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α-2b干扰素重组质粒的建立及在毕赤酵母中的表达
被引量：
1
1
作者
丁鹏
方斌
+1 位作者
梁布锋
何光源
《生物技术》
CAS
CSCD
2007年第3期18-20,共3页
目的:采用基因工程手段构建基因工程菌表达α-2b干扰素。方法:根据毕赤酵母密码子嗜好性原理设计并合成α-2b干扰素基因序列,将其插入到毕赤酵母Pichia pastoris的分泌型表达质粒pPIC9K中,得到重组分泌表达质粒pPIC9K-IFNα-2b,并用电...
目的:采用基因工程手段构建基因工程菌表达α-2b干扰素。方法:根据毕赤酵母密码子嗜好性原理设计并合成α-2b干扰素基因序列,将其插入到毕赤酵母Pichia pastoris的分泌型表达质粒pPIC9K中,得到重组分泌表达质粒pPIC9K-IFNα-2b,并用电转化法转化P.pastoris GS115。筛选出整合型His+Muts菌株,进一步用G418筛选获得高拷贝转化子,经5d诱导表达后SDS-PAGE检测。结果:菌落PCR和序列测定结果显示重组表达质粒已成功构建,SDS-PAGE结果显示目的蛋白已成功表达。结论:在毕赤酵母中成功表达α-2b干扰素。
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关键词
Α-2B干扰素
毕赤酵母
PPIC9K
SDS-PAGE
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职称材料
题名
α-2b干扰素重组质粒的建立及在毕赤酵母中的表达
被引量：
1
1
作者
丁鹏
方斌
梁布锋
何光源
机构
华中科技大学生命
科学
与技术
学院
中英
联合实验室
中国科学院武汉病毒所苏中药业联合实验室
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
2007年第3期18-20,共3页
基金
国家"973"项目(2002CB111302)
国家自然基金项目(30370807)资助
文摘
目的:采用基因工程手段构建基因工程菌表达α-2b干扰素。方法:根据毕赤酵母密码子嗜好性原理设计并合成α-2b干扰素基因序列,将其插入到毕赤酵母Pichia pastoris的分泌型表达质粒pPIC9K中,得到重组分泌表达质粒pPIC9K-IFNα-2b,并用电转化法转化P.pastoris GS115。筛选出整合型His+Muts菌株,进一步用G418筛选获得高拷贝转化子,经5d诱导表达后SDS-PAGE检测。结果:菌落PCR和序列测定结果显示重组表达质粒已成功构建,SDS-PAGE结果显示目的蛋白已成功表达。结论:在毕赤酵母中成功表达α-2b干扰素。
关键词
Α-2B干扰素
毕赤酵母
PPIC9K
SDS-PAGE
Keywords
Interferon α-2b
Pichia pastoris
pPICgK
SDS- PAGE
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
α-2b干扰素重组质粒的建立及在毕赤酵母中的表达
丁鹏
方斌
梁布锋
何光源
《生物技术》
CAS
CSCD
2007
1
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