U1RNP70KD,Sm-D,SSB及β2GP1自身抗原的重组表达及临床研究

1

作者 沈南 吕良敬 +6 位作者 陈顺乐 薛峰 陆瑜 杨程德 郑捷 赵阴环 叶萍 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期263-266,共4页

目的　制备U1RNP70KD ,Sm D ,SSB及 β2GP1重组自身抗原 ,探讨自身免疫性疾病的机理及提高临床自身抗体检测的敏感性和特异性。方法　应用逆转录PCR方法克隆 β2GP1及其第 5功能区 (D5 ) ,U1RNP70KD及其U1RNA结合功能区 (BD) ,Sm D和SS... 目的　制备U1RNP70KD ,Sm D ,SSB及 β2GP1重组自身抗原 ,探讨自身免疫性疾病的机理及提高临床自身抗体检测的敏感性和特异性。方法　应用逆转录PCR方法克隆 β2GP1及其第 5功能区 (D5 ) ,U1RNP70KD及其U1RNA结合功能区 (BD) ,Sm D和SSB的编码基因 ,经原核表达系统 (PGEX 2T)进行表达、鉴定及纯化 ,并分析 β2GP1及U1RNP70KD抗原表位的定位 ,进而以重组抗原为基质建立新型免疫印迹及酶联免疫吸附检测法。结果　成功表达纯化了上述重组抗原 ;定位研究显示 β2GP1 D5及U1RNA BD分别为 β2GP1及U1RNP70KD的主要抗原表位区域 ;新型重组检测法的测定结果与常规检测系统比较基本相吻合。结论　重组蛋白具有良好的特异性 ,可进一步作为抗原表位研究的手段 ,并可用于临床自身抗体检测。 展开更多

关键词 重组表达 自身抗原 基因克隆 自身免疫性疾病

下载PDF 职称材料

性激素雌激素受体与红斑狼疮的免疫失调 被引量：2

2

作者 张晓 陈顺乐 《国外医学（免疫学分册）》 北大核心 1991年第3期138-141,共4页

性激素(特别是雌激素)与SLE 密切相关,它可通过与胸腺、免疫活性细胞、中枢神经系统及骨髓中的雌激素受体结合,导致胸腺素产生减少、Ts 细胞活性受抑制、免疫复合物清除降低。雄激素则通过减少雌激素受体维持Ts 细胞活性、增加免疫复合... 性激素(特别是雌激素)与SLE 密切相关,它可通过与胸腺、免疫活性细胞、中枢神经系统及骨髓中的雌激素受体结合,导致胸腺素产生减少、Ts 细胞活性受抑制、免疫复合物清除降低。雄激素则通过减少雌激素受体维持Ts 细胞活性、增加免疫复合物的清除。故应用雄激素制剂和雌激素拮抗剂治疗SLE,可望缓解。 展开更多

关键词 红斑狼疮 性激素 雌激素 系统性

下载PDF 职称材料

自身核抗原U1RNP 70 kD多肽全长基因克隆及鉴定 被引量：3

3

作者 沈南 薛峰 +1 位作者 陆瑜 陈顺乐 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期15-18,共4页

应用逆转录ＰＣＲ方法从Ｈｅｌａ细胞中成功地克隆了编码自身核抗原Ｕ１ＲＮＰ７０ｋＤ多肽的全长基因，将此基因重组入原核表达载体系统ＰＧＥＸ－２Ｔ中，以限制性酶切及核苷酸测序鉴定扩增的ＤＮＡ片段，经计算机分析，基因全长１．... 应用逆转录ＰＣＲ方法从Ｈｅｌａ细胞中成功地克隆了编码自身核抗原Ｕ１ＲＮＰ７０ｋＤ多肽的全长基因，将此基因重组入原核表达载体系统ＰＧＥＸ－２Ｔ中，以限制性酶切及核苷酸测序鉴定扩增的ＤＮＡ片段，经计算机分析，基因全长１．３ｋｂ，编码４３７个氨基酸，并进行了基因同源性比较。结果表明，克隆得到的基因与Ｇｅｎｂａｎｋ报道的完全一致，蛋白质一级结构分析表明编码的７０ｋＤ多肽在羧基片段有３个可能的抗原性区域，该多肽的抗原表位可能主要存在于羧基半段上，为重组蛋白的表达及抗原表位的定位研究奠定基础。 展开更多

关键词 自身抗原 多肽 基因克隆 鉴定

下载PDF 职称材料

应用免疫印迹技术检测抗Scl-70和抗Jo-1抗体 被引量：4

4

作者 许以华 陈顺乐 +3 位作者 魏莹 金雅琴 叶萍 黄铭新 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1990年第5期292-294,共3页

本文通过对兔胸腺可抽提核抗原(ENA)制备方法的改良应用免疫印迹技术(IBT)检测抗Scl-70与抗 Jo-1抗体,对 157例各种风湿性疾病及 36名正常人的对照研究,表明 70 kD(Scl-70)多肽抗体是进行性系统性硬化症(PSS)伴弥漫性硬皮病(DS)的标记抗... 本文通过对兔胸腺可抽提核抗原(ENA)制备方法的改良应用免疫印迹技术(IBT)检测抗Scl-70与抗 Jo-1抗体,对 157例各种风湿性疾病及 36名正常人的对照研究,表明 70 kD(Scl-70)多肽抗体是进行性系统性硬化症(PSS)伴弥漫性硬皮病(DS)的标记抗体,阳性率为45.5％,而55kD(Jo-1)多肽抗体是多发性肌炎(PM)的标记抗体,阳性率为25％。 展开更多

关键词 免疫印迹 ScI-70 抗Jo-I抗体

原文传递

抗磷脂抗体综合征发病机制的研究现状 被引量：4

5

作者 杨程德 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 1997年第A01期55-57,共3页

抗磷脂抗体综合征发病机制的研究现状杨程德（综述）陈顺乐（审校）抗磷脂抗体综合征（ａｎｔｉｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＡＰＳ）的主要临床表现为复发性动脉、静脉血栓形成、多发性流产和血小板减少症等症状。ＡＰ... 抗磷脂抗体综合征发病机制的研究现状杨程德（综述）陈顺乐（审校）抗磷脂抗体综合征（ａｎｔｉｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＡＰＳ）的主要临床表现为复发性动脉、静脉血栓形成、多发性流产和血小板减少症等症状。ＡＰＳ患者血清中存在高滴度的抗磷脂抗体... 展开更多

关键词 抗磷脂抗体综合征 发病机制 内皮细胞 血小板减少症 分子复合物 抗凝血酶原抗体 磷脂结合蛋白 功能区 血栓形成 抗心磷脂抗体

原文传递

狼疮带试验对系统性红斑狼疮诊断价值的再探讨 被引量：1

6

作者 陈顺乐 王健华 +1 位作者 陶瑞翔 沈芬 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期158-159,共2页

皮肤狼疮带试验(以下简称 LBT)对系统性红斑狼疮(以下简称 SLE)的诊断价值已为国内外学者们所肯定。本文在我室1983年工作的基础上,就 LBT 检测各部位的敏感性,各种免疫球蛋白和补体在 LBT 中沉积的阳性率、激素剂量、疗程及病程对 LBT... 皮肤狼疮带试验(以下简称 LBT)对系统性红斑狼疮(以下简称 SLE)的诊断价值已为国内外学者们所肯定。本文在我室1983年工作的基础上,就 LBT 检测各部位的敏感性,各种免疫球蛋白和补体在 LBT 中沉积的阳性率、激素剂量、疗程及病程对 LBT 的影响等方面进行探讨,现将结果报道如下。 展开更多

关键词 红斑狼疮 系统性 狼疮带试验

下载PDF 职称材料

系统性红斑狼疮诊治之我见 被引量：1

7

作者 陈顺乐 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期257-259,共3页

关键词 系统性红斑狼疮 诊断 治疗 SLE

下载PDF 职称材料

人Fas全长cDNA的克隆和序列分析

8

作者 裴军 沈南 +2 位作者 薛峰 王元 陈顾乐 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1999年第S1期4-6,共3页

目的克隆人Fas基因。方法采用RT-PCR技术从EB病毒转化的人B淋巴细胞株中扩增包含全长阅读框架的FascDNA，与pGEM-T质粒连接，经测序验证。结果RT-PCR扩增Fas的PCR产物经限制性内切酶后生成的片段符合预期大小。氨节育抗性的克隆经测序... 目的克隆人Fas基因。方法采用RT-PCR技术从EB病毒转化的人B淋巴细胞株中扩增包含全长阅读框架的FascDNA，与pGEM-T质粒连接，经测序验证。结果RT-PCR扩增Fas的PCR产物经限制性内切酶后生成的片段符合预期大小。氨节育抗性的克隆经测序证实得到的正常人FSS与首次文献报道Fas基因有2个碱基的差异。结论本研究用RT-PCR方法克隆了正常人Fas全长cDNA，为进一步研究Fas的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 FAS基因 序列分析 克隆

下载PDF 职称材料

100例系统性红斑狼疮患者的肺间质病变初探 被引量：27

9

作者 黄文群 陈顺乐 +2 位作者 顾越英 鲍春德 杨程德 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期260-262,共3页

目的　调查系统性红斑狼疮 (SLE)患者肺间质病变 (ILD)的发生率及临床表现 ,并根据临床、影像学及肺功能检查制定新的分型方法。方法　随机对 10 0例SLE患者进行胸片 ,高分辨CT扫描 (HRCT) ,肺功能和动脉血氧分压的同步测定。结果　HRC... 目的　调查系统性红斑狼疮 (SLE)患者肺间质病变 (ILD)的发生率及临床表现 ,并根据临床、影像学及肺功能检查制定新的分型方法。方法　随机对 10 0例SLE患者进行胸片 ,高分辨CT扫描 (HRCT) ,肺功能和动脉血氧分压的同步测定。结果　HRCT诊断SLE患者的ILD阳性率为 77% (77/10 0 ) ,其敏感性高于胸片(38% )。 77例HRCT有ILD者肺功能和动脉血氧分压异常 ,分别为 35 .1%和 6 %。提出SLE合并ILD的临床分型新方法。分 3型 :临床前期型 ,急性肺泡炎型和慢性肺间质病变型。 77例HRCT阳性者分型分别为 92 .2 %(71/77) ,2 .6 % (2 /77) ,5 .2 % (4/77)。结论　SLE患者进行肺HRCT的检查 ,结合肺功能检查能发现早期ILD。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 肺间质病变 发生率 分型

下载PDF 职称材料

可抽提核抗原(ENA)的抗原性多肽研究 被引量：10

10

作者 陈顺乐 许以华 +2 位作者 袭燕 叶萍 黄铭新 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1990年第2期117-119,共3页

目前国内在ENA抗体的检测上主要是应用商品化的猪脾ENA与兔胸腺ENA,为了评价和比较这二种不同组织来源ENA在ENA抗体检测上的敏感性,本文用免疫印迹技术(IBT)从分子水平比较它们所含的Sm,RNP,SSB及SSA抗原性多肽数量和分子量的差异,并用... 目前国内在ENA抗体的检测上主要是应用商品化的猪脾ENA与兔胸腺ENA,为了评价和比较这二种不同组织来源ENA在ENA抗体检测上的敏感性,本文用免疫印迹技术(IBT)从分子水平比较它们所含的Sm,RNP,SSB及SSA抗原性多肽数量和分子量的差异,并用IBT与CIE二法比较测定ENA抗体的敏感性。 展开更多

关键词 ENA 抗原性 多肽

原文传递

抗68KD核糖核蛋白抗体的临床意义探讨 被引量：4

11

作者 许以华 沈南 +1 位作者 叶萍 陈顺乐 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1990年第6期356-359,共4页

近年来在抗核抗体谱的研究中,应用免疫印迹技术(IBT)证实细胞核中分子量为68KD的核糖核蛋白具有RNP抗原性。Pette-rsson等认为抗68KD多肽抗体可能是混合性结缔组织病(MCTD)的血清标记抗体。为了明确抗68K多肽抗体在MCTD诊断上的意义,本... 近年来在抗核抗体谱的研究中,应用免疫印迹技术(IBT)证实细胞核中分子量为68KD的核糖核蛋白具有RNP抗原性。Pette-rsson等认为抗68KD多肽抗体可能是混合性结缔组织病(MCTD)的血清标记抗体。为了明确抗68K多肽抗体在MCTD诊断上的意义,本文应用IBT法分别对MCTD与系统性红斑狼疮(SLE)患者进行抗68K多肽抗体的研究,并探讨其临床意义。 展开更多

关键词 抗68KD抗体 多肽抗体

原文传递

重组自身抗原U1RNP多肽的制备及在风湿病诊断中的意义 被引量：2

12

作者 薛峰 沈南 +1 位作者 陆瑜 陈顺乐 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期340-343,共4页

制备重组核抗原Ｕ１ＲＮＰ多肽，为探讨自身免疫性疾病的机理及提高临床自身抗体检测敏感特异性奠定基础。方法对１２０例经对流免疫电泳证实的ＲＮＰ抗体阳性血清，以重组抗原为基质进行了印迹法测定。结果重组抗原具有分子量７０００... 制备重组核抗原Ｕ１ＲＮＰ多肽，为探讨自身免疫性疾病的机理及提高临床自身抗体检测敏感特异性奠定基础。方法对１２０例经对流免疫电泳证实的ＲＮＰ抗体阳性血清，以重组抗原为基质进行了印迹法测定。结果重组抗原具有分子量７００００多肽抗原性，１１５例抗ＲＮＰ７００００抗体阳性血清中有１１２例可识别重组抗原，分子量为７００００（ｒ７００００），阳性率为９７．４％，而５例ＲＮＰ阴性血清及５例正常人血清均不识别ｒ７００００。结论ｒ７００００具有良好的核抗原ＲＮＰ７００００多肽的特异性，可进一步作为抗原表位研究的手段。 展开更多

关键词 抗原U1RNP 多肽 风湿病 诊断

原文传递

系统性红斑狼疮十年随访 被引量：6

13

作者 陈顺乐 吴建农 +1 位作者 顾越英 鲍春德 《风湿病学杂志》 CSCD 1997年第2期4-6,共3页

报道50例SLE患者的10年(1980年～1990年)随访结果。10年的生存率情况,以发病时间计算,其一年、五年、十年生存率分别为98％、98％、84％,以确诊时间计算,则分别为98％、86％、76％。本组患者十年中死亡12例(24％),感染与肾功能衰竭为两... 报道50例SLE患者的10年(1980年～1990年)随访结果。10年的生存率情况,以发病时间计算,其一年、五年、十年生存率分别为98％、98％、84％,以确诊时间计算,则分别为98％、86％、76％。本组患者十年中死亡12例(24％),感染与肾功能衰竭为两大主要死因,分别占33％及33％。74％存活的患者能很好工作与生活,12例患者病情缓解,平均缓解时间4年(2年～9年)随访,结果表明SLE的早期诊断,以及预防感染与肾衰是进一步降低SLE死亡率的两大关键。 展开更多

关键词 系统性 红斑狼疮 生存率 肾功能衰竭 感染

原文传递

阳离子DNA抗体与狼疮肾炎的关系 被引量：3

14

作者 康向东 陈顺乐 +2 位作者 顾越英 鲍春德 沈南 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期224-225,223,共3页

为研究系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血阳离子抗体与狼疮肾炎的关系 ,本文采用制备型等电聚焦电泳、放射免疫测定及SDS PAGE电泳等方法对SLE肾炎患者及无肾炎患者外周血清中阳离子dsDNA抗体进行了分离和检测分析 ,结果表明 ,在SLE肾炎... 为研究系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血阳离子抗体与狼疮肾炎的关系 ,本文采用制备型等电聚焦电泳、放射免疫测定及SDS PAGE电泳等方法对SLE肾炎患者及无肾炎患者外周血清中阳离子dsDNA抗体进行了分离和检测分析 ,结果表明 ,在SLE肾炎患者外周血清中存在着高滴度的dsDNA抗体 ,而无肾炎患者则不存在这种抗体 。 展开更多

关键词 狼疮性肾炎 阳离子 DNA抗体 等电聚集电泳

原文传递

人β_2GP1第5功能区cDNA的分子克隆及重组表达

15

作者 杨程德 陈顺乐 +3 位作者 沈南 陆喻 叶萍 薛峰 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1997年第4期236-238,共3页

采用逆转录PCR技术自人胎肝细胞中克隆出人β_2GP1第5功能区cDNA,长度为298bp,经纯化后定向插入表达性载体pGEX-2T,并筛选出带有插入片段的阳性克隆,重组克隆经IPTG诱导,可产生约36kD的融合蛋白,为研究抗磷脂抗体所针对的抗原及表位奠... 采用逆转录PCR技术自人胎肝细胞中克隆出人β_2GP1第5功能区cDNA,长度为298bp,经纯化后定向插入表达性载体pGEX-2T,并筛选出带有插入片段的阳性克隆,重组克隆经IPTG诱导,可产生约36kD的融合蛋白,为研究抗磷脂抗体所针对的抗原及表位奠定了基础. 展开更多

关键词 重组蛋白 抗磷脂抗体 β2GP1 分子克隆

原文传递

习惯性流产者抗心磷脂抗体检测及其意义

16

作者 鲍春德 陈顺乐 +1 位作者 唐培忠 吴锦芝 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1993年第2期95-96,94,共3页

65例习惯性流产患者分为甲组(有妇产科原因)和乙组(不明原因)。检测结果表明,全部患者ACL的阳性率为18.5％,明显高于抗DNA、抗ENA抗体的检出率(P<0.01),乙组ACL的阳性率高于甲组,提示ACL在原发性习惯性流产的发病机理中起着一定的作... 65例习惯性流产患者分为甲组(有妇产科原因)和乙组(不明原因)。检测结果表明,全部患者ACL的阳性率为18.5％,明显高于抗DNA、抗ENA抗体的检出率(P<0.01),乙组ACL的阳性率高于甲组,提示ACL在原发性习惯性流产的发病机理中起着一定的作用。ACL阳性的患者对HCG的治疗反应比阴性组差(p<0.01),提示ACL阳性的习惯性流产者应采用其他的治疗方法如糖皮质激素加小剂量阿斯匹林等。 展开更多

关键词 抗磷脂抗体 习惯性流产 检测

原文传递

SLE患者单核吞噬细胞Fc-受体介导的清除功能

17

作者 李晓东 陈顺乐 +5 位作者 储谦 袁济民 顾越英 许明华 王建华 江绍基 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1989年第2期95-98,共4页

本文测定41例系统性红斑狼疮单核吞噬细胞系统Fc-受体的清除功能,发现其中26例有Fc-受体清除功能障碍,并与病情活动及肾脏累及有关。此外,Fc-受体清除功能障碍与CIC水平及抗ds-DNA抗体水平显著相关。

关键词 红斑狼疮 单核吞噬细胞 Fc-受体

原文传递