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浅谈北京协和医学院基础学院生理学科的建设和生理学教学改革——第37届国际生理科学联合会(IUPS)会议随感
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作者 张鹏 彭小忠 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第12期1511-1515,共5页
生理学是一门古老又年轻的基础学科。本文从第37届国际生理科学联合会的最新国际生理教学和科研进展中得到启示,引发了对北京协和医学院基础学院生理学教学的一些思考,例如着力培养能力、整合资源、优势互补等。
关键词 生理学 教学改革
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中西医学 双流汇聚 被引量:3
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作者 刘德培 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期7-11,共5页
很高兴能和中医学界的各位专家共同探讨中医药的发展,今天主要想围绕中西医学的深层次结合,谈谈我对未来医学发展的一些看法。1中医药学特色鲜明中医药学特色鲜明,相信大家对此都耳熟能详。中医药在过去的岁月里为中华民族的健康保障作... 很高兴能和中医学界的各位专家共同探讨中医药的发展,今天主要想围绕中西医学的深层次结合,谈谈我对未来医学发展的一些看法。1中医药学特色鲜明中医药学特色鲜明,相信大家对此都耳熟能详。中医药在过去的岁月里为中华民族的健康保障作出了巨大贡献,现在仍然发挥着重要作用。 展开更多
关键词 中医 西医 双流汇聚
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利用CRISPR/CAS9技术构建QKI敲除GC1-spg细胞株及其生物学功能检测 被引量:1
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作者 钟顺顺 李凯 +3 位作者 杨阳 缪时英 王琳芳 宋伟 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第5期589-593,共5页
目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建QKI敲除的GC1-spg细胞株,并在体外研究QKI对GC1-spg细胞增殖和分化的影响。方法利用CRISPR/Cas9系统的PX330质粒构建敲除QKI的重组质粒,转染GC1-spg野生型细胞,加入嘌呤霉素进行筛选,通过蛋白质免... 目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建QKI敲除的GC1-spg细胞株,并在体外研究QKI对GC1-spg细胞增殖和分化的影响。方法利用CRISPR/Cas9系统的PX330质粒构建敲除QKI的重组质粒,转染GC1-spg野生型细胞,加入嘌呤霉素进行筛选,通过蛋白质免疫印迹(Western blot)和基因测序鉴定出GC1-spg敲除QKI细胞株;常规培养野生型和敲除细胞株,利用细胞计数检测试剂盒(CCK8)绘制增殖曲线和荧光定量PCR(q-PCR)检测减数分裂相关基因变化。结果本研究成功构建出QKI敲除GC1-spg细胞株,与对照组相比,QKI敲除细胞株的增殖明显下降(P<0.05),减数分裂相关分子标志基因c-kit、Mtl5和Hspa2表达量明显降低(P<0.05)。结论 QKI蛋白可以影响GC1-spg的增殖和分化,因此QKI蛋白可能通过影响增殖和分化而影响精子发生。 展开更多
关键词 CRISPR/CAS9 GC1-spg QKI 精子发生
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黄连素降糖调脂机制的研究 被引量:43
4
作者 张茜 肖新华 +8 位作者 王彤 朱席琳 李文慧 刘英 袁涛 孙晓方 孙琦 向红丁 王姮 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第1期29-33,93,共6页
目的旨在研究黄连素对KKAy小鼠体重、血糖、血脂、胰岛素等相关代谢指标的影响,且应用基因芯片探讨黄连素降血糖、调血脂的机制。方法选用KKAy小鼠16只,随机分为黄连素组(给予每日250 mg/kg的黄连素粉末悬浊液)和对照组(给予等体积生理... 目的旨在研究黄连素对KKAy小鼠体重、血糖、血脂、胰岛素等相关代谢指标的影响,且应用基因芯片探讨黄连素降血糖、调血脂的机制。方法选用KKAy小鼠16只,随机分为黄连素组(给予每日250 mg/kg的黄连素粉末悬浊液)和对照组(给予等体积生理盐水),均连续灌胃4周。每周末测定小鼠空腹血糖(FBG)和体重。3周末进行口服糖耐量(OGTT)实验。4周末测定小鼠FBG、血脂和空腹胰岛素(FINS)水平。取小鼠骨骼肌组织进行RT-PCR基因芯片实验。结果黄连素组小鼠FBG、OGTT曲线下面积(AUC)、TC、TG、FINS和HOMA-IR值均比对照组显著降低(P<0.05或P<0.01)。基因芯片显示黄连素组GLUT4、MAPK8、MAPK14、PPARα、UCP2上调,PPARγ、PGC、CEBP、resistin、HNF4α下调。结论黄连素不仅能有效降低KKAy小鼠FBG,改善胰岛素敏感性,还能调节脂代谢。黄连素可能是通过AMPK-p38 MAPK-GLUT4通路调节KKAy小鼠血糖。PPARα上调参与黄连素对KKAy小鼠血脂的调节。 展开更多
关键词 黄连素 KKAY小鼠 基因芯片 糖尿病 脂代谢紊乱 糖代谢
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ApoB基因多态性与北京房山地区汉族人群脑卒中相关性分析 被引量:2
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作者 陈廓 肖占森 +5 位作者 窦会东 侯淑琴 刘岳峰 陶晓明 李峰 邱长春 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2010年第7期683-688,共6页
目的探讨ApoB基因多态性与北京房山地区汉族人群脑卒中的关系。方法采取横断面病例-对照相关分析方法。用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及直接测序技术检测ApoB基因第26外显子C7673T位点和第1外显子5′端信号肽区9 bp... 目的探讨ApoB基因多态性与北京房山地区汉族人群脑卒中的关系。方法采取横断面病例-对照相关分析方法。用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及直接测序技术检测ApoB基因第26外显子C7673T位点和第1外显子5′端信号肽区9 bp插入/缺失的基因型。汉族脑卒中患者547例(脑栓塞446例,脑出血81例);正常对照者886例。结果 ApoB基因C7673T位点和5′端信号肽区插入/缺失位点基因型均符合Hardy-Weinberg平衡定律,P值分别为0.6293和0.5359。ApoB基因C7673T位点的CC基因型和C等位基因频率在女性中栓塞组较对照组明显降低(P<0.01),而与男性脑卒中无关。5′端信号肽区插入/缺失位点,Ⅱ基因型频率在男性中脑出血组较对照组明显降低(P<0.01)。Ⅱ基因型和Ⅰ等位基因频率在男性中栓塞组较对照组明显降低(P<0.01);Ⅱ基因型和Ⅰ等位基因频率在女性中也有同样的趋势(P<0.01,P<0.05)。结论 ApoB基因C7673T位点多态性与房山地区汉族人群女性脑卒中相关,5′端信号肽区9 bp插入/缺失多态性与房山地区汉族人群中脑卒中易感相关。 展开更多
关键词 APOB基因 脑卒中 脑出血 脑栓塞 多态性
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精确医学为老药新用及联合用药带来新契机 被引量:7
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作者 盛苗苗 蒋澄宇 《生命科学》 CSCD 2015年第3期322-326,共5页
老药已在临床上应用,其物化、药代和安全性应有保障,新用途的开发可以大大节约研发周期和成本,因此老药新用以及联合用药被认为是新药开发中最快捷、最有效的策略之一。随着组学技术的长足发展,人类医学开始进入"精确医学时代&quo... 老药已在临床上应用,其物化、药代和安全性应有保障,新用途的开发可以大大节约研发周期和成本,因此老药新用以及联合用药被认为是新药开发中最快捷、最有效的策略之一。随着组学技术的长足发展,人类医学开始进入"精确医学时代",为老药新用以及联合用药的快速开发提供了广阔的应用前景。就老药新用的发展、意义以及组学技术对老药新用的促进作用进行综述。 展开更多
关键词 老药新用 联合用药 组学 精确医学
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孤独症的遗传学和神经生物学研究进展 被引量:2
7
作者 朱春燕 许琪 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2015年第8期717-724,共8页
孤独症是一种遗传度高达90%的多基因复杂疾病,具有典型的遗传和表型异质性,并受到环境因素的影响.本文对近年来孤独症遗传学、表观遗传学和神经生物学3方面的进展进行了简要综述.细胞遗传学法、全基因组扫描及候选基因法是孤独症分子遗... 孤独症是一种遗传度高达90%的多基因复杂疾病,具有典型的遗传和表型异质性,并受到环境因素的影响.本文对近年来孤独症遗传学、表观遗传学和神经生物学3方面的进展进行了简要综述.细胞遗传学法、全基因组扫描及候选基因法是孤独症分子遗传学研究中较为常见的3种方法.虽然应用上述方法发现了一些孤独症易感基因集中的染色体区域,但确切的致病或易感基因仍未被检出.因而,越来越多的关注被集中于如何提高样本同质性、如何将遗传学机制与环境作用相联系、如何提高微效基因的检出率上.在提高样本同质性方面,功能核磁共振及交叉表型的研究正在进行.同时,表观遗传学的研究可以联系遗传与环境因素,从而更好地解释孤独症的发病机制.目前,对染色体上表观遗传与遗传共同调控的区域,如7号和15号染色体长臂,进行了大量研究.在神经生物学方面,神经递质、神经发育及神经免疫学假说均有一定的进展.其中,针对神经递质的研究主要集中于5-羟色胺、?-氨基丁酸及谷氨酸.在神经发育假说方面,神经发育相关蛋白,如肝细胞生长因子、神经生长因子及Reelin,研究得较为深入. 展开更多
关键词 孤独症 分子遗传学 表观遗传学 神经生物学
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小鼠睾丸中细胞连接相关蛋白质的分析 被引量:4
8
作者 付俊 罗艳云 +1 位作者 缪时英 王琳芳 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期205-209,共5页
目的探讨细胞连接相关蛋白在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达模式。方法 Western blot检测并分析1~6周龄小鼠睾丸、原代支持细胞以及小鼠精原细胞系GC1 spg、精母细胞系GC2 spg、间质细胞系TM3、支持细胞系TM4等4种生殖相关细胞系中细胞... 目的探讨细胞连接相关蛋白在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达模式。方法 Western blot检测并分析1~6周龄小鼠睾丸、原代支持细胞以及小鼠精原细胞系GC1 spg、精母细胞系GC2 spg、间质细胞系TM3、支持细胞系TM4等4种生殖相关细胞系中细胞连接相关蛋白的表达水平。结果小鼠睾丸曲细精管中支持细胞间细胞连接相关膜蛋白连接黏附分子A、紧密连接蛋白Occludin和Claudin,以及支持细胞-生精细胞间细胞连接相关膜蛋白连接黏附分子C、连接蛋白Nectin-3和钙黏附蛋白E的表达表现出明显的阶段特异性。而参与细胞连接的调节蛋白紧密连接蛋白ZO-1、ZO-2、Afadin、β链蛋白和CD2相关蛋白在睾丸的不同发育阶段以及生殖细胞系中表达无差异。结论小鼠睾丸曲细精管中支持细胞间以及支持细胞-生精细胞间细胞连接相关的膜蛋白多表现出明显的阶段特异性。而参与细胞连接的调节蛋白在睾丸的不同发育阶段中表达无差异。 展开更多
关键词 血睾屏障 支持细胞间连接 支持细胞-生精细胞间连接 膜蛋白 调节蛋白
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内皮抑素和血管生成抑素融合基因的裂解病毒对C6胶质瘤的实验研究 被引量:4
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作者 王建交 杨立庄 +3 位作者 刘福生 金贵善 柴奇 彭小忠(点评) 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2008年第1期69-72,共4页
目的探讨重组单纯疱疹病毒介导的内皮抑素和血管生成抑素(Endo-Angio)融合基因对C6胶质瘤的疗效。方法构建含有Endo-Angio融合基因的重组单纯疱疹病毒,四唑蓝比色法(MTT法)体外观察其C6细胞的裂解作用;Western-blot观察Endo—Angi... 目的探讨重组单纯疱疹病毒介导的内皮抑素和血管生成抑素(Endo-Angio)融合基因对C6胶质瘤的疗效。方法构建含有Endo-Angio融合基因的重组单纯疱疹病毒,四唑蓝比色法(MTT法)体外观察其C6细胞的裂解作用;Western-blot观察Endo—Angio融合蛋白的表达。建立大鼠C6模型,当肿瘤体积≥2mm^3时,治疗组瘤腔内注射10^7pfu(10μl)病毒,对照组注射等剂量生理盐水。MRI动态观察肿瘤体积变化,组织病理行微血管计数,并记录荷瘤鼠生存时间。结果体外实验示:当感染率(MOI)=1000时,99%的C6细胞死亡;头部MRI发现治疗组胶质瘤生长减慢;荷瘤鼠存活期:对照组(20.3±0.45)d,治疗组(38.3±0.96)d,中位生存期延长(P〈0.01);HE染色见瘤细胞分散,体积较小,无出血坏死;病理染色示:治疗组和对照组新生血管均值分别为(5.3±1.7)/HP和(15.6±2.8)/HP(P〈0.01)。结论重组单纯疱疹病毒介导的Endo-Angio融合基因不仅通过抑制肿瘤的新生血管生成,而且通过裂解肿瘤细胞双重作用治疗颅内胶质瘤。 展开更多
关键词 内皮抑素 血管生成抑素 血管生成 C6胶质瘤 病毒-基因治疗
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AIDS患者γδ T细胞能够杀伤自体HIV感染的CD4^+ T细胞 被引量:5
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作者 李珍 焦艳梅 +2 位作者 崔莲仙 吴昊 何维 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第7期778-782,共5页
目的建立自体人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的CD4+T细胞模型,检测获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者γδT细胞对自体HIV感染的CD4+T细胞的杀伤作用。方法分离健康志愿者和未治疗的AIDS患者外周血单个核细胞(PBMCs),磁珠分选获得高纯度的CD4+... 目的建立自体人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的CD4+T细胞模型,检测获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者γδT细胞对自体HIV感染的CD4+T细胞的杀伤作用。方法分离健康志愿者和未治疗的AIDS患者外周血单个核细胞(PBMCs),磁珠分选获得高纯度的CD4+T细胞,加入植物血凝素(PHA)和白细胞介素-2(IL-2)共同培养,建立自体HIV感染的CD4+T细胞模型。流式细胞术检测HIV-P24+CD4+T细胞的比例。乳酸脱氢酶(LDH)法测定γδT细胞的细胞毒作用。结果培养到第10天时,HIV-P24+CD4+T细胞的比例达到最高值。AIDS患者的γδT细胞不仅能够杀伤自体HIV感染的CD4+T细胞(细胞溶解率为71.1±97),而且对HIV也有一定的杀伤作用(细胞溶解率为24.2±18.2)。而健康志愿者γδT细胞对自体CD4+T细胞没有杀伤作用(细胞溶解率为4.3±10.1)。结论 AIDS患者γδT细胞能够杀伤自体HIV感染的CD4+T细胞,为采用γδT细胞过继免疫治疗AIDS提供了依据。 展开更多
关键词 ΓΔT细胞 人类免疫缺陷病毒 获得性免疫缺陷综合征
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甲基转移酶样3通过调控MYC的N6-甲基腺苷水平促进急性髓系白血病细胞的增殖 被引量:5
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作者 王小爽 何金蓉 +1 位作者 于姗 余佳 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期308-314,共7页
目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)在急性髓系白血病(AML)细胞增殖中的功能和调控机制。方法通过基因表达汇编数据集检索METTL3在AML患者中的表达情况及METTL3在成体造血干/祖细胞髓系分化中的表达情况;在MOLM13细胞中利用慢病毒转导的方... 目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)在急性髓系白血病(AML)细胞增殖中的功能和调控机制。方法通过基因表达汇编数据集检索METTL3在AML患者中的表达情况及METTL3在成体造血干/祖细胞髓系分化中的表达情况;在MOLM13细胞中利用慢病毒转导的方式抑制METTL3的内源表达,检测细胞增殖情况,总mRNA的N6-甲基腺苷(m6A)水平,采用基因特异的m6A RNA免疫共沉淀检测MYC mRNA上的m6A水平,并进一步检测MYC mRNA和蛋白的表达水平。结果与正常对照相比,METTL3在AML-M5型患者中有上调趋势;幼稚细胞中的METTL3相对表达量显著高于成熟的单核细胞(t=4.504,P=0.0098)。抑制内源METTL3的表达后,MOLM13细胞增殖减缓(P<0.001),MOLM13细胞总mRNA的m6A水平降低(t=3.606,P=0.042),MYC上特异的m6A水平显著降低(P<0.01),MYC的表达显著减少(P<0.01)。结论 METTL3在MOLM13细胞中可通过增加MYC的表达水平而发挥原癌基因的功能。 展开更多
关键词 甲基转移酶样3 N6-甲基腺苷 急性髓系白血病 增殖 MYC
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在超负荷诱导的心脏疾病中心肌细胞自噬 被引量:4
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作者 张岩 刘伟 +1 位作者 孙寒松 胡盛寿 《国际心血管病杂志》 2012年第2期77-78,82,共3页
由各种原因引起的心室压力超负荷是导致心力衰竭的始动因素,如高血压或心肌梗死后,导致心肌能量代谢和心肌纤维蛋白组成的改变,进而心室扩张、泵功能降低最终发生心力衰竭。研究表明,在某些病理状态下,自噬活动在心肌病中被激活。超负... 由各种原因引起的心室压力超负荷是导致心力衰竭的始动因素,如高血压或心肌梗死后,导致心肌能量代谢和心肌纤维蛋白组成的改变,进而心室扩张、泵功能降低最终发生心力衰竭。研究表明,在某些病理状态下,自噬活动在心肌病中被激活。超负荷的压力使细胞自噬活动增加,会使疾病进一步恶化。随着对自噬分子机制的深入研究,自噬活动对于心室重塑及其在心脏疾病中的潜在作用逐渐被认识。 展开更多
关键词 自噬 压力超负荷 心肌肥厚 心力衰竭
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新疆哈萨克族人弗林蛋白Furin基因变异与高总胆固醇血症、高低密度脂蛋白胆固醇血症的相关性 被引量:1
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作者 王红梅 李南方 +5 位作者 洪静 罗文利 严治涛 王新玲 朱沂 沈岩 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期168-175,共8页
目的研究新疆哈萨克族人高总胆固醇血症、高低密度脂蛋白胆固醇血症与弗林蛋白(Furin)基因变异的相关性。方法本研究是以横断面流行病学调查为基础的病例-对照研究,878例研究对象均来自新疆哈萨克族自然人群。测定48例随机选择的哈萨克... 目的研究新疆哈萨克族人高总胆固醇血症、高低密度脂蛋白胆固醇血症与弗林蛋白(Furin)基因变异的相关性。方法本研究是以横断面流行病学调查为基础的病例-对照研究,878例研究对象均来自新疆哈萨克族自然人群。测定48例随机选择的哈萨克族高胆固醇血症患者(女性24例、男性24例)弗林蛋白基因启动子、外显子区序列,筛查代表性变异。采用TaqMan PCR分析弗林蛋白基因变异在878例哈萨克族自然人群(男性370例、女性508例)中的分型,分析其与哈萨克族人血总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平的相关性。结果在48例高胆固醇血症患者中,共筛查出弗林蛋白基因的12个变异,包括4个代表性变异(rs6226、rs6227、rs2071410、rs4932178)。4个代表性变异均在大样本哈萨克族人中基因型分型成功(成功率≥99%)。在哈萨克族自然人群中,rs6226、rs6227、rs2071410、rs4932178多态性的基因型、等位基因、单体型频率分别在高胆固醇血症组、对照组间及高低密度脂蛋白胆固醇血症组、对照组间的分布差异均无统计学意义(P均>0.05);每个多态性的不同基因型携带者之间的血总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇平均水平差异无统计学意义(P均>0.05)。结论新疆哈萨克族人高总胆固醇血症、高低密度脂蛋白胆固醇血症与弗林蛋白基因变异不相关,该变异可能不是哈萨克族人高胆固醇血症、高低密度脂蛋白胆固醇血症的易感因素。 展开更多
关键词 弗林蛋白基因 高胆固醇血症 高低密度脂蛋白胆固醇血症 哈萨克族 基因变异
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神经干细胞定向分化过程中编码基因表达谱分析 被引量:1
14
作者 张靖 朱丽媛 +2 位作者 阴彬 侯琳 彭小忠 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第6期734-739,共6页
目的探索小鼠神经干细胞定向分化为神经元及胶质细胞过程中重要发育基因的表达变化。方法 1)神经干细胞培养及定向分化诱导培养;2)分化神经元、星形胶质细胞的流式分选;3)针对编码基因表达谱芯片的生物信息学分析,包括基因功能聚类、通... 目的探索小鼠神经干细胞定向分化为神经元及胶质细胞过程中重要发育基因的表达变化。方法 1)神经干细胞培养及定向分化诱导培养;2)分化神经元、星形胶质细胞的流式分选;3)针对编码基因表达谱芯片的生物信息学分析,包括基因功能聚类、通路分析等。结果 1)经细胞分选获得神经干细胞、神经元、星形胶质细胞;2)Sox2、Nestin等神经干细胞、神经元及星形胶质细胞的标志性基因表达谱式明显;3)Wnt通路、Insulin通路、P53通路活性的改变在定向分化细胞类群中存在细胞特异性。结论神经干细胞的分化过程是一个多基因通路综合变化的复杂网络。 展开更多
关键词 神经干细胞 定向分化 WNT通路 insulin通路 P53通路
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利用流式细胞术检测LPS刺激活化后小鼠腹腔巨噬细胞体积的变化 被引量:1
15
作者 刘音 刘硕 +3 位作者 王文蝶 朱军 陈朱波 姜明红 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第6期767-770,共4页
目的探讨小鼠腹腔巨噬细胞经脂多糖(LPS)刺激活化后体积的变化。方法 LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞3和24 h后,用倒置显微镜观察细胞的形态,用ELISA法检测细胞上清中IL-6的含量,用流式细胞术定量检测细胞活化后的体积。结果小鼠腹腔巨噬细胞... 目的探讨小鼠腹腔巨噬细胞经脂多糖(LPS)刺激活化后体积的变化。方法 LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞3和24 h后,用倒置显微镜观察细胞的形态,用ELISA法检测细胞上清中IL-6的含量,用流式细胞术定量检测细胞活化后的体积。结果小鼠腹腔巨噬细胞在正常状态下呈圆型,细胞边缘光滑无伪足,胞质内无空泡。经LPS刺激3 h后,小鼠腹腔巨噬细胞的表面积变大,伸出伪足,伪足的数量和长度随时间延长而逐渐增多和增长,胞质内的空泡也逐渐增加;24 h后,细胞表面积明显增大,伪足牵拉使细胞形状呈梭型。LPS处理后细胞上清中IL-6的含量较对照组显著增加(P<0.01)。流式细胞术检测发现细胞的前向角散射光(FSC)的数值(代表细胞大小)随LPS刺激时间的延长而增加,3和24 h分别增加了11.0%(P<0.05)和20.2%(P<0.01);侧向角散射光(SSC)的数值(代表表面颗粒数)也逐渐增加,3和24 h分别增加了21.6%(P<0.05)和68.0%(P<0.01)。结论流式细胞术可以定量检测小鼠腹腔巨噬细胞经LPS活化后的体积变化,为天然免疫细胞的活化研究提供了新的检测手段。 展开更多
关键词 LPS 巨噬细胞 活化 流式细胞术
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HSD1蛋白在精子发生过程中的空间特异性表达 被引量:1
16
作者 宋伟 陈迎春 +1 位作者 缪时英 王琳芳 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第3期325-329,共5页
目的研究HSD1蛋白在各级生精细胞中的空间特异性表达及其在细胞中的核质穿梭特性。方法分离小鼠生精细胞,用免疫荧光法观察HSD1蛋白的内源定位。构建pEGFP-C1-HSD1融合表达质粒并转染CHO细胞,用激光共聚焦和电镜观察HSD1融合蛋白的定位... 目的研究HSD1蛋白在各级生精细胞中的空间特异性表达及其在细胞中的核质穿梭特性。方法分离小鼠生精细胞,用免疫荧光法观察HSD1蛋白的内源定位。构建pEGFP-C1-HSD1融合表达质粒并转染CHO细胞,用激光共聚焦和电镜观察HSD1融合蛋白的定位及其核质分布情况。结果 HSD1蛋白在初级精母细胞和圆形精子细胞的胞质中表达;在成熟精子细胞中主要表达于顶体和尾部。HSD1蛋白在CHO细胞中存在3种分布形式:细胞核型、细胞质型和核质分布型。进一步研究发现该蛋白在细胞中呈动态分布,存在细胞核-质间的穿梭特性。结论HSD1蛋白在生精细胞中呈空间特异性表达并且具有核质穿梭能力。 展开更多
关键词 HSD1 精子发生 免疫荧光 核质穿梭
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SIRT1上调大鼠血管平滑肌细胞P27^(Kip1)的表达 被引量:1
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作者 鲁云彪 陈厚早 +4 位作者 张冉 郑伟 李莉 张庆军 刘德培 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2010年第7期714-720,共7页
目的研究Ⅲ类去乙酰化酶SIRT1在血管平滑肌中对P27Kip1表达的影响及其可能的机制。方法用H2O2和oxLDL刺激大鼠平滑肌细胞A7r5,Western blot检测平滑肌细胞内源性SIRT1的表达变化;在动物血管损伤模型中,Western blot检测血管损伤处平滑肌... 目的研究Ⅲ类去乙酰化酶SIRT1在血管平滑肌中对P27Kip1表达的影响及其可能的机制。方法用H2O2和oxLDL刺激大鼠平滑肌细胞A7r5,Western blot检测平滑肌细胞内源性SIRT1的表达变化;在动物血管损伤模型中,Western blot检测血管损伤处平滑肌的SIRT1表达水平。用SIRT1重组腺病毒感染A7r5细胞和原代大鼠平滑肌细胞,Western blot观察SIRT1过表达引起的P27表达的改变;用SIRT1抑制剂NAM处理平滑肌细胞并观察P27的表达改变;用免疫共沉淀技术探寻SIRT1上调P27基因表达可能的分子机制。结果在H2O2和oxLDL氧化应激刺激的A7r5细胞中,内源性SIRT1的表达随作用时间逐渐增加;动物血管损伤模型中,内源性SIRT1的表达明显上调;过表达SIRT1能够在10%血清刺激的早期上调P27表达,而SIRT1抑制剂NAM则能够减少P27表达;在原代平滑肌细胞中,腺病毒介导的SIRT1过表达同样能够显著上调P27的表达。在血管平滑肌细胞中检测到SIRT1能够与FOXO3a相互作用。结论 SIRT1在血管平滑肌细胞中上调P27的表达。 展开更多
关键词 SIRT1 P27KIP1 血管平滑肌细胞
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儿茶酚胺氧位甲基转移酶基因Ala22/72Ser多态性与精神分裂症的相关性及初步功能学探索 被引量:1
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作者 王彦 房岳 +1 位作者 许琪 沈岩 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第5期449-452,共4页
目的研究儿茶酚胺氧位甲基转移酶(COMT)基因单核苷酸多态性(SNP)位点Ala22/72Ser与北方汉族人群精神分裂症(SCZ)之间的关系。方法在506例SCZ患者中,用聚合酶链式反应(PCR),对COMT基因Ala22/72Ser位点进行基因分型;用阳性与阴性症状量表(... 目的研究儿茶酚胺氧位甲基转移酶(COMT)基因单核苷酸多态性(SNP)位点Ala22/72Ser与北方汉族人群精神分裂症(SCZ)之间的关系。方法在506例SCZ患者中,用聚合酶链式反应(PCR),对COMT基因Ala22/72Ser位点进行基因分型;用阳性与阴性症状量表(PANSS)对患者的精神病性症状的严重程度进行评分;同时用Real-Time PCR测定COMT基因的表达量。结果在SCZ患者中,携带Ser等位基因和Ser/Ala基因型的患者的阳性症状总分和一般精神病理症状总分显著升高(P<0.01),而且COMT基因的表达量显著降低(P<0.01)。结论COMT基因的Ala22/72Ser多态性与SCZ患者的阳性症状和一般精神病理症状的严重程度相关,而且与COMT基因表达量相关。 展开更多
关键词 儿茶酚胺氧位甲基转移酶(COMT)基因 精神分裂症(SCZ) 单核苷酸多态性(SNP)
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视交叉上核损毁对小鼠疼痛日节律行为的影响 被引量:1
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作者 张靖 阴彬 +1 位作者 孙中生 彭小忠 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第6期787-791,共5页
目的通过建立视交叉上核(SCN)损毁实验建立小鼠节律调控中枢失能模型,观察中枢节律控制中心SCN对疼痛节律行为的影响。方法 1)12 h光照/12 h黑暗条件下观察小鼠甲醛诱导的炎性痛反应的节律波动;2)SCN损毁建立小鼠节律中枢失能模型,观察... 目的通过建立视交叉上核(SCN)损毁实验建立小鼠节律调控中枢失能模型,观察中枢节律控制中心SCN对疼痛节律行为的影响。方法 1)12 h光照/12 h黑暗条件下观察小鼠甲醛诱导的炎性痛反应的节律波动;2)SCN损毁建立小鼠节律中枢失能模型,观察小鼠转轮节律行为紊乱;3)观察SCN损毁后小鼠甲醛诱导的炎性痛日节律波动特征的改变。结果 1)12 h光照/12 h黑暗条件下小鼠的甲醛诱导炎性痛存在日节律波动;2)SCN损毁后小鼠正常的炎性痛日节律波动特点明显改变,出现活动期与静息期波动峰值的反转。结论脑内的节律调控中枢SCN对小鼠炎性痛的节律波动具有中枢调控作用。 展开更多
关键词 疼痛 甲醛 炎性痛 视交叉上核 日节律
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自然反义转录物Lmo4as对神经系统重要编码基因Lmo4的调节作用
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作者 张靖 吴朝 +3 位作者 朱丽媛 阴彬 侯琳 彭小忠 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第6期819-823,共5页
目的探索小鼠神经系统重要编码基因Lmo4基因座位上自然反义转录产物Lmo4as对该编码基因的表达调控功能。方法 1)使用c DNA末端快速扩增(RACE)与RT-PCR技术,验证Lmo4as是否具有多聚腺苷酸(poly A)尾,克隆Lmo4as的全长序列;2)使用实时定量... 目的探索小鼠神经系统重要编码基因Lmo4基因座位上自然反义转录产物Lmo4as对该编码基因的表达调控功能。方法 1)使用c DNA末端快速扩增(RACE)与RT-PCR技术,验证Lmo4as是否具有多聚腺苷酸(poly A)尾,克隆Lmo4as的全长序列;2)使用实时定量PCR和原位杂交技术确定Lmo4as及相应编码基因的时空表达谱;3)使用荧光素酶报告基因实验在体外验证Lmo4as对Lmo4是否具有调控作用。结果 1)Lmo4as是一个具有多聚腺苷酸(poly A)尾的非编码RNA转录本,获得其RNA全长信息;2)Lmo4as与相应编码基因转录Lmo4的丰度在时间上具有协同性,而在空间表达上具有明显不同的分布;3)Lmo4as对Lmo4在转录后水平具有负性调节作用,另外miR-124也能够抑制Lmo4的表达。结论编码基因Lmo4基因座位上自然反义转录产物Lmo4as对其转录后水平的负性调节与microRNA的调节共同发挥作用。 展开更多
关键词 小鼠大脑发育 Lmo4 自然反义转录物 原位杂交 转录后调控
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