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基于Tail-PCR分析AN2基因上游启动子活性 被引量：1
1
作者 宗渊 韦国 +2 位作者 石光禹 刘宝龙 包雪梅 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期257-263,共7页
黑果枸杞(Lycium ruthenicum)富含花青素,AN2基因是调控黑果枸杞花青素合成代谢的主效基因。为解析AN2基因启动子的活性差异,采用Tail-PCR方法分别克隆了黑果枸杞和红果枸杞(L.barbarum)AN2基因起始密码子上游约1686 bp(LrAN2p)和1495 b... 黑果枸杞(Lycium ruthenicum)富含花青素,AN2基因是调控黑果枸杞花青素合成代谢的主效基因。为解析AN2基因启动子的活性差异,采用Tail-PCR方法分别克隆了黑果枸杞和红果枸杞(L.barbarum)AN2基因起始密码子上游约1686 bp(LrAN2p)和1495 bp(LbAN2p)的序列。PlantCARE预测表明,LbAN2p和LrAN2p中分别有133和137个的顺式作用元件,其中,参与光调控的顺式元件分别有11和15个;参与激素响应相关的顺式元件分别有13和16个。构建AN2启动子植物表达载体pKGWFS7:LbAN2p和pKGWFS7:Lr AN2p,利用农杆菌介导的烟草遗传转化体系获得转基因烟草。GUS染色结果表明,LrAN2p能够驱动GUS在烟草中的表达,叶片呈现蓝色,具有较LbAN2p更强的启动活性,qRT-PCR结果表明,LrAN2p转基因烟草中GUS基因具有更高的转录水平,这可能会使AN2基因在黑果枸杞中具有更高的表达,激活黑果枸杞花青素合成代谢通路。这为解析枸杞果色形成及AN2基因的表达调控机制奠定了理论基础。 展开更多
关键词 黑果枸杞 花青素 AN2 启动子 GUS染色
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普通小麦中TaMYC1基因启动子的克隆和功能分析 被引量：1
2
作者 罗香怡 宗渊 +4 位作者 曹东 甘晓龙 李云 刘宝龙 魏乐 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2022年第8期2456-2462,共7页
花青素在植物生长发育和调节外界胁迫中发挥重要作用,TaMYC1是调控小麦四倍体紫色果皮花青素合成主效基因Pp3的候选基因。本研究对TaMYC1启动子的活性进行差异分析,结果表明TaMYC1w的弱活性是导致TaMYC1基因在白粒小麦中无法诱导花青素... 花青素在植物生长发育和调节外界胁迫中发挥重要作用,TaMYC1是调控小麦四倍体紫色果皮花青素合成主效基因Pp3的候选基因。本研究对TaMYC1启动子的活性进行差异分析,结果表明TaMYC1w的弱活性是导致TaMYC1基因在白粒小麦中无法诱导花青素的原因之一。从紫粒小麦GY115和白粒小麦Opata分离到TaMYC1p启动子和TaMYC1w启动子,分别为3198和2186 bp。构建TaMYC1启动子植物表达载体TaMYC1p:GUS和TaMYC1w:GUS并转入本氏烟草发现TaMYC1启动子能够驱动GUS基因在烟草表皮中的表达,且TaMYC1p启动子在烟草表皮中表达量明显高于TaMYC1w,说明TaMYC1p启动子的活性要远高于TaMYC1w,这可能就是紫粒小麦中TaMYC1转录水平较高,并能够诱导激活花青素合成代谢通路的原因之一。本研究对TaMYC1p和TaMYC1w启动子进行生物信息学分析以及转基因过表达验证等分子生物学实验,为后续有色小麦花青素生物合成代谢研究提供可靠的分子理论基础。 展开更多
关键词 紫粒小麦 花青素 TaMYC1 启动子
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