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间接法Dot-ELISA检测猪流行性腹泻抗体的研究 被引量：12
1
作者 陈茹 罗琼 +1 位作者 李树根 黄侠芳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第8期10-13,共4页
使用非洲绿猴肾（Ｖｅｒｏ）细胞增殖适应传代细胞培养的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），并经聚乙二醇（ＰＥＧ）沉淀法分离纯化ＰＥＤＶ抗原，建立斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测猪流行性腹泻（ＰＥＤ）抗体。在最适... 使用非洲绿猴肾（Ｖｅｒｏ）细胞增殖适应传代细胞培养的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），并经聚乙二醇（ＰＥＧ）沉淀法分离纯化ＰＥＤＶ抗原，建立斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测猪流行性腹泻（ＰＥＤ）抗体。在最适工作条件下，进行了敏感性和特异性试验，结果表明，该法检测ＰＥＤＶ抗体，敏感、特异、重复性好，且方便、快捷，适用于大批量试样的检测，可作为一种诊断ＰＥＤ的比较理想的方法。采用此方法分别对来自加拿大、台湾省进口的种猪和海南省和广东省内种猪群的血清样共８３４份进行了检测，检测得ＰＥＤＶ抗体阳性率达２１％。 展开更多
关键词 抗体检测 猪病 流行性 腹泻 DOT-ELISA
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用固定细胞阻断酶联免疫吸附试验鉴别诊断猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒的感染 被引量：5
2
作者 周仲芳 李力复 +1 位作者 颜思通 罗长保 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第12期5-7,共3页
用固定细胞阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对来自丹麦猪的１８０份血清进行了猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）和猪呼吸道冠状病毒（ＰＲＣＶ）感染的鉴别诊断，共检出了ＰＲＣＶ抗体阳性血清１０７份（５９．４％），ＴＧＥＶ抗体... 用固定细胞阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对来自丹麦猪的１８０份血清进行了猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）和猪呼吸道冠状病毒（ＰＲＣＶ）感染的鉴别诊断，共检出了ＰＲＣＶ抗体阳性血清１０７份（５９．４％），ＴＧＥＶ抗体阳性血清０份。同时也检测了一些来自国内不同ＴＧＥＶ感染类型的猪场血清。该鉴别诊断方法在我国的建立和应用为从ＰＲＣＶ阳性国家进口猪的ＴＧＥ的检疫提供了一条有效途径。 展开更多
关键词 固定细胞ELISA 鉴别诊断 TGEV PRCV 猪病
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猪繁殖与呼吸综合征的诊断 被引量：5
3
作者 梁杏娴 卢洪芬 +3 位作者 董振光 李力施 陈始和 梁华炳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第4期28-29,共2页
猪繁殖与呼吸综合征的诊断梁杏娴①卢洪芬①董振光②李力施②陈始和③梁华炳１流行情况广东某猪场建于１９９５年４月，是个中型的集约化养猪场，属工厂化饲养管理方式，怀孕母猪采用限位舍饲养，高床产仔，仔猪一般３０天断奶；母猪和... 猪繁殖与呼吸综合征的诊断梁杏娴①卢洪芬①董振光②李力施②陈始和③梁华炳１流行情况广东某猪场建于１９９５年４月，是个中型的集约化养猪场，属工厂化饲养管理方式，怀孕母猪采用限位舍饲养，高床产仔，仔猪一般３０天断奶；母猪和大部分公猪来自湖南长沙，猪的品种有... 展开更多
关键词 猪病 繁殖呼吸综合征 流行 诊断
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间接酶联免疫吸附试验检测猪生殖与呼吸系统综合征血清抗体的研究 被引量：4
4
作者 罗长保 李树根 +5 位作者 孙颖杰 陈茹 罗琼 孙延峰 潘凤城 苏永生 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第10期6-7,共2页
本研究建立了检测猪生殖与呼吸系统综合征（ＰＲＲＳ）血清抗体的间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），其抗原包被浓度为２μｇ／ｍｌ，血清最适稀释度为１∶１００。试验结果表明：ＥＬＩＳＡ的敏感性高于间接免疫荧光抗体试验（ＩＦ... 本研究建立了检测猪生殖与呼吸系统综合征（ＰＲＲＳ）血清抗体的间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），其抗原包被浓度为２μｇ／ｍｌ，血清最适稀释度为１∶１００。试验结果表明：ＥＬＩＳＡ的敏感性高于间接免疫荧光抗体试验（ＩＦＡ），是一种切实可行的诊断方法。 展开更多
关键词 猪病 繁殖呼吸综合症 血清抗体 ELISA
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猪生殖和呼吸综合征中国分离株ORF_7基因的克隆及鉴定 被引量：4
5
作者 赵耘 林志雄 +1 位作者 陈茹 罗长保 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第10期3-5,共3页
本研究利用对应于ＡＴＣＣＶＲ－２３３２及ＬＶＯＲＦ７基因保守序列的１对均为２８个碱基的引物１００１１ＰＣＳ、１０１０ＰＣＲ对ＰＲＲＳＶ中国分离株Ｂ１３进行ＲＴ－ＰＣＲ，结果扩增出了１条包括完整ＯＲＦ７基因的５１０ｂｐ... 本研究利用对应于ＡＴＣＣＶＲ－２３３２及ＬＶＯＲＦ７基因保守序列的１对均为２８个碱基的引物１００１１ＰＣＳ、１０１０ＰＣＲ对ＰＲＲＳＶ中国分离株Ｂ１３进行ＲＴ－ＰＣＲ，结果扩增出了１条包括完整ＯＲＦ７基因的５１０ｂｐ的ＤＮＡ片段。纯化此扩增产物，并对其进行ＥｃｏＲＩ／ＰｓｔＩ双酶切，与用ＥｃｏＲＩ、ＰｓｔＩ双酶切及碱性磷酸酶处理的ＰＵＣ１８载体连接。转化大肠杆菌。结果得到了１个Ｂ１３ＯＲＦ７基因与ＰＵＣ１８载体的重组质粒ＰＵＣ１８Ｂ１３ＯＲＦ７１０。通过ＥｃｏＲＩ／ＰｓｔＩ及ＰＣＲ证明此重组质粒即为Ｂ１３ＯＲＦ７基因与ＰＵＣ１８载体的重组质粒。从而为ＯＲＦ７基因及所表达的核衣壳蛋白进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 ORF7基因 重组质粒 猪病 PRRS综合征
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杆状病毒表达的猪传染性胃肠炎病毒钉状糖蛋白在其血清学诊断上的应用 被引量：5
6
作者 周仲芳 PeggyLewis 李力复 《中国兽医科技》 CSCD 1997年第8期3-6,共4页
利用从猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）Ｍｉｌｅｒ株（Ｍ５Ｃ）克隆建立的一株重组杆状病毒（Ｒ２－２）表达的重组ＴＧＥＶ钉状糖蛋白（Ｓ），建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来检测猪群抗ＴＧＥＶ抗体。试验表明，用重... 利用从猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）Ｍｉｌｅｒ株（Ｍ５Ｃ）克隆建立的一株重组杆状病毒（Ｒ２－２）表达的重组ＴＧＥＶ钉状糖蛋白（Ｓ），建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来检测猪群抗ＴＧＥＶ抗体。试验表明，用重组病毒Ｒ２－２接种ｓｆ９细胞（ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）所表达的重组蛋白量在接种后第７２ｈ达到最高值；该重组蛋白能与抗ＴＧＥＶＳ蛋白Ａ位点的单克隆抗体特异性结合。用阻断ＥＬＩＳＡ检测６８份来自无ＴＧＥＶ感染或ＴＧＥＶ（Ｐｕｒｄｕｅｌ５）免疫的仔猪或母猪血清，结果与ＴＧＥＶ蚀斑减数试验完全相符，灵敏度和特异性均为１００％。同时检测来自ＴＧＥＶ试验免疫猪、美国部分地区猪群、我国进口猪以及我国国内猪群血清６２７份，阳性检出率分别为８２．６１％、６１．６２％、５８．３３％和２９．１０％；用中和试验（微量中和试验或病毒蚀斑减数试验）检测的ＴＧＥ血清抗体阳性率分别为８０．８７％、５９．６０％、５６．１１％和３０．６０％，两种方法对抗ＴＧＥＶ抗体的检出率没有显著差异。 展开更多
关键词 猪病 传染性 肾肠炎 病毒抗原 抗体 血清学诊断
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用改良的RT-PCR技术快速检测传染性法氏囊病病毒 被引量：1
7
作者 陈茹 罗琼 +1 位作者 吴时清 李树根 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第1期3-7,共5页
本研究将最新的病毒核酸纯化技术和单管ＲＴ－ＰＣＲ技术相结合，应用于ＩＢＤＶ的诊断研究，对４０余个病毒样品进行扩增反应，均取得令人满意的效果。该技术灵敏快速，从核酸纯化到电脉检测ＰＣＲ产物只需５～６ｈ，反应灵敏度比传统... 本研究将最新的病毒核酸纯化技术和单管ＲＴ－ＰＣＲ技术相结合，应用于ＩＢＤＶ的诊断研究，对４０余个病毒样品进行扩增反应，均取得令人满意的效果。该技术灵敏快速，从核酸纯化到电脉检测ＰＣＲ产物只需５～６ｈ，反应灵敏度比传统方法至少提高１００倍。所设计的引物对毒株的适用范围较广。 展开更多
关键词 IBDV PCR 快速检测 鸡病
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猪流行性腹泻GZ9101病毒株核酸型的鉴定
8
作者 林诚斌 李力复 李树根 《中国畜禽传染病》 CSCD 1994年第1期1-2,共2页
将我们分离并适应于猪肾传代细胞株（ＰＫ１５）传代、增殖的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），经多次冻融后进行浓缩处理，在抽提病毒核酸前使用核酸酶和蛋白酶Ｋ清除细胞核酸和杂蛋白，抽提后的病毒核酸用ＲＮＡ酶消化；将各个试样以０... 将我们分离并适应于猪肾传代细胞株（ＰＫ１５）传代、增殖的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），经多次冻融后进行浓缩处理，在抽提病毒核酸前使用核酸酶和蛋白酶Ｋ清除细胞核酸和杂蛋白，抽提后的病毒核酸用ＲＮＡ酶消化；将各个试样以０．８％琼脂糖凝胶进行电泳分析，结果表明，ＰＥＤＶ样品的核酸型为ＲＮＡ． 展开更多
关键词 猪病 流行性腹泻 病毒 核酸型 鉴定
原文传递
杆状病毒表达猪传染性胃肠炎病毒钉状蛋白在血清学诊断上的应用
9
作者 周仲芳 Lewi.,P 《动植物检疫》 1997年第1期14-20,共7页
用从猪传染性胃炎病毒（ＴＧＥＶ）强毒Ｍｉｌｌｅｒ株（Ｍ５Ｃ）克隆建立的一株的重组杆状病毒（Ｒ２－２）表达的重组ＴＧＥＶ钉状糖蛋白（Ｓｐｉｋｅ，Ｓ）建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来检测猪群中抗ＴＧＥＶ抗体... 用从猪传染性胃炎病毒（ＴＧＥＶ）强毒Ｍｉｌｌｅｒ株（Ｍ５Ｃ）克隆建立的一株的重组杆状病毒（Ｒ２－２）表达的重组ＴＧＥＶ钉状糖蛋白（Ｓｐｉｋｅ，Ｓ）建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来检测猪群中抗ＴＧＥＶ抗体。实验表明，用重组病毒Ｒ２－２接种昆虫传代细胞系Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（ｓｆ９），所表达的重组蛋白量在接种后第７２小明达到最高值；该重组蛋白能与抗ＴＧＥＶ 展开更多
关键词 猪病 传染性 胃肠炎 病毒 血清学 诊断
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