目的:研究O-GlcNAcylation调节蛋白激酶C受体1(receptor for activated C kinase 1,Rack1)的稳定性在SHH型髓母细胞瘤(SHH type medulloblastoma,SHH-MB)形成中的功能作用。方法:选取中国人民解放军西部战区总医院临床肿瘤标本库中分子...目的:研究O-GlcNAcylation调节蛋白激酶C受体1(receptor for activated C kinase 1,Rack1)的稳定性在SHH型髓母细胞瘤(SHH type medulloblastoma,SHH-MB)形成中的功能作用。方法:选取中国人民解放军西部战区总医院临床肿瘤标本库中分子分型所确定的SHH-MB肿瘤及癌旁组织,分析样本中Rack1和O-GlcNAcylation(O-Glc NAc)的表达水平差异。对于人源髓母细胞瘤细胞系Daoy使用糖基化转移酶(OGT)抑制剂(OSMI-1)和去糖基化转移酶(OGA)抑制剂(TM-G)进行处理,通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法和免疫荧光染色检测肿瘤细胞增殖能力。采用O-Glc NAc酶标记系统、免疫共沉淀(Co-IP)和Western blot法判断Rack1有无发生O-Glc NAc,而后通过环己酰亚胺(CHX)实验和泛素化修饰实验证实O-GlcNAcylation对Rack1蛋白水平的影响。构建敲低Rack1的髓母细胞瘤模型,通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法、免疫荧光染色和划痕实验检测肿瘤细胞增殖能力。同时通过在免疫缺陷型小鼠进行异种原位肿瘤移植进行验证,在所得组织样本中(sh-NC和shRack1)使用Western blot检测下游SHH信号通路变化。结果:Rack1和O-GlcNAcylation在SHH-MB中表达水平显著增高,且Rack1表达水平和患者生存率呈负相关关系。对Daoy细胞系使用OSMI-1、TM-G处理后,发现O-Glc NAc能明显促进Daoy细胞增殖,而抑制细胞O-GlcNAc则抑制细胞增殖。分子实验证实Rack1蛋白O-GlcNAcylation可以调节其蛋白稳定性,进而促进肿瘤细胞增殖。在Daoy细胞系敲低Rack1表达,其细胞增殖能力明显低于对照组;在动物水平方面,相较于对照组,Rack1蛋白敲低的肿瘤组织增殖受到显著抑制。并且Rack1可通过调节SHH信号通路参与SHH-MB形成。结论:O-GlcNAcylation可通过调节Rack1蛋白的稳定性进而参与SHH-MB形成。展开更多
目的比较骨水泥(PMMA)的不同注射剂量和分布规律对重度骨质疏松(OP)人工骨中可注射螺钉固定强度的作用,分析螺钉固定强度与PMMA注射剂量、分布规律之间的相关关系。方法重度OP人工骨模块随机分为A(180°-4孔螺钉),B(180°-6孔螺...目的比较骨水泥(PMMA)的不同注射剂量和分布规律对重度骨质疏松(OP)人工骨中可注射螺钉固定强度的作用,分析螺钉固定强度与PMMA注射剂量、分布规律之间的相关关系。方法重度OP人工骨模块随机分为A(180°-4孔螺钉),B(180°-6孔螺钉),C(180°-间隔4孔螺钉),D(普通椎弓根螺钉)4个螺钉组,每组又随机分为0、1、2、3剂量组(0、2.0、2.5、3.0 m L PMMA)。同法制备钉道后,A、B、C组中分别拧入A、B、C 3种可注射螺钉并注射不同剂量PMMA,D组向钉道内注射不同剂量PMMA后再拧入普通椎弓根螺钉。X线检查PMMA分布情况,测量螺钉的最大轴向拔出力(F_(max))。结果 X线检查显示,A1～A3组中PMMA包裹螺钉的前1/3,B1～B3组和C1～C3组中PMMA包裹螺钉的中1/3,D1～D3组中PMMA相对均匀地包裹螺钉的全长。两因素方差分析显示,PMMA剂量和分布两个因素对F_(max)均有影响(P<0.05),但PMMA剂量和分布两者之间无明显的相互作用(P>0.05)。在相同螺钉组间,2.0 m L和2.5 m L PMMA组、2.5 m L和3.0 m L PMMA组的F_(max)比较差异均无统计学差异(P>0.05),但3.0 m L PMMA组的F_(max)高于2.0 m L PMMA组(P<0.05)。A1组中F_(max)低于D1组(P<0.05),其余相同剂量组间的F_(max)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PMMA可提高重度OP人工骨中椎弓根螺钉的稳定性,PMMA的剂量及分布对螺钉稳定性有影响。在重度OP人工骨模块中,推荐使用A组的180°-4孔螺钉或B组的180°-6孔螺钉,可注射螺钉注射3.0 m L PMMA来强化螺钉的稳定性。展开更多
文摘目的比较骨水泥(PMMA)的不同注射剂量和分布规律对重度骨质疏松(OP)人工骨中可注射螺钉固定强度的作用,分析螺钉固定强度与PMMA注射剂量、分布规律之间的相关关系。方法重度OP人工骨模块随机分为A(180°-4孔螺钉),B(180°-6孔螺钉),C(180°-间隔4孔螺钉),D(普通椎弓根螺钉)4个螺钉组,每组又随机分为0、1、2、3剂量组(0、2.0、2.5、3.0 m L PMMA)。同法制备钉道后,A、B、C组中分别拧入A、B、C 3种可注射螺钉并注射不同剂量PMMA,D组向钉道内注射不同剂量PMMA后再拧入普通椎弓根螺钉。X线检查PMMA分布情况,测量螺钉的最大轴向拔出力(F_(max))。结果 X线检查显示,A1～A3组中PMMA包裹螺钉的前1/3,B1～B3组和C1～C3组中PMMA包裹螺钉的中1/3,D1～D3组中PMMA相对均匀地包裹螺钉的全长。两因素方差分析显示,PMMA剂量和分布两个因素对F_(max)均有影响(P<0.05),但PMMA剂量和分布两者之间无明显的相互作用(P>0.05)。在相同螺钉组间,2.0 m L和2.5 m L PMMA组、2.5 m L和3.0 m L PMMA组的F_(max)比较差异均无统计学差异(P>0.05),但3.0 m L PMMA组的F_(max)高于2.0 m L PMMA组(P<0.05)。A1组中F_(max)低于D1组(P<0.05),其余相同剂量组间的F_(max)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PMMA可提高重度OP人工骨中椎弓根螺钉的稳定性,PMMA的剂量及分布对螺钉稳定性有影响。在重度OP人工骨模块中,推荐使用A组的180°-4孔螺钉或B组的180°-6孔螺钉,可注射螺钉注射3.0 m L PMMA来强化螺钉的稳定性。
