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GLI3、EN1基因在单纯性马蹄内翻足发生中的功能研究 被引量:6
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作者 曹东华 王谦 +3 位作者 林长坤 王正东 张炫 金春莲 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1214-1220,共7页
为了探讨人类GLI3基因在单纯性马蹄内翻足(Idiopathic congenital talipes equinovarus,ICTEV)发生时所起的作用,文章构建了大鼠Gli3基因启动子区域荧光素酶报告基因表达载体来分析Gli3基因启动子的活性,并利用P-Match软件预测大鼠Gli3... 为了探讨人类GLI3基因在单纯性马蹄内翻足(Idiopathic congenital talipes equinovarus,ICTEV)发生时所起的作用,文章构建了大鼠Gli3基因启动子区域荧光素酶报告基因表达载体来分析Gli3基因启动子的活性,并利用P-Match软件预测大鼠Gli3基因启动子区域可能的调控元件,应用ChIP实验加以验证。并利用RT-PCR、免疫组化和Western blotting的方法分析大鼠En1与ICTEV的相关性。经P-Match软件预测,Gli3基因启动子区域有3个转录因子En1的可能结合位点,经ChIP实验证实位点1是真正结合位点。RT-PCR、免疫组化和Western blotting方法都证实En1基因在马蹄内翻足模型鼠中表达下降。结果提示大鼠的转录因子En1可能是Gli3基因的上游负调控元件。在ICTEV患者中,很可能是由于EN1基因表达水平的下降导致了GLI3基因表达水平的上升,最终导致ICTEV的发生。 展开更多
关键词 GLI3基因 EN1基因 单纯性马蹄内翻足
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实时定量RT-PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因方法的建立 被引量:2
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作者 赵威 邱广斌 张继红 《检验医学与临床》 CAS 2011年第14期1669-1671,共3页
目的建立用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARα mRNA的方法。方法制备目的基因PML-RARα的RNA标准品及管家基因-βactin的RNA标准品。然后将目的基因PML-RARα和管家基因-βactin的标准品梯度... 目的建立用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARα mRNA的方法。方法制备目的基因PML-RARα的RNA标准品及管家基因-βactin的RNA标准品。然后将目的基因PML-RARα和管家基因-βactin的标准品梯度稀释作为模板进行实时荧光定量PCR反应,制作标准曲线。利用成功构建的两个标准曲线测定APL患者的目的基因PML-RARα与管家基因-βactin的相对值,分析不同状态患者的微小残留病(MRD)水平是否有差别,从而指导临床的治疗。结果用本研究建立的实时定量RT-PCR方法可检测出10~5μg NB4细胞cDNA中的PML-RARα融合基因,其重复性的循环域值(Ct值),管间、批间变异系数(CV)分别为2.2%、4.0%。结论本研究所建立的实时定量RT-PCR方法灵敏度高、重复性好。应用本法检测急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因表达水平的改变,有助于监测白血病微小残留病,评价疗效及判断预后。 展开更多
关键词 急性早幼粒细胞白血病 实时定量逆转录聚合酶链反应 PML-RARΑ融合基因 微小残留病
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泛素相关蛋白1基因与肿瘤抑制基因p16在急性白血病中的表达研究
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作者 关丽君 张继红 +4 位作者 王韫秀 张男 胡延平 李治国 赵威 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期1119-1123,共5页
为了探讨泛素相关蛋白1(UBAP1)基因和肿瘤抑制基因(p16)在急性白血病中的表达水平及二者的相关性,采用实时荧光定量PCR技术检测68例急性白血病患者和22例对照者骨髓细胞中ubap1基因和p16基因的mRNA的表达水平。结果发现,在急性白血病中u... 为了探讨泛素相关蛋白1(UBAP1)基因和肿瘤抑制基因(p16)在急性白血病中的表达水平及二者的相关性,采用实时荧光定量PCR技术检测68例急性白血病患者和22例对照者骨髓细胞中ubap1基因和p16基因的mRNA的表达水平。结果发现,在急性白血病中ubap1基因呈高表达,p16基因呈低表达,与对照组相比较有显著性差异(p<0.01)。然而,进一步分组比较发现,ubap1基因仅在成人急性髓系白血病的M4和M5亚型中的表达有统计学意义(p<0.05),p16基因除成人FAB分型的M1和M2亚型外,其余组差异均有统计学意义(p<0.05);而ubap1基因和p16基因的mRNA表达水平在染色体预后分组间差异无统计学意义(p>0.05)。ubap1基因和p16基因的表达水平在对照组中呈显著负相关(r=-0.827,p<0.01),在病例组中无相关性(r=0.065,p>0.05)。结论:ubap1基因高表达与p16基因低表达可能同时参与急性白血病的发病,其中ubap1基因高表达主要影响AML中M4和M5亚型的发病,这一发现为进一步探讨急性白血病发病机制及靶向治疗提供重要的理论依据。 展开更多
关键词 UBAP1基因 肿瘤抑制基因 P16基因 急性白血病
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