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转基因小鼠中外源基因遗传及表达稳定性的研究 被引量:6
1
作者 颜景斌 肖艳萍 +3 位作者 方彧聃 奚鹰 黄文英 黄英 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期758-760,T001,共4页
Two transgenic mouse strains , in which the expression of human factor IX (hFIX) in the milk were different significantly, were bred, and the foreign gene integration as well as the content of hFIX in the milk were de... Two transgenic mouse strains , in which the expression of human factor IX (hFIX) in the milk were different significantly, were bred, and the foreign gene integration as well as the content of hFIX in the milk were detected by PCR, Southern blot, FISH and ELISA, respectively. The results showed that approximately 50% offsprings were transgenic positive. Foreign gene integrated in mouse chromosomes was intact. The hFIX expression of each mouse in the same strain was different, the content of hFIX in the milk was (43.32±5.41)μg/mL in FIX-33 transgenic strain and (1.16±0.45)μg/mL in FIX-124 transgenic strain. Meanwhile, the hFIX gene expression between the two strains was different remarkably (P<0.01). We conclude that the characteristics of inheritance and expression in the founder were able to be transferred to their offsprings stably. 展开更多
关键词 转基因小鼠 外源基因 遗传 表达稳定性
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应用人SRY基因探针对2例性分化异常患者的分子细胞遗传学研究
2
作者 黄英 任兆瑞 曾溢滔 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1994年第11期678-679,共2页
应用人SRY基因探针对2例性分化异常患者的分子细胞遗传学研究上海市儿童医院,上海医学遗传研究所黄英,任兆瑞,曾溢滔哺乳动物Y染色体短臂上性别决定的主宰基因SRY(SexdeterminingregisnoftheY)... 应用人SRY基因探针对2例性分化异常患者的分子细胞遗传学研究上海市儿童医院,上海医学遗传研究所黄英,任兆瑞,曾溢滔哺乳动物Y染色体短臂上性别决定的主宰基因SRY(SexdeterminingregisnoftheY)[1~3]是一个高度保守的,能编码... 展开更多
关键词 人SRY基因探针 性分化异常 分子细胞遗传学
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转人血清白蛋白基因试管牛的研究 被引量:11
3
作者 黄淑帧 黄英 +6 位作者 陈美珏 陈巍 黄赞 李华 李景春 任兆瑞 曾溢滔 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第7期573-579,共7页
构建了含人血清白蛋白(hALB)基因的cDNA全序列、内含子1以及山羊β-酪蛋白基因启动子和5’端上游调控序列在内的乳腺表达载体pcDNA3.1-GCALBm,并通过显微注射将其导入经过体外受精(IVF)的奶牛受精卵中,体外培养到桑椹胚后期,... 构建了含人血清白蛋白(hALB)基因的cDNA全序列、内含子1以及山羊β-酪蛋白基因启动子和5’端上游调控序列在内的乳腺表达载体pcDNA3.1-GCALBm,并通过显微注射将其导入经过体外受精(IVF)的奶牛受精卵中,体外培养到桑椹胚后期,取出少许细胞,应用巢式PCR对其进行目的基因整合及性别的预鉴定,将10枚整合胚移植于8头受体母牛,结果有3头妊娠,受孕率为37.5%(3/8),其中2头于妊娠中期流产,另有1头足月分娩产下1头有人血清白蛋白基因整合的雄性转基因试管牛,转基因实验的总有效率为12.5%(1/8)。 展开更多
关键词 体外受精 转基因牛 乳腺生物反应器 hALB
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氯化高铁血红素诱导K562细胞中β-珠蛋白基因表达的研究 被引量:2
4
作者 贾春平 陈美珏 +1 位作者 黄淑帧 曾溢滔 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期399-402,共4页
以绿色荧光蛋白(EGFP)基因为报道基因,构建了在β-珠蛋白启动子驱动及HS2元件调控下的重组表达载体HG,用脂质体转染法将其转染到K562细胞中,并用RT-PCR方法及流式细胞仪检测氯化高铁血红素(Hm)对K562细胞中β-珠蛋白基因表达及重组... 以绿色荧光蛋白(EGFP)基因为报道基因,构建了在β-珠蛋白启动子驱动及HS2元件调控下的重组表达载体HG,用脂质体转染法将其转染到K562细胞中,并用RT-PCR方法及流式细胞仪检测氯化高铁血红素(Hm)对K562细胞中β-珠蛋白基因表达及重组载体HG在K562细胞中瞬时表达的影响。结果显示:用30μmol/L Hm诱导K562细胞24、28及72h后,不仅其γ-珠蛋白mRNA水平升高,其β-珠蛋白mRNA水平也明显上升,而且这种诱导作用在诱导24、48h后比较明显;Hm还可增强重组表达载体HG在K562细胞中的瞬时表达。提示Hm诱导红系分化的机理可能与γ-β-珠蛋白基因的转换机制相关。 展开更多
关键词 氯化高铁血红素 诱导 K562细胞 Β-珠蛋白 基因表达
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反义核酸对β-地中海贫血基因(IVS-2-654C→T)剪接缺陷抑制作用的研究 被引量:2
5
作者 宫澜 孙琼 +2 位作者 任兆瑞 黄淑帧 曾溢滔 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1997年第5期39-43,共5页
应用体外转录和体外剪接系统,以体外转录产生的特异性反义RNA封闭IVS-2-654→T突变基因中3’隐匿剪接位点和5’异常剪接位点,使之失去活性,以减少异常加工的mRNA,且部分恢复了正常剪接途径,其正常剪接mRNA的水平[β/(β十β... 应用体外转录和体外剪接系统,以体外转录产生的特异性反义RNA封闭IVS-2-654→T突变基因中3’隐匿剪接位点和5’异常剪接位点,使之失去活性,以减少异常加工的mRNA,且部分恢复了正常剪接途径,其正常剪接mRNA的水平[β/(β十β)]从处理前的0.25上升到处理后的0.46—0.61。研究结果提示了应用反义核酸临床治疗β-地贫(IVS-2-654C→T突变)的可能性。 展开更多
关键词 反义核酸 地中海贫血 基因剪接缺陷 基因治疗
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增强子作用机制的研究进展 被引量:5
6
作者 贾春平 曾溢滔 《生命科学》 CSCD 2002年第2期73-76,共4页
增强子是一个非常重要的顺式作用元件,可能以“开或关”或“渐进”方式来调控其相应基因的表达。“Looning”及“ Linking”模型可以解释增强子与启动子或其他顺式调控元件及反式因子的协同作用;尤其是增强子远距离调控的作用机制。
关键词 作用机制 研究进展 基因表达 顺式调控元件 增强子 绝缘子 作用模型
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中国人杜氏肌营养不良症患者基因缺失的研究 被引量:1
7
作者 陈美珏 任兆瑞 +2 位作者 仇效坤 盛敏 曾溢滔 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期249-252,共4页
作者应用从人类 Xp21区分离得的杜氏肌营养不良症(DMD)基因内的8种探针和肌营养不良蛋白基因的 cDNA 探针对69例无亲缘关系的 DMD 进行了基因分析。结果表明应用基因组探针可检测出9例(13%)在 Xp21区域内有不同程度的缺失,如应用系列 cD... 作者应用从人类 Xp21区分离得的杜氏肌营养不良症(DMD)基因内的8种探针和肌营养不良蛋白基因的 cDNA 探针对69例无亲缘关系的 DMD 进行了基因分析。结果表明应用基因组探针可检测出9例(13%)在 Xp21区域内有不同程度的缺失,如应用系列 cDNA 探针,基因缺失的检出率上升为56.5%。基因缺失的部位集中于 cDNA 探针8和7所检测的区域,占所有基因缺失患者的80%左右。这些结果有助于开展 DMD 的产前诊断。 展开更多
关键词 肌营养不良 DMD 基因缺失
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人类珠蛋白基因表达的遗传控制 被引量:3
8
作者 曾溢滔 任兆瑞 黄淑帧 《生物工程进展》 CSCD 1994年第1期49-53,共5页
人类珠蛋白基因表达的遗传控制曾溢滔,任兆瑞,黄淑帧(上海市儿童医院上海医学遗传研究所上海200040)一、血红蛋白的遗传人类珠蛋白基因可以说是基因组中最具有代表性的基因,不仅由于它本身的遗传复杂性是研究人类基因组结构... 人类珠蛋白基因表达的遗传控制曾溢滔,任兆瑞,黄淑帧(上海市儿童医院上海医学遗传研究所上海200040)一、血红蛋白的遗传人类珠蛋白基因可以说是基因组中最具有代表性的基因,不仅由于它本身的遗传复杂性是研究人类基因组结构及其表达的理想材料,而且珠蛋白基因... 展开更多
关键词 人类 珠蛋白 基因表达 遗传控制
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可用于基因表达研究的转基因小鼠乳腺上皮细胞模型的构建 被引量:1
9
作者 蒋世忠 闫亚彬 +3 位作者 谢飞 王娟 黄英 任兆瑞 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期955-960,共6页
目的建立转基因小鼠乳腺上皮细胞模型,为研究乳腺内环境因素调控外源基因的表达和制备高效表达外源基因的乳腺生物反应器提供研究平台。方法通过机械破碎和胶原酶消化的方法获取人转铁蛋白(hTF)转基因小鼠的乳腺上皮细胞,并进行体外原... 目的建立转基因小鼠乳腺上皮细胞模型,为研究乳腺内环境因素调控外源基因的表达和制备高效表达外源基因的乳腺生物反应器提供研究平台。方法通过机械破碎和胶原酶消化的方法获取人转铁蛋白(hTF)转基因小鼠的乳腺上皮细胞,并进行体外原代培养。经胰蛋白酶纯化后,绘制乳腺上皮细胞生长曲线;免疫组织化学方法检测角蛋白18的表达;透射电子显微镜(透射电镜)观察乳腺上皮细胞超微结构;流式细胞仪检测细胞周期分布;显微镜下分析乳腺上皮细胞核型。将牛催乳素真核表达载体(pCMV-bPRL)转染至转基因乳腺上皮细胞中,检测外源bPRL的表达。结果乳腺上皮细胞生长曲线呈"S"形;免疫荧光组织化学分析结果显示hTF转基因小鼠乳腺上皮细胞角蛋白18呈阳性表达;透射电镜观察发现乳腺上皮细胞胞核较大、偏位,有双核或多核,胞质丰富,空泡、粗面内质网、高尔基体丰富;流式细胞仪检测结果显示:乳腺上皮细胞增殖活跃,G2/M期+S期细胞占15%;细胞核型分析结果显示处于分裂期的细胞具有正常的二倍体,染色体完整。pCMV-bPRL转染乳腺上皮细胞24 h后,上清液中检测到bPRL的表达。结论体外培养的转基因乳腺上皮细胞具有类似体内细胞的生物学特征,并可表达真核表达载体,为研究环境因素对乳腺功能的影响及制备乳腺生物反应器提供了一种细胞模型。 展开更多
关键词 转基因小鼠 乳腺上皮细胞 真核表达载体 牛催乳素
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性分化异常病人的SRY基因研究
10
作者 黄英 陈美珏 +1 位作者 孙琼 曾溢滔 《医学研究杂志》 1995年第12期23-24,共2页
性别决定是生物学和医学研究的重大课题,长期以来一直吸引着各国科学家的兴趣,研究焦点集中在对雄性决定因子的研究。1959年,首次阐明了Y染色体是决定人类和其他哺乳动物的雌性表型;1966年,将雄性决定区定位在Y染色体短臂;70年代后,随... 性别决定是生物学和医学研究的重大课题,长期以来一直吸引着各国科学家的兴趣,研究焦点集中在对雄性决定因子的研究。1959年,首次阐明了Y染色体是决定人类和其他哺乳动物的雌性表型;1966年,将雄性决定区定位在Y染色体短臂;70年代后,随着分子生物学的迅速发展,雄性决定因子被精确定位在Yp1区,直至1990年发现的SRY基因(sex 展开更多
关键词 染色体 性别决定 性决定因子 哺乳动物 医学研究 重大课题 基因序列 分子生物学 研究焦点 精确定位
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内部核糖体进入位点研究现状及应用展望
11
作者 颜景斌 曾溢滔 《生命的化学》 CAS CSCD 2001年第6期483-484,共2页
关键词 IRES 内部核糖体进入位点 转基因动物 应用
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遗传病基因诊断的现状和未来
12
作者 任兆瑞 曾溢滔 《生命科学》 CSCD 1992年第1期7-10,共4页
遗传病的基因诊断是本世纪70年代末在重组DNA技术的基础上迅速发展起来的一项高技术,它的问世,标志着人们对疾病的认识已从传统的表型诊断步入基因型诊断或称逆诊断(reverse diagnosis)的新阶段,成为现代分子生物学和分子遗传学的理论... 遗传病的基因诊断是本世纪70年代末在重组DNA技术的基础上迅速发展起来的一项高技术,它的问世,标志着人们对疾病的认识已从传统的表型诊断步入基因型诊断或称逆诊断(reverse diagnosis)的新阶段,成为现代分子生物学和分子遗传学的理论和技术与医学相结合的典范。近十多年来,遗传病的基因诊断在国内外都取得了相当的发展。这不仅表现在基因诊断技术的不断更新,使越来越多的导致遗传病发生的分子缺陷或突变的本质被揭示;而且基因诊断的实用性也不断提高。 展开更多
关键词 遗传病 基因诊断
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羟基脲(Hu)治疗β-地中海贫血的研究——Hu对珠蛋白基因表达的影响
13
作者 黄淑帧 任兆瑞 +5 位作者 陈美珏 许洪平 曾溢滔 G.P.Rodgers 曾凡一 A.N.Schechter 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1993年第7期1-5,共5页
关键词 地中海贫血 珠蛋白 羟基脲 基因
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中国人亨廷顿舞蹈病的分子诊断研究
14
作者 任兆瑞 《医学研究杂志》 1999年第9期15-15,共1页
亨廷顿舞蹈病(Hungtington’s dis-ease,简称HD)是一种典型的常染色体显性遗传病。其特征是进行性中枢神经系统退行性病变,一般在中年时期发病,以后10~20年进行性加重,临床表现为慢性舞蹈样动作及性格、精神和智力等方面的异常,最后导... 亨廷顿舞蹈病(Hungtington’s dis-ease,简称HD)是一种典型的常染色体显性遗传病。其特征是进行性中枢神经系统退行性病变,一般在中年时期发病,以后10~20年进行性加重,临床表现为慢性舞蹈样动作及性格、精神和智力等方面的异常,最后导致死亡。目前该病的生化缺陷机制仍不清楚,临床上也没有有效的治疗方法。 展开更多
关键词 亨廷顿舞蹈病 诊断研究 分子诊断 常染色体显性遗传病 中枢神经系统 退行性病变 进行性 临床表现 分子遗传学 治疗方法
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遗传病基因诊断技术(上)
15
作者 黄淑帧 曾溢滔 《上海医学检验杂志》 1990年第2期121-122,共2页
随着分子生物学的进展和重组DNA技术的进步,我们已能在DNA分子水平上对异常或缺陷的基因进行分析或检测,从而能在人体发育的任何时期对相应的遗传性疾病进行诊断。因为人体基因组(DNA)的类型从受精卵开始即已形成,只要获得受检者的基因... 随着分子生物学的进展和重组DNA技术的进步,我们已能在DNA分子水平上对异常或缺陷的基因进行分析或检测,从而能在人体发育的任何时期对相应的遗传性疾病进行诊断。因为人体基因组(DNA)的类型从受精卵开始即已形成,只要获得受检者的基因组DNA,应用恰当的DNA分析技术,便能鉴定出缺陷的基因,而不论该基因产物是否已经表达,开创了绕过基因产物通过直接检测基囚来诊断遗传疾病的新纪元。 展开更多
关键词 遗传病 基因 诊断
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构建反义RNA表达载体对β-地中海贫血进行基因治疗研究
16
作者 黄淑帧 任兆瑞 +5 位作者 曾溢滔 顾小锋 宫澜 陈云弟 盛敏 陈美珏 《医学研究通讯》 2003年第8期14-14,共1页
β地中海贫血(简称β地贫)是常见的、严重危害人民身体健康的遗传性血液病,在我国南方(两广地区)的发病率约为1%.该病目前尚无有效的根治方法,患者只有依赖定期输血才能维持其生命,但输血过度将引起铁质大量沉积,最终导致心力衰竭而过... β地中海贫血(简称β地贫)是常见的、严重危害人民身体健康的遗传性血液病,在我国南方(两广地区)的发病率约为1%.该病目前尚无有效的根治方法,患者只有依赖定期输血才能维持其生命,但输血过度将引起铁质大量沉积,最终导致心力衰竭而过早地夭亡.因此,探索β地贫治疗途径是疾病防治工作的一项重要任务. 展开更多
关键词 β—地中海贫血 基因治疗 反义RNA 治疗
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遗传病的基因治疗
17
作者 任兆瑞 邱信芳 +1 位作者 薛京伦 曾溢滔 《科学》 1995年第4期22-26,3,共5页
基因治疗是指在基因水平上对人类遗传病进行治疗。具体地说,是利用基因转移或基因调控的手段,将正常基因转入疾病患者机体细胞内,取代突变基因,表达所缺乏的基因产物;或通过基因调控的方法,有目的地抑制异常基因表达或重新开启已关闭的... 基因治疗是指在基因水平上对人类遗传病进行治疗。具体地说,是利用基因转移或基因调控的手段,将正常基因转入疾病患者机体细胞内,取代突变基因,表达所缺乏的基因产物;或通过基因调控的方法,有目的地抑制异常基因表达或重新开启已关闭的基因,达到治疗某些人类遗传病的方法。自1990年9月14日世界首例 展开更多
关键词 遗传病 基因治疗 核酸
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反义c-fos寡脱氧核苷酸对淋巴瘤细胞株SAC-IIB_2恶性表型抑制的研究 被引量:4
18
作者 殷连华 孔宪寿 +1 位作者 严开平 郑颂国 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1997年第1期58-60,共3页
已发现SAC-IIB_2淋巴瘤细胞株中原癌基因c-fos呈过度表达.针对小鼠c-fos cDNA第2-7编码序列,设计合成了18聚反义、正义和无义的寡脱氧核苷酸.结果发现,反义c-fos寡脱氧核苷酸能促使SAC-IIB_2的细胞形态向成熟阶段分化并抑制其增殖速率,... 已发现SAC-IIB_2淋巴瘤细胞株中原癌基因c-fos呈过度表达.针对小鼠c-fos cDNA第2-7编码序列,设计合成了18聚反义、正义和无义的寡脱氧核苷酸.结果发现,反义c-fos寡脱氧核苷酸能促使SAC-IIB_2的细胞形态向成熟阶段分化并抑制其增殖速率,同时降低其对裸鼠的致瘤性及Fos蛋白的表达,但对SAC-IIB_2的细胞动力学没有明显的影响.而正义和无义的c-fos寡脱氧核苷酸没有相应的作用.提示反义c-fos寡脱氧核苷酸能特异地抑制小鼠淋巴瘤SAC-IIB_2细胞的恶性表型. 展开更多
关键词 淋巴瘤 细胞株 c-fox 寡脱氧核苷酸 反义技术
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中国人β-珠蛋白基因-530基序的变异性研究 被引量:1
19
作者 周刚 曾凡一 +3 位作者 陈美珏 任兆瑞 黄淑帧 曾溢滔 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1996年第6期419-424,共6页
应用双链DNA循环测序法,对中国人群中20例血液学正常个体,77例β-珠蛋白合成异常患者(43例)及其部分亲属(34例)的β珠蛋白基因上游-530基序进行了序列分析。结果表明,中国人-530基序存在(AT)_8T_5... 应用双链DNA循环测序法,对中国人群中20例血液学正常个体,77例β-珠蛋白合成异常患者(43例)及其部分亲属(34例)的β珠蛋白基因上游-530基序进行了序列分析。结果表明,中国人-530基序存在(AT)_8T_5、(AT)7_T_7和(AT)9_T_5三种主要的重排类型,以及一种未见报道的稀有重排类型(AT)_(10)T_3。进一步经家系连锁分析,获得由β珠蛋白结构基因与-530基序重排组成的单体型,结果显示IVS-II-654(C→T),CD41-42(-4bp)和HbE等类型的β珠蛋白突变基因分别与(AT)_8T_5、(AT)_7T_7和(AT)_9T_5重排存在着连锁不平衡现象。 展开更多
关键词 人类遗传学 β珠蛋白基因 结构重排
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造血干细胞子宫内移植研究进展
20
作者 颜景斌 《国外医学(遗传学分册)》 2003年第5期260-262,共3页
由于胎儿发育早期免疫系统尚未发育成熟 ,使得造血干细胞子宫内移植成为了可能。本文阐述了该技术实施的可行性及优越性 ,以及移植的时机。
关键词 造血干细胞 子宫内移植 免疫系统 供体细胞
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