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利用突变体研究植物激素对番茄果实品质的影响 被引量:12
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作者 魏佳 贾承国 +3 位作者 李振 汪炳良 蒋红玲 汪俏梅 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期521-525,529,共6页
分别对番茄中植物激素茉莉酸(JA)、脱落酸(ABA)、乙烯(ETH)和赤霉素(GA)的生物合成缺失型突变体植株进行果实农艺性状的分析,探索了这4种内源植物激素在番茄果实发育的典型时期对其品质的影响,结果表明:在番茄果实发育的不同时期,不同... 分别对番茄中植物激素茉莉酸(JA)、脱落酸(ABA)、乙烯(ETH)和赤霉素(GA)的生物合成缺失型突变体植株进行果实农艺性状的分析,探索了这4种内源植物激素在番茄果实发育的典型时期对其品质的影响,结果表明:在番茄果实发育的不同时期,不同植物激素对果实品质的影响各不相同。如在外观品质方面,JA和ETH显著影响红熟期果实硬度,ABA和GA显著影响果实果形指数以及果实大小;在营养品质方面,在番茄果实发育的几个典型时期,其营养成分类胡萝卜素、蛋白质、可溶性固形物和还原糖等均受到JA、ABA、ETH和GA的共同调节。说明番茄果实发育过程中,其外观品质和营养品质均不同程度地受到上述4种内源植物激素的精细调控。 展开更多
关键词 植物激素 番茄 突变体 品质性状
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纳米细菌纤维素的细胞生物相容性 被引量:7
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作者 李扬 沈建成 +4 位作者 徐枫 张华 陈磊 杨惠林 施勤 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第51期9541-9545,共5页
背景:细菌纤维素是一种新型天然高分子材料,具有良好的三维网状结构和高持水性等独特性能。目的:观察天然高分子材料细菌纤维素与细胞共培养的生物相容性。方法:采用静置培养方案制备细菌纤维素支架,将处于对数生长期的C2C12细胞和L929... 背景:细菌纤维素是一种新型天然高分子材料,具有良好的三维网状结构和高持水性等独特性能。目的:观察天然高分子材料细菌纤维素与细胞共培养的生物相容性。方法:采用静置培养方案制备细菌纤维素支架,将处于对数生长期的C2C12细胞和L929细胞分别与细菌纤维素支架材料在体外共培养,采用扫描电镜观察材料微结构,倒置相差显微镜观察细胞生长及增殖情况,CCK-8比色法检测细胞增殖率。结果与结论:细菌纤维素具有精细的三维结构,纤维直径为纳米级别。C2C12细胞和L929细胞在细菌纤维素材料上可以很好地生长、增殖,细胞状态为正常的梭型,形态无明显变化;两种细胞在细菌纤维素材料上的相对增殖率均≥100%,细胞毒性为0级。说明细菌纤维素具有良好的生物相容性,对细胞黏附和增殖无影响。 展开更多
关键词 细菌纤维素 CCK-8 生物相容性 组织工程 生物材料
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真核DNA复制起始点的结构与功能研究进展 被引量:1
3
作者 张迪 霍克克 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第12期98-102,共5页
DNA复制是细胞分裂的中心环节之一 ,在细胞周期中受到严谨的调控。染色体DNA的复制是由许多复制起点处形成的起始复制叉开始的。复制原点的结构和功能是控制染色体复制的关键因素。在DNA复制起始与RNA转录启动这两种不同的基因表达关键... DNA复制是细胞分裂的中心环节之一 ,在细胞周期中受到严谨的调控。染色体DNA的复制是由许多复制起点处形成的起始复制叉开始的。复制原点的结构和功能是控制染色体复制的关键因素。在DNA复制起始与RNA转录启动这两种不同的基因表达关键过程之间存在着共有顺式作用序列和共用反式作用因子。对DNA复制的研究是分子生物学的一项基本内容 ,具有重要的理论意义。本文主要对涉及DNA复制起始的顺式元件的结构和功能及其与RNA转录的关系进行了评述和总结。 展开更多
关键词 真核DNA复制 细胞分裂 细胞周期 染色体 RNA 基因表达 分子生物学
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中药滋补肝肾方对鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶mRNA表达的调节 被引量:24
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作者 王辉 王莒生 +6 位作者 王萍 陶毅 蔡念宁 郁卫东 杨立新 郭念筠 陈清轩 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期230-231,共2页
目的 探讨中药滋补肝肾方治疗白癜风的分子学作用机制。方法 采用定量逆转录 聚合酶链式反应(RT PCR)方法 ,观察中药滋补肝肾方对鼠B16黑素瘤细胞株酪氨酸酶mRNA表达的影响。结果 中药滋补肝肾方能使黑素瘤细胞酪氨酸酶mRNA表达水... 目的 探讨中药滋补肝肾方治疗白癜风的分子学作用机制。方法 采用定量逆转录 聚合酶链式反应(RT PCR)方法 ,观察中药滋补肝肾方对鼠B16黑素瘤细胞株酪氨酸酶mRNA表达的影响。结果 中药滋补肝肾方能使黑素瘤细胞酪氨酸酶mRNA表达水平增加。结论 中药滋补肝肾方能上调黑素细胞酪氨酸酶mRNA表达水平 ,这是其治疗白癜风的药理作用机制之一。 展开更多
关键词 中医药疗法 滋补肝肾方 B16黑素瘤 酪氨酸酶 MRNA表达 白癜风
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滋补肝肾方激活小鼠B-16黑色素瘤细胞线粒体ATP合成酶-6的基因表达 被引量:5
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作者 郁卫东 杨立新 +8 位作者 刘桂生 李文雍 陈清轩 王莒生 王辉 王平 蔡念宁 陶毅 张广中 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第S1期225-228,共4页
目的研究滋补肝肾方复方及单方对小鼠 B-16黑色素瘤细胞酪氨酸酶 mRNA 表达的影响及滋补肝肾方的分子作用机制。方法定量逆转录 PCR 法(quantitative reverse transcriptional polymerase chain reac-tion,QRT-PCR)研究滋补肝肾方复方... 目的研究滋补肝肾方复方及单方对小鼠 B-16黑色素瘤细胞酪氨酸酶 mRNA 表达的影响及滋补肝肾方的分子作用机制。方法定量逆转录 PCR 法(quantitative reverse transcriptional polymerase chain reac-tion,QRT-PCR)研究滋补肝肾方复方及单方对小鼠黑色素瘤酪氨酸酶 mRNA 表达的作用;mRNA 差别显示(mRNA differential display reverse transcriptional polymerase chain reaction,DDRT-PCR)法研究用滋补肝肾方复方及单方处理 B-16黑色素瘤细胞前后基因的差别表达。结果滋补肝肾方复方及各个单方并非都能够增加酪氨酸酶 mRNA 的表达量;但是滋补肝肾方复方和某些单方却能够激活小鼠黑色素瘤 B-16细胞线粒体 ATP合成酶-6(ATPase-6)基因的特异性表达。结论 QRT-PCR 结果表明不能将滋补肝肾方的治疗作用单纯解释为是酪氨酸酶表达提高的结果,而可能存在其他的作用机制,DDRT-PCR 结果表明 ATPase-6基因表达的激活可能是滋补肝肾方作用的关键环节。 展开更多
关键词 滋补肝肾方 白癜风 小鼠黑色素瘤细胞 酪氨酸酶 定量逆转录 PCR mRNA 差别显示 ATP 合成酶-6
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小麦锌指蛋白基因的克隆、序列与表达分析(英文) 被引量:6
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作者 万平 令利军 +4 位作者 周文娟 张文俊 凌宏清 朱立煌 张相岐 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期895-900,共6页
根据R基因及其调控基因保守序列设计简并性引物 ,对白粉菌接种和未接种处理的一对抗病和感病的小麦 黑麦等位突变易位系TAM10 4R和TAM10 4S总RNA进行RT PCR扩增 ,得到一个诱导表达的cDNA片段。序列分析表明 ,该片段全长 2 4 74bp ,其... 根据R基因及其调控基因保守序列设计简并性引物 ,对白粉菌接种和未接种处理的一对抗病和感病的小麦 黑麦等位突变易位系TAM10 4R和TAM10 4S总RNA进行RT PCR扩增 ,得到一个诱导表达的cDNA片段。序列分析表明 ,该片段全长 2 4 74bp ,其中含有一个 82 2bp的完整开放阅读框 ,推测其编码一个有 2 73个氨基酸残基、分子量约 31kD的蛋白质分子。蛋白质的氨基酸序列比对显示 ,该蛋白质分子具有C2 HC锌结合motifCX2CX4HX4C结构和锌指domain ,可见克隆的cDNA是一个锌指蛋白基因 ,命名为TaZF。Southern杂交表明 ,TaZF在抗病易位系TAM10 4R的基因组中是多拷贝的。半定量RT PCR分析显示 ,TaZF基因属组成型表达、但受白粉菌诱导表达上调的基因 ,推测其与白粉病菌的侵染过程相关。基因组DNA专化扩增、克隆和测序揭示TaZF基因无内含子。 展开更多
关键词 小麦 锌指蛋白 基因克隆 序列分析 表达
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紫外线强烈诱导的谷胱甘肽转移酶基因的功能鉴定 被引量:16
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作者 刘新仿 李家洋 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期458-460,T003,共4页
植物谷胱甘肽转移酶 (glutathioneS transferases ,GSTs)基因家族在逆境反应和植物生长发育过程中都起着非常重要的作用。为了阐明GST在紫外辐射下是否对植物有保护作用 ,以紫外强烈诱导表达的GSTcDNA为探针 ,筛选拟南芥cDNA文库 ,获得... 植物谷胱甘肽转移酶 (glutathioneS transferases ,GSTs)基因家族在逆境反应和植物生长发育过程中都起着非常重要的作用。为了阐明GST在紫外辐射下是否对植物有保护作用 ,以紫外强烈诱导表达的GSTcDNA为探针 ,筛选拟南芥cDNA文库 ,获得了这种GST的全长cDNA ;利用此cDNA构建植物表达载体 ,并通过农杆菌介导法转化拟南芥 ,使其在拟南芥中得到大量表达 ;通过对转基因植株的紫外辐射耐性分析 。 展开更多
关键词 强烈诱导 基因 功能 鉴定 拟南芥 谷胱甘肽转移酶 紫外辐射 损伤
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Novel Halophyte EREBP/AP2-type DNA Binding Protein Improves Salt Tolerance in Transgenic Tobacco 被引量:11
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作者 沈义国 闫冬青 +4 位作者 张万科 杜保兴 张劲松 刘强 陈受宜 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第1期82-87,共6页
EREBP/AP2-type proteins are members of a large DNA binding protein (DBP) family found in plants. Some members like APETALA2 and AtDREB/CBF can regulate flower development and response to environmental stresses, respec... EREBP/AP2-type proteins are members of a large DNA binding protein (DBP) family found in plants. Some members like APETALA2 and AtDREB/CBF can regulate flower development and response to environmental stresses, respectively. To characterize transcription factors involved in plant responses to salt stress, we constructed cDNA library from salt-treated halophyte (Atriplex hortensis) and isolated a novel gene encoding EREBP/AP2-type protein from this library. This cDNA contained an ORF of 723 bp and a long 3'-Untranslated-Region (UTR) of 655 bp. The deduced amino acid sequence showed one conserved DNA binding domain of EREBP/AP2, thus the corresponding gene was named AhDREB1 with a calculated molecular mass of 26.1 kD. AhDREB1 under the control of CaMV 35S promoter was then transformed into tobacco and nine independent transgenic lines were obtained and subjected to long term salt stress. The results suggested that overexpression of AhDREB1 improved the salt tolerance in transgenic tobacco through functioning as a regulatory molecule in response to salt stress. Analysis of Arabidopsis genome in database resulted in dozens of EREBP/AP2-type homologous proteins, of which seven members showed high similarity to AhDREB1. Secondary structure analysis predicted similar arrangement of a-helix in their DNA binding domains. 展开更多
关键词 Atriplex hortensis EREBP/AP2-type DNA binding protein transgenic tobacco
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植物外源凝集素及其在植物基因工程中的应用 被引量:17
9
作者 路子显 常团结 朱祯 《生物工程进展》 CSCD 2002年第2期3-9,共7页
植物外源凝集素及其基因研究近年来发展迅速 ,尤其是在植物基因工程中 ,植物外源凝集素越来越受到重视。本文介绍了植物外源凝集素的分类、分布、多样性、基本组成与结构、凝集素基因同源性、表达及生物学功能等。
关键词 应用 植物外源凝集素 结构 功能 植物基因工程
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兔移核重构胚再程序化相关基因片段的分离与鉴定 被引量:1
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作者 郁卫东 李文雍 +4 位作者 王玉阁 杨立新 刘桂生 杜淼 陈清轩 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期30-34,共5页
用单个植入前胚胎mRNA差别显示方法 (SinglePreimplantationEmbryonicmRNADifferentialDisplayReversePolymeraseReaction ,SPEDDRT PCR) ,以家兔移核重构发育至 2细胞、8细胞时期的胚胎及囊胚作为起始材料。研究家兔移核重构胚再程序... 用单个植入前胚胎mRNA差别显示方法 (SinglePreimplantationEmbryonicmRNADifferentialDisplayReversePolymeraseReaction ,SPEDDRT PCR) ,以家兔移核重构发育至 2细胞、8细胞时期的胚胎及囊胚作为起始材料。研究家兔移核重构胚再程序化相关基因的表达。获得了 2 5个与再程序化相关的基因片段 ,完成了对所有片段的克隆、序列分析 ,其中 5个反向Northern证实的片段在从MⅡ到囊胚的发育阶段中呈现特异性表达的特点。这项研究为再程序化相关基因全长的分离以及功能研究奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 兔移核重构胚 再程序化 相关基因片段 分离 鉴定
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Isolation of Rice EPSP Synthase cDNA and Its Sequence Analysis and Copy Number Determination 被引量:1
11
作者 徐军望 魏晓丽 +3 位作者 李旭刚 陈蕾 冯德江 朱祯 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第2期188-192,共5页
In order to isolate the total cDNA of rice (Oryza sativa L.) epsps gene, RT-PCR was carried out with template of rice first-strand cDNA and primers designed according to rice EPSP synthase genomic sequence obtained in... In order to isolate the total cDNA of rice (Oryza sativa L.) epsps gene, RT-PCR was carried out with template of rice first-strand cDNA and primers designed according to rice EPSP synthase genomic sequence obtained in previous study. A 1 585-bp cDNA fragment was amplified and cloned. The 1 585-bp cDNA contains an open reading frame (ORF) comprising of 1 533 nucleotides (nt) which encodes a 511 residue polypepetides, including 67 amino acids chloroplast transit peptide and 444 amino acids EPSP synthase mature peptide. A comparison between the EPSP synthase of different sources indicates that the mature peptide shows more than 51% identity except for the fungi EPSP synthase and the transit peptide shows considerably less sequence conservation. The copy number of rice epsps gene is estimated to be one copy per haploid rice genome using southern blot. RT-PCR indicated that rice epsps gene is expressed in rice leaves, endosperms and roots and has the highest expression level in leaves. 展开更多
关键词 rice EPSP synthase cDNA sequence sequence analysis copy numbers EXPRESSION
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治疗性克隆 被引量:2
12
作者 王鸿 郑瑞珍 安利佳 《生物工程进展》 CSCD 2002年第2期29-34,共6页
治疗性克隆是利用核移植技术将病人的体细胞核移植到去核的卵母细胞中 ,使其重编程并发育成囊胚 ,然后再用胚胎干细胞分离技术从克隆囊胚的ICM分离出多能胚胎干细胞 (ES)。这种干细胞在遗传学上和病人完全一致 ,再定向诱导其分化成病人... 治疗性克隆是利用核移植技术将病人的体细胞核移植到去核的卵母细胞中 ,使其重编程并发育成囊胚 ,然后再用胚胎干细胞分离技术从克隆囊胚的ICM分离出多能胚胎干细胞 (ES)。这种干细胞在遗传学上和病人完全一致 ,再定向诱导其分化成病人所需要的体细胞进行移植 ,以取代和修复患者已丧失功能的细胞、组织或器官 ,而达到完全治愈。治疗性克隆不仅解决移植物与受者间的免疫排斥反应问题 。 展开更多
关键词 核移植 胚胎干细胞 治疗性克隆 移植物
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干细胞与中枢神经系统损伤的修复
13
作者 王鸿 王笑虹 郑瑞珍 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1359-1362,共4页
内源性神经干细胞,外源性神经干细胞以及胚胎干细胞具有分化为各种神经细胞的能力,神经细胞的再生在恢复中枢神经系统受损伤的功能时起着关键作用。将近年来神经干细胞和胚胎干细胞对中枢神经系统损伤的修复研究作一综述。
关键词 神经干细胞 胚胎干细胞 中枢神经系统 损伤
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转基因克隆奶山羊大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ蛋白质(rhATⅢ) 被引量:22
14
作者 邹贤刚 袁三平 +7 位作者 鲜建 赵雅琳 李狄尔 王玉阁 郝茹 解居伦 刘身庆 杜淼 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期117-123,共7页
利用转基因克隆奶山羊乳腺生物反应器大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ(rhATⅢ)蛋白质。其中包括:筛选出人的抗凝血酶Ⅲ蛋白基因的cDNA序列;利用山羊的β-酪蛋白基因的启动区,终止信号和Enterokinase蛋白酶酶切DNA序列,构建在乳腺中特异表达r... 利用转基因克隆奶山羊乳腺生物反应器大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ(rhATⅢ)蛋白质。其中包括:筛选出人的抗凝血酶Ⅲ蛋白基因的cDNA序列;利用山羊的β-酪蛋白基因的启动区,终止信号和Enterokinase蛋白酶酶切DNA序列,构建在乳腺中特异表达rhATⅢ的表达载体。同时在转基因载体的末端连接一个新酶素筛选基因(Neomycin)。再以细胞转染、G418筛选和体细胞核移植(动物克隆)等过程,最后获得含有人的抗凝血酶Ⅲ基因的转基因克隆奶山羊。我们共获得了5个原代转基因公羊。第一只克隆羊在出生后78 d死亡,解剖表明:羊的肺部和肾脏等器官有异常。其它克隆公羊经过与崂山种母羊交配,得到转基因后代,其中两个原代转基因羊的后代母羊已成熟、所获得的奶经蛋白质电泳证明:转基因克隆羊后代奶中含有约60 kD大小的rhATⅢ糖蛋白;经Elisa检测表明:在奶中含有大量活性的rhATⅢ,在来源于两个不同克隆公羊的后代母羊奶中的rhATⅢ含量分别为0.4mg/L和3 g/L。此研究证明:转基因奶山羊可以大量地生产具有很高活性的rhATⅢ。用这种方法生产的rhATⅢ通过蛋白质提纯,制成注射针剂,将可用于人的抗凝血酶Ⅲ缺乏症的治疗、预防血栓和重大手术过程中的止血的作用等。 展开更多
关键词 山羊 乳腺生物发应器 转基因 克隆 重组人的抗凝血酶Ⅲ(rhATⅢ) 胎儿成纤维细胞(FFC)
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以胚胎干细胞为核供体能促进异种重构胚的体外发育 被引量:4
15
作者 王鸿 郑瑞珍 +5 位作者 安利佳 王鸿 徐营 廉莉 陈大元 徐营 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第17期1313-1316,共4页
体细胞在异种成熟的去核卵母细胞中能够去分化和重编程,并能发育到囊胚,甚至能全程发育正常出生。为了评价胚胎干细胞作为供核细胞在异种动物克隆中的意义,以小鼠胚胎干细胞(ES)为核供体,兔成熟的去核卵母细胞为受体构建异种重构胚,... 体细胞在异种成熟的去核卵母细胞中能够去分化和重编程,并能发育到囊胚,甚至能全程发育正常出生。为了评价胚胎干细胞作为供核细胞在异种动物克隆中的意义,以小鼠胚胎干细胞(ES)为核供体,兔成熟的去核卵母细胞为受体构建异种重构胚,分析其在体外的发育能力,并以小鼠胚胎成纤维细胞和成年小鼠外耳皮肤的成纤维细胞为对照。通过核移植的方法分别把3种细胞移入成熟的兔去核卵母细胞透明带下,经电融合和激活后,在体外培养,胚胎干细胞作为供核细胞所构建的异种重构胚在体外发育到囊胚的比例为16.1%,明显高于用成年小鼠外耳皮肤成纤维细胞(0%~3.1%,P<0.05)和小鼠胚胎成纤维细胞(2.1%~3.7%,P<0.05)所构建的异种重构胚的体外囊胚发育率.重构囊胚细胞经染色体分析,证实其染色体来源于小鼠胚胎干细胞。以上结果显示,用胚胎干细胞作为供核细胞,比体细胞作为供核细胞所构建的异种重构胚更容易进行重编程,并且胚胎干细胞指导异种克隆胚胎正常发育的能力强于体细胞。 展开更多
关键词 核供体 异种重构 异种重构胚 体外发育 胚胎干细胞 成纤维细胞 小鼠 异种核移植 异种克隆
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