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我的生物化学一生
1
作者 李载平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期J0002-J0004,共3页
一、北医生化引我进入生物化学 1947年我由北京大学化学系毕业后,恰逢在北京大学医学院生化科任教的师姐李玉瑞赴美深造。使我有机会进入北医生化科,开始了我热爱的生物化学的一生。
关键词 生物化学 北京大学 生化 化学系 医学院
原文传递
一本有用的书——祝贺“英汉分子生物学百科辞典”出版
2
作者 龚祖埙 《生命的化学》 CAS CSCD 2004年第5期445-445,共1页
关键词 《分子生物学百科全书》 生命科学 《英汉分子生物学百科辞典》 J.Kendrew博士 中国
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RRP15过表达对核糖体生物发生和细胞增殖的影响 被引量：1
3
作者 印熙娣 陈瑾 +2 位作者 戈靖 董智雄 朱长军 《天津师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2019年第5期45-50,共6页
为了明确核糖体RNA加工蛋白15(RRP15)在肿瘤发生发展中的作用,通过构建稳定过表达RRP15的HeLa细胞株HeLa-Flag RRP15及其对照细胞株HeLa-Flag,利用细胞免疫荧光、蛋白免疫印迹等方法研究了RRP15过表达对核仁结构的影响,利用蔗糖密度梯... 为了明确核糖体RNA加工蛋白15(RRP15)在肿瘤发生发展中的作用,通过构建稳定过表达RRP15的HeLa细胞株HeLa-Flag RRP15及其对照细胞株HeLa-Flag,利用细胞免疫荧光、蛋白免疫印迹等方法研究了RRP15过表达对核仁结构的影响,利用蔗糖密度梯度离心法提取核糖体大小亚基前体,探究了RRP15过表达对核糖体生物发生的影响,利用MTT实验和蛋白免疫印迹检测了RRP15过表达对细胞生长增殖的影响.结果发现,RRP15过表达使细胞核仁数量增多,核仁蛋白表达量上调,核糖体大小亚基前体生物发生水平均有提高,细胞生长增殖速率加快,细胞周期相关蛋白的表达增加.由此认为,RRP15可能通过增加核仁数量和提高核糖体生物发生水平增强细胞的增殖能力,进而促进肿瘤的发生与发展. 展开更多
关键词 RRP15 核仁 核糖体生物发生 细胞增殖
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蝎毒多肽对肿瘤细胞的抑制作用研究 被引量：22
4
作者 孔天翰 林山 +2 位作者 韩雪飞 琚济杭 董伟华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期968-972,共5页
目的 :观察蝎毒多肽 (PBMV)对肿瘤细胞生长、细胞周期、P5 3表达和膜电位的影响。方法 :MTT法、集落形成、细胞分裂指数、流式细胞仪和玻璃微电极细胞内记录法。结果 :PBMV对数种肿瘤细胞具有毒性作用 ,细胞生长抑制、集落形成能力和分... 目的 :观察蝎毒多肽 (PBMV)对肿瘤细胞生长、细胞周期、P5 3表达和膜电位的影响。方法 :MTT法、集落形成、细胞分裂指数、流式细胞仪和玻璃微电极细胞内记录法。结果 :PBMV对数种肿瘤细胞具有毒性作用 ,细胞生长抑制、集落形成能力和分裂指数降低、多核细胞数减少 ;PBMV使进入S期的CNE - 2Z细胞明显减少 ,G1、S和G2 期细胞的百分比增多 (P <0 0 1) ;PBMV处理后 ,CNE - 2Z细胞P5 3蛋白表达量降低 (P <0 0 1) ,细胞膜负电位明显减小 ,胞膜呈去极化状态。结论 :PBMV可能具有膜毒素的作用 ,通过使CNE - 2Z细胞膜电位降低 ,影响肿瘤细胞的生长增殖。 展开更多
关键词 蝎毒液类 ECA109细胞 细胞周期 蛋白质P53 膜电位
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BmNPV-ZJ iap1基因的克隆、序列分析及其对哺乳动物细胞NF-κB的调节作用研究(英文)
5
作者 吴金美 Robert WLim +2 位作者 吴祥甫 Grace Y Sun 吕鸿声 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第4期359-364,共6页
利用PCR法克隆得到家蚕核型多角体病毒镇江株 (BmNPV ZJ)的iap 1基因。序列同源分析表明 :BmNPV ZJ的iap 1全长为 85 8bp ,与BmNPV T3株的碱基同源性为 96 % ,与BmNPV T3株相比少了一段编码 7个氨基酸的区域 ,该缺失区域的两侧有着独特... 利用PCR法克隆得到家蚕核型多角体病毒镇江株 (BmNPV ZJ)的iap 1基因。序列同源分析表明 :BmNPV ZJ的iap 1全长为 85 8bp ,与BmNPV T3株的碱基同源性为 96 % ,与BmNPV T3株相比少了一段编码 7个氨基酸的区域 ,该缺失区域的两侧有着独特的结构 :缺失区的 5′侧为连续编码 7个天冬氨酸的序列 ;缺失区的 3′侧为连续编码3个天冬氨酸的序列。NCBI的DART(DomainArchitectureRetrievalTool)功能域搜索表明 ;BmNPV ZJ的iap1含有 2个杆状病毒BIR功能域 ,但不含RING区域。BmNPV的iap是否具有抗凋亡作用迄今尚未见报道。利用以NF κB为探针的凝胶阻滞分析表明 ,BmNPV ZJ的iap1转染鼠的pc12细胞 ,可逆转肿瘤坏死因子TNFα处理pc12细胞引起的核因子 κB(NF κB)的激活。BmNPV ZJ的iap1对NF κB的作用途径及作用方式 。 展开更多
关键词 BmNPV—ZJiap基因 克隆 序列分析 哺乳动物细胞 NF-ΚB 调节作用 PCR 家蚕 核型多角体病毒镇江株 碱基同源性 凝胶阻滞分析 pcl2细胞 凋亡
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昆虫杆状病毒表达系统研究进展及其应用展望 被引量：17
6
作者 朱江 吴祥甫 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第2期114-119,共6页
昆虫杆状病毒表达系统作为四大表达系统之一,已广泛应用于重组蛋白的合成。该系统具有如多角体启动子控制下的高效表达,比较完善的转译后加工修饰,容易从无血清培养上清中纯化,无内毒素污染等特点。杆状病毒表达载体系统研究的最新进展... 昆虫杆状病毒表达系统作为四大表达系统之一,已广泛应用于重组蛋白的合成。该系统具有如多角体启动子控制下的高效表达,比较完善的转译后加工修饰,容易从无血清培养上清中纯化,无内毒素污染等特点。杆状病毒表达载体系统研究的最新进展:高强度早期启动子群杆状病毒转移载体的成功合成,以扩大寄主范围和增进重组蛋白稳定性为目的的亲本病毒的改造;通用的昆虫细胞培养基配方的不断优化,特定昆虫细胞株培养基的研制和适用于大规模悬浮培养的无血清培养基的商品化;旨在进行复杂糖基化及提供相对稳定细胞环境的宿主细胞工程;以新标记物(tag)载体和相关亲和层析方法为代表的蛋白质高效纯化方法的进步。昆虫杆状病毒表达载体系统在基础研究、医药卫生和农业上具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 昆虫杆状病毒表达系统 研究进展 应用 改进 蛋白质 昆虫细胞培养 纯化
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撤除粒-巨噬细胞集落刺激因子对TF-1细胞生长的影响 被引量：4
7
作者 杨素荣 文莉 +2 位作者 孙兰英 朱德厚 姚明辉 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2003年第2期199-203,共5页
采用MTT实验测定撤除细胞因子后TF 1细胞的增殖活性 ,经流式细胞仪、透射电镜观察撤除细胞因子对TF 1细胞凋亡的作用及其形态学变化。采用荧光微孔板读数仪测定凋亡过程中Caspase 3活性的改变。结果发现 ,撤除细胞因子后 4 8h ,细胞存... 采用MTT实验测定撤除细胞因子后TF 1细胞的增殖活性 ,经流式细胞仪、透射电镜观察撤除细胞因子对TF 1细胞凋亡的作用及其形态学变化。采用荧光微孔板读数仪测定凋亡过程中Caspase 3活性的改变。结果发现 ,撤除细胞因子后 4 8h ,细胞存活率为正常培养时的 4 8 8% ;电镜显示TF 1细胞出现了凋亡典型的变化。细胞凋亡率在撤除因子后 2 4h、4 8h时分别为 2 1 2 3%和 71 36 % ,TF 1细胞被阻滞在G0 G1 期。细胞内Caspase 3活性在撤除因子后 12h、36h时明显升高 ,荧光度分别为 6 32 1和 1782 3。结果表明 ,撤除因子后可导致TF 1细胞凋亡 ,Caspase 3活化参与了此凋亡过程。另外通过MTT实验观察到一种新型造血刺激因子粒 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF) 白细胞介素 3(IL 3)融合蛋白可维持TF 展开更多
关键词 粒-巨噬细胞集落刺激因子 TF-1细胞 细胞凋亡 CASPASE-3 白细胞介素3 融合蛋白
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胃肠道黏膜免疫的一些研究进展 被引量：13
8
作者 朱海颖 谢弘 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第1期8-10,共3页
本文主要综述了在胃肠道黏膜免疫中起重要作用的黏膜相关淋巴组织、小肠黏膜上皮内淋巴细胞和分泌型IgA的性能,并就胃肠道黏膜对食物抗原的作用以及其在预防疾病方面功能进行了讨论。
关键词 胃肠道粘膜 粘膜免疫 研究进展
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纯化的蚯蚓蛋白对多种血液系统瘤细胞系的作用 被引量：5
9
作者 袁玲 徐建民 周元聪 《中国临床医学》 2004年第2期177-179,共3页
目的:探讨纯化的蚯蚓蛋白提取物(以下简称蚯蚓提取物)体外对多种血液系统瘤细胞的作用及机制。方法:以人慢性粒细胞白血病K562细胞、人骨髓瘤KM3细胞、小鼠急性淋巴细胞性白血病L6565细胞以及小鼠淋巴瘤SRS-B2细胞为靶细胞,采用细胞计... 目的:探讨纯化的蚯蚓蛋白提取物(以下简称蚯蚓提取物)体外对多种血液系统瘤细胞的作用及机制。方法:以人慢性粒细胞白血病K562细胞、人骨髓瘤KM3细胞、小鼠急性淋巴细胞性白血病L6565细胞以及小鼠淋巴瘤SRS-B2细胞为靶细胞,采用细胞计数及台盼蓝拒染法、光镜观察、细胞凋亡荧光染色法、DNA凝胶电泳等技术,观察蚯蚓提取物对上述细胞生长的影响。结果:①蚯蚓提取物对K562细胞具有双向作用,小剂量可促进K562细胞的增殖,大剂量可通过凋亡轻度抑制细胞生长;②≥50mg/L的蚯蚓提取物可明显抑制L6565细胞的生长,细胞坏死和凋亡可能是其共同的作用机制;③100～250mg/L的蚯蚓提取物可通过细胞毒作用促使SRS-B2细胞死亡,此种作用呈现剂量和时间依赖;④对KM3细胞作用不明显。结论:蚯蚓提取物对不同的细胞具有不同的作用,其作用也是通过不同的机制实现的。 展开更多
关键词 纯化 蚯蚓蛋白提取物 血液系统肿瘤 瘤细胞 淋巴瘤 急性淋巴细胞性白血病 骨髓瘤
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连续自由流电泳微重力下分离模式蛋白质的研究 被引量：1
10
作者 丁士健 刘韬 +10 位作者 宋金芳 吴高德 邵晓霞 夏其昌 吴汉基 蒋远大 张志远 刘文喜 冯学章 马玉立 李钦 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期233-240,共8页
以连续自由流电泳的区带电泳模式分离血红蛋白和细胞色素C,比较了不同缓冲液甘油浓度下的分离效果,确定了最终装载在神舟4号飞船上A3-2型电泳仪的电泳分离条件,通过地面和空间实验,初步探讨了微重力对连续自由流电泳分离的影响,并对电... 以连续自由流电泳的区带电泳模式分离血红蛋白和细胞色素C,比较了不同缓冲液甘油浓度下的分离效果,确定了最终装载在神舟4号飞船上A3-2型电泳仪的电泳分离条件,通过地面和空间实验,初步探讨了微重力对连续自由流电泳分离的影响,并对电泳的分离产物做了多种检测。 展开更多
关键词 连续自由流电泳 微重力 分离模式 蛋白质 血红蛋白 细胞色素C 空间实验
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附睾功能基因组研究进展 被引量：16
11
作者 张永莲 《中国科学院院刊》 2002年第1期34-36,共3页
精子的成熟不是靠自身来完成 ,而是通过与附睾腔中微环境的相互作用而取得的。关于附睾这种对精子的成熟、储存和保护的作用 ,人们已取得共识 ,认为它是男性避孕药的一个靶点。我们最近在大鼠和猴附睾特异表达的新基因研究中已发现 13... 精子的成熟不是靠自身来完成 ,而是通过与附睾腔中微环境的相互作用而取得的。关于附睾这种对精子的成熟、储存和保护的作用 ,人们已取得共识 ,认为它是男性避孕药的一个靶点。我们最近在大鼠和猴附睾特异表达的新基因研究中已发现 13个全长cDNA克隆 ,其中 2个在大鼠附睾头部、4个在猴附睾头部、4个在猴附睾体部、3个在猴附睾尾部。目前正对这些新基因的功能进行研究。最近在对其中的一个新基因———大鼠Bin1b进行较多的研究后发现 ,它是一个天然抗菌肽 ,并在生育期表达最高 ,因而可能与生育有关 ,可能与精子成熟及附睾自身防御系统相关。研究结果发表在Science上。 展开更多
关键词 附睾功能基因组 研究进展 精子成熟 抗菌肽 男性避孕
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异种器官移植中的Galα(1,3)Gal抗原表位的研究进展 被引量：2
12
作者 邢力 郭礼和 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期191-195,共5页
改造猪的器官移植给人类被认为是解决人类移植器官供不应求的可能方案,但由于猪和人在免疫学上的差异使移植到人体的猪的带血管器官很快被排斥掉,本文综述了近十年来对猪-人之间最重要的差异性抗原表位的研究进展。
关键词 异种器官移植 Galα(1 3)Gal抗原表位 基因结构
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成体哺乳动物心肌细胞增殖及其调控 被引量：1
13
作者 刘秀秀 周斌 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期365-374,共10页
心肌细胞作为一种终末分化的细胞最初被认为不具备增殖的能力,然而越来越多的证据表明,成体的哺乳动物心脏中心肌细胞是以一定的比例进行更新换代的.相关研究使用了不同的巧妙的方法,包括同位素的掺入以及遗传工具小鼠的使用.心肌细胞... 心肌细胞作为一种终末分化的细胞最初被认为不具备增殖的能力,然而越来越多的证据表明,成体的哺乳动物心脏中心肌细胞是以一定的比例进行更新换代的.相关研究使用了不同的巧妙的方法,包括同位素的掺入以及遗传工具小鼠的使用.心肌细胞的增殖受到复杂的分子网络的调控,同时也受到外界环境及内部微环境的调控.心肌细胞自身具有的特性也是影响心肌细胞增殖的关键. 展开更多
关键词 增殖 心肌细胞 调控 成体哺乳动物
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镁离子稳定tRNA高级结构及其重要意义——生化所tRNA研究的一段历史回顾 被引量：2
14
作者 刘望夷 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期188-189,共2页
镁离子稳定tRNA高级结构并具有重要的生理功能已经写入生物化学教科书。上世纪60年代初,中国科学院上海生物化学研究所的研究者与国外同行同时发现了这一现象。镁离子稳定tRNA的高级结构在tRNA的序列分析中可以得到较大的片段,甚至tRNA... 镁离子稳定tRNA高级结构并具有重要的生理功能已经写入生物化学教科书。上世纪60年代初,中国科学院上海生物化学研究所的研究者与国外同行同时发现了这一现象。镁离子稳定tRNA的高级结构在tRNA的序列分析中可以得到较大的片段,甚至tRNA半分子。将这一事实运用于“片段重叠”法测定tRNA序列工作中,极大地推动了tRNA的序列测定。 展开更多
关键词 TRNA 镁离子 tRNA高级结构
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后基因组时代的生命观与科学观 被引量：6
15
作者 吴家睿 《科学》 CAS 2021年第2期38-43,共6页
后基因组时代引发了对生命和生命科学的新认识。生命不再是用“还原论”或“活力论”观点进行简单的划分,而是构成材料、构成形式和环境之统一。生命科学也出现了一种全新的数据驱动的研究范式,这种新范式打破了传统决定论的局限性.补... 后基因组时代引发了对生命和生命科学的新认识。生命不再是用“还原论”或“活力论”观点进行简单的划分,而是构成材料、构成形式和环境之统一。生命科学也出现了一种全新的数据驱动的研究范式,这种新范式打破了传统决定论的局限性.补充和完善了生命科学的方法论体系。 展开更多
关键词 生命 生命科学 还原论 活力论
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人线粒体亮氨酰tRNA合成酶的表达、纯化及其动力学研究(英文)
16
作者 汪振诚 王学敏 +2 位作者 金由辛 缪明永 焦炳华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1081-1085,共5页
目的:构建含人线粒体亮氨酰tRNA合成酶(mtLeuRS)基因的重组表达载体,表达纯化mtLeuRS并检测其酶促动力学参数。方法:克隆mtLeuRS基因,构建入pET-24a(+)表达载体,转化大肠杆菌BL21-codonPlus(DE3)-RIL,经诱导产生带6-His标签的mtLeuRS融... 目的:构建含人线粒体亮氨酰tRNA合成酶(mtLeuRS)基因的重组表达载体,表达纯化mtLeuRS并检测其酶促动力学参数。方法:克隆mtLeuRS基因,构建入pET-24a(+)表达载体,转化大肠杆菌BL21-codonPlus(DE3)-RIL,经诱导产生带6-His标签的mtLeuRS融合蛋白,再经Ni2+亲和层析柱一步法纯化后用酶促反应检测其氨酰化活力。作为mtLeuRS酶促反应底物,人tRNALeu(UUR)由T7 RNA聚合酶体外转录生成。结果:经IPTG诱导,人mtLeuRS蛋白表达量约占细菌总蛋白量的1％～2％,1 L培养液的菌体内可收获约2 mg的纯化酶蛋白。通过体外转录生成的酶底物tRNALeu(UUR)可达转录模板的100倍。经酶促反应,人mtLeuRS可氨酰化人线粒体内tRNALeu(UUR)。反应的亲和常数(Km)为16.67μmol/L,催化常数(Kcat)为0.17s-1。结论:本实验成功克隆并表达了人mtLeuRS,并成功用于催化tRNALeu(UUR)的氨酰化。 展开更多
关键词 线粒体 亮氨酰tRNA合成酶 基因表达 动力学 纯化 酶促动力学参数
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家蚕核型多角体病毒遍在蛋白及结合肽的研究
17
作者 张文波 林蓉 +1 位作者 张耀洲 吴祥甫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1038-1044,共7页
从家蚕核型多角体病毒镇江株 (BombyxmorinuclearpolyhedrosisvirusZhenjiangstrain ,BmNPV ZJ)基因组DNA中克隆遍在蛋白 (BmVUB)基因 .序列分析结果显示 ,BmVUB基因长 2 34bp ,编码 77个氨基酸 .BmVUB氨基酸序列内有一致HTH序列 ,遍在... 从家蚕核型多角体病毒镇江株 (BombyxmorinuclearpolyhedrosisvirusZhenjiangstrain ,BmNPV ZJ)基因组DNA中克隆遍在蛋白 (BmVUB)基因 .序列分析结果显示 ,BmVUB基因长 2 34bp ,编码 77个氨基酸 .BmVUB氨基酸序列内有一致HTH序列 ,遍在蛋白保守序列LRLRGG ,参与遍在蛋白 蛋白酶复合体形成的 4个保守性功能位点 (Lys 2 9、Cys 4 8、Cys 6 3、Gly 76 )及保守的Gly Gly X (X是疏水氨基酸残基 )蛋白酶切信号序列 ,在遍在蛋白保守的Gly Gly后多出由一个氨基酸组成的延伸肽 .原核诱导表达表明BmVUB主要以可溶性形式存在 ,表达量占总菌蛋白的 5 0 %以上 .纯化的遍在蛋白浓度为 1 0 3～ 2 4 6 g/L ,制备抗体 ,效价在 3 2× 10 -5以上 .用噬菌体表面展示技术筛选遍在蛋白结合肽 ,所筛选的结合肽可与遍在蛋白特异性结合 ,其中结合肽VAPHHAYAPMRT对细胞增殖有明显的浓度调控作用 ,即低浓度促进细胞生长 ,高浓度强烈抑制细胞的生长 . 展开更多
关键词 结合肽 遍在蛋白 白及 性功能 原核 细胞增殖 细胞生长 诱导表达 氨基酸序列 特异性结合
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围在“墙”里的科学
18
作者 吴家睿 《科学》 CAS 2022年第3期40-42,共3页
科学对人类社会具有巨大的影响和作用。为了促进、利用和控制科学,社会从宗教、战争、利益和伦理等角度构建了四面无形的“墙”,让研究者和其科研活动受制于它们的影响。
关键词 科研活动 影响和作用 墙 科学 研究者
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对虾白斑杆状病毒对螯虾血淋巴原代细胞的感染 被引量：8
19
作者 李钫 杨丰 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第12期74-77,共4页
应用螯虾血淋巴细胞的原代培养系统 ,作为对虾白斑杆状病毒 (whitespotbacilliformvirus ,WSBV )的替代宿主 ,进行体外感染实验。通过PCR及RNA点杂交的方法监测WSBV的DNA复制、转录情况。结果显示 ,来源于对虾的WSBV可以感染体外培养的... 应用螯虾血淋巴细胞的原代培养系统 ,作为对虾白斑杆状病毒 (whitespotbacilliformvirus ,WSBV )的替代宿主 ,进行体外感染实验。通过PCR及RNA点杂交的方法监测WSBV的DNA复制、转录情况。结果显示 ,来源于对虾的WSBV可以感染体外培养的螯虾原代血淋巴细胞 ,并在其中增殖 ;WSBV感染螯虾原代血淋巴细胞后 6h左右病毒开始大量复制 ,感染后的细胞可以存活数日。在目前虾细胞系尚未建立之前 ,螯虾血淋巴原代细胞可以作为研究WSBV感染、转录和复制等机理的替代系统。 展开更多
关键词 对虾白斑杆状病毒 WSBV 螯虾血淋巴细胞 原代培养 病毒感染
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原子力显微镜在纳米生物学研究中的应用 被引量：2
20
作者 蒋青青 张利娟 +4 位作者 张钰 郭彦 任炜 张晓晖 王鑫艳 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2010年第5期788-794,共7页
原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)自从1986年发明以来,作为一种重要的单分子研究工具,在包括细胞粘附、蛋白折叠以及蛋白间的相互作用等生物学过程的研究中得到了广泛应用。本文主要介绍原子力显微镜的原理,着重于研究相互作... 原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)自从1986年发明以来,作为一种重要的单分子研究工具,在包括细胞粘附、蛋白折叠以及蛋白间的相互作用等生物学过程的研究中得到了广泛应用。本文主要介绍原子力显微镜的原理,着重于研究相互作用时能垒大小的确定,以及常用的单分子表面修饰方法。 展开更多
关键词 原子力显微镜(AFM) 单分子 能垒 表面修饰
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