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代谢综合征临床研究进展──内分泌代谢疾病(3) 被引量：24
1
作者 程桦 《新医学》 北大核心 2003年第5期330-332,共3页
关键词 代谢综合征 临床 研究进展 内分泌代谢疾病 肥胖症 高血压 诊断 流行病学 病因学 发病机制
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PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用 被引量：4
2
作者 杨川 程桦 +3 位作者 王川 严励 黎锋 魏菁 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期409-412,共4页
【目的】探讨PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用。【方法】将C2C12细胞分别经过不同浓度的类胰高血糖素(GLP-1)诱导120h后,瞬间转染胰腺十二指肠同源框(PDX-1)基因,用RT-PCR检测PDX-1的表达,流式细胞仪、放射免疫法检... 【目的】探讨PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用。【方法】将C2C12细胞分别经过不同浓度的类胰高血糖素(GLP-1)诱导120h后,瞬间转染胰腺十二指肠同源框(PDX-1)基因,用RT-PCR检测PDX-1的表达,流式细胞仪、放射免疫法检测细胞内和培养基中是否存在胰岛素。【结果】GLP-1可以直接诱导C2C12细胞表达PDX-1;PDX-1瞬时转染C2C12细胞后,胰岛素分泌细胞阳性率比值(1.19±0.10)、培养基中的胰岛素含量(2.45±1.48)×10-6U/mL均明显升高(P<0.05);单独的40nmol/LGLP-1诱导与瞬间转染PDX-1相比,阳性率比值及胰岛素浓度的差别均无统计学意义。【结论】GLP-1可以诱导C2C12表达PDX-1,而且PDX-1可以促进C2C12分泌胰岛素。提示GLP-1诱导C2C12分化为胰岛素分泌细胞可能与PDX-1有关。 展开更多
关键词 胰岛素分泌细胞 PDX-1 成肌细胞株 分化 C2C12细胞 GLP-1 RT-PCR检测 胰腺十二指肠 胰高血糖素 流式细胞仪 免疫法检测 胰岛素含量 mol/L 胰岛素浓度 分泌胰岛素 不同浓度 细胞表达 瞬时转染 培养基 阳性率 同源框 细胞内
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GLP-1、Betacellulin、Activin A、bFGF和Nicotinamide联合诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞 被引量：5
3
作者 吴木潮 陈黎红 +1 位作者 徐明彤 程桦 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期426-430,共5页
【目的】探讨体外联合应用GLP-1、betacellulin、activinA、bFGF和nicotinamide5种生长因子能否将小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化为胰岛素分泌细胞。【方法】以GLP-1、betacellulin、activinA、bFGF和nicoti-namide5种生长因子诱导E14.... 【目的】探讨体外联合应用GLP-1、betacellulin、activinA、bFGF和nicotinamide5种生长因子能否将小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化为胰岛素分泌细胞。【方法】以GLP-1、betacellulin、activinA、bFGF和nicoti-namide5种生长因子诱导E14.1小鼠ES细胞30d后,应用RT-PCR、DTZ染色和免疫组化检测分化细胞胰岛素表达,以流式细胞仪检测胰岛素分泌细胞的分化率,用RIA法测定培养液中胰岛素水平。【结果】分化细胞可检测到胰岛素mRNA表达,DTZ染色和胰岛素免疫组化染色阳性,胰岛素分泌细胞的分化率平均为13.6%±3.7%,在5.6mmol/L和25mmol/L葡萄糖浓度作用下培养液中胰岛素水平分别为(0.04±0.01)ng/mL和(0.09±0.02)ng/mL。【结论】体外联合应用GLP-1、betacellulin、activinA、bFGF和nicotinamide5种生长因子能将小鼠ES细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞,但胰岛素分泌功能较差。 展开更多
关键词 胰岛素分泌细胞 GLP-1 FGF 生长因子 胰岛素水平 干细胞分化 联合诱导 分化细胞 小鼠胚胎 ES细胞
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肥胖对不同糖耐量者第一时相胰岛素分泌功能的影响 被引量：6
4
作者 何扬 王川 +2 位作者 黎锋 程桦 严励 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期932-936,共5页
目的:探讨肥胖对不同糖耐量人群第一时相胰岛素分泌功能的影响。方法:无糖尿病家族史的正常糖耐量者(正常对照,NC)38例、2型糖尿病一级亲属正常糖耐量(NGT)者32例、糖调节受损(IGR)者67例及新诊断的2型糖尿病(T2DM)患者35例参与本试验。... 目的:探讨肥胖对不同糖耐量人群第一时相胰岛素分泌功能的影响。方法:无糖尿病家族史的正常糖耐量者(正常对照,NC)38例、2型糖尿病一级亲属正常糖耐量(NGT)者32例、糖调节受损(IGR)者67例及新诊断的2型糖尿病(T2DM)患者35例参与本试验。这4个组再分为超重/肥胖及正常体重2个亚组。各组均行静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)和口服葡萄糖-胰岛素释放试验(OG-IRT),计算第一时相胰岛素分泌功能指数(AlR3-5)及胰岛素敏感性指数(ISI),分析肥胖对不同糖耐量人群胰岛β细胞功能及胰岛素抵抗的影响。结果:NC超重/肥胖亚组较正常体重亚组AIR3-5显著升高(P<0.05),其余3对亚组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。超重/肥胖亚组ISI较正常体重亚组有降低趋势,其中IGR两亚组间比较差异无统计学意义(P>0.05),其余3对亚组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。ISI与体重指数和腰围在各组均呈负相关(P<0.05),与AIR3-5在NC组呈负相关(P<0.05),而在其余各组均呈正相关(均P<0.05)。结论:肥胖对不同糖耐量人群胰岛β细胞分泌功能影响各不相同。无糖尿病家族史的正常糖耐量者随着胰岛素抵抗的加重,第一时相胰岛素分泌功能代偿性增加,而2型糖尿病一级亲属正常糖耐量者、糖调节受损者和2型糖尿病患者则不能代偿性增加。 展开更多
关键词 糖尿病 肥胖 胰岛素分泌 胰岛素敏感性
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三种不同细胞培养方式对体外小鼠胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞诱导效果的比较 被引量：6
5
作者 吴木潮 程桦 +3 位作者 陈黎红 徐明彤 黎锋 薛声能 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1591-1596,共6页
目的:比较胚胎体、胚胎体-细胞单层和细胞单层3种细胞培养方式对小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化为胰岛素分泌细胞的诱导效果。方法:应用胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、β细胞素(betacellu lin)、激活素A(activin A)、碱性成纤维细胞生长因子(bF... 目的:比较胚胎体、胚胎体-细胞单层和细胞单层3种细胞培养方式对小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化为胰岛素分泌细胞的诱导效果。方法:应用胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、β细胞素(betacellu lin)、激活素A(activin A)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和尼克酰胺(n icotinam ide),分别以胚胎体、胚胎体-细胞单层和细胞单层3种细胞培养方式诱导小鼠ES细胞30 d后,应用RT-PCR、双硫腙(DTZ)染色和免疫组化检测分化细胞胰岛素表达,以流式细胞仪检测胰岛素阳性细胞百分比。结果:3种细胞培养方式诱导的分化细胞均可见DTZ染色和胰岛素免疫组化染色阳性细胞,RT-PCR检测到胰岛素和其它一些胰岛相关基因mRNA表达,胚胎体-细胞单层方式胰岛素mRNA表达最强,胚胎体方式次之,细胞单层方式最弱。胚胎体-细胞单层方式的胰岛素阳性细胞百分比高于胚胎体方式(P<0.01),后者又高于细胞单层方式(P<0.01)。结论:采用胚胎体-细胞单层方式诱导可更好促进小鼠ES细胞分化为胰岛素分泌细胞。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 细胞培养 胰岛素分泌细胞
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2型糖尿病一级亲属不同糖耐量者第一时相胰岛素分泌功能的变化 被引量：5
6
作者 严励 陈黎红 +4 位作者 何扬 唐菊英 黎锋 刘湘茹 程桦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期2039-2042,共4页
目的:探讨胰岛素分泌功能和胰岛素抵抗(IR)在2型糖尿病(T2DM)发生、发展中的作用。方法: T2DM一级亲属正常糖耐量(NGT+)组32例,T2DM一级亲属糖耐量异常(IGT+)组36例,新诊断的T2DM组35例,计 算各组的第一时相胰岛素分泌功能指数(AIR3-5)... 目的:探讨胰岛素分泌功能和胰岛素抵抗(IR)在2型糖尿病(T2DM)发生、发展中的作用。方法: T2DM一级亲属正常糖耐量(NGT+)组32例,T2DM一级亲属糖耐量异常(IGT+)组36例,新诊断的T2DM组35例,计 算各组的第一时相胰岛素分泌功能指数(AIR3-5)及胰岛素敏感性指数(SIM),与无糖尿病家族史的正常糖耐量 (NGT-)组(38例)比较。结果:T2DM一级亲属T2DM组、IGT+和NGT+组AIR3-5均低于NGT-组(P值分别为<0．01、 <0．01、<0．05);T2DM组和IGT+组SIM均低于NGT-组(均P<0．01),而NGT+组SIM值与NGT-组比较无统计学差异 (P>0．05)。结论:胰岛素分泌功能缺陷可能是T2DM发病的始动因素。当发展为IGT及T2DM时,胰岛素分泌功能 进一步降低,并伴有胰岛素敏感性的降低。 展开更多
关键词 糖尿病 非胰岛素依赖型 胰岛素敏感性
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不同饮食负荷对葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽的影响 被引量：3
7
作者 陈重 严励 +2 位作者 傅晓莹 杨华章 邝建 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2031-2034,共4页
目的探讨不同饮食负荷对正常糖耐量人群的葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽(glucose-dependent insulinotropicploypeptide,GIP)分泌模式的影响,及其与胰岛素分泌、血浆葡萄糖水平的关系。方法 14例正常糖耐量受试者先后接受75 g葡萄糖耐... 目的探讨不同饮食负荷对正常糖耐量人群的葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽(glucose-dependent insulinotropicploypeptide,GIP)分泌模式的影响,及其与胰岛素分泌、血浆葡萄糖水平的关系。方法 14例正常糖耐量受试者先后接受75 g葡萄糖耐量及混合餐耐量试验,检测空腹及葡萄糖或混合餐后15,30,60,90和120 min的血糖、胰岛素及GIP。结果(1)葡萄糖负荷后GIP的第一个峰值在糖负荷后15 min(45.09±4.67)pmol/L,短暂下降之后持续上升至120 min(59.66±11.73)pmol/L;(2)混合餐负荷后GIP分泌呈双时相曲线,第一峰值在15 min(71.69±14.19)pmol/L,显著高于同时点的葡萄糖负荷(P<0.05);第二个峰在90 min(55.35±13.19)pmol/L。两种饮食负荷后GIP曲线下面积无统计学差异(P>0.05);(3)随着混合餐负荷时GIP早期分泌(15 min)第一峰值升高幅度较葡萄糖负荷大,胰岛素达峰时间提前(30 min vs 60min),同时混合餐负荷后15 min血糖升高幅度明显低于葡萄糖负荷(P<0.05)。结论正常糖耐量人群两种饮食负荷后GIP分泌曲线明显不同,混合餐后GIP分泌呈典型的双相分泌,其第一峰值显著高于葡萄糖负荷,提示混合餐(含脂肪)刺激GIP释放较强,使胰岛素达峰时间提前,可能是混合餐血糖峰值较低的重要原因之一。 展开更多
关键词 正常糖耐量 肠促胰岛素 葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽
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新诊断2型糖尿病病人脂代谢紊乱状态与胰岛素抵抗及胰岛素分泌缺陷 被引量：3
8
作者 梁真 唐菊英 +2 位作者 肖辉盛 严励 程桦 《临床内科杂志》 CAS 北大核心 2004年第6期375-377,共3页
目的　观察新诊断的 2型糖尿病病人脂代谢紊乱状态与胰岛素抵抗及胰岛素分泌缺陷的关系。方法　 14 3例新诊断的 2型糖尿病病人 ,根据美国ATPIII标准分为血脂正常组 ,高甘油三酯组、高胆固醇组、混合性高脂组 ,应用稳态模型评估法评价... 目的　观察新诊断的 2型糖尿病病人脂代谢紊乱状态与胰岛素抵抗及胰岛素分泌缺陷的关系。方法　 14 3例新诊断的 2型糖尿病病人 ,根据美国ATPIII标准分为血脂正常组 ,高甘油三酯组、高胆固醇组、混合性高脂组 ,应用稳态模型评估法评价胰岛素敏感性及胰岛B细胞功能 ,探讨各种类型的脂代谢紊乱与胰岛素抵抗及胰岛素分泌缺陷的关系。结果　新诊断的 2型糖尿病病人血脂紊乱发生率为 5 6.6% ,高甘油三酯组的HOMA IR较正常组显著升高。各组HOMA β无显著差别。结论　新诊断的 2型糖尿病病人脂代谢紊乱类型以高TC/LDL最常见 ,但高TG者的胰岛素抵抗程度更为严重。 展开更多
关键词 2型糖尿病 脂代谢紊乱 胰岛素抵抗 胰岛素分泌
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醛固酮对3T3-L1前脂肪细胞与脂肪细胞内脂素表达和分泌的影响 被引量：2
9
作者 王川 张少玲 +1 位作者 严励 程桦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1270-1274,共5页
目的:探讨醛固酮对3T3-L1前脂肪细胞和脂肪细胞内脂素基因表达和蛋白分泌的影响。方法:10-8和10-6mol/L醛固酮加或不加10-6mol/L安体舒通分别干预3T3-L1前脂肪细胞和脂肪细胞24h和48h,用实时RT-PCR测定内脂素和盐皮质激素受体(MR)mRNA... 目的:探讨醛固酮对3T3-L1前脂肪细胞和脂肪细胞内脂素基因表达和蛋白分泌的影响。方法:10-8和10-6mol/L醛固酮加或不加10-6mol/L安体舒通分别干预3T3-L1前脂肪细胞和脂肪细胞24h和48h,用实时RT-PCR测定内脂素和盐皮质激素受体(MR)mRNA的表达,酶联免疫法测定培养液中内脂素的浓度。结果:醛固酮作用于3T3-L1前脂肪细胞,内脂素mRNA表达减少,培养液中蛋白浓度变化不明显,MR mRNA表达增高。醛固酮作用于脂肪细胞,内脂素mRNA表达和蛋白浓度均降低,MR mRNA表达增高。安体舒通在一定程度上可对抗醛固酮对内脂素的抑制作用。结论:醛固酮抑制3T3-L1脂肪细胞内脂素的基因表达和分泌。 展开更多
关键词 醛固酮 脂细胞 内脂素 受体 盐皮质激素
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丁酸钠、激活素A和地塞米松诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰腺外分泌细胞 被引量：1
10
作者 任萌 闵军 +4 位作者 严励 商昌珍 曹君 李静宜 程桦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1585-1590,共6页
目的:探讨丁酸钠、激活素A(activinA)和地塞米松诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化为胰腺外分泌细胞的可行性,并对诱导作用进行比较。方法:小鼠ES细胞悬浮培养为拟胚体后,以不同浓度的丁酸钠(1mmol/L,2mmol/L,3mmol/L)诱导分化,通过RT-PC... 目的:探讨丁酸钠、激活素A(activinA)和地塞米松诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化为胰腺外分泌细胞的可行性,并对诱导作用进行比较。方法:小鼠ES细胞悬浮培养为拟胚体后,以不同浓度的丁酸钠(1mmol/L,2mmol/L,3mmol/L)诱导分化,通过RT-PCR检测不同时点胰腺特异性外分泌基因的表达水平,确定丁酸钠诱导ES细胞向胰腺外分泌细胞分化的最佳浓度和作用时间。进一步单独或联合应用丁酸钠、activinA、地塞米松诱导ES细胞分化,并通过细胞形态学变化、RT-PCR和免疫荧光检测观察不同诱导方案对胰腺外分泌基因和蛋白表达的影响,确定最佳诱导方案。结果:1mmol/L丁酸钠能明显促进胰腺外分泌基因amylase、chymot-rypsinogen、elastase1、elastase2和carboxypeptidase的表达,随着丁酸钠浓度的增加,丁酸钠的诱导作用逐渐减弱;1mmol/L丁酸钠诱导第3d后可检测到amylase、chymotrypsinogen、elastase1、elastase2和carboxypeptidase的表达,在第5d外分泌基因mRNA表达水平达到高峰,随后逐渐下降。与自发对照组相比,单独应用丁酸钠、activinA、地塞米松诱导ES细胞分化,均能提高amylase、chymotrypsinogen、elastase1、elastase2和carboxypeptidase的表达水平。但联合应用丁酸钠、activinA、地塞米松诱导后,ES细胞形态更为均一,上述胰腺外分泌基因的表达进一步增强;免疫荧光结果显示amylase表达为阳性。结论:低浓度的丁酸钠、activinA以及地塞米松均可以诱导小鼠ES细胞胰腺外分泌基因的表达,多种诱导因子的联合作用能明显提高胰腺外分泌细胞的诱导效率。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 丁酸钠 地塞米松 胰腺外分泌细胞 细胞分化
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胚胎干细胞向胰岛素分泌细胞的定向分化 被引量：6
11
作者 吴木潮 《国外医学（内分泌学分册）》 2003年第3期209-211,共3页
在适当的条件下 ,胚胎干细胞可在体外被诱导分化为胰岛素分泌细胞。这一过程包括胚胎干细胞的诱导分化以及分化细胞的筛选和成熟。通过检测胰岛细胞的细胞标志和应用组织化学方法可鉴定胚胎干细胞是否已分化为胰岛素分泌细胞。研究显示 ... 在适当的条件下 ,胚胎干细胞可在体外被诱导分化为胰岛素分泌细胞。这一过程包括胚胎干细胞的诱导分化以及分化细胞的筛选和成熟。通过检测胰岛细胞的细胞标志和应用组织化学方法可鉴定胚胎干细胞是否已分化为胰岛素分泌细胞。研究显示 ,来源于小鼠胚胎干细胞的胰岛素分泌细胞可使糖尿病模型动物的血糖恢复到正常水平 ,但在胚胎干细胞进入临床应用之前 ,仍有很多问题需进一步研究加以解决。 展开更多
关键词 糖尿病 胚胎干细胞 胰岛素分泌细胞 细胞分化
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不同培养时间对NIT-1细胞胰岛素分泌及相关基因表达的影响 被引量：4
12
作者 李英 杨川 +2 位作者 严励 傅静奕 王川 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1811-1815,共5页
目的:研究体外生理浓度葡萄糖培养胰岛β细胞株NIT-1细胞在不同时间出现的功能变化及其可能机制。方法:观察5.6 mmol/L葡萄糖浓度的DMEM完全培养基培养的NIT-1细胞在8周培养时间内细胞的形态变化;胰岛素免疫细胞化学染色;应用放射免疫... 目的:研究体外生理浓度葡萄糖培养胰岛β细胞株NIT-1细胞在不同时间出现的功能变化及其可能机制。方法:观察5.6 mmol/L葡萄糖浓度的DMEM完全培养基培养的NIT-1细胞在8周培养时间内细胞的形态变化;胰岛素免疫细胞化学染色;应用放射免疫法测定8周葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平;并以RT-PCR半定量测定各基因Insulin、Glut2、GK、PDX-1、NeuroD1、Pax4、Pax6 mRNA表达水平变化。结果:(1)传代培养过程中细胞生长良好呈多边形,不同培养时间的NIT-1细胞形态无显著差异;(2)胰岛素免疫细胞化学染色示GSIS组胞浆染色阳性,呈淡黄褐色;(3)1-8周每周测定的葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)与第1周数据比较,显示胰岛细胞分泌功能改变差异显著(P<0.05);(4)1-8周每周测定的胰岛素基因、PDX-1基因、GK基因、Glut2基因、Neu-roD1基因和Pax6基因mRNA的表达与第1周比较,显示基因mRNA的改变差异显著(P<0.05);Pax4基因mRNA的改变无显著差异(P>0.05)。结论:生理浓度葡萄糖培养的NIT-1细胞的葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能随体外培养时间的延长呈逐步下降趋势;这可能与维持β细胞功能有关的基因Insulin、PDX-1、GK、Glut2、NeuroD1和Pax6表达下降有关。 展开更多
关键词 葡萄糖 NIT-1细胞 胰岛素分泌 基因表达
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如何模拟生理状态的胰岛素分泌?
13
作者 刘丹 《糖尿病新世界》 2005年第5期40-41,共2页
患上糖尿病后，医生往往会根据患者的临床表现、伴随症状及实验室检查结果，将患者分为1型或2型糖尿病患者。两型糖尿病的发病机制不同，治疗也有很大的差异。1型糖尿病的特点是胰岛素绝对缺乏；如果没有外源胰岛素的替代治疗，患者将... 患上糖尿病后，医生往往会根据患者的临床表现、伴随症状及实验室检查结果，将患者分为1型或2型糖尿病患者。两型糖尿病的发病机制不同，治疗也有很大的差异。1型糖尿病的特点是胰岛素绝对缺乏；如果没有外源胰岛素的替代治疗，患者将会发生一些危及生命的代谢紊乱如糖尿病酮症酸中毒等，所以1型糖尿病患者需要依赖胰岛素治疗。 展开更多
关键词 胰岛素分泌 模拟生理状态 2型糖尿病患者 糖尿病酮症酸中毒 1型糖尿病 替代治疗 外源胰岛素 胰岛素治疗 临床表现
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一个多发性内分泌腺瘤病2A型家系新的RET原癌基因突变方式 被引量：6
14
作者 张少玲 翁育 +5 位作者 严励 姜晓华 黎锋 陈黎红 李焱 程桦 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期282-286,共5页
目的探讨一个多发性内分泌腺瘤病2A型（MEN2A）家系的临床表现和RET原癌基因突变方式。方法对一个MEN2A家系成员进行临床调查，提取其中3例具有典型临床表现的患者及15个家庭成员的外周血淋巴细胞DNA，对RET原癌基因的第8、10、11、13... 目的探讨一个多发性内分泌腺瘤病2A型（MEN2A）家系的临床表现和RET原癌基因突变方式。方法对一个MEN2A家系成员进行临床调查，提取其中3例具有典型临床表现的患者及15个家庭成员的外周血淋巴细胞DNA，对RET原癌基因的第8、10、11、13～16外显子进行DNA测序分析，并对发现突变的PCR产物进行亚克隆测序。结果该家系先证者系30岁起先后确诊为嗜铬细胞瘤和甲状腺髓样癌的男性，其一姐患有嗜铬细胞瘤、一弟患有甲状腺髓样癌。在这3例患者及另外2例未发病的家庭成员中，发现了RET原癌基因第11号外显子存在相同的杂合突变，即1893-1895delCGA，系一种新的突变类型。结论RET原癌基因第11号外显子1893—1895delCGA杂合突变，是一种新突变，可能为该MEN2A家系的致病基因。 展开更多
关键词 多发性内分泌腺瘤病2A型 嗜铬细胞瘤 RET原癌基因
原文传递
两个多发性内分泌腺瘤病2A型家系RET原癌基因突变方式的研究 被引量：1
15
作者 翁育 黎锋 +2 位作者 张少玲 程桦 严励 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期648-652,共5页
目的探讨两个多发性内分泌腺瘤病2A型家系的RET原癌基因突变方式。方法提取2个家系成员外周血基因组DNA，对RET原癌基因外显子进行PCR扩增，PCR产物进行直接基因测序。首先对两个家系的先证者的RET原癌基因中发生突变率较高的第8、10、1... 目的探讨两个多发性内分泌腺瘤病2A型家系的RET原癌基因突变方式。方法提取2个家系成员外周血基因组DNA，对RET原癌基因外显子进行PCR扩增，PCR产物进行直接基因测序。首先对两个家系的先证者的RET原癌基因中发生突变率较高的第8、10、11、13、14、15和16这7个外显子的基因片段进行测序，再根据先证者发生突变的位点，对其家庭成员进行相应外显子测序。为排除合并其他位点的基因突变，对家系1中的先证者DNA的其余的14个外显子（第1、2、3、4、5、6、7、9、12、17、18、19、20、21）也进行了扩增测序。结果在家系1的3例患者（先证者及其一姐和一弟）及2名表型正常家系成员中，发现了RET原癌基因第11外显子存在1893-1895delCGA杂合突变，是一种新的突变类型。其他进行DNA测序的家庭成员未见以上突变。在家系2的2例患者（先证者及其兄）及3名表型正常家系成员，发现了RET原癌基因第11外显子存在Cys634Arg杂合突变，为已报道的发生率较高的一种突变类型。结论RET原癌基因第11外显子1893-1895delCGA杂合突变及Cys634Arg杂合突变，均为多发性内分泌腺瘤病2A型的致病基因，而前者是一种未见报道的新突变，丰富了人类基因突变谱。 展开更多
关键词 多发性内分泌腺瘤病2A型 RET原癌基因 基因突变
原文传递
甘精胰岛素对游离脂肪酸诱导的RIN-m细胞凋亡的影响 被引量：28
16
作者 傅静奕 李焱 +3 位作者 严励 张淼 陈黎红 傅祖植 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期413-416,共4页
【目的】研究甘精胰岛素(insulinglargine)对游离脂肪酸诱导的β细胞凋亡是否具有保护作用。【方法】不同浓度的甘精胰岛素、普通人胰岛素以及IGF-1与0.3mmol/L棕榈酸分别加入RIN-m细胞培养液中,24h后,采用Hoechst33342染色、流式细胞... 【目的】研究甘精胰岛素(insulinglargine)对游离脂肪酸诱导的β细胞凋亡是否具有保护作用。【方法】不同浓度的甘精胰岛素、普通人胰岛素以及IGF-1与0.3mmol/L棕榈酸分别加入RIN-m细胞培养液中,24h后,采用Hoechst33342染色、流式细胞仪以及ELISA方法检测RIN-m细胞的凋亡。【结果】0.3mmol/L棕榈酸诱导RIN-m细胞凋亡率达42.10%±4.24%,同时加入甘精胰岛素或者普通胰岛素(均为100nmol/L)的凋亡率分别为32.00%±3.08%和35.97%±3.14%,甘精胰岛素对凋亡的抑制作用明显强于普通胰岛素,并呈剂量依赖性。【结论】甘精胰岛素对游离脂肪酸诱导的β细胞凋亡具有呈剂量依赖性的保护作用。 展开更多
关键词 甘精胰岛素 游离脂肪酸 HOECHST33342 Β细胞凋亡 普通胰岛素 剂量依赖性 保护作用 细胞培养液 IGF-1 流式细胞仪 细胞凋亡率 mol/L 不同浓度 人胰岛素 抑制作用 棕榈酸 24h m细胞
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新诊断2型糖尿病患者血清炎症因子及外周血单个核细胞中核因子κB活性变化 被引量：24
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作者 石秀林 李芳萍 +4 位作者 蔡梦茵 黎锋 严励 李焱 程桦 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期266-270,共5页
目的探讨新诊断2型糖尿病患者血清炎症因子超敏-C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平及外周血单个核细胞(PMNC)中NF-κB的活性变化。方法选择健康成人66例,新诊断2型糖尿病患者92例,分为正常对照组和2型糖... 目的探讨新诊断2型糖尿病患者血清炎症因子超敏-C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平及外周血单个核细胞(PMNC)中NF-κB的活性变化。方法选择健康成人66例,新诊断2型糖尿病患者92例,分为正常对照组和2型糖尿病组,分析比较两组血清炎症因子及PMNC中NF-κB活性水平。血清hs-CRP、TNF-α、IL-6采用酶联免疫吸附法测定。免疫印迹分析检测PMNC中核因子κBp65(Ser536)的磷酸化水平,β-actin作为内参。结果2型糖尿病组患者的血清CRP、IL-6、TNF-α水平均显著高于正常对照组(P<0.001);糖尿病组患者PMNC中NF-κBP65(Ser536)磷酸化水平高于正常对照组(0.85±0.38vs0.47±0.25,P<0.05);在糖尿病组,log(CRP)与质量指数(BMI)、腰围、腰臀比、稳态模型法估计的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、log(IL-6)、log(TNF-α)、糖基化血红蛋白(hemoglobin,A1c)呈正相关。结论结果提示2型糖尿病患者处于炎症状态,血清炎症因子水平及PMNC中NF-κB活性的升高可能与胰岛素抵抗和动脉粥样硬化的形成有关。 展开更多
关键词 2型糖尿病 核因子ΚB 炎症因子 TNF-α CRP IL-6
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复方丹参滴丸对新诊断2型糖尿病患者动脉内膜中层厚度的影响 被引量：16
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作者 刘丹 唐菊英 +4 位作者 严励 文艳玲 肖辉盛 黎锋 程桦 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1265-1268,共4页
目的探讨复方丹参滴丸对新诊断2型糖尿病患者动脉内膜中层厚度(IMT)的影响。方法将108例新诊断2型糖尿病患者随机分为阿司匹林、维生素E和丹参滴丸3组(各36例),在降糖、降压、调脂的基础上分别予以口服阿司匹林(0.1g/次,1次/日)、维生素... 目的探讨复方丹参滴丸对新诊断2型糖尿病患者动脉内膜中层厚度(IMT)的影响。方法将108例新诊断2型糖尿病患者随机分为阿司匹林、维生素E和丹参滴丸3组(各36例),在降糖、降压、调脂的基础上分别予以口服阿司匹林(0.1g/次,1次/日)、维生素E(0.1g/次,2次/日)和复方丹参滴丸(10丸/次,3次/日)治疗18个月,观察治疗后血糖、血脂谱和胰岛素抵抗指数的变化及颈、髂、股动脉IMT的变化。结果治疗后与治疗前比较,丹参滴丸组糖化血红蛋白水平下降(P<0.01),总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平降低(P<0.01),胰岛素抵抗指数改善(P<0.05);颈、髂和股动脉IMT无明显增厚(P>0.05)。治疗后丹参滴丸组颈动脉IMT增厚幅度低于阿司匹林组(P<0.05),股动脉IMT增厚幅度低于阿司匹林和维生素E组(P<0.05)。结论对新诊断2型糖尿病患者加用复方丹参滴丸治疗,可协助血糖、血脂的调控,延缓动脉内膜增生。 展开更多
关键词 复方丹参滴丸 动脉内膜中层厚度 新诊断2型糖尿病
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抵抗素在肝脏胰岛素抵抗中的作用及其机制探讨 被引量：8
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作者 李焱 何娟 +6 位作者 李芳萍 刘珊英 罗招凡 黎峰 刘丹 徐明彤 严励 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期190-193,共4页
目的探讨抵抗素在肝脏胰岛素抵抗中的作用及其可能的机制。方法将载有抵抗素基因的重组腺病毒经尾静脉注射构建高抵抗素血症小鼠模型,同时设正常对照组及病毒对照组,取肝脏组织切片行PAS糖原染色半定量观察肝糖代谢变化;以Western blot... 目的探讨抵抗素在肝脏胰岛素抵抗中的作用及其可能的机制。方法将载有抵抗素基因的重组腺病毒经尾静脉注射构建高抵抗素血症小鼠模型,同时设正常对照组及病毒对照组,取肝脏组织切片行PAS糖原染色半定量观察肝糖代谢变化;以Western blot检测肝腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的磷酸化,以磷酸化AMPK/总AMPK的比值代表AMPK激活程度;以实时PCR检测肝组织糖异生关键酶葡萄糖6磷酸酶(G6Pase)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEP-CK)mRNA表达水平的变化。结果重组腺病毒注射d5获得血中抵抗素高表达构建了高抵抗素血症动物模型,糖原染色示高抵抗素血症小鼠肝糖原含量较正常对照及病毒对照组降低(P<0.05);高抵抗素血症组肝AMPK磷酸化水平较正常对照及病毒对照组下降,磷酸化AMPK/总AMPK比值分别为0.78±0.06vs0.93±0.13,0.89±0.05(P<0.05)。高抵抗素血症小鼠G6Pase和PEPCK的mRNA表达升高,G6Pase分别为2.136±0.857vs1.353±0.49,1.250±0.77;PEPCK分别为3.54±0.90vs2.75±0.78,2.63±0.67(P<0.05)。结论抵抗素可能通过抑制肝脏AMPK活性,增加肝糖异生关键酶的表达而影响机体肝糖代谢,降低肝糖储量,参与肝脏胰岛素抵抗的形成。 展开更多
关键词 肝脏胰岛素抵抗 抵抗素 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 腺苷酸活化蛋白激酶 正常对照组 重组腺病毒 磷酸化水平 mRNA表达
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抵抗素诱导脐静脉内皮细胞功能异常 被引量：12
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作者 李志臻 黎锋 +4 位作者 严励 李芳萍 李焱 程桦 傅祖植 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期258-261,共4页
目的研究抵抗素(resistin)对脐静脉内皮细胞功能的影响,以探讨抵抗素在粥样硬化性疾病中的作用及其机制。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,不同浓度人抵抗素(0、50、100ng/mL)培养24h。流式细胞检测抵抗素对内皮细胞间黏附分子(ICAM-1)、... 目的研究抵抗素(resistin)对脐静脉内皮细胞功能的影响,以探讨抵抗素在粥样硬化性疾病中的作用及其机制。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,不同浓度人抵抗素(0、50、100ng/mL)培养24h。流式细胞检测抵抗素对内皮细胞间黏附分子(ICAM-1)、血管细胞间黏附分子(VCAM-1)与活性氧簇(ROS)表达的影响;RT-PCR检测抵抗素对内皮素(ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的影响。结果人脐静脉内皮细胞经人抵抗素(50ng/mL、100ng/mL)处理24h后ICAM-1和ET-1mRNA表达显著增高,而各组间VCAM-1表达、ROS生成,以及eNOS和iNOSmRNA表达无明显差别。结论抵抗素可通过增加ICAM-1表达,上调ET-1表达直接促进内皮细胞激活,提示脂肪细胞与内皮细胞的相互作用可能是动脉粥样硬化性疾病的发病因素之一。 展开更多
关键词 抵抗素 人脐静脉内皮细胞 细胞间黏附分子 血管细胞间黏附分子
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