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实验动物与微量元素硒 被引量:2
1
作者 蔡炯 刘德惠 《中国实验动物学杂志》 1999年第4期250-255,共6页
关键词 实验动物 微量元素硒 忽视 脂类 发现 毒性 维生素 需要量 适量 碳水化合物
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H5N1型禽流感病毒感染非人灵长类动物的观察 被引量:5
2
作者 代小伟 魏强 +10 位作者 朱华 丛琍 蒋虹 高虹 佟巍 黄澜 刘亚莉 马春梅 邓巍 夏咸柱 秦川 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第4期271-274,I0005,共5页
目的观察H5N1型禽流感病毒对中国非人灵长类动物的易感性并建立动物模型。方法将病毒通过滴鼻接种实验猴,观察感染后动物的临床症状,采血、咽拭子及各器官组织进行血清学、病原学及病理学检查,记录抗体变化、病毒分离情况及病理学改变... 目的观察H5N1型禽流感病毒对中国非人灵长类动物的易感性并建立动物模型。方法将病毒通过滴鼻接种实验猴,观察感染后动物的临床症状,采血、咽拭子及各器官组织进行血清学、病原学及病理学检查,记录抗体变化、病毒分离情况及病理学改变。结果感染后动物表现轻度食欲下降、一过性体温升高及外周血白细胞减少,肺组织病毒分离及RT-PCR阳性,病理检查感染急性期动物肺组织表现为间质性肺炎,肺泡间隔增宽,充血出血明显,肺泡受压变形,间质及肺泡内有大量炎细胞浸润,符合病毒性肺炎的改变,感染后14 d动物血清IgG抗体水平较感染前升高4倍。结论H5N1病毒可感染非人灵长类动物,可以作为感染模型进行H5N1病毒的发病机制、疫苗评价、药物筛选等研究。 展开更多
关键词 H5N1型禽流感病毒 恒河猴 食蟹猴 模型 动物
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SARS病原体的检测及其在动物模型鉴定及疫苗评价中的应用 被引量:5
3
作者 张扬清 鲍琳琳 +7 位作者 孔琪 邓巍 涂新明 朱华 高虹 张兵林 佟巍 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第2期65-70,共6页
目的 通过RT PCR及病毒分离等方法 ,鉴定SARS感染性动物模型是否成立 ,并对疫苗效果进行评估。方法 选用 3周岁的健康SPF级恒河猴 8只 ,分为SARS实验感染动物模型组及疫苗组 (Sino 3SARS灭活疫苗2 0 0 30 90 4批肌内注射 ,免疫 2次 )... 目的 通过RT PCR及病毒分离等方法 ,鉴定SARS感染性动物模型是否成立 ,并对疫苗效果进行评估。方法 选用 3周岁的健康SPF级恒河猴 8只 ,分为SARS实验感染动物模型组及疫苗组 (Sino 3SARS灭活疫苗2 0 0 30 90 4批肌内注射 ,免疫 2次 )。经鼻吸入Sino 1SARS毒株 ,病毒攻击后 7d动物进行安乐死。自病毒攻击后的第一天起每日连续采集动物咽拭子标本 ,病毒攻击后的第二天、第五天、第七天采集血浆标本[1 ] 。将标本进行病毒分离及RT PCR检测 .结果 模型组动物病毒攻击后第一天至第七天咽拭子RT PCR检测均为阳性。注射疫苗组动物仅在病毒攻击后第一天咽拭子RT PCR检测呈阳性。模型组动物血浆RT PCR检测呈现阳性 ,疫苗组动物血浆RT PCR检测均为阴性。病毒分离结果显示仅在模型动物咽拭子标本中分离到病毒 ,未在疫苗组动物的咽拭子标本分离到病毒 .血浆标本中均未分离到病毒 .结论 RT PCR及病毒分离可以及时有效地检测出病毒在体内的复制情况 ,可作为模型鉴定、疫苗评估及药物筛选的重要手段。 展开更多
关键词 SARS 病原体 疫苗 动物模型 逆转录聚合酶链反应 病毒培养
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SARS病毒感染动物模型 被引量:1
4
作者 孔琪 秦川 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第S1期61-,共1页
SARS-CoV感染动物模型的建立可加深对SARS病原学的了解和发病机制的研究,加速实验室诊断技术的建立、抗病毒药物的筛选和疫苗的开发,同时也有助于给该病一个更精确的定义。可以说SARS动物模型的建立,不但是SARS研究的瓶颈问题,其应用更... SARS-CoV感染动物模型的建立可加深对SARS病原学的了解和发病机制的研究,加速实验室诊断技术的建立、抗病毒药物的筛选和疫苗的开发,同时也有助于给该病一个更精确的定义。可以说SARS动物模型的建立,不但是SARS研究的瓶颈问题,其应用更是贯穿SARS研究的整个过程。到目前为止,已经报道有4种非人灵长类动物(恒河猴、食蟹猴、绒猴、非洲绿猴)和6种啮齿类动物(大鼠、小鼠、豚鼠、田鼠、仓鼠、转基因鼠),以及雪貂、家猫等可以作为SARS动物模型用于实验研究,并已经开始利用动物模型进行疫苗和药物的安全性和有效性评价。本文就已报道的各类SARS动物模型进行综述,并根据动物模型和SARS患者的比对,提出动物模型建立的技术要点。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 动物模型 病理 冠状病毒
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非胰岛素依赖型糖尿病基因定位研究进展 被引量:1
5
作者 赵进英 方福德 蔡有余 《中国实验动物学杂志》 1999年第2期120-125,共6页
糖尿病是一种严重危害人类健康的多基因遗传病。根据其发病机制,分为胰岛素依赖型(insulin-dependentdiabetesmelitus,IDDM)和非胰岛素依赖型(non-insulin-dependentd... 糖尿病是一种严重危害人类健康的多基因遗传病。根据其发病机制,分为胰岛素依赖型(insulin-dependentdiabetesmelitus,IDDM)和非胰岛素依赖型(non-insulin-dependentdiabetesmelitus,NI... 展开更多
关键词 NIDDM 家系 非胰岛素依赖型糖尿病 基因定位 严重并发症 早死 多基因遗传病 人类健康 遗传学家 危害
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肝素结合性表皮生长因子转基因小鼠的建立和功能研究
6
作者 彭健豪 邸冉 +1 位作者 董伟 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第4期187-191,I0001,共6页
目的建立肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)的转基因动物模型,利用转基因动物模型研究HB-EGF在心脏功能中的作用。方法构建α-MHC-HB-EGF表达载体,将目的片段注射到受精卵的雄原核中,使其发育成携带有HB-EGF的转基因小鼠。通过PCR的方法... 目的建立肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)的转基因动物模型,利用转基因动物模型研究HB-EGF在心脏功能中的作用。方法构建α-MHC-HB-EGF表达载体,将目的片段注射到受精卵的雄原核中,使其发育成携带有HB-EGF的转基因小鼠。通过PCR的方法鉴定转基因的首建鼠。采用Western blotting方法鉴定HB-EGF在心脏中的表达,取HB-EGF在心脏中特异性高表达的阳性转基因小鼠的F1代与同窝阴性对照小鼠的心脏做BrdU免疫组化和Masson染色。结果得到了两只HB-EGF阳性的首建鼠,Western blotting发现16号小鼠中HB-EGF在心脏中的表达与同窝阴性对照小鼠相比蛋白表达明显增加。转基因小鼠心脏BrdU标记的阳性细胞数明显多于阴性对照组的阳性细胞数,Masson染色胶原纤维明显少于同窝阴性对照的小鼠。结论HB-EGF的高表达可以促进心肌细胞的增殖,减少胶原纤维生成,抑制心肌的纤维化。 展开更多
关键词 模型 动物 转基因 肝素结合性 表皮生长因子 ERBB 扩张性心肌病 小鼠
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腺病毒载体介导的人类B7.1基因修饰的肿瘤细胞疫苗 被引量:3
7
作者 刘雪丰 张连峰 +4 位作者 鞠丽梅 曾苹 马耀文 李万波 蔡有余 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期390-395,共6页
为了证明腺病毒载体可做为将B7基因导入肿瘤细胞的替代载体,达到提高肿瘤细胞疫苗效应的目的,且不存在逆转录病毒载体的局限性,用同源重组的方法构建了表达人类B7.1cDNA的重组人类5型腺病毒(AdB7.1),并用它感染... 为了证明腺病毒载体可做为将B7基因导入肿瘤细胞的替代载体,达到提高肿瘤细胞疫苗效应的目的,且不存在逆转录病毒载体的局限性,用同源重组的方法构建了表达人类B7.1cDNA的重组人类5型腺病毒(AdB7.1),并用它感染小鼠乳腺癌细胞系EMF6和大鼠神经胶质瘤细胞系C6,检测B7.1基因在感染过的肿瘤细胞中的表达;用AdB7.1感染过的肿瘤细胞给同基因宿主(BALB/c小鼠和Wistar大鼠)接种,观察它们在体内的致瘤性及对肿瘤的防治作用;用51Cr-释放法对用各种肿瘤细胞免疫后3周的动物脾淋巴细胞进行CTLs杀伤活性的测定,来检测其细胞免疫活性。结果的Northernblot分析表明:AdB7.1感染过的肿瘤细胞表达了B7.1基因。接种/侵袭实验和CTLs杀伤活性的测定实验表明,与野生型肿瘤细胞相比,表达B7.1的肿瘤细胞在动物体内的致瘤性降低(P<0.01),能诱导针对野生型肿瘤的高水平的系统性免疫应答和细胞毒T细胞活性,对肿瘤也有一定的防治作用。本研究的结论是,腺病毒载体可代替逆转录病毒载体将B7.1基因导入肿瘤细胞,提高肿瘤细胞疫苗的抗肿瘤作用。它操作简单,感染效率高。 展开更多
关键词 腺病毒载体 肿瘤细胞疫苗 B7.1基因 基因修饰
原文传递
肥胖大鼠瘦素信号传导通路的变化 被引量:6
8
作者 苏卫 马晓红 +2 位作者 张文明 刘红霞 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第5期15-20,84,共7页
目的筛选与人类代谢障碍性肥胖症发病病因学相似的肥胖大鼠模型,并对肥胖个体Leptin信号传导通路的改变情况进行初步研究。方法离乳雄性Wistar大鼠以高脂饲料喂养6周后,取体重增加值大的前1/4部分作为肥胖倾向组大鼠。对肥胖倾向组大鼠... 目的筛选与人类代谢障碍性肥胖症发病病因学相似的肥胖大鼠模型,并对肥胖个体Leptin信号传导通路的改变情况进行初步研究。方法离乳雄性Wistar大鼠以高脂饲料喂养6周后,取体重增加值大的前1/4部分作为肥胖倾向组大鼠。对肥胖倾向组大鼠,继续进行高脂饲料喂养,并观察其体重、血清Leptin的变化趋势;试验49周后,大鼠处死,对内脏脂肪含量、附睾脂肪细胞大小以及下丘脑LRb(Leptin受体b亚型)表达水平及Stat3磷酸化水平(Tyr705磷酸化)进行测定。结果正常对照组大鼠和肥胖倾向组大鼠在不同饲料喂养的第17周开始体重相对增加值出现组间显著性差异;除第16周肥胖倾向组大鼠的血清Leptin浓度高于正常对照组,但不存在显著性差异之外,其它采血时间点,肥胖倾向组的血清Leptin浓度均显著高于正常对照组;动物处死后,肥胖倾向组大鼠的内脏脂肪含量和附睾脂肪细胞大小均显著大于正常对照组;两组大鼠在下丘脑LRb表达水平和细胞浆内Stat3磷酸化水平方面不存在显著性差异。结论本研究得到了与营养性肥胖人群临床表现相似的肥胖大鼠;同时发现,肥胖大鼠在长期高浓度Leptin刺激后,可能引起了中枢性Leptin抵抗,致使Leptin对体重调节的正常生理作用受到抑制,脂代谢异常的程度进一步加深,最终表现为脂肪细胞体积增大、内脏脂肪含量升高和体重增加。 展开更多
关键词 肥胖大鼠 高脂饮食 廋素 信号传导通道
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病毒性心肌炎的发病机制 被引量:23
9
作者 彭健豪 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第1期54-57,共4页
心肌炎是一种由多种致病因素所引起的复杂疾病。急性或慢性感染性心肌炎是由病毒、细菌、支原体或真菌所引起的心肌炎症。其中,病毒性心肌炎最为常见。肠道病毒和腺病毒所引起的心肌炎约占临床病例的20%-50%。因此,本文对病毒性心... 心肌炎是一种由多种致病因素所引起的复杂疾病。急性或慢性感染性心肌炎是由病毒、细菌、支原体或真菌所引起的心肌炎症。其中,病毒性心肌炎最为常见。肠道病毒和腺病毒所引起的心肌炎约占临床病例的20%-50%。因此,本文对病毒性心肌炎的发病机制进行了总结。病毒性心肌炎造成的心脏损伤主要有三种发病机制:(1)病毒的感染和复制直接导致的心肌损伤;(2)免疫反应;(3)生化机制。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 病毒的感染 免疫反应
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下丘脑第三脑室和中缝核微注射5-HT对北京鸭肌胃电峰电位的影响 被引量:2
10
作者 蔡炯 乔惠理 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1997年第2期80-86,共7页
本实验探讨了5-HT对鸭肌胃电峰电位的中枢调节。实验用5~7周龄北京鸭15只,雌雄不拘。以慢性手术方法分别在鸭肌胃的后腹薄肌和前腹厚肌浆膜表面各埋藏一对Ag-AgCl乏极化电极。实验前预先禁食16~18h,在清醒状态... 本实验探讨了5-HT对鸭肌胃电峰电位的中枢调节。实验用5~7周龄北京鸭15只,雌雄不拘。以慢性手术方法分别在鸭肌胃的后腹薄肌和前腹厚肌浆膜表面各埋藏一对Ag-AgCl乏极化电极。实验前预先禁食16~18h,在清醒状态下利用多导生理仪记录肌胃电活动。进而将鸭头前倾45°,固定在脑立体定位仪上,分别往第三脑室和延脑中缝核内微量注射5-HT和等量生理盐水,观察注射前后肌胃电峰电位串的平均幅度和相邻两峰电位串间隔时间的变化。注射位点用旁胺天蓝标记,取脑作冰冻切片,镜检确定标记位点的解剖部位。结果如下:往第三脑室注射2.1μg和1.0μg5-HT后肌胃电峰电位串平均幅度(ASP)比注射前下降215μv和160μv(P<0.01),相邻两峰电位串间隔(INSP)平均增加192.1s和46.1s(P<0.01)。而注射0.1μg5-HT和等量生理盐水前后ASP和INSP的差异均不显著。提示正常情况下,下丘脑室周灰质5-HT免疫阳性神经元可能参与肌胃运动的抑制性调控。往中缝核注射10μg5-HT后ASP比注射前下降840μv(P<0.01),而注射1.0μg、0.1μg5-HT和等量生理盐水前后ASP和INSP的差异均不显? 展开更多
关键词 5-HT 注射 胃电 中缝核 胃运动 生理盐水 第三脑室 肌胃 北京鸭 标记位点
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网养对大、小鼠生长发育的影响 被引量:1
11
作者 刘云波 梁永利 +5 位作者 康爱丽 王伟 徐龙进 吕素军 孙淑华 王艳蓉 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2006年第2期145-147,共3页
目的观察全网饲养对大、小鼠其生长发育的影响。方法在传统的大小鼠饲养盒底部40mm高处加不锈钢金属网格,网孔大小为10mm×100mm,网格上用于饲养动物。雌雄动物分别分为实验组和对照组,观察体重、行为、供食量和供水量的变化。结果... 目的观察全网饲养对大、小鼠其生长发育的影响。方法在传统的大小鼠饲养盒底部40mm高处加不锈钢金属网格,网孔大小为10mm×100mm,网格上用于饲养动物。雌雄动物分别分为实验组和对照组,观察体重、行为、供食量和供水量的变化。结果全网养小鼠生长不如传统饲养方式生长快,但没有统计学差异;全网养大鼠生长发育正常,与传统饲养方式相比,未见差异。结论全网养大鼠不需要垫料,值得进一步推广;全网式饲养小鼠必须慎重。 展开更多
关键词 饲养方式 大鼠 小鼠
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A^y基因对KK/Upj-A^y/J小鼠繁殖性能与血糖的影响 被引量:2
12
作者 张晓娟 孙景江 +1 位作者 田玉书 刘云波 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第10期582-584,共3页
目的探讨遗传因子Ay基因对KK/Upj_Ay/J小鼠繁殖性能及血糖的影响,并确定最好的繁殖方式。方法KK/Upj-Ay/J小鼠保持在SPF状态,采用3种繁殖方式,分别为:杂合子雄鼠与隐性纯合子雌鼠交配;杂合子雌鼠与隐性纯合子雄鼠交配;杂合子雌鼠与杂合... 目的探讨遗传因子Ay基因对KK/Upj_Ay/J小鼠繁殖性能及血糖的影响,并确定最好的繁殖方式。方法KK/Upj-Ay/J小鼠保持在SPF状态,采用3种繁殖方式,分别为:杂合子雄鼠与隐性纯合子雌鼠交配;杂合子雌鼠与隐性纯合子雄鼠交配;杂合子雌鼠与杂合子雄鼠交配,同时尾尖取血测量小鼠血糖。结果3种繁殖方式中,杂合子雄鼠与隐性纯合子雌鼠交配的受孕率,平均窝产子数最高,分别为92.6%;6.38只。杂合子雌鼠与杂合子雄鼠繁殖方式的离乳率最高为91.67%。仔鼠A/a杂合子与a/a隐性纯合子的比例为1∶1。结论(1)杂合子雄鼠与隐性纯和子雌鼠交配繁殖性能具有较大的优势。(2)遗传因子Ay黄色肥胖糖尿病基因对小鼠血糖的影响显著。 展开更多
关键词 小鼠 KK/Upj-A^y/J血糖 繁殖性能
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肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)在心脏发育中的作用 被引量:2
13
作者 彭健豪 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第4期217-217,共1页
关键词 肝素结合性表皮生长因子 心脏发育 factor HB-EGF 膜蛋白前体 跨膜区 金属蛋白 受体结合 结构域
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一种大鼠笼具的改进及其饲养效果的观察 被引量:1
14
作者 刘云波 梁永利 +5 位作者 康爱丽 王伟 徐龙进 吕素军 孙淑华 王艳蓉 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第1期34-37,共4页
目的设计半网式饲养盒,探讨半网式饲养大鼠的可行性。方法R5型饲养盒改进后,以普通饲养盒和半网式饲养盒饲养大鼠,计算换盒工作量,计算动物生产能力,按GB14925-2001测定不同时间盒内氨气浓度。结果1)半网式饲养与盒式饲养相比可减少动... 目的设计半网式饲养盒,探讨半网式饲养大鼠的可行性。方法R5型饲养盒改进后,以普通饲养盒和半网式饲养盒饲养大鼠,计算换盒工作量,计算动物生产能力,按GB14925-2001测定不同时间盒内氨气浓度。结果1)半网式饲养与盒式饲养相比可减少动物垫料用量50%,工作量可减少75%以上。2)两种饲养方式用于大鼠饲养,效果没有区别。3)两种饲养方式在换盒后的前4天氨气浓度几乎无差异,5 d以后,半网式饲养方式的饲养盒内氨气浓度低于盒养式饲养方式。结论半网式饲养方式有其独特的优势,既能取得盒式饲养方式的饲养效果和适用范围,又能具备网式饲养方式节约垫料和减少工作量的目的。 展开更多
关键词 饲养方式 氨气浓度 大鼠
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肺纤维化的发病机制及关键靶点 被引量:34
15
作者 孔琪 秦川 《国外医学(呼吸系统分册)》 2005年第5期331-333,336,共4页
关键词 肺纤维化 发病机制 关键靶点 发病原因 巨噬细胞活化 炎症细胞聚集
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IL-2-TNFα融合基因与B7.1基因联合修饰的肿瘤的疫苗作用
16
作者 刘雪丰 张连峰 +2 位作者 张铭 马耀文 蔡有余 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2000年第2期98-106,共9页
目的 改进基因修饰的肿瘤细胞疫苗的效力。方法 在小鼠乳腺癌细胞系EMF6 和一个已被含有IL - 2和TNFα融合基因的逆转录病毒载体XdF转染的EMF6 亚系 (T2 -EMF6)中表达B7 1基因。结果 免疫 /侵袭实验表明 ,与单基因转导的肿瘤细胞相比... 目的 改进基因修饰的肿瘤细胞疫苗的效力。方法 在小鼠乳腺癌细胞系EMF6 和一个已被含有IL - 2和TNFα融合基因的逆转录病毒载体XdF转染的EMF6 亚系 (T2 -EMF6)中表达B7 1基因。结果 免疫 /侵袭实验表明 ,与单基因转导的肿瘤细胞相比 ,IL - 2-TNFα/B7 1共同修饰的肿瘤细胞具有较低的致瘤性和较优的疫苗效力 (P <0 0 5)。在各种肿瘤细胞的免疫接种后三周 ,进行混合淋巴细胞培养实验和51 Cr释放实验来检测动物的细胞免疫活性 ,IL - 2 -TNFα和B7 1共同作用诱导了比其中的任意一个单独作用更强的抗肿瘤应答 (比IL - 2 -TNFα高 2 5% ,比B7 1高 2 0 % )。结论 IL - 2 -TNFα和B7 1协同作用可提高他们所修饰的肿瘤细胞的疫苗效力。 展开更多
关键词 B7.1 IL-2 TNF 肿瘤细胞 疫苗效力 融合基因 联合 免疫接种 动物 释放
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限制性内切酶EcoR的高效表达与纯化
17
作者 刘金毅 赵晓娟 +2 位作者 蔡有余 沈洁 孟雁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第3期417-420,共4页
EcoR Ⅱ was the first restriction endonuclease ever found requiring the cooperative interaction with the least two DNA sites for digestion activity.To study the specific activity, Eco R Ⅱ was purified from hyperexpre... EcoR Ⅱ was the first restriction endonuclease ever found requiring the cooperative interaction with the least two DNA sites for digestion activity.To study the specific activity, Eco R Ⅱ was purified from hyperexpression engineering bacteria in which the specific expression products increased to about 20% of total cellular protein.By using chromatography on DEAE cellulose column,phosphocellulose column and FPLC of Resource Q,the enzyme was purified from soluble protein fraction.The inclusion bodies were solved and renatured,and the enzyme was purified from this part of protein with higher specific activity by using FPLC of Resource Q.Detection showed that the enzyme was purified to homogeneity and was free of detectable contamination by other DNase(exo and endo). 展开更多
关键词 EcoRⅡ 限制性内切酶 基因表达 纯化
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野生型及突变型α-synuclein转基因表达载体的构建
18
作者 郭军堂 陈安琪 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第5期267-270,共4页
目的构建中枢神经系统特异表达的野生型及突变型-αsynuclein转基因表达载体。方法通过PCR方法扩增-αsynuclein基因,产物亚克隆到pGEM-T载体,经测序无误后克隆到pCEP4载体,并用神经特异的PDGF启动子替代pCEP4载体的CMV启动子构建野生... 目的构建中枢神经系统特异表达的野生型及突变型-αsynuclein转基因表达载体。方法通过PCR方法扩增-αsynuclein基因,产物亚克隆到pGEM-T载体,经测序无误后克隆到pCEP4载体,并用神经特异的PDGF启动子替代pCEP4载体的CMV启动子构建野生型转基因表达载体。利用大引物突变法构建A53T和A30P的转基因表达载体。结果通过限制性内切酶及DNA测序证实野生型及突变型-αsynuclein均成功的克隆到所需要的载体中。结论该转基因表达载体的成功构建为帕金森氏病转基因动物的构建及帕金森氏病发病机制的研究奠定基础。 展开更多
关键词 Α-SYNUCLEIN 定点突变
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Ⅱ型单胺囊泡转移体在SH-SY5Y细胞中的稳定表达
19
作者 陈安琪 郭军堂 +7 位作者 朱华 黄澜 刘亚莉 马春梅 张京钟 徐群渊 张连峰 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第6期339-342,F0005,共5页
目的构建稳定表达Ⅱ型单胺囊泡转移体(VMAT2)的SH-SY5Y细胞系。方法构建VMAT2真核表达载体,利用脂质体转染神经母细胞瘤SH-SY5Y,选择筛选后挑取单克隆扩大培养,通过Western-blot及免疫荧光的方法鉴定蛋白质在细胞中的表达,并通过免疫双... 目的构建稳定表达Ⅱ型单胺囊泡转移体(VMAT2)的SH-SY5Y细胞系。方法构建VMAT2真核表达载体,利用脂质体转染神经母细胞瘤SH-SY5Y,选择筛选后挑取单克隆扩大培养,通过Western-blot及免疫荧光的方法鉴定蛋白质在细胞中的表达,并通过免疫双荧光技术对VMAT2在细胞系中的分布进行定位。结果Western-blot及免疫荧光结果显示该蛋白在挑选的细胞系中有高效表达。免疫双荧光结果显示表达的蛋白定位在大密度核心囊泡(LDCV)。结论该细胞系的成功构建为研究VMAT2在帕金森氏病(PD)发病机制中的作用奠定良好的基础。 展开更多
关键词 Ⅱ型单胺囊泡转移体 SH-SY5Y
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