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^(99m)Tc-YIGSR与^(99m)Tc-MIBI肿瘤细胞摄取比较研究
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作者 胡佳 张永学 +1 位作者 田元 胡志红 《放射学实践》 2003年第3期208-209,共2页
目的 :利用肿瘤细胞表面含有大量层粘素受体 ,而且能与层粘素特异性结合机制 ,研究99mTc YIGSR (层粘蛋白 小分子肽 )作为一种新型的肿瘤显像剂 ,在埃氏腹水瘤细胞 (EAC)中的摄取并与MIBI进行比较。方法 :① 99mTc MAG3 YIGSR探针的制... 目的 :利用肿瘤细胞表面含有大量层粘素受体 ,而且能与层粘素特异性结合机制 ,研究99mTc YIGSR (层粘蛋白 小分子肽 )作为一种新型的肿瘤显像剂 ,在埃氏腹水瘤细胞 (EAC)中的摄取并与MIBI进行比较。方法 :① 99mTc MAG3 YIGSR探针的制备 :利用S 已基 琥铂酰亚胺 巯已甘肽 (S Acetly NH 3 MAG3 )作为螯合剂 ,在适当还原剂作用下 ,将99mTc标记到层粘素 YIGSR上 ,用SphadexG10凝胶柱纯化 ,根据放射性计数及 2 80nm紫外吸光值合并各峰管 ,利用纸层析进行放射性化学纯度分析。②细胞培养及细胞存活率测定 :EAC在含小牛血清的 164 0细胞培养液中悬浮培养 ,用台盼兰排除法计数活细胞。③细胞动力学研究 :用放射性核素示踪法研究EAC在 3 7℃和 2 2℃时对99mTc YIGSR及99mTc MIBI的摄取。结果 :①99mTc YIGSR标记率为 ( 62± 3 ) % ,放化纯为 95 % ,99mTc MIBI标记率为 ( 96± 2 ) % ,放化纯为 98%。②细胞存活率随孵育时间延长而下降 ,实验前细胞存活率为 96%± 1% ,孵育 2h细胞及 3h存活率分别为( 96± 1) %及 ( 90± 2 ) % ,均在 85 %以上符合实验要求。③ 3 7℃ 60min时 ,EAC对99mTc YIGSR及99mTc MIBI的摄取峰值分别为 ( 4 3 .16± 2 .4) %和 ( 2 4.4± 1.8) % ;在 2 2℃时EAC摄取峰值分别为 ( 2 6.5? 展开更多
关键词 层粘蛋白-小分子肽 甲氧基异丁基异腈 肿瘤 细胞摄取 ^99M锝
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利用杆状病毒表达载体系统表达重组乙型肝炎病毒核心蛋白 被引量:2
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作者 高琳琳 王晓燕 +4 位作者 张颖慧 李岩 邓菲 张艳芳 林菊生 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期787-790,共4页
目的利用杆状病毒表达载体系统制备重组乙型肝炎病毒核心蛋白。方法构建含有HBV C基因的杆状病毒转移载体pFastBac Dual-HBV core,转化大肠埃希菌DH10Bac进行转座,提取重组Bacmid DNA转染昆虫细胞Sf9,获得含有HBV C基因的重组杆状病毒... 目的利用杆状病毒表达载体系统制备重组乙型肝炎病毒核心蛋白。方法构建含有HBV C基因的杆状病毒转移载体pFastBac Dual-HBV core,转化大肠埃希菌DH10Bac进行转座,提取重组Bacmid DNA转染昆虫细胞Sf9,获得含有HBV C基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染Sf9细胞进行乙型肝炎病毒核心蛋白表达,然后通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析表达情况。结果成功构建了含HBV C基因的重组杆状病毒,而且在昆虫细胞Sf9中表达了乙型肝炎病毒核心蛋白。结论利用Bac to Bac杆状病毒表达系统,成功地表达了乙型肝炎病毒核心蛋白,为进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒核心蛋白 杆状病毒表达载体系统 昆虫细胞
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单种及联合靶向EV71VP1~VP4基因的shRNA干扰病毒复制的研究 被引量:1
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作者 阎岩 李世军 +3 位作者 郭军 周敬祝 唐光鹏 王定明 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期110-115,共6页
目的检测单种及2种联合靶向Ev71病毒衣壳蛋白VP1、VP2、VP3、VP4基因(VP1~VP4)的shRNA干扰病毒复制的效果。方法靶向EV71病毒的VP1~VP4基因序列设计及合成shRNA,并分别将其克隆到慢病毒质粒表达载体pLOV.CMV.EGFP中。重组表达质粒... 目的检测单种及2种联合靶向Ev71病毒衣壳蛋白VP1、VP2、VP3、VP4基因(VP1~VP4)的shRNA干扰病毒复制的效果。方法靶向EV71病毒的VP1~VP4基因序列设计及合成shRNA,并分别将其克隆到慢病毒质粒表达载体pLOV.CMV.EGFP中。重组表达质粒同psPAX2和pMD2.G共转染293T细胞,3d后收集上清中的重组病毒颗粒。用荧光定量RT—PCR法(real—timeqRT—PCR)和Westernblot检测单种及2种联合shRNA干扰EV71mRNA的表达水平及病毒蛋白的表达水平。结果靶向EV71VP1-VP4基因的shRNA对本研究的毒株(含死亡病例、重症病例、普通病例,FY0805)复制干扰差异无统计学意义(P〉0.05),对EV71病毒的抑制率分别约为:sh-VP1—1(51.6%),sh—VP1—2(85.1%),sh—VP1-3(76.4%),sh-VP2—1(57.5%),sh-VP2-2(81.4%),sh—VP2-3(79.5%),sh—VP3(68.9%),sh—VP4(56.7%),且有剂量依赖性。干扰病毒效率最高的为sh—VP1-2联合sh—VP2—2,抑制率可达96.6%,联合组均比单种加倍剂量的抑制率高。结论本研究设计的单独及联合靶向EV71病毒衣壳蛋白每个基因区均筛选到抑制率均大于50%的shRNA,且联合shRNA可以增强其干扰复制的能力。 展开更多
关键词 慢病毒 基因靶向 手足口病 EV71
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基于随机森林模型内脏脂肪等级相关指标分析
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作者 陈海军 刘翟 +5 位作者 史越 李雨泽 郭洪霞 鲍金华 许超蕊 张堃 《中华健康管理学杂志》 CAS CSCD 2023年第1期41-46,共6页
目的探讨基于随机森林模型分析内脏脂肪等级的相关指标。方法本研究为横断面研究,选取2021年3—9月在黑龙江省医院健康管理中心进行体检的医院职工(包括在职职工和退休职工)共617例的各项实验室指标以及体成分分析各项指标,按照2∶1的... 目的探讨基于随机森林模型分析内脏脂肪等级的相关指标。方法本研究为横断面研究,选取2021年3—9月在黑龙江省医院健康管理中心进行体检的医院职工(包括在职职工和退休职工)共617例的各项实验室指标以及体成分分析各项指标,按照2∶1的比例将样本分为训练集(411例)和测试集(206例),模型共纳入预测变量110个,使用训练集数据进行随机森林模型构建,测试集数据进行模型验证,选择最优节点数和决策树数目,对构建模型的预测性能进行评价,同时选取重要性在前10位的相对重要因子进行下一步的研究。按内脏脂肪等级,对617名研究对象再次进行分组:内脏脂肪等级正常组和内脏脂肪等级偏高组,进一步分析前10位相对重要因子在组间的差异。结果随机森林模型的最优节点数为39、决策树数目为300。模型在测试集上的准确率为83.3%、精确率为73.9%、灵敏度为89.4%、特异度为78.7%,其受试者工作特征曲线下面积为0.881(95%CI:0.832~0.931)。模型中前10位相对重要因子依次为:体重指数、性别、年龄、尿酸、红细胞计数、单核细胞计数、C肽、癌胚抗原、糖化血红蛋白、谷氨酰转肽酶。内脏脂肪等级偏高组的体重指数、年龄、尿酸、红细胞计数、单核细胞计数、C肽、癌胚抗原、糖化血红蛋白、谷氨酰转肽酶水平均高于内脏脂肪等级正常组(均P<0.05);内脏脂肪等级偏高的发生率男性大于女性(P<0.05)。结论本研究构建的内脏脂肪等级的随机森林预测模型表现良好,内脏脂肪与机体肝功能、胰岛功能、免疫功能的改变均有关系。 展开更多
关键词 内脏脂肪等级 体重指数 随机森林预测模型 机器学习模型
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