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下呼吸道感染病原体检测方法研究进展 被引量:19
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作者 贾雪洋 任红宇 +2 位作者 聂旭冬 秦天 李建国 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期263-270,共8页
下呼吸道感染(lower respiratory tract infection, LRTI)是常见的呼吸系统疾病,包括肺炎、慢性支气管炎等多种感染类型,以抗生素治疗为主,尽快确定下呼吸道感染的病原体并采取针对性治疗可以大大降低下呼吸道感染死亡率,因此病原体的... 下呼吸道感染(lower respiratory tract infection, LRTI)是常见的呼吸系统疾病,包括肺炎、慢性支气管炎等多种感染类型,以抗生素治疗为主,尽快确定下呼吸道感染的病原体并采取针对性治疗可以大大降低下呼吸道感染死亡率,因此病原体的快速检测对疾病准确诊断和及时治疗相当关键。目前下呼吸道感染病原体检测技术较多,高通量、自动化和快速检测成为其主要发展趋势。本文介绍了下呼吸道感染检测标本类型和下呼吸道感染常见及非常见病原体,并着重对目前常用的病原体检测方法尤其是多种病原体同时检测方法进行综述,旨在指导临床根据疾病采集相应的样本类型,选择适宜的检测方法,快速确定感染病原体并及时治疗。 展开更多
关键词 下呼吸道 感染 病原体 检测 标本
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中国西南地区结核分枝杆菌临床分离菌株一线药物耐药状况调查 被引量:15
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作者 陈杏 李雨晴 +5 位作者 万李 刘海灿 赵秀芹 管茶香 万康林 袁秀琴 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期300-304,共5页
目的了解西南地区结核分枝杆菌临床分离株的耐药表型及其影响因素情况,为结核病的预防和控制提供基础参考数据。方法选取中国西南4个地区(贵州、广西、四川和重庆)2006—2013年从结核病患者痰标本中分离培养的500株结核分枝杆菌,用比例... 目的了解西南地区结核分枝杆菌临床分离株的耐药表型及其影响因素情况,为结核病的预防和控制提供基础参考数据。方法选取中国西南4个地区(贵州、广西、四川和重庆)2006—2013年从结核病患者痰标本中分离培养的500株结核分枝杆菌,用比例法药物敏感试验对4种一线抗结核药物进行药物敏感性检测,用SPSS22.0中的χ~2检验和Logistic回归进行统计学分析。结果 500株结核分枝杆菌临床分离株,对INH、RFP、EMB和SM的耐药率分别为30.40%、26.00%、9.80%和24.40%,总体耐药率和耐多药率分别是40.60%和27.20%;贵州、四川、广西和重庆的总耐药率和MDR率分别为64.10%和46.15%、59.54%和51.90%、28.88%和14.97%、20.19%和3.85%。χ~2检验结果显示,各地区间菌株对4种药物的耐药率、总体耐药率和耐多药率差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,地区和病例类型是结核病耐药及耐多药发生的影响因素(P<0.05)。结论西南地区,特别是贵州和四川的耐药结核病、尤其是耐多药结核病的流行状况严峻。应加强结核分枝杆菌耐药性监测,以指导临床用药和预防控制耐药结核病的发生和流行。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐药性 LOGISTIC回归分析
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中国结核病流行新特点及挑战 被引量:28
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作者 万康林 《疾病监测》 CAS 2008年第11期667-670,共4页
据推测,分枝杆菌(Mycobacterium)起源于1.5亿年以前。在300万年前,结核分枝杆菌早期祖先可能和早期原始人类同时起源于东非并共同进化。现代结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex)大约在15000~35000年前起源... 据推测,分枝杆菌(Mycobacterium)起源于1.5亿年以前。在300万年前,结核分枝杆菌早期祖先可能和早期原始人类同时起源于东非并共同进化。现代结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex)大约在15000~35000年前起源于同一个祖先圈。在埃及、印度、中国分别于5000、3300和2300年前就有结核病的文字记载。目前,结核病仍然是严重危害着人类健康的传染病之一。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌复合群 TUBERCULOSIS 中国 人类健康 文字记载 传染病 早期
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结核病疫苗研究进展及挑战 被引量:5
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作者 范雪亭 万康林 +2 位作者 王瑞白 赵秀芹 刘海灿 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期643-647,共5页
卡介苗是目前唯一应用于预防人类结核病的疫苗,但其保护效果备受争议,研究新型高效的结核病疫苗尤为重要。从安全性、经济成本及保护效果等方面考虑,多阶段抗原亚单位疫苗或多表位疫苗具有较好的应用前景。随着对结核分枝杆菌致病机制... 卡介苗是目前唯一应用于预防人类结核病的疫苗,但其保护效果备受争议,研究新型高效的结核病疫苗尤为重要。从安全性、经济成本及保护效果等方面考虑,多阶段抗原亚单位疫苗或多表位疫苗具有较好的应用前景。随着对结核分枝杆菌致病机制的深入了解以及疫苗研发技术的不断更新,结核病疫苗会有重大突破。本文论述结核病疫苗的类型及其特性,并针对结核病新型疫苗研究中抗原选择、动物模型选择、疫苗效果评价指标及人群特异性存在的问题和挑战进行讨论,旨在为新型结核病疫苗的研究提供参考。 展开更多
关键词 结核病 卡介苗 结核病新型疫苗
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福建省临床分离非结核分枝杆菌菌种分布研究 被引量:35
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作者 黄明翔 万康林 +2 位作者 陈力舟 张丽水 李丹 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1227-1230,共4页
目的分析我院临床分离非结核分枝杆菌(NTM)菌株,探讨福建省NTM临床分离率和菌种分布情况。方法对我院2009-2012年临床分离6 362株分枝杆菌进行结核分枝杆菌复合群(MTBC)与NTM鉴别,对鉴定为NTM菌株应用hsp65-和rpoB-PCR-RFLP进行菌种鉴... 目的分析我院临床分离非结核分枝杆菌(NTM)菌株,探讨福建省NTM临床分离率和菌种分布情况。方法对我院2009-2012年临床分离6 362株分枝杆菌进行结核分枝杆菌复合群(MTBC)与NTM鉴别,对鉴定为NTM菌株应用hsp65-和rpoB-PCR-RFLP进行菌种鉴定。结果 6 362株临床分离分枝杆菌共鉴别出649株NTM。鉴别出的649株NTM菌株,经hsp65-和rpoB-PCR-RFLP鉴定,菌种分布达24个种,其中菌株数量前3位菌种为:胞内分枝杆菌(M.intracellulare)302株(46.5%),鸟分枝杆菌(M.avium)138株(21.3%),脓肿分枝杆菌(M.abscessus)81株(12.5%)。结论 2009-2012年福建省NTM临床分离率占分枝杆菌培养阳性菌株的10.2%,NTM种类多,以鸟-胞内分枝杆菌复合群(MAC)为福建省NTM的主要流行菌种,占总数的67.8%。 展开更多
关键词 非结核分枝杆菌 PCR-RFLP 菌种鉴定
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IPCC第五次评估报告气候变化对人类福祉影响的新认知 被引量:44
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作者 张存杰 黄大鹏 +1 位作者 刘昌义 刘起勇 《气候变化研究进展》 CSCD 北大核心 2014年第4期246-250,共5页
IPCC第五次评估报告(AR5)第二工作组(WGⅡ)报告评估了气候变化对人类健康、人类安全、生计与贫困的影响,指出气候变化已经对人类健康和安全造成了负面影响,气候变化、气候变率和极端气候事件给城市和农村的贫困人口增添了额外的负担,与... IPCC第五次评估报告(AR5)第二工作组(WGⅡ)报告评估了气候变化对人类健康、人类安全、生计与贫困的影响,指出气候变化已经对人类健康和安全造成了负面影响,气候变化、气候变率和极端气候事件给城市和农村的贫困人口增添了额外的负担,与气候变化相关的风险增大。21世纪的气候变化,将继续加剧现有健康问题,增加人类的迁徙,放大冲突的驱动因素的影响,对许多国家的关键基础设施造成不利影响,给小岛国和有很长海岸线国家的领土完整带来风险;整个21世纪,气候变化将减缓经济增长,进一步威胁粮食安全,使减贫更为困难,贫困问题更加突出。 展开更多
关键词 气候变化 影响与适应 人类健康 人类安全 生计与贫困
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诺卡氏菌研究进展 被引量:44
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作者 张媛 张媛媛 +1 位作者 李振军 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期628-634,共7页
目的诺卡氏菌是一种新发的人兽共患病病原,呈全球性分布,它能引起不同程度的人类疾病。近年来,病例报道明显增加,但大多数人对该菌不熟悉,本文就诺卡氏菌的分布、感染途径、致病性、分类及鉴定等做一综述。
关键词 诺卡菌 分类 鉴定
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44株甘肃疑似非结核分枝杆菌临床分离株的菌种鉴定 被引量:12
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作者 连璐璐 姜元 +7 位作者 赵秀芹 同重湘 余琴 张敬蕊 董海燕 张媛媛 吴移谋 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期343-348,共6页
目的对甘肃44株疑似非结核分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定。方法收集2010年甘肃省兰州市胸科医院从结核病患者痰标本中分离的、抗酸染色阳性和改良罗氏培养基,TCH和PNB鉴别培养基培养鉴定为非结核分枝杆菌(non-tuberculosis Mycobacter... 目的对甘肃44株疑似非结核分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定。方法收集2010年甘肃省兰州市胸科医院从结核病患者痰标本中分离的、抗酸染色阳性和改良罗氏培养基,TCH和PNB鉴别培养基培养鉴定为非结核分枝杆菌(non-tuberculosis Mycobacteria,NTM),采用rpoB-PRA和PCR产物DNA测序等分子生物学方法进行细菌种的鉴定。结果共对44株疑似非结核分枝杆菌临床分离株进行了鉴定。经rpoB-PRA、rpoB和hsp65基因DNA测序分析,其中非结核分枝杆菌13株(29.55%),包括龟分枝杆菌(M.chelonae)5株,戈登分枝杆菌(M.gordonae)4株,胞内分枝杆菌(M.intracellulare)2株,赛特分枝杆菌(M.setense)1株,耻垢分枝杆菌(M.smegmatis)1株;诺卡菌(Nocardia)31株(70.45%),其中鼻疽诺卡菌(N.farcinica)30株,卡尔涅亚诺卡菌(N.carnea)1株。结论抗酸染色阳性、PNB/TCH鉴定为非结核分枝杆菌临床分离株中包含不同种类的非结核分枝杆菌和诺卡菌,应开展进一步菌种鉴定,以便于临床正确诊断和合理治疗。 展开更多
关键词 非结核分枝杆菌 诺卡菌 鉴定 RPOB PRA
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诺卡菌的培养和染色特征研究 被引量:16
9
作者 张媛 张媛媛 +1 位作者 万康林 李振军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期230-236,共7页
目的了解诺卡菌的培养及染色特征。方法采用脑心浸液琼脂培养基、哥伦比亚血琼脂基础培养基和沙保弱琼脂培养基,分别在25℃和37℃条件下培养,观察不同种类诺卡菌的生长时间和菌落生长形态。应用革兰染色、抗酸染色及改良抗酸染色方法进... 目的了解诺卡菌的培养及染色特征。方法采用脑心浸液琼脂培养基、哥伦比亚血琼脂基础培养基和沙保弱琼脂培养基,分别在25℃和37℃条件下培养,观察不同种类诺卡菌的生长时间和菌落生长形态。应用革兰染色、抗酸染色及改良抗酸染色方法进行染色,观察诺卡菌的染色特征和形态特点。结果共对从德国的DSMZ菌种保藏中心购得的7个种23株诺卡菌标准参照菌株进行了培养观察。诺卡菌的菌落形态和颜色多样,菌落形态有针尖状、雪花状、菜花状、不规则状等,菌落颜色有白色、黄色、橙红色、灰色等。诺卡菌为革兰氏阳性菌,弱抗酸性菌,用不同浓度的脱色液进行抗酸染色,所用脱色液浓度越低,抗酸染色阳性率越高,硫酸脱色液浓度为0.125%时,诺卡菌抗酸染色阳性率最高。结论诺卡菌具有独特的培养和染色特征,菌落形态和镜下形态多样。诺卡菌为弱抗酸菌,0.125%硫酸脱色液的改良抗酸染色方法检测阳性率最高。 展开更多
关键词 诺卡氏菌 培养 染色 改良抗酸染色
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hsp65 and rpoB PCR-RFLP用于龟/脓肿分枝杆菌复合群种的快速鉴定(英文) 被引量:12
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作者 李艳冰 张媛媛 +4 位作者 黄明翔 赵秀芹 张丽水 万康林 刘文恩 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期645-652,共8页
目的探讨和评价hsp65and rpoB PCR-RFLP用于龟/脓肿分枝杆菌复合群种的快速鉴定。方法收集经PNB/TCH鉴别培养基表型鉴定和16s rRNA基因测序鉴定为龟/脓肿分枝杆菌复合群的临床分离菌株,用hsp65and rpoBPCR-RFLP进行种/亚种鉴定。结果经... 目的探讨和评价hsp65and rpoB PCR-RFLP用于龟/脓肿分枝杆菌复合群种的快速鉴定。方法收集经PNB/TCH鉴别培养基表型鉴定和16s rRNA基因测序鉴定为龟/脓肿分枝杆菌复合群的临床分离菌株,用hsp65and rpoBPCR-RFLP进行种/亚种鉴定。结果经表型鉴定为非结核分枝杆菌的27株临床菌株,16s rRNA基因测序分析与龟/脓肿分枝杆菌的同源性达到99.7%。经hsp65PCR-RFLP and rpoBPCR-RFLP鉴定18株为脓肿分枝杆菌(M.abscessus),4株为溃疡分枝杆菌(M.absecces),另5株表现为独特的指纹特征,可能是一个新的亚种。结论能够快速进行龟/脓肿分枝杆菌复合群种/亚种的鉴定。 展开更多
关键词 非结核分枝杆菌 龟/脓肿分枝杆菌复合群 PCR-RFLP
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耐多药结核分枝杆菌对喹诺酮类药物的耐药性与gyr基因突变的初步研究 被引量:5
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作者 赵丽丽 夏强 +2 位作者 赵秀芹 刘志广 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期390-393,共4页
目的分析耐多药结核分枝杆菌(Multiple drug-resistant tuberculosis,MDR-TB)临床分离株的gyr基因突变特点,探讨MDR-TB对喹诺酮类药物耐药产生与gyr基因突变的关系。方法采用比例法对耐多药结核临床分离菌株进行氧氟沙星的药物敏感性检... 目的分析耐多药结核分枝杆菌(Multiple drug-resistant tuberculosis,MDR-TB)临床分离株的gyr基因突变特点,探讨MDR-TB对喹诺酮类药物耐药产生与gyr基因突变的关系。方法采用比例法对耐多药结核临床分离菌株进行氧氟沙星的药物敏感性检测,应用DNA直接测序法检测MDR-TB的gyr基因突变情况。结果 125株MDR-TB临床分离株中,50株对喹诺酮类耐药,耐药率为40%。50株耐药菌株中,40株gyr基因发生突变:其中39株gyrA基因突变,突变率为78%,突变位点包括90,91和94位氨基酸;5株gyrB基因突变,其中4株合并gyrA基因突变,gyrB基因突变位点为500,506,534和539位氨基酸。结论 MDR-TB中的喹诺酮类药物耐药态势比较严峻,其对喹诺酮类药物耐药机制主要与gyrA基因突变有关。 展开更多
关键词 喹诺酮 GYRA基因 gyrB基因 耐多药结核分枝杆菌 耐药决定区
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2株胞内分枝杆菌临床分离株的鉴定 被引量:5
12
作者 潘爱珍 张媛媛 +2 位作者 王心 赵秀芹 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期218-221,共4页
目的联合应用多种分子生物学技术进行分枝杆菌菌种鉴定。方法从经PNB、TCH鉴别培养基鉴定为结核分枝杆菌的临床分离菌株285株中选取6株,其中包括oxyR-ahpC基因间隔区检测时PCR产物分子量异常的2株和另外随机选择的PCR产物分子量正常者4... 目的联合应用多种分子生物学技术进行分枝杆菌菌种鉴定。方法从经PNB、TCH鉴别培养基鉴定为结核分枝杆菌的临床分离菌株285株中选取6株,其中包括oxyR-ahpC基因间隔区检测时PCR产物分子量异常的2株和另外随机选择的PCR产物分子量正常者4株,采用H37Rv、鸟分枝杆菌95001和胞内分支杆菌95002做对照,PCR扩增oxyR-ahpC基因间隔区,对其产物进行测序和网上同源性(H37Rv、U18263、U71061)比对。同时,采用多位点PCR扩增和hsp65 PCR-限制性酶切片段长度多态性分析,从而判定分枝杆菌菌种类型。结果经PNB、TCH鉴别培养基鉴定初步判定为结核分枝杆菌的285株临床分离株中2株临床菌株oxyR-ahpC基因间隔区PCR产物大小约为1 000bp,DNA序列与胞内分枝杆菌同源性极高,达99%,而与同片段序列结核分枝杆菌H37Rv的差异大,同源性为84%。多位点PCR指纹显示为非分枝结核杆菌,hsp65 PCR-RLFP/RFLP指纹与95002一致。结论2株oxyR-ahpC基因间隔区PCR产物分子量异常的经PNB、TCH鉴别培养基鉴定为结核分枝杆菌的临床分离株确定为胞内分枝杆菌。多种分子生物学技术联合应用能够快速、简便、更准确地鉴定分枝杆菌菌种。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核分枝杆菌 胞内分枝杆菌 菌种鉴定
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结核分枝杆菌链霉素耐药临床分离株rpsL基因突变特征分析 被引量:6
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作者 魏淑贞 赵秀芹 +1 位作者 刘志广 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1097-1100,共4页
目的了解我国结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)rpsL基因突变特征及其与链霉素耐药的相关性,并评价其应用价值。方法对302株结核分枝杆菌临床分离株的rpsL基因采用聚合酶链反应-直接测序(PCR-DS)进行检测。结果 59株对INH、... 目的了解我国结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)rpsL基因突变特征及其与链霉素耐药的相关性,并评价其应用价值。方法对302株结核分枝杆菌临床分离株的rpsL基因采用聚合酶链反应-直接测序(PCR-DS)进行检测。结果 59株对INH、RFP、SM、EMB和PAS全部敏感,rpsL基因没有突变,61株对SM敏感的耐药株有6株突变,SM敏感菌株突变率为5.00%(6/120)。182株SM耐药MTB,rpsL基因突变率为70.33%,其中43位密码子赖氨酸转变为精氨酸(Lys43Arg)突变率为52.20%;88位密码子有4种突变类型,突变率为17.58%;86位密码子精氨酸转变为谷氨酰胺(Arg86Gln)突变率为0.55%。SM耐药株的rpsL基因突变率明显高于SM敏感株的基因突变率,两者之间的差异有统计学意义,χ2=125.05,P<0.05。结论 rpsL基因突变与结核分枝杆菌链霉素耐药高度相关,其中Lys43Arg突变是主要突变类型,PCR-DS检测rpsL基因突变可以用于临床结核菌链霉素耐药的快速检测。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 链霉素 耐药 基因突变
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MGIT 960和比例法对结核分枝杆菌药物敏感性试验的对比研究 被引量:10
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作者 赵丽丽 夏强 +2 位作者 刘志广 赵秀芹 万康林 《医学研究杂志》 2011年第5期40-43,共4页
目的评价BACTEC MGIT960检测8种抗结核药物耐药性的效果。方法用MGIT960对结核杆分枝杆菌临床分离菌株进行抗结核药物异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺的药敏检测,并将结果与L-J比例法结果... 目的评价BACTEC MGIT960检测8种抗结核药物耐药性的效果。方法用MGIT960对结核杆分枝杆菌临床分离菌株进行抗结核药物异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺的药敏检测,并将结果与L-J比例法结果进行比较分析。结果用MGIT960法与L-J比例法对118株结核分枝杆菌临床分离株进行异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星、乙硫异烟胺的耐药性检测,两种方法的符合率分别为97.5%(115/118)、92.4%(109/118)、96.6%(114/118)、84.7%(100/118)、94.9%(112/118)、94.1%(111/118)、97.5%(115/118)、85.6%(101/118)。MGIT960完成一线/二线药物药敏试验的时间平均为8.9和8.3天,L-J法则分别为26.7天和26.1天,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MGIT960所得的药敏结果与传统比例法有较高的一致性,但检测时间较短,有利于耐药结核病人的早期诊断和治疗。 展开更多
关键词 BACTEC MGIT 960系统结核分枝杆菌 比例法药敏试验
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结核分枝杆菌分子分型技术研究进展 被引量:4
15
作者 吕冰 高守一 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期487-490,494,共5页
关键词 结核分枝杆菌感染 分子分型技术 分子流行病学 全基因组序列 人类健康 H37RV 结核病 致病机制
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鸡源大肠杆菌β-内酰胺类药敏及blaCTX-M基因携带状况的探讨 被引量:5
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作者 张利锋 齐静 +6 位作者 罗成旺 刘玉庆 陈霞 袁敏 禹蕙兰 卢金星 李娟 《检验医学与临床》 CAS 2016年第9期1153-1155,共3页
目的分析肉鸡养殖、屠宰和销售不同环节来源大肠杆菌对β-内酰胺类药物的敏感性及CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的携带状况,探讨大肠杆菌在肉鸡养殖、屠宰和销售环节上可能存在的耐药性传播。方法对从山东大型肉鸡养殖场、屠宰场分离... 目的分析肉鸡养殖、屠宰和销售不同环节来源大肠杆菌对β-内酰胺类药物的敏感性及CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的携带状况,探讨大肠杆菌在肉鸡养殖、屠宰和销售环节上可能存在的耐药性传播。方法对从山东大型肉鸡养殖场、屠宰场分离的373株大肠杆菌进行药物敏感性检测、blaCTX-M基因核酸检测及序列分析。结果菌株对头孢他啶、头孢噻肟和哌拉西林存在高水平的耐药,耐药率依次是89.3%、92.8%和91.7%,但对哌拉西林/他唑巴坦仍保持敏感。菌株blaCTX-M基因的携带率高,达54.7%(204/373),来自养殖和销售等不同环节的菌株携带的blaCTX-M基因集中在4个亚型,分别是blaCTX-M-55、blaCTX-M-65、blaCTX-M-14和blaCTX-M-27。结论鸡源大肠杆菌对青霉素及头孢菌素类药物有较高的耐药率,对酶抑制剂复方制剂仍保持较高的敏感率。携带blaCTX-M基因的菌株来自养殖和销售等不同的环节,主要集中在4个亚型,提示肉鸡食品链不同环节可能存在大肠杆菌耐药性的传播。 展开更多
关键词 大肠杆菌 细菌耐药 blaCTX基因 耐药性传播
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山西省某医院发现的携带碳青霉烯酶基因的肺炎克雷伯菌的流行特征研究(英文) 被引量:3
17
作者 庞慧 弓艳娥 +6 位作者 袁敏 蒋毅 郭步平 龚林 李水仙 李娟 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1110-1115,共6页
目的肺炎克雷伯菌是一类重要的引起院内感染的病原微生物,可导致机体多个器官和组织受累。本研究主要是针对携带有碳青霉烯酶基因的肺炎克雷伯菌进行分子特征和流行状况的评价。方法本研究中所用菌株是2008-2012年分离自山西省长治某医... 目的肺炎克雷伯菌是一类重要的引起院内感染的病原微生物,可导致机体多个器官和组织受累。本研究主要是针对携带有碳青霉烯酶基因的肺炎克雷伯菌进行分子特征和流行状况的评价。方法本研究中所用菌株是2008-2012年分离自山西省长治某医院的标本,通过琼脂扩散和E纸条试验来分析菌株的药敏状况。碳青霉烯酶的产生情况经Carba NP试验来确认,而碳青霉烯酶基因的测定及确证由PCR和DNA测序完成。最后,将碳青霉烯类抗生素耐药菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)研究。结果 1 297株临床分离的肺炎克雷伯菌中,有9株对碳青霉烯类抗生素的耐药株,它们都是产A组碳青霉烯酶、肺炎克雷伯菌的碳青霉烯酶(KPC-2)基因阳性,而其它的检测基因均为阴性。尽管9株菌都属于MLST中的ST11型,但就PFGE分析发现,可能存在两次院内感染的传播:分别在2010和2012年。结论携带KPC-2基因的耐药肺炎克雷伯菌已经在医院内传播,加强院内严密监控和制定严格的感染控制措施已是刻不容缓。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯酶 药物敏感性试验 脉冲场凝胶电泳 多位点序列分型
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等位基因特异性多重PCR快速检测结核分枝杆菌喹诺酮耐药性的初步研究 被引量:7
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作者 夏强 赵丽丽 +2 位作者 刘志广 刘劼 万康林 《医学研究杂志》 2011年第4期31-34,共4页
目的建立等位基因特异性多重聚合酶链反应(multiplex allele-specific PCR,MAS-PCR)技术,以快速检测结核分枝杆菌对喹诺酮的耐药性。方法根据结核分枝杆菌gyrA基因序列,分别设计4条特异性寡聚核苷酸引物,优化PCR条件,建立针对gyrA基因90... 目的建立等位基因特异性多重聚合酶链反应(multiplex allele-specific PCR,MAS-PCR)技术,以快速检测结核分枝杆菌对喹诺酮的耐药性。方法根据结核分枝杆菌gyrA基因序列,分别设计4条特异性寡聚核苷酸引物,优化PCR条件,建立针对gyrA基因90和94位点突变进行检测的MAS-PCR技术,对临床分离菌株进行喹诺酮耐药性检测,同时以比例法和DNA直接测序法做对照。结果共对144株喹诺酮敏感株和56株喹诺酮耐药株进行了MAS-PCR检测。MAS-PCR与比例法比较,敏感性为53.57%(30/56);与DNA测序比较,敏感性为71.43%(30/42),特异性均为100%(144/144)。结论 MAS-PCR技术检测结核分枝杆菌对喹诺酮耐药性简便、快速、特异性高,但敏感性需进一步提高。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 喹诺酮 耐药 等位基因特异性多重聚合酶链反应
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福建省46株耐多药结核分枝杆菌rpoB基因突变特征分析 被引量:2
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作者 魏淑贞 陈求扬 +5 位作者 万康林 林淑芳 梁庆福 赵永 林建 郑金凤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期913-916,共4页
目的阐明来源于福建省耐药性调查的46株耐多药结核分枝杆菌rpoB基因的突变特征,为福建省耐多药结核病快速诊断方法的建立提供一定的分子基础。方法对福建省9个监测点进行耐药性调查,收集菌株进行菌种鉴定、药物敏感性试验。选取46株耐... 目的阐明来源于福建省耐药性调查的46株耐多药结核分枝杆菌rpoB基因的突变特征,为福建省耐多药结核病快速诊断方法的建立提供一定的分子基础。方法对福建省9个监测点进行耐药性调查,收集菌株进行菌种鉴定、药物敏感性试验。选取46株耐多药结核分枝杆菌和15株全敏感株,扩增包含rpoB热点突变区的基因片段,测序后比对分析。结果 15株全敏感株未检测到突变。42株耐多药结核分枝杆菌rpoB基因检测到13种突变类型,涉及10个氨基酸,突变率为91.30%。突变均位于核心突变区内,包括9种点突变、1个插入突变和3种联合突变,531位和526位密码子的点突变率之和达69.57%。结论福建省耐多药结核分枝杆菌杆rpoB基因最常见的点突变发生于531位和526位。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐多药 利福平 RPOB基因 突变
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利用分枝杆菌的重组工程系统将TAP标签敲入耻垢分枝杆菌的方法研究 被引量:2
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作者 赵丽丽 夏强 +1 位作者 赵秀芹 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期539-542,546,共5页
目的利用pJV53质粒编码的分枝杆菌重组工程系统将TAP标签敲入耻垢分枝杆菌基因组。方法将pJV53质粒转入耻垢分枝杆菌,使其表达重组蛋白,制备带有重组蛋白的感受态细胞;从质粒pBS1479中扩增出tap片段,从质粒pSMT3中扩增hyg片段,从耻垢分... 目的利用pJV53质粒编码的分枝杆菌重组工程系统将TAP标签敲入耻垢分枝杆菌基因组。方法将pJV53质粒转入耻垢分枝杆菌,使其表达重组蛋白,制备带有重组蛋白的感受态细胞;从质粒pBS1479中扩增出tap片段,从质粒pSMT3中扩增hyg片段,从耻垢分枝杆菌基因组中分别扩增出aasf基因及其5′端非编码区片段AASF5和aasf基因下游3′端非编码区片段AASF3,利用重叠PCR将以上4个片段拼接在一起,形成最终的敲入片段A5THA3;将构建好的敲入片段转入感受态细胞,使其重组入耻垢分枝杆菌基因组中,PCR和DNA测序鉴定敲入效果。结果重叠PCR技术得到全长为3 200 bp的敲入片段,PCR与DNA测序结果证实带有TAP标签的A5THA3片段已成功敲入耻垢分枝杆菌基因组中。结论成功将TAP标签敲入耻垢分枝杆菌基因组,为下一步进行目的基因功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 重组工程系统 pJV53质粒 串联亲和纯化标签 敲入片段 重叠PCR 耻垢分枝杆菌
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