敲低FBXO38之后该通路是否激活。结果·qRT-PCR和Western blotting验证A375和OMM2.3细胞系中的FBXO38的mRNA及蛋白质表达水平,发现与对照组相比敲低组的FBXO38表达水平下降,与野生型相比过表达组的FBXO38的表达水平提高(P<0.05)。克隆形成实验、BrdU免疫荧光染色和CCK8细胞增殖实验显示,敲低FBXO38显著增强A375和OMM2.3细胞的增殖能力(P<0.05),反之过表达FBXO38抑制A375和OMM2.3细胞增殖(P<0.05)。KEGG通路富集分析显示,在皮肤黑色素瘤和葡萄膜黑色素瘤中,FBXO38的表达影响磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K-Akt)通路激活。与对照组相比,PI3K抑制剂LY294002和mTOR1抑制剂Everolimus对FBXO38敲低组的抑制率显著提升(P<0.05),对FBXO38过表达组的抑制率则显著下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,敲低FBXO38之后,与PI3K-Akt通路相关的PTEN、P21和P53蛋白水平下降,而MDM2蛋白水平上升。qRT-PCR结果显示在FBXO38敲低细胞中P53转录水平显著下降(P<0.05),而MDM2转录水平显著上升(P<0.05)。结论·FBXO38通过PI3K-Akt信号通路参与调控眼部黑色素瘤细胞的增殖。展开更多
文摘自身免疫性眼病是一类由自身免疫反应引起的炎症性眼病,主要包括自身免疫性葡萄膜炎、甲状腺相关眼病、干燥综合征相关型干眼症、视神经脊髓炎谱系障碍等。这类疾病发病机制复杂,可累及眼表、眼内和眼眶。传统治疗方法主要包括糖皮质激素治疗和免疫抑制剂治疗,其有效率低且不良反应较大,因此需要对自身免疫性眼病发病机制做更加深入的研究以期寻找到治疗靶点进行对因治疗。程序性死亡蛋白-1 (programmed death 1,PD-1)已被证实与许多自身免疫性疾病相关,它与程序性死亡蛋白配体1 (programmed death ligand 1,PD-L1)组成的信号通路对于调节免疫反应起关键作用。PD-1/PD-L1通路的失活可能导致自身免疫性T细胞的异常活化,从而导致自身免疫性疾病的发生发展。该综述系统总结了现阶段已研究发现的PD-1/PD-L1通路的免疫调节机制,以及其在自身免疫性眼病中的作用,并对未来靶向治疗的潜在可能提出展望。
文摘作为眼球的外部屏障,由角膜、结膜、眼睑及其上面的睑板腺、泪腺组成的眼表组织暴露于环境当中。在维持角膜光滑和湿润的同时,眼表组织还具有丰富的免疫细胞及相关因子;它们通过先天性免疫反应和适应性免疫反应对抗病原体,以及通过多种调节机制防止针对自身或无害抗原的不必要或者过度的炎症反应。免疫调节发生障碍是许多眼表疾病的基础。调节性T细胞(regulatory T cell,Treg细胞)作为眼表微环境的重要组成部分,通过多种机制积极地参与抑制针对自身、微生物和环境抗原的异常或过度的免疫反应,在诱导免疫耐受、调节机体免疫平衡方面起着重要作用。Treg细胞的功能受损和数量减少,会破坏眼表免疫稳态,进而导致或促进多种眼表疾病的发生。近年来,越来越多的研究着眼于Treg细胞在眼表疾病发生发展中的作用及相关的分子机制。部分临床前研究显示Treg细胞相关免疫疗法在眼表疾病中具有巨大的潜力。因此,该文就Treg细胞的生物学功能及其在干眼症、眼表过敏性疾病、眼表感染性疾病、角膜移植排斥和眼表组织修复方面发挥的作用进行简要综述,探讨Treg细胞疗法在眼表疾病领域的广阔应用前景。
文摘目的·研究F-box蛋白38(F-box only protein 38,FBXO38)对眼部黑色素瘤增殖的作用以及潜在的调控通路。方法·使用FBXO38短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)和FBXO38过表达质粒构建FBXO38敲低以及过表达的人皮肤黑色素瘤A375和葡萄膜黑色素瘤OMM2.3细胞系,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和Western blotting在转录和蛋白水平验证FBXO38的敲低和过表达效率。通过克隆形成实验、BrdU免疫荧光染色和CCK8细胞增殖实验,探究FBXO38对黑色素瘤细胞增殖的影响。使用肿瘤基因组图谱计划数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA),分析FBXO38高表达和低表达组中的差异表达基因,并进行京都基因与基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集,揭示与FBXO38相关的信号通路。进一步通过CCK8细胞增殖实验检测信号通路抑制剂对不同FBXO38表达量细胞的抑制率。同时通过qRT-PCR和Western blotting,验证在敲低FBXO38之后该通路是否激活。结果·qRT-PCR和Western blotting验证A375和OMM2.3细胞系中的FBXO38的mRNA及蛋白质表达水平,发现与对照组相比敲低组的FBXO38表达水平下降,与野生型相比过表达组的FBXO38的表达水平提高(P<0.05)。克隆形成实验、BrdU免疫荧光染色和CCK8细胞增殖实验显示,敲低FBXO38显著增强A375和OMM2.3细胞的增殖能力(P<0.05),反之过表达FBXO38抑制A375和OMM2.3细胞增殖(P<0.05)。KEGG通路富集分析显示,在皮肤黑色素瘤和葡萄膜黑色素瘤中,FBXO38的表达影响磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K-Akt)通路激活。与对照组相比,PI3K抑制剂LY294002和mTOR1抑制剂Everolimus对FBXO38敲低组的抑制率显著提升(P<0.05),对FBXO38过表达组的抑制率则显著下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,敲低FBXO38之后,与PI3K-Akt通路相关的PTEN、P21和P53蛋白水平下降,而MDM2蛋白水平上升。qRT-PCR结果显示在FBXO38敲低细胞中P53转录水平显著下降(P<0.05),而MDM2转录水平显著上升(P<0.05)。结论·FBXO38通过PI3K-Akt信号通路参与调控眼部黑色素瘤细胞的增殖。
