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Vasa基因在斑马鱼不同发育时期的mRNA表达分析 被引量:5
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作者 孙冬捷 王晨 严继舟 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期132-134,160,F0002,共5页
Vasa基因在果蝇中首次报道后,作为不同物种早期原始生殖细胞(PGC)标记基因被普遍接受。但对其研究都集中于早期胚胎,对性腺分化及成熟时期的Vasa表达及功能少有研究。RT-PCR结果显示,Vasa基因在整个发育阶段的表达量先上升再下降。荧光... Vasa基因在果蝇中首次报道后,作为不同物种早期原始生殖细胞(PGC)标记基因被普遍接受。但对其研究都集中于早期胚胎,对性腺分化及成熟时期的Vasa表达及功能少有研究。RT-PCR结果显示,Vasa基因在整个发育阶段的表达量先上升再下降。荧光定量PCR结果显示,在同一发育时期,精巢、卵巢表达量基本一致,卵巢略高于精巢。mRNA原位杂交显示,Vasa基因早期在斑马鱼生殖干细胞特异表达,随后在精巢表达于精原细胞和初级精母细胞,在卵巢表达于Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ时相卵母细胞。研究结果有助于鉴定斑马鱼生殖干细胞和进一步研究性分化和逆转的细胞机制。 展开更多
关键词 VASA基因 斑马鱼 mRNA表达分析
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斑马鱼组织石蜡切片质量的优化 被引量:14
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作者 郑伟 严继舟 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第11期260-263,共4页
斑马鱼作为模式生物已经广泛运用于生物学各个研究领域。传统方法制作的斑马鱼组织石蜡切片经常出现收缩、脆裂,主要原因是脱水和透明作用时间过长。为提高切片质量,本实验室摸索出了一套改善石蜡切片质量的方法:以组织透明作为标志,摸... 斑马鱼作为模式生物已经广泛运用于生物学各个研究领域。传统方法制作的斑马鱼组织石蜡切片经常出现收缩、脆裂,主要原因是脱水和透明作用时间过长。为提高切片质量,本实验室摸索出了一套改善石蜡切片质量的方法:以组织透明作为标志,摸索最短的脱水与透明时间,并适时采用脱水能力弱的脱水剂,提高了切片的质量,缩短了试验时间。我们以斑马鱼的心脏、肠、脾脏为材料进行石蜡切片,结果表明,改进后的组织结构完整清晰,基本无脆裂现象。本优化技术适合于小型动物的石蜡切片制作。 展开更多
关键词 石蜡切片 斑马鱼 透明 脱水剂
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西伯利亚鲟Tbx3基因的克隆和表达分析 被引量:2
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作者 张昊 范纯新 宋佳坤 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期158-164,共7页
Tbx3基因是一类重要的转录因子,在形态发生和器官形成中发挥着重要作用。该文克隆了西伯利亚鲟Tbx3基因(AbTbx3)cDNA的全长序列,该cDNA全长2908bp,包含一个2166bp的开放阅读框,编码721个氨基酸的多肽。分析表明:AbTbx3和人Tbx3的T-box... Tbx3基因是一类重要的转录因子,在形态发生和器官形成中发挥着重要作用。该文克隆了西伯利亚鲟Tbx3基因(AbTbx3)cDNA的全长序列,该cDNA全长2908bp,包含一个2166bp的开放阅读框,编码721个氨基酸的多肽。分析表明:AbTbx3和人Tbx3的T-box结构域蛋白序列同源性达到95.2%,三维结构也具有高度的相似性。系统进化分析表明:AbTbx3与其他物种的Tbx3聚为一支,并在一个大的分支上与Tbx2聚类。半定量RT-PCR显示,AbTbx3基因从西伯利亚鲟囊胚早期即开始表达,且随着发育表达渐强,至尾芽早期表达量达到最大,随后稍有下降;在成体的眼、脑、鳃、肠、胸鳍和腹鳍中有表达,在肝、血液、心脏、肾和肌肉中均未检测到其表达。整体原位杂交表明,在37期和43期仔鱼的耳泡、后脑、松果体和后部脊索中表达量较高,同时在背鳍芽中也有表达。综上结果表明:西伯利亚鲟Tbx3与人Tbx3在结构上高度同源,在胚胎、仔鱼和成体中呈时空特异性表达。 展开更多
关键词 西伯利亚鲟 软骨硬鳞鱼 Tbx3 结构 表达
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Tbx5基因在牙鲆变态初期的表达
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作者 邹莎 范纯新 +2 位作者 周婷婷 张昊 宋佳坤 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期650-656,共7页
鲽形目鱼类仔鱼经过变态后形成眼睛和偶鳍等器官左右不对称的稚鱼。Tbx家族成员参与脊椎动物心脏、肢体和眼等器官的发育,而Tbx基因与鲽形目鱼类变态的关系目前尚无报道。运用扫描电镜和软硬骨染色等方法对出膜后2 d(变态早期)和26 d(... 鲽形目鱼类仔鱼经过变态后形成眼睛和偶鳍等器官左右不对称的稚鱼。Tbx家族成员参与脊椎动物心脏、肢体和眼等器官的发育,而Tbx基因与鲽形目鱼类变态的关系目前尚无报道。运用扫描电镜和软硬骨染色等方法对出膜后2 d(变态早期)和26 d(变态前期)的牙鲆仔鱼的形态进行观察,牙鲆出膜后2 d胸鳍原基出现,出膜后26 d胸鳍发育成熟,而在出膜后26 d胸鳍和腹鳍仍左右对称。我们克隆了牙鲆Tbx5基因的CDS序列,该序列编码的多肽具有部分T-box保守结构域,与斑马鱼Tbx5同源性高达93%。系统进化分析显示:这段CDS序列与硬骨鱼的Tbx5基因聚为一支,但与四足动物Tbx5相分离。整体原位杂交显示出膜后26 d的牙鲆仔鱼中,Tbx5基因不仅在胸鳍、眼背侧、脊柱和尿囊表达,且在胸鳍和眼背侧的表达呈现左右不对称,左侧面(有眼侧)的表达量均高于右侧面(无眼侧)的表达量。综上结果显示,牙鲆Tbx5基因可能参与了变态过程中眼睛与胸鳍左右不对称的形成。 展开更多
关键词 牙鲆 TBX5基因 胸鳍 眼睛 表达
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