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中国(云南)丙型肝炎病毒基因型研究
1
作者 陈元鼎 《医学研究通讯》 2003年第7期13-14,共2页
本项目研究运用基因工程和分子免疫学技术,对中国HCV感染者中HCV基因组进行了克隆、序列测定和基因分型,对中国HCV感染的流行病学和临床特征以及HCV的基因型及其地理和人群分布进行了研究,并对HCV感染者中不同基因群(Clade)或不同基因型... 本项目研究运用基因工程和分子免疫学技术,对中国HCV感染者中HCV基因组进行了克隆、序列测定和基因分型,对中国HCV感染的流行病学和临床特征以及HCV的基因型及其地理和人群分布进行了研究,并对HCV感染者中不同基因群(Clade)或不同基因型(genotype)HCV以及HCV同其他肝炎病毒的混合感染状况及其临床特征进行了研究. 展开更多
关键词 基因型 丙型肝炎病毒 中国 基因工程 分子免疫学技术
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HSVⅠ感染人成纤维细胞诱导的SR-15蛋白生物学功能分析 被引量:1
2
作者 姜莉 李品忠 +1 位作者 董承红 李琦涵 《中国病毒学》 CSCD 2006年第6期546-550,共5页
人单纯疱疹病毒Ⅰ型(HerpessimplexvirusⅠ,HSVⅠ)结合人成纤维细胞相应受体以启动感染的过程,能够引起细胞产生特异性蛋白分子的表达,其中之一的SR-15蛋白经酵母双杂交系统分析证明可与细胞内多个具有KRAB结构的锌指蛋白产生特异性相... 人单纯疱疹病毒Ⅰ型(HerpessimplexvirusⅠ,HSVⅠ)结合人成纤维细胞相应受体以启动感染的过程,能够引起细胞产生特异性蛋白分子的表达,其中之一的SR-15蛋白经酵母双杂交系统分析证明可与细胞内多个具有KRAB结构的锌指蛋白产生特异性相互作用,其作用部位为锌指结构域,该作用能够影响该类蛋白之一ZNF268在细胞内的转录抑制作用。 展开更多
关键词 HSV SR-15 相互作用 锌指蛋白
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中国消灭脊髓灰质炎——历史回顾及体会 被引量:11
3
作者 董德祥 《国外医学(流行病学.传染病学分册)》 2004年第5期261-264,共4页
脊髓灰质炎是一种严重危害人类健康的急性病毒性传染病。20世纪初叶此病即在欧洲及美洲的一些国家流行,以后遍及世界各地,我国于50年代开始有流行报道。1959年卫生部决定用疫苗来预防此病,并从苏联引进脊髓灰质炎减毒活疫苗的制造技术。... 脊髓灰质炎是一种严重危害人类健康的急性病毒性传染病。20世纪初叶此病即在欧洲及美洲的一些国家流行,以后遍及世界各地,我国于50年代开始有流行报道。1959年卫生部决定用疫苗来预防此病,并从苏联引进脊髓灰质炎减毒活疫苗的制造技术。2000年7月我国证实从1994年10月起已无由本土脊髓灰质炎野病毒引起的脊髓灰质炎病例,达到了无脊髓灰质炎的目标。本文就我国脊髓灰质炎的发病情况及控制消灭此病的历史进程作一介绍。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎减毒活疫苗 消灭 体会 流行 急性病毒性传染病 脊髓灰质炎野病毒 严重 引进 中国 人类健康
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人睫状神经营养因子基因克隆、表达、纯化及其生物活性 被引量:5
4
作者 李鸿钧 马雁冰 +4 位作者 苏 婷 戴长柏 孙茂盛 黎建肖 张明珠 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期155-158,共4页
[摘 要]目的 克隆人睫状神经营养因子(hCNTF)基因,在大肠杆菌宿主系统中高效表达并纯化,获得具有生物活性的hCNTF蛋白。方法 以人染色体DNA为模板,经PCR扩增到编码CNTF成熟蛋白的cDNA序列,并克隆进原核表达载体 pBV220,在大肠... [摘 要]目的 克隆人睫状神经营养因子(hCNTF)基因,在大肠杆菌宿主系统中高效表达并纯化,获得具有生物活性的hCNTF蛋白。方法 以人染色体DNA为模板,经PCR扩增到编码CNTF成熟蛋白的cDNA序列,并克隆进原核表达载体 pBV220,在大肠杆菌 BL21(Gold)中进行表达,产物经 CM-Sepharose FF柱纯化后,以体外培养的鸡胚背根神经节(DRG)测定生物活性。结果 重组表达质粒pBV22Z- CNTF在大肠杆菌BL21(Gold)中获得了非融合的稳定、高效表达,目的蛋白占细胞总蛋白的45%左右,以可溶性和包涵体两种形式存在,表达上清及包涵体复性后经CM柱一步纯化纯度达90%以上;表达的重组hCNTF能促进培养的鸡胚背根神经节神经突起的生长。结论 基因工程rhCNTF的获得为进一步研究其结构功能关系和临床应用奠定基础。 展开更多
关键词 人睫状神经营养因子 基因克隆 表达 纯化 生物活性
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采用质粒DNA研究人结缔组织生长因子(hCTGF)对骨损伤修复作用 被引量:1
5
作者 孙明 和占龙 +4 位作者 王晶晶 鲁帅尧 王丽春 赵远 李琦涵 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期16-19,共4页
目的:研究人结缔组织生长因子(hCTGF)对细胞的增殖作用及其骨损伤促愈合的生物学作用。方法:利用真核基因导入系统,转染具有分化潜能的成纤维细胞,并导入骨折实验动物模型,利用分子生物学和临床骨科技术检测分析,获得数据。结果:明确了h... 目的:研究人结缔组织生长因子(hCTGF)对细胞的增殖作用及其骨损伤促愈合的生物学作用。方法:利用真核基因导入系统,转染具有分化潜能的成纤维细胞,并导入骨折实验动物模型,利用分子生物学和临床骨科技术检测分析,获得数据。结果:明确了hCTGF对细胞的增殖作用,表明了hCTGF以基因治疗为手段具有修复骨损伤的生物学活性,为该因子在临床上治疗骨损伤提供新的活性因子和新的治疗方法。 展开更多
关键词 hCTGF 基因表达系统 骨创伤 愈合
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重组人降钙素基因相关肽融合表达及纯化初步研究 被引量:1
6
作者 陈慧诚 李健峰 徐维明 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第3期14-17,共4页
采用大肠杆菌偏爱的密码子人工合成hαCGRP基因,构建了原核融合表达载体,对融合蛋白成功地进行了表达、纯化,Western免疫印迹验证该蛋白具有αCGRP抗原性,为下一步hαCGRP纯品的获得及动物实验的研究奠定基础。
关键词 Self-primering αCGRP 原核表达
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数据挖掘在蛋白质组学研究中的应用 被引量:1
7
作者 肖革新 代解杰 《生命的化学》 CAS CSCD 2004年第5期381-383,共3页
介绍蛋白质组学研究的背景 ;阐述数据挖掘的原理、方法 ,重点讲述数据挖掘技术在蛋白质组学研究中取得的新的进展。最后 ,对数据挖掘目前存在的问题作分析 ,并对它的发展的前景作展望。
关键词 蛋白质组 蛋白质组学 数据挖掘
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胶质细胞源性神经营养因子家族研究进展 被引量:7
8
作者 李鸿钧 马雁冰 孙茂盛 《国外医学(临床生物化学与检验学分册)》 2002年第2期115-117,共3页
胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)、neurturin(NTN)、persephin(PSP)、artemin(ART)共同构成TGF β超家族的一个亚家族。四者结构相似、功能相关 ,且氨基酸顺序有较高的同源性。在体内 ,它们都是以前体的形式分泌 ,经加工、修饰 ,成熟... 胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)、neurturin(NTN)、persephin(PSP)、artemin(ART)共同构成TGF β超家族的一个亚家族。四者结构相似、功能相关 ,且氨基酸顺序有较高的同源性。在体内 ,它们都是以前体的形式分泌 ,经加工、修饰 ,成熟的蛋白质分子为二硫键连接形成的同源二聚体。对中脑多巴胺能神经元、颈上神经节交感神经元、脊髓运动神经元等具有明显的营养与保护作用。在信号传导中 ,GDNF家族α受体 (GDNFFamilyRecepteralpha,GFRα)与原癌基因c ret编码的产物蛋白Ret共同形成GDNF家族成员的功能性复合受体 。 展开更多
关键词 神经营养因子 同源二聚体 多巴胺能神经元 GDNF家族 研究进展
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鼻腔免疫研究进展 被引量:1
9
作者 李菁 胡云章 《生物技术通讯》 CAS 2002年第6期476-478,482,共4页
鼻腔免疫能避免肝脏的首过效应,有效地诱导粘膜局部免疫和系统免疫应答,具有远端共同粘膜效应,比其它免疫途径更简便、更安全,成为当今疫苗研究的重点方向之一。本文综述鼻腔免疫应答的细胞和分子机理、抗原释放系统及佐剂等方面的最新... 鼻腔免疫能避免肝脏的首过效应,有效地诱导粘膜局部免疫和系统免疫应答,具有远端共同粘膜效应,比其它免疫途径更简便、更安全,成为当今疫苗研究的重点方向之一。本文综述鼻腔免疫应答的细胞和分子机理、抗原释放系统及佐剂等方面的最新研究进展。 展开更多
关键词 鼻腔免疫 研究进展 鼻相关淋巴组织 抗原释放系统 佐剂
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Bax和Bcl-2在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘组织中的表达研究
10
作者 高红军 代解杰 +3 位作者 唐东红 王红星 林海燕 祝诚 《中国计划生育学杂志》 北大核心 2005年第3期166-169,共4页
 目的:Bax和Bcl-2是重要的凋亡调节因子,本研究主要探讨细胞凋亡与流产的关系。方 法:应用RT-PCR和原位杂交的方法检测恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘、子宫中Bax和Bcl-2的 表达。结果:BaxmRNA在流产胎盘中的表达...  目的:Bax和Bcl-2是重要的凋亡调节因子,本研究主要探讨细胞凋亡与流产的关系。方 法:应用RT-PCR和原位杂交的方法检测恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘、子宫中Bax和Bcl-2的 表达。结果:BaxmRNA在流产胎盘中的表达量明显高于正常妊娠胎盘,在胎盘绒毛滋养层细胞和基 底层蜕膜细胞均有明显表达。Bcl-2mRNA在流产胎盘中的表达量明显低于正常妊娠胎盘,表达模 式与Bax类似。结论:药物可能通过上调Bax和下调Bcl-2的表达,导致恒河猴胎盘组织和子宫基 底层凋亡细胞的数量增加,影响胎盘的正常结构和功能,从而增加了流产的危险性。 展开更多
关键词 表达量 正常妊娠 恒河猴 药物流产 胎盘组织 BCL-2 子宫 RNA 结构和功能 表达模式
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人类免疫缺陷病毒Vpr蛋白研究进展
11
作者 董少忠 胡方 《医学研究杂志》 1998年第10期18-20,共3页
Vpr蛋白对HIV在细胞中复制的速率有加速作用。其定位于病毒颗粒中,能同细胞核基质结合,并与细胞内的蛋白发生相互作用,影响细胞功能。
关键词 人类免疫缺陷病毒 Vpr蛋白
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血管新生调节因子VEGF及其受体在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘中的表达 被引量:11
12
作者 高红军 代解杰 +2 位作者 王红星 林海燕 王红梅 《中国计划生育学杂志》 北大核心 2005年第6期356-359,共4页
目的:研究血管新生调节因子VEGF及其受体Flt-1、KDR在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘组织中的表达。方法:用免疫组化方法检测妊娠30天的恒河猴上述蛋白在胎盘中的表达。结果:VEGF蛋白主要表达于胎盘绒毛和子宫内膜,在母胎界面和子宫内膜... 目的:研究血管新生调节因子VEGF及其受体Flt-1、KDR在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘组织中的表达。方法:用免疫组化方法检测妊娠30天的恒河猴上述蛋白在胎盘中的表达。结果:VEGF蛋白主要表达于胎盘绒毛和子宫内膜,在母胎界面和子宫内膜血管中显著高表达;KDR蛋白的表达模式与VEGF类似;Flt-1蛋白在两组胎盘中的表达无显著差异。VEGF和KDR在药物流产胎盘中的表达量明显低于正常妊娠胎盘。结论:VEGF、Flt-1及KDR在恒河猴妊娠早期参与子宫内膜和胎盘发育过程中的血管新生,在胎盘绒毛的浸润以及腺上皮细胞分化及其分泌等过程中也发挥着重要作用;流产药物可能通过下调VEGF和KDR蛋白的表达,影响了血管发生和胎盘发育,增加了流产机会。 展开更多
关键词 血管新生调节因子 VEGF 药物流产 正常妊娠 恒河猴 受体FLT-1 免疫组化方法 子宫内膜血管 上皮细胞分化 胎盘绒毛 KDR 胎盘组织 母胎界面 表达模式 发育过程 妊娠早期 流产药物 胎盘发育 血管发生 R蛋白 高表达 表达量
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一例白变猕猴的酪氨酸酶基因及病因分析 被引量:5
13
作者 王斌 陈瑜 +2 位作者 李春花 叶尤松 代解杰 《四川动物》 CSCD 北大核心 2006年第4期730-735,F0004,共7页
目的—对一例不同寻常的白变猕猴进行病因研究,以探讨其色素病变的分子机理。方法—利用DH-PLC分析及测序技术对酪氨酸酶基因进行突变研究。并检测了毛发黑色素含量、微量元素含量等;结果—白猴血液指标无异常变化,酪氨酸酶基因发生多... 目的—对一例不同寻常的白变猕猴进行病因研究,以探讨其色素病变的分子机理。方法—利用DH-PLC分析及测序技术对酪氨酸酶基因进行突变研究。并检测了毛发黑色素含量、微量元素含量等;结果—白猴血液指标无异常变化,酪氨酸酶基因发生多处杂合突变。白猴黑色素含量仅为正常猴的67%,同时Fe元素含量高于正常值。结论—白猴色素变化与酪氨酶基因的多态杂合突变有关,又与血液中Fe元素含量升高有关,但二者之间是否有联系,有何种联系却尚待进一步研究。 展开更多
关键词 白化病 猕猴 全身性皮肤变白 酪氨酸酶基因
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猕猴逆转录病毒多重套式PCR检测方法的建立 被引量:4
14
作者 李晓燕 代成波 +1 位作者 李春花 代解杰 《四川动物》 CSCD 北大核心 2007年第3期534-537,共4页
分别针对编码STLV-1和SRV/D-1两种逆转录病毒膜蛋白的env基因进行引物设计,通过优化、调整PCR条件,建立一种能同时检测猕猴STLV-1和SRV/D-1两种逆转录病毒的多重PCR方法,用于猕猴种群逆转录病毒的常规监测。结果显示多重套式PCR产物片... 分别针对编码STLV-1和SRV/D-1两种逆转录病毒膜蛋白的env基因进行引物设计,通过优化、调整PCR条件,建立一种能同时检测猕猴STLV-1和SRV/D-1两种逆转录病毒的多重PCR方法,用于猕猴种群逆转录病毒的常规监测。结果显示多重套式PCR产物片段大小与预期结果一致,进一步测序证实为目的产物,说明建立的多重套式PCR方法能同时检测出猕猴体内可能存在的STLV-1和SRV/D-1两种逆转录病毒。这种方法具有灵敏度高、特异性强、省时、试剂用量少和检测费用低等优点,因此可以作为一种新方法用于猕猴种群逆转录病毒的定性监测。 展开更多
关键词 逆转录病毒 套式PCR 多重PCR 猕猴
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p21^(WAF1/CIP1)基因与肿瘤 被引量:4
15
作者 翟友刚 史朋 谢忠平 《生命的化学》 CAS CSCD 2004年第6期505-507,共3页
肿瘤的发生发展是多基因参与的复杂而多步骤的过程。p2 1WAF1/CIP1基因作为一种重要的细胞周期抑制基因与肿瘤的发生发展密切相关 ,近年来的研究表明它在不同肿瘤发生发展中有着不同的作用。
关键词 P21WAF1/CIP1 细胞周期 细胞凋亡 基因多态性 肿瘤
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B超对恒河猴子宫内膜周期性变化的监测分析 被引量:2
16
作者 唐东红 叶尤松 +4 位作者 匡德宣 江勤芳 陈瑜 李春花 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第4期262-266,共5页
目的 应用B超技术对恒河猴子宫内膜周期性变化进行实时监测.方法 采用Aloka 3.5 mHz探头的B超仪,分别对6只性成熟的正常雌性恒河猴进行连续3个月经周期(n=18)的子宫内膜的周期性变化的实时测量,同时进行连续2个周期(n=12)的血清雌... 目的 应用B超技术对恒河猴子宫内膜周期性变化进行实时监测.方法 采用Aloka 3.5 mHz探头的B超仪,分别对6只性成熟的正常雌性恒河猴进行连续3个月经周期(n=18)的子宫内膜的周期性变化的实时测量,同时进行连续2个周期(n=12)的血清雌二醇E2及孕酮P的放射免疫检测分析.结果 恒河猴子宫内膜厚度变化呈周期性.在滤泡期(月经周期的第-9~0天),B超图像表现为子宫内膜区域相对子宫肌层区域回声较低(较黑),子宫内膜厚度呈线性增长(r=0.88);黄体期(月经周期的第0~17天),B超图像表现为子宫内膜区域光点增强为强回声,子宫内膜厚度无明显增长.子宫内膜周期性变化与血清E2及P相关,子宫内膜线性增长最大值出现时间与E2分泌最高峰出现时间相一致.结论 B型超声监测技术(ultrasound examination,US)作为一种有用的手段,能实时监测恒河猴子宫内膜周期性变化. 展开更多
关键词 超声检查 子宫内膜 恒河猴 雌二醇 孕酮
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人结缔组织生长因子的透皮吸收实验 被引量:1
17
作者 马绍辉 董少忠 +6 位作者 王晶晶 刘龙丁 董承红 廖芸 王丽春 赵红玲 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期152-154,共3页
目的研究人结缔组织生长因子的透皮吸收。方法应用氯胺T法制备125I-人结缔组织生长因子(125I-rCTGF),采用家兔进行不同剂量的125II-rCTGF的完整皮肤和破损(烫伤)皮肤吸收试验。结果125I-rCTGF的比活度为2.0×105计数/(分.μg)。皮... 目的研究人结缔组织生长因子的透皮吸收。方法应用氯胺T法制备125I-人结缔组织生长因子(125I-rCTGF),采用家兔进行不同剂量的125II-rCTGF的完整皮肤和破损(烫伤)皮肤吸收试验。结果125I-rCTGF的比活度为2.0×105计数/(分.μg)。皮肤吸收试验表明,不同剂量125I-rCTGF透皮给药后家兔均未能通过皮肤经毛细血管吸收入血。结论为重组人CTGF临床试验提供必要的实验数据。 展开更多
关键词 人结缔组织生长因子 透皮吸收 烫伤 皮肤 家兔 成纤维细胞
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重组Neurturin对大鼠面神经损伤模型中面神经元的保护作用 被引量:1
18
作者 李鸿钧 苏婷 +3 位作者 马雁冰 魏海刚 戴长柏 孙茂盛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期51-53,共3页
目的 建立大鼠面神经损伤实验动物模型 ,观察重组Neurturin对面神经元的营养与保护作用。方法 以切断面神经总干的方法 ,造成大鼠两侧面神经损伤模型 ,在右侧面神经损伤处给予重组Neurturin ,左侧作为对照侧 ,给予PBS ,分别于手术后 7... 目的 建立大鼠面神经损伤实验动物模型 ,观察重组Neurturin对面神经元的营养与保护作用。方法 以切断面神经总干的方法 ,造成大鼠两侧面神经损伤模型 ,在右侧面神经损伤处给予重组Neurturin ,左侧作为对照侧 ,给予PBS ,分别于手术后 7、14、2 8和 4 2d ,取脑组织行双侧面神经核切片 ,甲苯胺兰染色 ,观察面神经元形态 ,分别计数两侧面神经元数量。结果 给予重组Neurturin的一侧大鼠面神经核大部分细胞仍保持正常形态 ,对照侧面神经核神经细胞多呈空泡样变性、坏死 ,部分正常形态已消失 ;手术后 7及 14d ,给药一侧存活的神经元数量明显比对照侧多 ,2 8和 4 2d差异无显著意义。结论 重组Neurturin对损伤的大鼠面神经核神经元细胞具有营养和保护作用。 展开更多
关键词 面神经元 大鼠 面神经损伤 面神经核 保护作用 对照 正常 数量 营养 形态
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降钙素基因相关肽及其在免疫系统的功能 被引量:8
19
作者 陈慧诚 李健峰 《动物医学进展》 CSCD 2006年第6期50-53,共4页
降钙素基因相关肽(CGRP)是迄今发现的人体内舒血管活性最强的多肽。CGRP与免疫系统关系密切,能够促进细胞表面分子表达;抑制B淋巴细胞早期发育;调节T淋巴细胞成熟与增殖;增强中性粒细胞的富集并与炎症反应相关。CGRP在免疫系统功能的研... 降钙素基因相关肽(CGRP)是迄今发现的人体内舒血管活性最强的多肽。CGRP与免疫系统关系密切,能够促进细胞表面分子表达;抑制B淋巴细胞早期发育;调节T淋巴细胞成熟与增殖;增强中性粒细胞的富集并与炎症反应相关。CGRP在免疫系统功能的研究为CGRP运用于抗感染免疫、免疫系统疾病的治疗提供可能性,也为“神经内分泌-免疫调节”的研究提供实例。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 TH1细胞 TH2细胞 淋巴细胞
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靶向survivin的siRNA表达载体的构建和表达及对HeLa细胞的影响 被引量:1
20
作者 蒋鸿超 孙强明 +3 位作者 赵丹 孙茂盛 吕琳 李鸿钧 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1806-1811,共6页
目的应用RNA干扰技术(RNAi)针对凋亡抑制因子survivin存活素的siRNA抑制Hela细胞株内源survivin基因的表达以及可促进Hela细胞凋亡。方法构建重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2并分别转染Hela细胞株,通过免疫荧光和半定量RT... 目的应用RNA干扰技术(RNAi)针对凋亡抑制因子survivin存活素的siRNA抑制Hela细胞株内源survivin基因的表达以及可促进Hela细胞凋亡。方法构建重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2并分别转染Hela细胞株,通过免疫荧光和半定量RT-PCR检测survivin蛋白表达及mRNA转录水平的变化,并通过流式细胞仪使用PI-AnnexinV双染法检测Hela细胞株的凋亡。结果构建的2种重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2均能明显抑制survivin基因的表达;应用免疫荧光检测survivin基因的表达,转染重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2的实验组survivin荧光强度明显低于转染空载体pGE-1和pshRNA阴性非特异对照质粒;通过半定量RT-PCR检测到survivin基因mRNA转录明显减少;通过PI-AnnexinV双染法检测Hela细胞的凋亡分别达(36.02±2.12)%(P<0.01)和(35.29±2.02)%(P<0.01)。结论重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2均可明显抑制Hela细胞内源survivin的表达和mRNA的转录均可并明显促进Hela细胞的凋亡,为survivin介导的肿瘤基因沉寂疗法提供良好的实验基础。 展开更多
关键词 SIRNA HELA细胞株 SURVIVIN基因 质粒 表达
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