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柔嫩艾美耳球虫保守蛋白EtCHP35特性和功能初步研究
1
作者 张思诗 姚亚文 +5 位作者 朱顺海 赵其平 董辉 于钰 黄兵 韩红玉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期11-21,共11页
鸡球虫病是由几种艾美耳属寄生虫寄生引起的一种家禽肠道疾病。目前,对于该病控制仍然主要依赖于抗球虫药物,但长期广泛地使用药物造成了球虫耐药性的产生。为研究球虫耐药性产生的分子机制,本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株... 鸡球虫病是由几种艾美耳属寄生虫寄生引起的一种家禽肠道疾病。目前,对于该病控制仍然主要依赖于抗球虫药物,但长期广泛地使用药物造成了球虫耐药性的产生。为研究球虫耐药性产生的分子机制,本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株、地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株以及敏感株进行了转录组测序并获得了敏感株与耐药株的差异表达基因,发现柔嫩艾美耳球虫保守蛋白35(EtCHP35)在盐霉素耐药株和马杜拉霉素耐药株mRNA转录水平显著上调。本研究以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA第一链为模板,成功克隆了柔嫩艾美耳球虫保守蛋白35(EtCHP35)基因,并在原核表达系统中成功表达了重组蛋白(rEtCHP3)。利用实时荧光定量PCR分析了该基因在柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段以及不同虫株(敏感株和耐药株)的mRNA转录水平,结果显示EtCHP35基因在敏感株孢子化卵囊的mRNA转录水平最高;与敏感株相比,EtCHP35的mRNA转录水平在马杜拉霉素耐药株和盐霉素耐药株上调,但在地克珠利耐药株mRNA转录水平无差异,且随着盐霉素耐药株浓度的升高,EtCHP35的mRNA转录水平也升高。间接免疫荧光定位结果表明该蛋白主要分布在子孢子和第二代裂殖子的表面和顶部。因此,推测该蛋白可能参与了虫体在宿主体内的生长发育、对宿主细胞的识别附着、逃避宿主免疫应答以及球虫对离子载体类药耐药性产生的过程。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 保守蛋白 免疫逃逸 耐药性
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马属(Equus)动物球虫种类与世界分布
2
作者 黄兵 董辉 +4 位作者 赵其平 韩红玉 朱顺海 赵焕之 于珏 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期229-236,共8页
为了解马属(Equus)动物球虫的种类及在世界各地的分布状况,本文收集整理了世界上有关马属动物球虫报道的相关文献,按虫种学名的字母为序,介绍了已报道的4种马属动物球虫,其中艾美耳属(Eimeria)3种、克氏孢子虫属(Klossiella)1种,每种球... 为了解马属(Equus)动物球虫的种类及在世界各地的分布状况,本文收集整理了世界上有关马属动物球虫报道的相关文献,按虫种学名的字母为序,介绍了已报道的4种马属动物球虫,其中艾美耳属(Eimeria)3种、克氏孢子虫属(Klossiella)1种,每种球虫包括中文名称与学名、宿主名称、寄生部位、地理分布,地理分布按照国家和地区的英文或拼音字母为序。在收录的45个国家记录马属动物球虫中,土耳其记录4种,俄罗斯记录3种,澳大利亚等14个国家记录2种,阿尔巴尼亚等29个国家记录1种;有40个国家记录了鲁氏艾美耳球虫(E.leuckarti),16个国家记录了马克氏孢子虫(K.equi),5个国家记录了单蹄兽艾美耳球虫(E.uniungulati),3个国家记录了奇蹄兽艾美耳球虫(E.solipedum)。另外,在秘鲁、伊拉克、斯里兰卡、马其顿、莱索托的马粪便中均检出艾美耳球虫未定种,其感染率为1.63%~54.54%。本文基本能反映出马属动物球虫在世界范围的分布状况,为全面了解马属动物球虫的种类与地理分布提供了一份较为完整的基础资料。 展开更多
关键词 马属 球虫 艾美耳球虫 克氏孢子虫 种类 分布
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柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白Et RON2 L1-2特性与功能初步分析
3
作者 陈烺 刘曼玉 +6 位作者 赵其平 朱顺海 王丽慧 郭慧琳 韩红玉 董辉 郝力力 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期389-397,共9页
为研究柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2(RON2)同源分子——Et RON2 L1-2的分子特性与功能,利用实时荧光定量PCR、Western blot、入侵抑制试验、间接免疫荧光试验以及双分子荧光互补实验(BiFC)等方法分析其生物学特征。结果发现Et RON2 L... 为研究柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2(RON2)同源分子——Et RON2 L1-2的分子特性与功能,利用实时荧光定量PCR、Western blot、入侵抑制试验、间接免疫荧光试验以及双分子荧光互补实验(BiFC)等方法分析其生物学特征。结果发现Et RON2 L1-2蛋白序列与Et RON2仅有29.69%的同源性,转录水平和蛋白水平均在第二代裂殖子阶段最高。抗r Et RON2 L1-2抗体对子孢子入侵细胞有明显抑制作用。Et RON2 L1-2蛋白主要分布于经PBS孵育子孢子的胞质和表面,并分布于经完全培养基孵育或入侵DF-1细胞后2 h子孢子的顶端;其表达量在滋养体和未成熟裂殖体增加,且在带虫空泡膜也有分布;在第二代裂殖子中主要分布于整个胞质。Et RON2 L1-2与柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原4(AMA4)之间存在互作关系。 展开更多
关键词 球虫 柔嫩艾美耳球虫 棒状体颈部蛋白2同源分子 入侵
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柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白EtRON2_(L2)特性与功能初步分析
4
作者 刘曼玉 朱顺海 +7 位作者 赵其平 贾刘数 肖克 赵焕之 于钰 黄兵 韩红玉 董辉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期1-10,共10页
利用RT-PCR、间接免疫荧光实验、免疫印迹实验、抗体中和实验以及BiFC等方法对柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2同源分子—Et RON2_(L2)的特性和功能进行研究。结果发现Et RON2_(L2)氨基酸序列与常规的Et RON2仅有26.63%的同源性,mRNA水... 利用RT-PCR、间接免疫荧光实验、免疫印迹实验、抗体中和实验以及BiFC等方法对柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2同源分子—Et RON2_(L2)的特性和功能进行研究。结果发现Et RON2_(L2)氨基酸序列与常规的Et RON2仅有26.63%的同源性,mRNA水平在第二代裂殖子中最高,而蛋白水平在第二代裂殖子和子孢子阶段最高;Et RON2_(L2)在游离的第二代裂殖子和子孢子阶段主要分布于胞质,而在入侵后子孢子中主要分布于虫体表面;抗rEt RON2_(L2)多克隆血清处理组明显抑制子孢子入侵细胞;Et RON2_(L2)与EtAMA3之间存在互作关系。本研究为探究Et RON2_(L2)在球虫入侵过程中的作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 棒状体颈部蛋白2 相互作用
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硅藻土惰性粉杀蜱效果研究 被引量:1
5
作者 周勇志 Mungunsar Chuluun +4 位作者 曹杰 张厚双 吴辉文 蒋春青 周金林 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第6期92-95,共4页
硅藻土惰性粉是一种不产生抗性的物理杀虫剂,已应用于某些植物害虫和粮食仓储害虫的杀灭,但对媒介硬蜱的杀灭效果还没有报道。本研究通过喷洒硅藻土惰性粉,分别对不同发育阶段的长角血蜱和亚洲璃眼蜱进行杀灭实验,观察蜱的死亡情况。结... 硅藻土惰性粉是一种不产生抗性的物理杀虫剂,已应用于某些植物害虫和粮食仓储害虫的杀灭,但对媒介硬蜱的杀灭效果还没有报道。本研究通过喷洒硅藻土惰性粉,分别对不同发育阶段的长角血蜱和亚洲璃眼蜱进行杀灭实验,观察蜱的死亡情况。结果发现硅藻土惰性粉对二种硬蜱的幼蜱和若蜱均具有一定杀灭作用,但对成蜱无效。本研究结果为消杀环境和畜禽圈舍中幼蜱和若蜱提供了一个可选的绿色环保方法。 展开更多
关键词 硅藻土 防治
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弓形虫新的表面抗原SRS20A的鉴定及特征化
6
作者 林晓幸 李威 +4 位作者 曹杰 周勇志 王亚楠 周金林 张厚双 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第5期93-100,共8页
克隆弓形虫上海SHR株SRS20A基因,构建原核表达体系,通过诱导表达和蛋白纯化,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,对蛋白进行特征化鉴定。采用PCR技术扩增弓形虫SRS20A基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠埃希菌(E.coli),IPTG诱导... 克隆弓形虫上海SHR株SRS20A基因,构建原核表达体系,通过诱导表达和蛋白纯化,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,对蛋白进行特征化鉴定。采用PCR技术扩增弓形虫SRS20A基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠埃希菌(E.coli),IPTG诱导目的蛋白表达,采用镍亲和层析法获得纯化蛋白并免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,使用弓形虫阳性血清检测SRS20A蛋白的反应原性,应用纯化的rSRS20A蛋白通过ELISA方法对猪临床样品进行检测,利用Western blot技术检测多克隆抗体与弓形虫天然蛋白的反应性,通过间接免疫荧光观察SRS20A蛋白在虫体内的定位情况。成功从弓形虫基因组中扩增出SRS20A目的基因,构建了pET-30a-SRS20A重组质粒,利用小鼠感染弓形虫的阳性血清可以特异性识别重组蛋白rSRS20A,ELISA试验表明rSRS20A可以与猪临床血清特异性反应,证明SRS20A具有良好的反应原性。制备并获得了抗SRS20A重组蛋白的多克隆抗体,通过Western blot可检测出弓形虫天然蛋白SRS20A的特异性条带。通过间接免疫荧光方法鉴定SRS20A蛋白定位在弓形虫速殖子表面。通过分子生物学方法鉴定及特征化了一个新的弓形虫速殖子表面抗原SRS20A,为进一步深入研究弓形虫SRS20A功能奠定基础。 展开更多
关键词 弓形虫 SRS20A 鉴定 特征化
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柔嫩艾美耳球虫AMA1基因DNA疫苗的免疫保护效果 被引量:7
7
作者 王晔 赵其平 +6 位作者 朱顺海 董辉 姜连连 薛璞 舒凡帆 黄兵 韩红玉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第6期1-9,共9页
本研究旨在评价表达柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)顶膜抗原1(Apical membrane antigen 1,Et AMA1)基因的DNA疫苗对雏鸡柔嫩艾美耳球虫人工感染的免疫保护效果。将Et AMA1基因和鸡IFN-γ基因插入真核表达载体p CAGGS中,分别构建了真... 本研究旨在评价表达柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)顶膜抗原1(Apical membrane antigen 1,Et AMA1)基因的DNA疫苗对雏鸡柔嫩艾美耳球虫人工感染的免疫保护效果。将Et AMA1基因和鸡IFN-γ基因插入真核表达载体p CAGGS中,分别构建了真核表达重组质粒p CAGGS-Et AMA1和p CAGGS-Et AMA1-IFN-γ。将重组质粒p CAGGS-Et AMA1转染进293T细胞中,经间接免疫荧光和Western blot实验鉴定,观察其在体外表达情况。将p CAGGS-Et AMA1和p CAGGS-Et AMA1-IFN-γ于7日龄和14日龄腿部肌肉注射免疫雏鸡,21日龄人工感染1×10^4个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,第29日龄时处死试验鸡,以平均增重、卵囊产量和病变记分来评价重组质粒的免疫保护效果。结果显示,p CAGGS-Et AMA1转染的293T细胞出现明显的红色荧光;两种真核表达重组质粒免疫组鸡的平均增重与未攻虫组的平均增重差异不显著,不具有统计学意义,而未免疫攻虫组则与未攻虫组在增重方面差异具有显著统计学意义;免疫组鸡相较于未免疫攻虫组在病变记分方面显著下降;免疫组的卵囊减少率分别为67.43%和72.89%;p CAGGSEt AMA1-IFN-γ组在增重、盲肠病变记分和卵囊减少率方面都优于p CAGGS-Et AMA1组,但差异不具有统计学意义。表明构建的2种重组质粒对雏鸡柔嫩艾美耳球虫感染有一定的免疫保护效果。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 AMA1基因 真核表达 免疫保护效果
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世界牛球虫种类与地理分布 被引量:5
8
作者 黄兵 董辉 +3 位作者 朱顺海 赵其平 韩红玉 赵焕之 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第6期1-18,共18页
为全面了解牛球虫的种类及在世界各地的分布状况,本文收集整理了世界上有关牛球虫报道的文献,依虫种学名的字母为序,介绍了27种牛球虫,其中25种艾美耳球虫(Eimeria)、2种等孢球虫(Isospora),每种球虫包括中文名称与学名、宿主名称、寄... 为全面了解牛球虫的种类及在世界各地的分布状况,本文收集整理了世界上有关牛球虫报道的文献,依虫种学名的字母为序,介绍了27种牛球虫,其中25种艾美耳球虫(Eimeria)、2种等孢球虫(Isospora),每种球虫包括中文名称与学名、宿主名称、寄生部位、致病性和地理分布,部分种类有同物异名,地理分布则按国家或地区的英文或拼音字母为序。在收录的60个国家中,分布最广的球虫为椭圆艾美耳球虫(52个国家),其次为奥博艾美耳球虫(50个国家),第三为牛艾美耳球虫和邱氏艾美耳球虫(均为48个国家),分布少于10个国家的种类占51.85%。报道球虫种类最多的国家为印度(20种),其次为中国(19种),第三为巴西(16种),报道少于10种球虫的国家占51.67%。本文能反映出牛球虫在世界范围内的基本分布状况,为全面了解牛球虫的种类与地理分布提供了一份较为完整的基础资料。 展开更多
关键词 球虫 种类 世界分布
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世界绵羊(Ovis aries)球虫种类与地理分布
9
作者 黄兵 董辉 +3 位作者 赵其平 韩红玉 于珏 朱顺海 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第2期181-197,共17页
为了解绵羊(Ovis aries)球虫的种类及在世界各地的分布情况,本文收集整理了世界上报道绵羊球虫的相关资料,按照虫种学名的字母为序,介绍了寄生于绵羊的17种艾美耳球虫(Eimeria),其中3种在中国发现与命名的球虫为卵状艾美耳球虫(Eimeria ... 为了解绵羊(Ovis aries)球虫的种类及在世界各地的分布情况,本文收集整理了世界上报道绵羊球虫的相关资料,按照虫种学名的字母为序,介绍了寄生于绵羊的17种艾美耳球虫(Eimeria),其中3种在中国发现与命名的球虫为卵状艾美耳球虫(Eimeria oodeus Hu and Yan,1990)、厚膜艾美耳球虫(Eimeria pachmenia Hu and Yan,1990)、固原艾美耳球虫(Eimeria guyuanensis Xiao,1992)。每种球虫包括中文名称与学名、宿主名称、寄生部位、地理分布,部分种类有同物异名,地理分布按照国家或地区的英文或拼音字母为序。在收录的56个国家中,记录球虫种类最多的国家为中国(17种),其次为巴西(13种),记录11~12种球虫的国家占32.14%,6~10种球虫的国家占35.71%,1~5种球虫的国家占28.57%。在17种绵羊球虫中,分布最广的球虫为小型艾美耳球虫(49个国家),其次为类绵羊艾美耳球虫(46个国家),分布40~45个国家的球虫种类占29.41%,20~39个国家的球虫种类占23.53%,1~19个国家的球虫种类占35.29%。本文基本能反映出绵羊球虫在世界范围的分布状况,为全面了解绵羊球虫的地理分布提供了一份较为完整的基础资料。 展开更多
关键词 绵羊 球虫 艾美耳球虫 种类 分布
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日本血吸虫蛋白质组学研究进展
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作者 洪炀 林矫矫 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 2021年第6期725-731,共7页
蛋白是基因功能的主要体现者和具体实施者。近年来,日本血吸虫蛋白质组学研究受到关注并取得一些进展。本文对国内外在日本血吸虫蛋白质组学方面的研究进展作一综述,以期为阐述日本血吸虫的生长发育机制,筛选诊断抗原标识、疫苗候选分... 蛋白是基因功能的主要体现者和具体实施者。近年来,日本血吸虫蛋白质组学研究受到关注并取得一些进展。本文对国内外在日本血吸虫蛋白质组学方面的研究进展作一综述,以期为阐述日本血吸虫的生长发育机制,筛选诊断抗原标识、疫苗候选分子和新治疗药物靶标等提供有参考价值的信息。 展开更多
关键词 日本血吸虫 蛋白质组学 生长发育机制
原文传递
柔嫩艾美耳球虫延伸因子1α特性与功能初步分析 被引量:2
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作者 梁珊珊 朱顺海 +7 位作者 赵其平 黄兵 董辉 于钰 王青杰 余水兰 王海霞 韩红玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期3111-3121,共11页
鸡球虫病在世界范围内对家禽业具有重大的经济影响,导致高死亡率、低增长、低生产力和高防治成本。由于球虫耐药性问题严峻,球虫病的防治重点倾向于研究方便安全,并且与活疫苗相比更容易生产的亚单位疫苗。因此,迫切需要新的方法来有效... 鸡球虫病在世界范围内对家禽业具有重大的经济影响,导致高死亡率、低增长、低生产力和高防治成本。由于球虫耐药性问题严峻,球虫病的防治重点倾向于研究方便安全,并且与活疫苗相比更容易生产的亚单位疫苗。因此,迫切需要新的方法来有效地控制球虫病,包括寻找特定的分子靶标。本文以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA第一链为模板,扩增了延伸因子1α(Et EF1α)的ORF序列,生物信息学分析显示,该基因编码450个氨基酸,预测相对分子质量为49.1 ku,等电点为4.7;编码的蛋白无信号肽和跨膜结构域,但都含有N-肉豆蔻酰化位点。qRT-PCR和Western blot分析Et EF1α在虫体不同发育阶段的mRNA转录水平和蛋白翻译水平,结果显示,Et EF1α在子孢子(Spz)和裂殖子(Mrz)的mRNA转录水平高于未孢子化卵囊(UO)和孢子化卵囊(SO),翻译水平在UO和Mrz高表达;间接免疫定位发现,Et EF1α主要定位于Spz一端和整个Mrz,随着虫体在细胞内发育,荧光强度逐渐增强。分泌试验显示该蛋白为分泌蛋白,但不是由微线体分泌的。入侵抑制试验结果表明,兔抗r Et EF1α多克隆抗体能抑制子孢子入侵DF-1细胞,抑制率约为22%。综上表明,该蛋白可能参与了虫体在宿主细胞内的生长发育和子孢子入侵宿主细胞的过程。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 延伸因子1α 特性分析 入侵
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基于iTRAQ技术分析柔嫩艾美耳球虫感染后CEF细胞的差异表达蛋白 被引量:2
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作者 王璐 朱顺海 +6 位作者 赵其平 黄兵 韩红玉 刘桂玲 李志行 赵焕之 董辉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第5期8-16,共9页
柔嫩艾美耳球虫是一种严格的细胞内专性寄生虫,可主动入侵鸡的盲肠上皮细胞。当受到柔嫩艾美耳球虫感染时,宿主细胞会发生相应的变化以应对感染引起的损伤。迄今为止,对宿主细胞应对球虫感染机制的研究极其有限。本研究利用相对和绝对... 柔嫩艾美耳球虫是一种严格的细胞内专性寄生虫,可主动入侵鸡的盲肠上皮细胞。当受到柔嫩艾美耳球虫感染时,宿主细胞会发生相应的变化以应对感染引起的损伤。迄今为止,对宿主细胞应对球虫感染机制的研究极其有限。本研究利用相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)技术结合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术分析了感染柔嫩艾美耳球虫子孢子72 h后原代鸡胚成纤维(CEF)细胞的蛋白质组表达变化,结果共鉴定出3967个非冗余蛋白质,与不感染组相比,感染组有259个蛋白质的表达量发生了明显变化,其中上调蛋白质145个和下调蛋白质114个;GO和KEGG通路分析结果发现,这些差异表达蛋白具有结合活性、催化活性、转运子活性等分子功能,主要参与细胞外基质受体互作、糖酵解/糖异生、粘着斑、氨基酸的生物合成、半胱氨酸和蛋氨酸代谢等通路;qPCR结果发现,8个基因的mRNA转录水平变化与iTRAQ结果一致,2个基因的不一致;Western blot结果发现感染组细胞的FABP4蛋白表达量显著降低,与iTRAQ结果中蛋白表达水平变化相一致。本研究结果为柔嫩艾美耳球虫与宿主之间互作关系的深入研究提供了重要的基础数据。 展开更多
关键词 ITRAQ 球虫 CEF细胞 差异表达蛋白
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柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原2特性与功能初步分析 被引量:1
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作者 王青杰 朱顺海 +7 位作者 赵其平 黄兵 韩红玉 于钰 梁珊珊 余水兰 王海霞 董辉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第5期8-18,共11页
为了研究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原2(EtAMA2)的分子特性与功能,利用间接免疫荧光试验、入侵抑制试验、实时荧光定量PCR、Western blot以及分泌试验等方法分析其生物学特性。结果发现EtAMA2蛋白具一个跨膜区和信号肽,在子孢子和第二代裂殖... 为了研究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原2(EtAMA2)的分子特性与功能,利用间接免疫荧光试验、入侵抑制试验、实时荧光定量PCR、Western blot以及分泌试验等方法分析其生物学特性。结果发现EtAMA2蛋白具一个跨膜区和信号肽,在子孢子和第二代裂殖子中的转录水平明显高于未孢子化卵囊和孢子化卵囊,但蛋白仅在第二代裂殖子中被检测到;EtAMA2在游离的子孢子和第二代裂殖子中主要分布在胞质,在胞内的子孢子中主要分布在顶端。EtAMA2是一种微线体分泌蛋白,其分泌受到温度的调控。抗EtAMA2特异性抗体对子孢子入侵细胞没有明显抑制作用;将EtAMA2转染至DF-1细胞后,子孢子入侵率明显提高。本研究结果为深入研究 EtAMA2 在球虫入侵过程中的功能与作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 球虫 柔嫩艾美耳球虫 顶膜抗原2 微线体 入侵
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日本血吸虫p38MAPK的克隆、表达和功能初步分析
14
作者 李慧民 李雪 +8 位作者 Bikash R.Giri 刘军涛 夏天奇 王立辉 杜鹏飞 陈永军 Hanif Ullah Abdul Qadeer 程国锋 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第6期35-41,共7页
丝裂原相关蛋白激酶(MAPK)信号通路在血吸虫的发育和产卵过程中发挥重要的调节作用,已有研究表明p38MAPK可调控曼氏血吸虫的发育,并参与雌性成熟过程。为此,本研究对日本血吸虫p38MAPK(Sjp38MAPK)进行了克隆、表达,并对其功能进行了初... 丝裂原相关蛋白激酶(MAPK)信号通路在血吸虫的发育和产卵过程中发挥重要的调节作用,已有研究表明p38MAPK可调控曼氏血吸虫的发育,并参与雌性成熟过程。为此,本研究对日本血吸虫p38MAPK(Sjp38MAPK)进行了克隆、表达,并对其功能进行了初步分析。结果表明:Sjp38MAPK长度1038 bp,预测分子量39.58 kDa;生物信息学分析表明Sjp38MAPK与曼氏血吸虫和埃及血吸虫的同源性分别为93%和90%;qRT-PCR分析表明Sjp38MAPK在成虫中的表达量较高于虫卵、尾蚴和童虫时期;进一步利用siRNA抑制Sjp38MAPK表达,发现虫体卵壳蛋白的合成,运动以及细胞活性等方面受到影响。总之,本研究初步表明了Sjp38MAPK在日本血吸虫的发育和产卵过程中可能同样发挥重要的调节作用,值得深入研究。 展开更多
关键词 日本血吸虫 P38MAPK 蛋白激酶 发育 产卵
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包裹双链RNA的壳聚糖纳米粒子的制备和初步抗蜱作用
15
作者 罗莉 张厚双 +3 位作者 王亚楠 曹杰 周勇志 周金林 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第6期59-67,共9页
为了开发简便、环境友好的新型抗蜱制剂,本研究在前期发现镰形扇头蜱ATG5基因的双链RNA具有显著干扰作用的基础上,构建了一种携载双链RNA(dsRNA)的壳聚糖纳米粒子,用于抗蜱作用研究。在壳聚糖分子中引入二硫键,制备得到了由聚乙二醇(PEG... 为了开发简便、环境友好的新型抗蜱制剂,本研究在前期发现镰形扇头蜱ATG5基因的双链RNA具有显著干扰作用的基础上,构建了一种携载双链RNA(dsRNA)的壳聚糖纳米粒子,用于抗蜱作用研究。在壳聚糖分子中引入二硫键,制备得到了由聚乙二醇(PEG)修饰的具有还原刺激响应性的壳聚糖纳米粒子,即PEG-(CS-SS-CS)。该纳米具有表面积大、吸附能力强、能够在蜱体内还原性环境中快速释放药物等特点。通过静电相互作用,吸附带负电的dsRNA,形成载药复合纳米粒子,即:PEG/(CS-SS-CS)/dsRNA。其结合效率高达77.62%±5.77%,微观形貌为球形,平均粒径为200.80±2.04 nm。红外光谱图结果显示,壳聚糖纳米粒子中含有二硫键,具有还原刺激响应性,增强其体外稳定性,有效避免dsRNA的体外降解。初步抗蜱实验表明,当浸染蜱的双链RNA的壳聚糖纳米浓度为10 ng/μL时,严重影响蜱的正常吸血,显示了较好的抗蜱效果,这些结果为新型抗蜱制剂的开发提供了新思路。 展开更多
关键词 壳聚糖纳米粒子 RNA干扰 二硫键
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日本血吸虫PROHIBITIN 2克隆和表达及免疫保护效果评估
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作者 杨珊珊 杨静云 +7 位作者 张旻 张倩 何静 黄明月 窦记晨 洪炀 林矫矫 傅志强 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第6期83-90,共8页
为研究日本血吸虫PROHIBITIN的生物特性,利用PCR和3’RACE扩增到日本血吸虫抗增殖蛋白2(Schistosoma japonicum Prohibitin 2,Sj PHB2)基因,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-SjPHB2,并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达,用Western blot检测其免... 为研究日本血吸虫PROHIBITIN的生物特性,利用PCR和3’RACE扩增到日本血吸虫抗增殖蛋白2(Schistosoma japonicum Prohibitin 2,Sj PHB2)基因,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-SjPHB2,并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达,用Western blot检测其免疫原性。将重组蛋白免疫小鼠评估其免疫保护效果,ELISA检测其特异性抗体水平。结果显示:日本血吸虫Sj PHB2基因编码299个氨基酸,含PHB结构域;含GST标签的r Sj PHB2融合蛋白的分子量为59 kDa;r Sj PHB2能被GST单克隆抗体抗和免疫血清识别,表明其具有较好的免疫原性;将r Sj PHB2结合ISA206佐剂免疫BALB/c小鼠可诱导较高水平的特异性IgG抗体,但未能诱导显著的减虫率和减卵率。本文结果为开展日本血吸虫Sj PHB2的表达特性和生物学功能提供了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 抗增殖蛋白2 克隆 表达
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左旋咪唑对柔嫩艾美耳球虫活疫苗免疫增强效果的评价
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作者 余水兰 赵其平 +7 位作者 朱顺海 黄兵 韩红玉 于钰 梁珊珊 王青杰 王海霞 董辉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第4期61-68,共8页
为评价左旋咪唑对柔嫩艾美耳球虫活疫苗的免疫增强效力,本研究以3日龄雏鸡为研究对象,先通过笼养试验筛选左旋咪唑的有效剂量,再通过平养试验验证其效果。笼养试验结果显示,0.1 mg和0.05 mg组免疫期间的增重均稍高于0.2 mg组及无佐剂免... 为评价左旋咪唑对柔嫩艾美耳球虫活疫苗的免疫增强效力,本研究以3日龄雏鸡为研究对象,先通过笼养试验筛选左旋咪唑的有效剂量,再通过平养试验验证其效果。笼养试验结果显示,0.1 mg和0.05 mg组免疫期间的增重均稍高于0.2 mg组及无佐剂免疫组,ACI分别高于或相当于无佐剂免疫组。平养试验结果显示,0.1 mg和0.05 mg组免疫期间的增重均稍好于无佐剂免疫组,0.10 mg组的ACI明显高于0.05 mg组,而后者与无佐剂免疫组的相当;0.1 mg组CD8水平于免疫后第14 d明显高于无佐剂免疫组,而0.05 mg组与无佐剂免疫组相当;0.1 mg和0.05 mg组的TNF-α水平在免疫后第21 d和攻虫后7 d均明显高于无佐剂免疫组,而CD4分子与无佐剂免疫组之间无显著性差异。以上结果表明,0.1 mg左旋咪唑可以明显提高柔嫩艾美耳球虫对3日龄雏鸡的免疫效果。本研究结果为进一步评估左旋咪唑作为球虫病活疫苗的免疫增强剂提供理论基础。 展开更多
关键词 左旋咪唑 柔嫩艾美耳球虫 免疫增强
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日本血吸虫重组蛋白TMEM66P的表达和多克隆抗体的制备
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作者 李雪 李旭欣 +7 位作者 GiRi B R 刘静宜 刘军涛 夏天奇 杜鹏飞 李慧民 李舜 程国锋 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第4期150-155,共6页
血吸虫病是由血吸虫尾蚴感染引起的一种人畜共患寄生虫病,对宿主造成严重病理性损害,是WHO确定的六大重点热带病之一。血吸虫体被直接与宿主的免疫系统相接触,是宿主与虫体信息交流的重要界面,位于虫体体被跨膜蛋白的功能研究尤显重要... 血吸虫病是由血吸虫尾蚴感染引起的一种人畜共患寄生虫病,对宿主造成严重病理性损害,是WHO确定的六大重点热带病之一。血吸虫体被直接与宿主的免疫系统相接触,是宿主与虫体信息交流的重要界面,位于虫体体被跨膜蛋白的功能研究尤显重要。本文对日本血吸虫膜蛋白(TEME66P)的cDNA进行表达和抗血清的制备。首先,利用生物信息学分析TMEM66P跨膜结构,并构建系统进化树,构建重组原核表达质粒并表达纯化重组蛋白,制备抗血清,通过Western blot对抗血清的特异性进行检测。研究表明TMEM66P存在跨膜区,其氨基酸序列与曼氏血吸虫同源性为67.79%,抗血清能够识别出全虫蛋白中TMEM66P,具有良好的特异性。本研究为进一步探索TMEM66P在日本血吸虫中的功能奠定了初步基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 TMEM66P 膜蛋白 抗血清
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