载体和基因片段的选择对戊型肝炎病毒基因免疫抗原表达的影响 被引量：4

1

作者 房雪峰 王立新 +3 位作者 孟继鸿 董晨 田华 翟理杰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期22-25,共4页

目的比较不同载体和不同大小的目的基因片段对戊型肝炎病毒(HEV)基因免疫抗原表达的影响,为基于HEV中和抗原表位的HEV基因免疫提供一定的依据。方法将含Ⅳ型HEV中国株中和抗原表位的p166和p179片段编码基因分别克隆入pTR421和pCDNA3.1... 目的比较不同载体和不同大小的目的基因片段对戊型肝炎病毒(HEV)基因免疫抗原表达的影响,为基于HEV中和抗原表位的HEV基因免疫提供一定的依据。方法将含Ⅳ型HEV中国株中和抗原表位的p166和p179片段编码基因分别克隆入pTR421和pCDNA3.1两种真核表达载体,用脂质体介导基因转染HepG2人肝癌细胞系,经间接免疫荧光和Western blot分析以及将质粒注射小鼠局部肌肉组织后经免疫组织化学染色检测,分析目的基因在体内外的表达水平。结果成功构建了pTR421-166、pTR421-179、pCDNA3.1-166和pCDNA3.1-179四种重组质粒,经限制性内切酶双酶切和核苷酸测序鉴定,编码基因正确无误;pTR421-179转染的细胞以及注射小鼠的局部肌肉组织可以检测到p179的表达,而pCDNA3.1-179、pCDNA3.1-166以及pTR421-166均检测不到目的基因在体内、外的抗原表达。结论载体和目的基因片段的选择显著影响HEV抗原在体内、外的表达,直接关系到基因免疫的成功与否。 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 基因免疫 中和抗原表位 基因表达

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从鼠黑色素瘤细胞系中分离和鉴定癌干细胞样细胞 被引量：1

2

作者 潘猛 文萍 +6 位作者 窦骏 李雅婷 唐权 褚莉莉 赵枫姝 蒋翠莲 顾宁 《生物技术通讯》 CAS 2008年第4期500-502,共3页

目的:从鼠黑色素瘤BL6F10细胞系中分离与鉴定癌干细胞(CSC)样细胞,为今后对CSC的鉴定及靶向治疗奠定基础。方法:用不同免疫磁珠标记的单克隆抗体,从BL6F10细胞系中分离有特征性CD表型的瘤细胞,体外观察不同CD表型瘤细胞在软琼脂培养基... 目的:从鼠黑色素瘤BL6F10细胞系中分离与鉴定癌干细胞(CSC)样细胞,为今后对CSC的鉴定及靶向治疗奠定基础。方法:用不同免疫磁珠标记的单克隆抗体,从BL6F10细胞系中分离有特征性CD表型的瘤细胞,体外观察不同CD表型瘤细胞在软琼脂培养基上形成克隆的能力;将这些瘤细胞皮下注射到C57BL/6小鼠,比较其致瘤性。结果:从BL6F10细胞系中分离出不同CD表型的特征性瘤细胞;在软琼脂培养基上,CD133+、CD44+和CD44+CD133+细胞克隆形成率分别高于CD133-、CD44-和CD44+CD133-细胞;CD133+、CD44+、CD44+CD133+和CD44+CD133+CD24+细胞在小鼠体内的致瘤性分别强于CD133-、CD44-、CD44+CD133-和CD44+CD133+CD24-细胞。结论:CD44+CD133+CD24+表型的BL6F10细胞的某些生物学特性与CSC样细胞相似,具有CSC特征,这些实验结果为进一步鉴定BL6F10细胞系中的CSC提供了重要的实验资料。 展开更多

关键词 鼠黑色素瘤 BL6F10细胞系 癌干细胞样细胞 癌干细胞

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CD133分子与造血干/祖细胞和癌干细胞之间的关系 被引量：1

3

作者 胡卫华 窦骏 《微生物学免疫学进展》 2009年第3期63-66,共4页

越来越多的实体瘤癌干细胞(CSCs)研究中鉴定分离出含有CD133+的CSCs亚群。深入了解CD133+分子的生物学特性及在细胞与肿瘤信号转导、药物耐受和放化疗抵抗等的相关性,将有助于靶向治疗CSCs。本文就CD133分子与造血干/祖细胞(HSPC)和CSC... 越来越多的实体瘤癌干细胞(CSCs)研究中鉴定分离出含有CD133+的CSCs亚群。深入了解CD133+分子的生物学特性及在细胞与肿瘤信号转导、药物耐受和放化疗抵抗等的相关性,将有助于靶向治疗CSCs。本文就CD133分子与造血干/祖细胞(HSPC)和CSCs之间的关系及其耐药机制的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 CD133分子 造血干细胞 癌干细胞 耐药治疗

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基于戊型肝炎病毒中和表位的基因免疫表达载体的构建与鉴定

4

作者 翟理杰 王立新 +4 位作者 房雪峰 梁久红 林陵 赵宇 孟继鸿 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2004年第2期71-74,78,共5页

目的 :获得戊型肝炎病毒 (HEV )中和表位 p166的编码基因 ,构建基于该中和表位的HEV基因免疫的真核表达载体。方法 :应用RT PCR方法从粪便标本中扩增获得HEVORF2中G64 61～G70 3 5片段 ,通过比较核酸序列同源性鉴定其基因型 ,PCR方法扩... 目的 :获得戊型肝炎病毒 (HEV )中和表位 p166的编码基因 ,构建基于该中和表位的HEV基因免疫的真核表达载体。方法 :应用RT PCR方法从粪便标本中扩增获得HEVORF2中G64 61～G70 3 5片段 ,通过比较核酸序列同源性鉴定其基因型 ,PCR方法扩增该片段中HEV中和表位 p166的编码基因 ,经酶切后克隆于真核表达载体 pTR42 1质粒 ,并以PCR、酶切和DNA测序加以鉴定。结果 :成功克隆了 p166的编码基因 ,其基因型别为Ⅳ型 ;经酶切鉴定和DNA测序证实p166的编码基因已成功插入pTR42 1质粒 ,且核酸序列、读码框架正确。结论 :成功构建含Ⅳ型HEV中和表位编码基因的重组质粒 ,为后续基于HEV中和表位基因免疫的研究奠定基础。 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 中和表位 基因免疫 真核表达载体

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HCV结构区DNA疫苗诱发小鼠特异性细胞免疫反应的研究(英文) 被引量：5

5

作者 李兵 窦骏 +4 位作者 王立新 史志英 王净 印佩钦 林陵 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期323-327,共5页

目的通过 HCV结构区 DNA疫苗直接免疫小鼠 ,诱发其体内特异性细胞介导的免疫反应的研究 ,为 HCVDNA疫苗的研制打下基础。方法用重组的 p BK- CMV质粒体外转染小鼠骨髓瘤细胞 SP2 / 0 ,建立了能体外表达 HCV结构区蛋白的 SP2 / 0 D细胞... 目的通过 HCV结构区 DNA疫苗直接免疫小鼠 ,诱发其体内特异性细胞介导的免疫反应的研究 ,为 HCVDNA疫苗的研制打下基础。方法用重组的 p BK- CMV质粒体外转染小鼠骨髓瘤细胞 SP2 / 0 ,建立了能体外表达 HCV结构区蛋白的 SP2 / 0 D细胞系 ,分别用 SP2 / 0和 SP2 / 0 D细胞攻击用空质粒或 p BK- CMV质粒免疫过的 Balb/ c小鼠 ,通过肿瘤形成、肿瘤重量、肿瘤组织淋巴细胞的浸润以及不同免疫组小鼠血清中 IL - 2和 IFN -γ含量来观察小鼠体内 T淋巴细胞的活性。结果用 SP2 / 0和 SP2 / 0 D攻击空质粒或 p BK- CMV质粒免疫过的小鼠 15 d后 ,SP2 / 0 D攻击的 p BK- CMV质粒免疫鼠肿瘤重量 ( 0 .9± 0 .12 ) g明显低于空白质粒免疫组和 SP2 / 0接种组 ( P<0 .0 0 1) ,且该免疫组小鼠血清中 IL- 2和 IFN- γ的浓度明显高于其它免疫组 ;此外 ,用 SP2 / 0 D攻击的 p BK- CMV免疫鼠 ,肿瘤病理切片中可见明显的 T淋巴细胞浸润。结论重组的 HCV结构区 DNA疫苗 ( p BK- CMV)能诱导小鼠体内特异性 T淋巴细胞反应 ,HCV DNA疫苗可能为临床疾病的治疗和预防提供一种新的途径。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 DNA疫苗 CTL 活性 HCV 小鼠

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mIL-21基因转染的Sp2/0瘤苗细胞的抗肿瘤机制探讨 被引量：5

6

作者 褚莉莉 窦骏 +4 位作者 赵枫姝 唐权 张爱凤 王永仿 顾宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期507-510,共4页

目的:探讨小鼠IL-21瘤苗-Sp2/0-mIL-21抗肿瘤效应的机制。方法:用流式细胞术检测Sp2/0-mIL-2瘤苗细胞表面MHC-Ⅰ类分子及CD80分子的表达。以瘤苗细胞接种BALB/c小鼠,以CFSE,7-AAD标记,用流式细胞术检测NK细胞、CTL的细胞毒活性。观察肿... 目的:探讨小鼠IL-21瘤苗-Sp2/0-mIL-21抗肿瘤效应的机制。方法:用流式细胞术检测Sp2/0-mIL-2瘤苗细胞表面MHC-Ⅰ类分子及CD80分子的表达。以瘤苗细胞接种BALB/c小鼠,以CFSE,7-AAD标记,用流式细胞术检测NK细胞、CTL的细胞毒活性。观察肿瘤组织中淋巴细胞的浸润。用RT-PCR检测肿瘤组织中CXC家族趋化因子I-TAC的表达。结果:与对照组相比,瘤苗细胞膜表面MHC-Ⅰ类分子的表达明显上调。瘤苗接种组小鼠NK细胞、CTL的细胞毒活性明显增强。病理分析发现,肿瘤组织中有较多的淋巴细胞浸润并检测到干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)的表达上调。结论:肿瘤细胞瘤苗Sp2/0-mIL21可增强小鼠的细胞免疫作用,其抗肿瘤机制可能与T细胞的增殖、活化,促进NK细胞的分化成熟,淋巴细胞向肿瘤组织浸润,以及增强NK细胞和CTL的细胞毒活性有关。 展开更多

关键词 白细胞介素-21 瘤苗 羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE) 7-氨基放线菌素D(7-AAD) 干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC) 抗肿瘤机制

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不同基因型戊型肝炎病毒重组蛋白的抗原性分析 被引量：30

7

作者 孟继鸿 戴星 +2 位作者 窦晓光 YE KHUDYAKOV H A FIELDS 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2002年第1期31-35,共5页

目的 :探讨不同基因型和亚型戊型肝炎病毒 (HEV)重组蛋白氨基酸序列的变化对HEV抗原性的影响 ,筛选出最佳的HEV抗原用于戊型肝炎的免疫诊断。方法 :用已知序列的HEV基因工程表达蛋白作为包被抗原 ,对已知血清标本进行酶联免疫吸附试验... 目的 :探讨不同基因型和亚型戊型肝炎病毒 (HEV)重组蛋白氨基酸序列的变化对HEV抗原性的影响 ,筛选出最佳的HEV抗原用于戊型肝炎的免疫诊断。方法 :用已知序列的HEV基因工程表达蛋白作为包被抗原 ,对已知血清标本进行酶联免疫吸附试验测定。结果 :6种不同抗原对 3 0份正常献血者血清无抗原性 ,对 17份急性戊型肝炎病人血清和 5份实验感染动物血清均呈阳性反应 ,但血清抗体滴度的高低与所用抗原的基因型有关 ,尤其是受到该抗原第 76位氨基酸变化的影响。结论 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 基因型 重组蛋白 抗原性

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人、猪、禽戊型肝炎病毒血清学关系的研究 被引量：16

8

作者 梁久红 孟继鸿 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期581-586,共6页

目的研究人、猪、禽戊型肝炎病毒(HEV)的血清学关系。方法应用ELISA分别以人、猪、禽HEV ORF2重组蛋白p166human、p166swine、p268avian检测人、猪、鸡血清及其他标本中抗- HEV IgG,用SAS软件进行统计学分析,同时进行序列同源性比较。结... 目的研究人、猪、禽戊型肝炎病毒(HEV)的血清学关系。方法应用ELISA分别以人、猪、禽HEV ORF2重组蛋白p166human、p166swine、p268avian检测人、猪、鸡血清及其他标本中抗- HEV IgG,用SAS软件进行统计学分析,同时进行序列同源性比较。结果p166human和p166swine对HEV实验感染动物血清、HEV ORF2重组蛋白免疫血清和单克隆抗体均呈阳性反应,而p268avian均呈阴性反应。以p166human、p166swine、p268avian检测人、猪、鸡血清抗-HEV IgG,戊型肝炎患者血清检出率分别为98.5%、97.7%和1.5%,正常人血清为10.0%、10.0%和4.0%,猪血清为26.9%、25.6%和1.3%,鸡血清为4.3%、2.2%和33.3%。p268avian与p166human或p166swine的检出率差异有统计学意义(P<0.001)。相关性分析表明,p166human和p166swine对不同样本的检测均呈直线正相关,而p268avian与p166human或p166swine无直线相关性。人和猪HEV pORF2的序列同源性在88.2%～99.2%,而禽HEV与人、猪HEV pORF2的同源性仅为45.5%～46.1%,其中含有多个插入和缺失突变。结论人和猪HEV血清学关系密切,而禽HEV与人、猪HEV抗原性差异有统计学意义,无血清学相关性。因此禽HEW与人、猪HEV的关系应予进一步考证。 展开更多

关键词 人戊型肝炎病毒 猪戊型肝炎病毒 禽戊型肝炎病毒 血清学关系

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mIL-21基因治疗小鼠肿瘤及其机制的初步研究 被引量：2

9

作者 陈国兵 窦骏 +3 位作者 赵枫姝 陈峻崧 褚莉莉 唐权 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期126-130,共5页

建立小鼠Sp2/0皮下肿瘤模型,以我们构建并鉴定过的真核表达质粒peDNA3.1/mIL-21在瘤体内直接注射,考察mIL-21基因治疗对小鼠Sp2/0肿瘤的疗效。结果显示pcDNA3.1/mIL-21质粒治疗对小鼠皮下Sp2/0肿瘤有一定的生长抑制作用,CTL和NK细胞毒... 建立小鼠Sp2/0皮下肿瘤模型,以我们构建并鉴定过的真核表达质粒peDNA3.1/mIL-21在瘤体内直接注射,考察mIL-21基因治疗对小鼠Sp2/0肿瘤的疗效。结果显示pcDNA3.1/mIL-21质粒治疗对小鼠皮下Sp2/0肿瘤有一定的生长抑制作用,CTL和NK细胞毒活性明显增强,IFN-γ分泌升高显著,但抗体无明显升高。表明mIL-21基因治疗的抗肿瘤效应,可能和细胞免疫功能增强有关。 展开更多

关键词 白细胞介素21 肿瘤 基因治疗 CTL NK

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癌、干细胞和癌干细胞共同拥有的信号传导通路 被引量：3

10

作者 潘猛 窦骏 +2 位作者 李雅婷 文萍 顾宁 《生物技术通讯》 CAS 2007年第5期824-826,共3页

干细胞(SC)是具有无限自我更新和分化能力的细胞,随着对SC研究的不断深入,人们发现SC与肿瘤细胞有许多共性,如无限增生能力、迁移能力及在某些条件下能相互转化,故提出了肿瘤起源于SC的学说。探讨癌、SC和癌干细胞(CSC)之间可能存在的... 干细胞(SC)是具有无限自我更新和分化能力的细胞,随着对SC研究的不断深入,人们发现SC与肿瘤细胞有许多共性,如无限增生能力、迁移能力及在某些条件下能相互转化,故提出了肿瘤起源于SC的学说。探讨癌、SC和癌干细胞(CSC)之间可能存在的共同信号传导通路,以便发现治疗CSC的靶位。 展开更多

关键词 癌 干细胞 癌干细胞 信号通路

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小鼠白细胞介素21瘤苗的构建及其抗肿瘤效应研究 被引量：3

11

作者 褚莉莉 窦骏 +3 位作者 赵枫姝 唐权 王永仿 顾宁 《生物技术通讯》 CAS 2007年第1期29-31,共3页

目的:建立稳定表达小鼠白细胞介素21(mIL-21)的肿瘤细胞瘤苗,观察其在小鼠体内是否能够诱导有效的抗肿瘤免疫反应及免疫记忆效应。方法:将已鉴定的重组质粒pcDNA3.1/mIL-21用脂质体法转染Sp2/0细胞制备瘤苗,RT-PCR法鉴定瘤苗中mIL-21的... 目的:建立稳定表达小鼠白细胞介素21(mIL-21)的肿瘤细胞瘤苗,观察其在小鼠体内是否能够诱导有效的抗肿瘤免疫反应及免疫记忆效应。方法:将已鉴定的重组质粒pcDNA3.1/mIL-21用脂质体法转染Sp2/0细胞制备瘤苗,RT-PCR法鉴定瘤苗中mIL-21的表达。通过流式细胞仪检测细胞周期来反映瘤苗体外增殖活性,再将其接种BALB/c小鼠,监测肿瘤生长情况,观察mIL-21瘤苗诱导的抗肿瘤效应;用ELISA法检测血清IFN-γ和IL-4含量。结果:得到稳定表达mIL-21的瘤苗Sp2/0-mIL-21。与对照组相比,体外增殖活性无差异。皮下接种BALB/c小鼠后,肿瘤生长缓慢,部分小鼠无瘤体生长并长期存活;用野生株Sp2/0瘤细胞再次攻击未长肿瘤的实验小鼠,4周后亦未见肿瘤生长。接种瘤苗小鼠血清中IFN-γ水平明显上升,IL-4无明显增高。结论:成功构建了mIL-21瘤苗Sp2/0-mIL-21,其能诱导有效的抗肿瘤免疫反应及免疫记忆效应。 展开更多

关键词 白细胞介素21 瘤苗 抗肿瘤效应

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小鼠骨髓瘤中肿瘤干细胞的初步分析 被引量：2

12

作者 李雅婷 窦骏 +3 位作者 文萍 赵枫姝 蒋翠莲 顾宁 《微生物学免疫学进展》 2008年第4期31-35,共5页

探讨小鼠骨髓瘤(SP2/0细胞)中肿瘤干细胞存在与否。以克隆形成试验检测SP2/0细胞中具有形成克隆能力细胞的大体比例;采用BrdU标记滞留试验检测SP2/0细胞中含有DNA永生化链的细胞,即具有干细胞特性的细胞;检测SP2/0细胞中具有干细胞特性... 探讨小鼠骨髓瘤(SP2/0细胞)中肿瘤干细胞存在与否。以克隆形成试验检测SP2/0细胞中具有形成克隆能力细胞的大体比例;采用BrdU标记滞留试验检测SP2/0细胞中含有DNA永生化链的细胞,即具有干细胞特性的细胞;检测SP2/0细胞中具有干细胞特性的SP细胞存在情况及其比例。结果显示,SP2/0细胞中有一部分细胞具有形成克隆的能力;SP2/0细胞中含有DNA永生化链的细胞;SP2/0细胞中存在SP细胞,其比例约为0.7%。而且SP2/0细胞中存在肿瘤干细胞。 展开更多

关键词 肿瘤干细胞 克隆形成 DNA永生化链 SP细胞

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GM-CSF与IL-21基因共转染卵巢癌细胞及其对NK细胞活性的影响 被引量：1

13

作者 王永仿 褚莉莉 +6 位作者 窦骏 赵枫姝 唐权 曹明刚 李雅亭 胡卫华 王净 《中国医药生物技术》 CSCD 2008年第3期183-188,共6页

目的探讨粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)与IL-21基因共转染的体外抗肿瘤效应。方法制备pRSC-GM-CSF-IL21重组质粒,再用脂质体将质粒pRSC-GM-CSF、pRSC-IL21和pRSC-GM-CSF-IL2分别转染人卵巢癌SKOV3细胞(依次命名为SKOV3/GMCSF、SKO... 目的探讨粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)与IL-21基因共转染的体外抗肿瘤效应。方法制备pRSC-GM-CSF-IL21重组质粒,再用脂质体将质粒pRSC-GM-CSF、pRSC-IL21和pRSC-GM-CSF-IL2分别转染人卵巢癌SKOV3细胞(依次命名为SKOV3/GMCSF、SKOV3/IL21、SKOV3/GM-CSF-IL21细胞)。以RTPCR方法检测GM-CSF与IL-21表达;倒置相差显微镜观察各组细胞形态学变化;噻唑蓝法测定各组细胞增殖活性;流式细胞仪检测各组细胞细胞周期分布,细胞表面HLA-ABC、主要组织相容性复合体I类相关基因(MICA/B)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达,以及各组细胞培养上清液对NK细胞活性的影响。以未转染的SKOV细胞和转染空质粒pRSC的细胞(SKOV3/Neo)为对照。结果经酶切与测序鉴定,pRSC-GM-CSF-IL21重组体构建正确,共转染SKOV3细胞中有目的基因GM-CSF、IL-21的表达。各组细胞的形态学、增殖特性、细胞周期分布及HLA-ABC表达无明显变化。SKOV3、SKOV3/Neo、SKOV3/GM-CSF、SKOV3/IL21和SKOV3/GM-CSF-IL2细胞的MICA/B表达量分别为19.24%±2.31%、31.11%3.76%、37.27%±3.04%、54.97%±4.77%和63.94%±5.90%ICAM-1表达量分别为35.88%±3.06%、37.75%±4.09%、68.59%±4.84%、78.53%±5.78%和84.10%±3.98%;加入各组细胞培养上清液后NK细胞活性分别为31.8%±3.6%42.7%±3.3%、54.7%±7.4%、55.9%±4.4%及63.4%6.4%。SKOV3/GM-CSF-IL21细胞分别与SKOV3、SKOV3Neo细胞比较,3项指标的差异均有统计学意义(P<0.01)结论GM-CSF与IL-21基因共转染可上调SKOV3细胞表面MICA/B与ICAM-1表达,表达产物可增强NK细胞活性,这有助于免疫细胞激活,增强抗肿瘤效应。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素21 杀伤细胞 天然

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肿瘤干细胞若干研究进展与展望 被引量：2

14

作者 窦骏 《皖南医学院学报》 CAS 2008年第2期79-82,共4页

随着干细胞（stem cells，SC）研究的深入，人们发现肿瘤细胞和SC之间有惊人的相似处，如自我更新和分化。肿瘤可能通常起源于正常SC的转化，相似的信号传导通路可能既调节SC也调节肿瘤细胞的自我更新。许多证据表明，大多数的肿瘤组织... 随着干细胞（stem cells，SC）研究的深入，人们发现肿瘤细胞和SC之间有惊人的相似处，如自我更新和分化。肿瘤可能通常起源于正常SC的转化，相似的信号传导通路可能既调节SC也调节肿瘤细胞的自我更新。许多证据表明，大多数的肿瘤组织中存在着具有SC特征的“起始肿瘤细胞”，称之为肿瘤干细胞（tumor stem cells，TSC）或癌干细胞（cancer stem cells，CSC），其具备高度自我更新和多向分化的潜能，是形成不同分化程度肿瘤细胞和肿瘤增长及复发的根源，由此而产生了TSC学说。本文就TSC作一简述。 展开更多

关键词 肿瘤干细胞 自我更新 分化 进展

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猪戊型肝炎病毒的研究进展 被引量：3

15

作者 翟理杰 孟继鸿 《国外医学（流行病学．传染病学分册）》 2002年第5期269-271,共3页

近年来国外对戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)的研究表明,该病毒不仅可以侵犯人,而且有多种动物可以作为其自然宿主,提示由该病毒引起的戊型肝炎(hepatitis E,HE)是一种人畜共患性疾病。从猪中分离并确定的猪HEV,对于HEV的病原学... 近年来国外对戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)的研究表明,该病毒不仅可以侵犯人,而且有多种动物可以作为其自然宿主,提示由该病毒引起的戊型肝炎(hepatitis E,HE)是一种人畜共患性疾病。从猪中分离并确定的猪HEV,对于HEV的病原学、流行病学、动物模型、临床诊断及HEV的疫苗制备等都具有重要意义。 展开更多

关键词 戊型肝炎 研究进展 HEV 人畜共患病 病原学 流行病学 分子生物学

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γc家族新成员:白细胞介素21 被引量：3

16

作者 陈国兵 王净 《国外医学（免疫学分册）》 2003年第4期183-186,共4页

白细胞介素 2 1(Interleukin 2 1,IL 2 1)是最近发现的γc家族新成员 ,和IL 2、IL 15、IL 4高度同源 ,主要由活化的CD4 + T细胞产生。IL 2 1受体复合体由特异的IL 2 1受体识别亚单位和γc信号传导亚单位组成 ,高表达于胸腺、骨髓基质细... 白细胞介素 2 1(Interleukin 2 1,IL 2 1)是最近发现的γc家族新成员 ,和IL 2、IL 15、IL 4高度同源 ,主要由活化的CD4 + T细胞产生。IL 2 1受体复合体由特异的IL 2 1受体识别亚单位和γc信号传导亚单位组成 ,高表达于胸腺、骨髓基质细胞、外周B细胞和NK细胞。IL 2 1能促进骨髓NK细胞增殖与分化 ,与抗CD4 0抗体协同刺激B细胞增殖 ,与抗CD3抗体协同刺激T细胞增殖。 展开更多

关键词 白细胞介素21 白细胞介素21受体 NK细胞 γc家族

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肿瘤疫苗及其增强策略

17

作者 王立新 熊思东 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2004年第2期125-130,140,共7页

肿瘤疫苗是利用肿瘤抗原激发机体自身的免疫保护机制达到防治肿瘤的目的 ,近来肿瘤疫苗已发展成为一种重要的肿瘤生物治疗手段。本文根据肿瘤疫苗的常见种类 ,从细胞载体肿瘤疫苗、肿瘤多肽疫苗、肿瘤基因疫苗以及抗独特型抗体肿瘤疫苗... 肿瘤疫苗是利用肿瘤抗原激发机体自身的免疫保护机制达到防治肿瘤的目的 ,近来肿瘤疫苗已发展成为一种重要的肿瘤生物治疗手段。本文根据肿瘤疫苗的常见种类 ,从细胞载体肿瘤疫苗、肿瘤多肽疫苗、肿瘤基因疫苗以及抗独特型抗体肿瘤疫苗等方面对肿瘤疫苗的设计原理。 展开更多

关键词 肿瘤 生物治疗 细胞载体疫苗 多肽疫苗 基因疫苗

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IL-21修饰的脐血间充质干细胞对卵巢癌裸鼠治疗作用 被引量：5

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作者 胡卫华 王净 +6 位作者 窦骏 何向锋 赵枫姝 褚莉莉 蒋翠莲 邹丹丹 李晓丽 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期110-114,共5页

探讨IL-21修饰的脐血间充质干细胞(UMSC)对荷卵巢癌裸鼠的治疗作用。从脐血单个核细胞中培养UMSC,经流式细胞术(FCM)鉴定后用于重组体pIRES2-IL-21-EGFP转染。RT-PCR检测UMSC中IL-21的表达。荷瘤裸鼠治疗实验分为PBS、UMSC、UMSC空质粒... 探讨IL-21修饰的脐血间充质干细胞(UMSC)对荷卵巢癌裸鼠的治疗作用。从脐血单个核细胞中培养UMSC,经流式细胞术(FCM)鉴定后用于重组体pIRES2-IL-21-EGFP转染。RT-PCR检测UMSC中IL-21的表达。荷瘤裸鼠治疗实验分为PBS、UMSC、UMSC空质粒和UMSC-IL-21四组。以肿瘤大小、荷瘤鼠生存期判断IL-21修饰的UMSC对荷瘤鼠的治疗效应。以ELISpot法检测脾细胞IFN-γ分泌、免疫荧光法检测肿瘤组织中IL-21、NKG2D的表达,并同时检测了NK细胞活性。结果显示,脐血分离的单个核细胞经三代培养后已初步符合UMSC表型,pIRES2-IL-21-EGFP转染的UMSC能表达IL-21和EGFP。UMSC-IL-21治疗组,能抑制肿瘤生长,延长荷瘤裸鼠生存期,与其他组相比,差异有明显统计学意义(P<0.01)。UMSC-IL-21组肿瘤局部能表达IL-21与NKG2D、脾细胞分泌IFN-γ能力升高,NK细胞杀伤活性增强,表明UMSC-IL-21有良好地抗裸鼠卵巢癌作用,其机制可能与表达IL-21诱导IFN-γ分泌增加,激活NK细胞活性有关。 展开更多

关键词 脐血间充质干细胞 白细胞介素21 卵巢上皮癌

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B16F10/IL-21-gpi瘤苗通过减少调节性T细胞发挥治疗鼠黑色素瘤作用 被引量：3

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作者 赵枫姝 胡卫华 +7 位作者 窦骏 胡凯 何向锋 唐权 吴昀 褚莉莉 文萍 刘春生 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期100-105,共6页

观察B16F10/IL-21-gpi瘤苗对小鼠黑色素瘤治疗作用,并探讨其作用机制。以灭活的B16F10/IL-21-gpi瘤苗治疗黑色素瘤小鼠,经观察小鼠肿瘤生长大小、生存期长短判断其治疗肿瘤效应。以双抗夹心ELISA法检测小鼠脾细胞分泌的IL-4、IFN-γ和RT... 观察B16F10/IL-21-gpi瘤苗对小鼠黑色素瘤治疗作用,并探讨其作用机制。以灭活的B16F10/IL-21-gpi瘤苗治疗黑色素瘤小鼠,经观察小鼠肿瘤生长大小、生存期长短判断其治疗肿瘤效应。以双抗夹心ELISA法检测小鼠脾细胞分泌的IL-4、IFN-γ和RT-PCR法检测肿瘤组织中IL-21的表达状况;同时以流式细胞仪检测小鼠脾细胞、肿瘤组织中和肿瘤引流淋巴结Treg的比例。结果显示,B16F10/IL-21-gpi瘤苗治疗鼠未成瘤率增高,肿瘤生长变慢;GPI锚定的IL-21瘤苗可很好地在肿瘤局部表达,Treg比例减少,脾细胞分泌的IFN-γ有明显地升高。该结果表明B16F10/IL-21-gpi瘤苗具有良好的治疗鼠黑色素瘤作用,并可能通过表达IL-21诱导IFN-γ分泌增加而抑制Treg细胞的减少达到抗肿瘤效应。 展开更多

关键词 瘤苗 IL-21 TREG

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糖基化磷脂酰肌醇修饰的小鼠IL-21瘤苗抗肿瘤效应及其机制初探 被引量：2

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作者 赵枫姝 褚莉莉 +6 位作者 窦骏 唐权 王永仿 吴昀 曹明刚 潘猛 顾宁 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期822-827,共6页

目的构建糖基化磷脂酰肌醇（glycosyl phosphatidylinositol，GPI）修饰的小鼠IL-21瘤苗，并对此瘤苗的抗肿瘤效应及其机制作初步探讨。方法通过重叠PCR方法获得IL-21-GPI融合基因并将其插入空载体pcDNA3．1。将鉴定过的重组载体以脂质... 目的构建糖基化磷脂酰肌醇（glycosyl phosphatidylinositol，GPI）修饰的小鼠IL-21瘤苗，并对此瘤苗的抗肿瘤效应及其机制作初步探讨。方法通过重叠PCR方法获得IL-21-GPI融合基因并将其插入空载体pcDNA3．1。将鉴定过的重组载体以脂质体法转染B16F10细胞制成瘤苗，细胞间接免疫荧光法及流式细胞仪检测转染瘤细胞膜表面IL-21的表达，通过对小鼠脾细胞的增殖作用鉴定表达的IL-21的生物学活性。将瘤苗接种小鼠后，通过观察小鼠肿瘤体积和生存率分析瘤苗的抗瘤性，并检测了瘤苗免疫鼠的细胞免疫活性。结果正确构建了pcDNA3．1／IL-21-GPI重组载体，膜表达的IL-21有良好的生物学活性，制备的瘤苗能发挥抗肿瘤效应，其机制与免疫鼠细胞免疫活性增强有关。结论成功构建了具有抗肿瘤活性的GPI修饰的IL-21瘤苗，为其进一步抗肿瘤免疫治疗研究奠定了基础。 展开更多

关键词 小鼠IL-21 糖基化磷脂酰肌醇 抗肿瘤免疫

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