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5-aza-dc和TSA对广西陆川猪体细胞核移植的影响 被引量：3
1
作者 秦小娥 王猛 +2 位作者 宋雪梅 卢晟盛 卢克焕 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期2372-2375,共4页
为探讨甲基转移酶抑制剂5-aza-dc、去乙酰基转移酶抑制剂TSA对广西陆川猪体细胞核移植效率的影响,用5-aza-dc、TSA处理供体细胞和重构胚。结果显示,5-Aza-dc联合TSA处理供体细胞、重构胚以及连续处理供体细胞和重构胚,桑椹胚率均显著高... 为探讨甲基转移酶抑制剂5-aza-dc、去乙酰基转移酶抑制剂TSA对广西陆川猪体细胞核移植效率的影响,用5-aza-dc、TSA处理供体细胞和重构胚。结果显示,5-Aza-dc联合TSA处理供体细胞、重构胚以及连续处理供体细胞和重构胚,桑椹胚率均显著高于对照组(P<0.05),但各组间囊胚率差异不显著。说明5-aza-dc联合TSA处理供体细胞和克隆胚能提高猪克隆胚的发育能力,尽管差异不显著。 展开更多
关键词 猪 体细胞核移植 卵母细胞 5-AZA-DC TSA
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亮甲酚蓝筛选对广西巴马小型猪孤雌激活及克隆重构胚早期发育的影响 被引量：4
2
作者 苏克同 卢克焕 卢晟盛 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1218-1222,共5页
【目的】探讨亮甲酚蓝(BCB)染色是否可以筛选出发育潜能优秀的卵母细胞。【方法】猪卵丘卵母细胞复合体(COCs)在体外成熟培养前用13μmol/LBCB染色,根据卵母细胞胞质蓝色的有无分为阳性(BCB+,蓝色)和阴性组(BCB-,不着色),以在不含BCB的... 【目的】探讨亮甲酚蓝(BCB)染色是否可以筛选出发育潜能优秀的卵母细胞。【方法】猪卵丘卵母细胞复合体(COCs)在体外成熟培养前用13μmol/LBCB染色,根据卵母细胞胞质蓝色的有无分为阳性(BCB+,蓝色)和阴性组(BCB-,不着色),以在不含BCB的改良杜氏磷酸盐缓冲液(m-DPBS)中处理90min为控制对照组,直接培育作空白对照,体外成熟培养后统计各组卵母细胞的核成熟率及孤雌激活胚胎、克隆重构胚胎(供体细胞来自广西巴马小型猪)的早期发育率。【结果】BCB+组卵母细胞的核成熟率(80.8%)显著高于BCB-组(44.2%)和空白对照组(72.4%);BCB+组的孤雌囊胚形成率(32.9%)显著高于BCB-组(10.1%),但与对照组(25.8%)之间无显著差异;BCB+组显微操作核移植胚胎的囊胚发育率(14.1%)显著高于BCB-组(3.4%),但与对照组之间无显著差异;各组手工克隆胚胎发育率之间无显著差异。【结论】BCB染色筛选出的卵母细胞具有较好的核成熟发育潜能,但未能显著改善广西巴马小型猪显微操作及手工克隆胚胎的早期发育。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 卵母细胞 亮甲酚蓝 核成熟 孤雌激活 显微操作 手工克隆
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广西巴马小型猪体细胞核移植体系的建立 被引量：3
3
作者 王献伟 卢晟盛 卢克焕 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期2376-2381,共6页
通过建立广西巴马小型猪体细胞核移植培养体系,为后续转基因克隆猪生产及其相关研究提供最佳条件。试验探讨了盲吸法对猪卵母细胞的去核效率;利用分离到的广西巴马小型猪附睾成纤维细胞作供体构建重构胚胎,探讨6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)... 通过建立广西巴马小型猪体细胞核移植培养体系,为后续转基因克隆猪生产及其相关研究提供最佳条件。试验探讨了盲吸法对猪卵母细胞的去核效率;利用分离到的广西巴马小型猪附睾成纤维细胞作供体构建重构胚胎,探讨6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)和细胞松弛素B(CB)对其后续胚胎发育的影响;利用分离到的广西巴马小型猪腹部成纤维作供体,探讨其对核移植胚胎的发育效率。结果表明:猪卵母细胞盲吸法去核的效率为73.75%;广西巴马小型猪附睾成纤维细胞作供体构建重构胚胎,6-DMAP和CB对其后续胚胎发育没有显著差异(分裂率和囊胚率分别为:89.89%and 6.74%vs.82.95%and 5.68%,P>0.05);腹部成纤维细胞作供体,重构胚胎的融合率、分裂率和囊胚率分别为55.40%、67.53%和6.49%。采用盲吸法可以对体外成熟猪卵母细胞成功去核,广西巴马小型猪腹部成纤维细胞和附睾成纤维细胞均可作供体成功构建体细胞核移植胚胎,并可以发育到囊胚。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 体细胞核 移植
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广西烟草病毒病发生情况调查和病原病毒的鉴定 被引量：18
4
作者 蒙姣荣 赵家新 +4 位作者 蔡琦 邹承武 李战彪 廖咏梅 陈保善 《广西植保》 2012年第4期1-2,共2页
2010-2011年对广西百色市、河池市和贺州市的主要烤烟产区进行烟草病毒病发生情况和种类调查。结果显示，广西烟草病毒病以由烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒引起的花叶类型症状为主，一般发病率1．0％-10．0％，个别严重发病田块发病率达... 2010-2011年对广西百色市、河池市和贺州市的主要烤烟产区进行烟草病毒病发生情况和种类调查。结果显示，广西烟草病毒病以由烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒引起的花叶类型症状为主，一般发病率1．0％-10．0％，个别严重发病田块发病率达到82．0％-100．0％；马铃薯Y病毒病、番茄斑萎病毒病和曲叶病则为局部发生病害，其中马铃薯Y病毒病在靖西县、南丹县、富川县和钟山县零星发生，发病率0．1％-5．0％，个别田块达到20．0％；番茄斑萎病毒病主要在靖西县、隆林县、田林县和南丹县发生；曲叶病仅在靖西县、隆林县、田林县和乐业县等百色市烟区发现。采用间接ELISA、PCR和RT-PCR等方法对田间采集的185个各类疑似病毒病样进行病毒种类检测，其中145个样品检测出病毒，分别是烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、马铃薯Y病毒、番茄环纹斑点病毒、中国番茄曲叶病毒和中国番茄黄化曲叶病毒，以及分别由上述2种病毒与云南辣椒曲叶病毒重组而来的2种重组病毒，其中以TMV的检出率最高，占检出样品的86．7％，是广西烟草病毒病的优势病原病毒。 展开更多
关键词 烟草 病毒病 调查 鉴定
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利用酿酒酵母ZM1-5制备活性干酵母的工艺条件优化试验 被引量：4
5
作者 陈伟康 罗雪梅 +1 位作者 王进 冯家勋 《广西农学报》 2017年第5期4-10,25,共8页
【目的】以糖蜜为底物,建立将实验室的耐高温酿酒酵母ZM1-5制作成活性干酵母的工艺条件,将酿酒酵母ZM1-5制作成活性干酵母,大规模制备活性干酵母提供依据。【方法】对酿酒酵母ZM1-5在种子培养基中的培养时间、糖蜜培养基的配方、发酵液... 【目的】以糖蜜为底物,建立将实验室的耐高温酿酒酵母ZM1-5制作成活性干酵母的工艺条件,将酿酒酵母ZM1-5制作成活性干酵母,大规模制备活性干酵母提供依据。【方法】对酿酒酵母ZM1-5在种子培养基中的培养时间、糖蜜培养基的配方、发酵液的离心条件、酵母的干燥条件以及酵母干燥保护剂进行了优化。【结果】酿酒酵母ZM1-5在种子培养基中培养时间18h,OD_(600)达到4.62。培养基中当糖蜜浓度为18°Bx时,酵母的生长状况最好,增殖最多;添加尿素对酵母生长有促进作用,添加量为1.5g/L时OD_(600)的值为14.39;添加KH2PO4对酵母生长有促进作用,添加量为2g/L时,OD_(600)为14.63。离心条件为6000r/min和10min时活菌率最高,此时活菌率达到了88.73%。干燥温度为40℃时的活菌率最高,达到了74.44%,45℃和50℃略有降低,分别是67.84%和65.95%,当干燥温度为55℃和60℃时明显降低,降到了50%以下。乳化剂对酵母干燥的保护作用较强,其中硬脂酸乳酸钠最好,当添加量为0.2%时,酵母干燥活菌率达到了84.16%。【结论】酿酒酵母ZM1-5在种子培养基中的培养时间为18h;糖蜜培养基的配方为:糖蜜浓度18°Bx、尿素1.5g/L、KH2PO42g/L;发酵培养基培养时间为24h;菌体离心条件为4℃、6000r/min离心10min,酵母收得率为88.73%;酵母细胞干燥条件为50℃干燥85min,在此条件下酵母细胞的存活率为66.95%;;最适添加剂为硬脂酸乳酸钠,添加量为0.2%,酵母细胞的活菌率为84.16%。 展开更多
关键词 糖蜜 酿酒酵母 干燥保护剂 活性干酵母
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南亚热带10种造林树种的水力结构和水力安全 被引量：1
6
作者 黄冬柳 项伟 +1 位作者 李忠国 朱师丹 《植物生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期602-612,共11页
南亚热带地区人工纯林面积大,但是结构简单,对气候变化响应敏感。在区域气候干旱化的背景下,造林树种的生理生态策略及其对季节性干旱的响应亟待研究。该研究选择南亚热带地区10种造林树种(包括6种乡土种和4种外来种),测定这些树种的平... 南亚热带地区人工纯林面积大,但是结构简单,对气候变化响应敏感。在区域气候干旱化的背景下,造林树种的生理生态策略及其对季节性干旱的响应亟待研究。该研究选择南亚热带地区10种造林树种(包括6种乡土种和4种外来种),测定这些树种的平均生长速率、水力学性状以及经济学性状,分析性状与生长速率之间的相关关系,并比较水力安全边际和气孔安全边际的种间差异。结果发现:(1)造林树种的生长速率与木质部导水率显著正相关,但与木材密度、比叶面积以及水力安全性指标无显著相关性。(2)造林树种的水分传导效率性和安全性之间没有权衡关系,外来树种Acaciacrassicarpa和Eucalyptus grandis×urophylla同时具有较高的木质部导水率和较强的抗栓塞能力。(3)造林树种的水力安全边际和气孔安全边际的种间差异显著,大叶相思(Acaciaauriculiformis)、红锥(Castanopsishystrix)、壳菜果(Mytilarialaosensis)和阴香(Cinnamomum burmannii)在干季发生水力失败的风险较高。建议南亚热带人工林的生态监测指标体系中应包括树木水力学性状,进而为人工林的可持续经营管理提供重要参考。 展开更多
关键词 导水率 抗栓塞能力 生长速率 水力安全 人工林管理
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热带亚热带26种蕨类植物的吸收根解剖特征 被引量：3
7
作者 项伟 黄冬柳 朱师丹 《植物生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期593-601,共9页
植物吸收根的生理功能是从土壤中吸收水分和营养物质,研究其解剖结构有助于揭示植物的环境适应策略。热带亚热带地区蕨类植物丰富,生态和经济价值较高,但目前对这一重要植物类群的吸收根解剖特征的研究仍然缺乏。该研究测定了分布在热... 植物吸收根的生理功能是从土壤中吸收水分和营养物质,研究其解剖结构有助于揭示植物的环境适应策略。热带亚热带地区蕨类植物丰富,生态和经济价值较高,但目前对这一重要植物类群的吸收根解剖特征的研究仍然缺乏。该研究测定了分布在热带亚热带地区4种典型森林的共26种蕨类植物吸收根的解剖特征,分析它们的种间差异,结合系统发育与全球自然分布区的气候因子解释根系性状的变异。同时,通过收集亚热带木本被子植物和温带蕨类植物相关的已发表数据,比较不同类群的根系性状相关关系的差异。结果表明:(1)这些蕨类植物吸收根特征的种间差异显著, 8个根系性状的种间变异系数范围为20.61%–41.75%。(2)除皮层厚度外根系性状无显著的系统发育信号,说明性状变异受系统发育的影响较小;气候因子显著影响根系特征,根直径和皮层厚度随着最干月(季)降水量减少而增大。(3)随着吸收根直径的减小,亚热带木本被子植物趋于具有更低的皮层厚度/中柱直径比值,而蕨类植物则相反;与温带蕨类相比,该研究中蕨类植物具有更大的根直径、皮层厚度和管胞直径。该研究有助于提高对热带亚热带蕨类植物根系生理生态适应性的认识。 展开更多
关键词 吸收根 气候 系统发育 根直径 皮层厚度 中柱直径
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水牛YY1基因克隆及其shRNA片段的筛选 被引量：7
8
作者 龚云 乔树叶 +3 位作者 林浪 王梦 石德顺 李湘萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期62-68,共7页
本试验旨在克隆水牛阴阳因子1(YY1)基因,并筛选获得可有效抑制水牛YY1基因表达的shRNA干扰片段。以水牛成纤维细胞cDNA为模板,采用RT-PCR方法,扩增水牛YY1基因CDS序列,将其连接插入到pMD18-T载体中,进行序列测序并分析。采用Xho I和Eco... 本试验旨在克隆水牛阴阳因子1(YY1)基因,并筛选获得可有效抑制水牛YY1基因表达的shRNA干扰片段。以水牛成纤维细胞cDNA为模板,采用RT-PCR方法,扩增水牛YY1基因CDS序列,将其连接插入到pMD18-T载体中,进行序列测序并分析。采用Xho I和EcoR I双酶切,将水牛YY1基因编码区定向克隆至pEGFP-N1载体中,构建其真核表达载体pYY1-EGFP-N1。设计2条靶向水牛YY1基因的shRNA序列并构建其慢病毒表达载体,命名为pSicoR-GFP-YY1 shRNA1/2。以pSicoR-GFP和pSieoR-GFP-1864分别为空白对照和阴性对照质粒,采用脂质体转染方法,将YY1真核表达载体分别与2条shRNA慢病毒表达载体共转染293T细胞,48h后观察绿色荧光蛋白EGFP表达情况;72h收集共转染细胞样品,采用qRT-PCR和western-blot方法分析YY1基因的表达水平。结果表明,克隆得到1248 bp的水牛YY1基因CDS序列,其与牛YY1基因的同源性达99%。构建的水牛YY1基因真核表达载体pYY1-EGFP-N1能在水牛胎儿成纤维细胞(BFF)中瞬时表达。酶切分析及序列测定结果表明,所构建的shRNA慢病毒表达载体pSieoR-GFP-YY1 shRNA1/2为阳性克隆。质粒共转染293T细胞48h后,可观察到绿色荧光蛋白EGFP的表达。qRT-PCR结果显示,设计合成的2条shRNA对水牛YY1基因的表达均有抑制效果,其中YY1 shRNA2的抑制效果(93.64%)显著高于YY1 shRNA1(50.77%)(P<0.05),Western-blot分析结果显示,2条shRNA对YY1蛋白表达均有抑制效果。以上结果说明克隆得到水牛YY1基因编码区序列,并获得2条有效抑制其表达的shRNA片段,为进一步阐明YY1基因在水牛早期胚胎发育过程中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 水牛YY1基因 SHRNA 慢病毒表达载体 基因表达
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产β-葡萄糖苷酶的菌种的筛选,鉴定及其酶学特性 被引量：10
9
作者 黄琴 朱婷 +2 位作者 蒋承建 申佩弘 武波 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期590-595,共6页
β-葡萄糖苷酶来源广泛,几乎存在于所有的生物体中,而不同来源的β-葡萄糖苷酶其性质也各不同。本文利用七叶苷分离培养基从土样中分离筛选出产6种β-葡萄糖苷酶时间较快的菌种,其中发现菌种WGEA1酶活性较高,随后对菌种WGEA1进行初步的... β-葡萄糖苷酶来源广泛,几乎存在于所有的生物体中,而不同来源的β-葡萄糖苷酶其性质也各不同。本文利用七叶苷分离培养基从土样中分离筛选出产6种β-葡萄糖苷酶时间较快的菌种,其中发现菌种WGEA1酶活性较高,随后对菌种WGEA1进行初步的鉴定并且采用DNS法测该菌株所产粗酶液的酶学特性。酶学特性表明,WGEA1产的β-葡萄糖苷酶最适温度是在50～55℃之间,最适pH在6～7之间;在低于50℃条件下,pH为5～8时,酶活较稳定,同时在最适反应时间30min下,金属离子和有机溶剂都对酶活性影响很大,这些发现都为在非水相体系中酶法合成烷基糖苷奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖苷酶 筛选 鉴定 酶学特性
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超高效液相色谱-串联质谱同时测定加味左金丸中的9种有效成分 被引量：12
10
作者 覃莎 王锦 徐远金 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1153-1158,共6页
建立了同时测定加味左金丸中9种药效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。采用Zorbax RRHD Eclipse Plus C18色谱柱,以含0.2%甲酸的水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,在电喷雾电离(ESI)正离子模式下,采... 建立了同时测定加味左金丸中9种药效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。采用Zorbax RRHD Eclipse Plus C18色谱柱,以含0.2%甲酸的水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,在电喷雾电离(ESI)正离子模式下,采用多重反应监测模式进行检测。结果表明,芍药苷、延胡索乙素、药根碱、小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、柴胡皂苷C、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D的线性范围分别为0.025～5.0 mg/L、0.001 0～2.0 mg/L、0.002 3～7.2 mg/L、0.002 7～28.9 mg/L、0.002 3～9.1 mg/L、0.005 0～1.0 mg/L、0.050～10 mg/L、0.005～1.0mg/L、0.007 5～1.5 mg/L;检出限分别为5.0、0.20、0.45、0.54、0.45、1.0、10、1.0、1.5μg/L。9种成分的加样回收率为99.3%～105%,相对标准偏差均不大于2.6%。该法快捷、准确、重复性好,已成功用于实际样品的分析。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS MS) 有效成分 加味左金丸 中成药
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体细胞核移植技术在猪基因修饰中的应用 被引量：12
11
作者 朱向星 全守能 +1 位作者 黄勇 卢晟盛 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期692-699,共8页
基因修饰猪作为一种理想的动物模型已应用于生物医学研究。构建基因修饰猪的方法很多,包括原核注射、慢病毒转染、精子介导和体细胞核移植等,其中体细胞核移植具有显著优势,一直是构建基因修饰猪的重要方法。近几年,随着转座子、设计核... 基因修饰猪作为一种理想的动物模型已应用于生物医学研究。构建基因修饰猪的方法很多,包括原核注射、慢病毒转染、精子介导和体细胞核移植等,其中体细胞核移植具有显著优势,一直是构建基因修饰猪的重要方法。近几年,随着转座子、设计核酸酶等基因修饰新技术以及诱导性多能干细胞研究的不断进展,将进一步凸显体细胞核移植技术在基因修饰猪构建中的价值。本文比较了猪基因修饰的主要方法,并论述体细胞核移植技术在猪基因修饰中的优势、发展历程和最新应用等。 展开更多
关键词 猪 基因修饰 体细胞核移植 疾病模型
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一种非Piezo依赖的高卵子存活率小鼠显微授精技术 被引量：4
12
作者 苗聪秀 燕志光 +4 位作者 杨红梅 梁红星 于莎 匡延平 吕祁峰 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1020-1023,共4页
目的对已建立的非Piezo依赖的小鼠显微授精技术作进一步改良,以获得更高的卵子存活率。方法将卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术中对卵子深吸持后直接深穿刺(一步法非Piezo-ICSI组)的步骤分成两步进行(两步法非Piezo-ICSI组):先浅吸持... 目的对已建立的非Piezo依赖的小鼠显微授精技术作进一步改良,以获得更高的卵子存活率。方法将卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术中对卵子深吸持后直接深穿刺(一步法非Piezo-ICSI组)的步骤分成两步进行(两步法非Piezo-ICSI组):先浅吸持后浅穿刺,再进一步深吸持后深穿刺;另以孤雌激活发育的卵子作为卵子质量对照组。比较两步法非Piezo-ICSI组与一步法非Piezo-ICSI组卵子的存活率、原核出现率和卵裂率。结果两步法非Piezo-ICSI组的卵子存活率(92.2%)显著高于一步法非Piezo-ICSI组(83.7%)(P<0.01);而原核出现率和卵裂率与一步法非Piezo-ICSI组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠卵子胞膜在被新型持卵管深吸持时的变形造成了部分卵子胞膜变脆,两步法吸持穿刺在深吸持前进行了穿刺,避免了脆性敏感时的穿刺,有利于卵子存活。 展开更多
关键词 卵胞浆内单精子显微注射 卵子 卵胞膜 穿刺 存活率 小鼠
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超高效液相色谱-串联质谱双内标法同时测定复方杏香兔耳风胶囊中的10种有效成分 被引量：5
13
作者 范晓苏 庞倩 徐远金 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期216-223,共8页
建立了同时测定复方杏香兔耳风胶囊中原儿茶酸、原儿茶醛、绿原酸、野黄芩苷、异绿原酸 C、黄芩苷、木犀草素、芹菜素、白术内酯 III 和白术内酯 I 等10种有效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱（ UPLC-MS / MS）双内标分析方法。以咖... 建立了同时测定复方杏香兔耳风胶囊中原儿茶酸、原儿茶醛、绿原酸、野黄芩苷、异绿原酸 C、黄芩苷、木犀草素、芹菜素、白术内酯 III 和白术内酯 I 等10种有效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱（ UPLC-MS / MS）双内标分析方法。以咖啡酸和淫羊藿苷为内标（IS），在 ZORBAX RRHD Eclipse Plus C 18色谱柱上，以甲醇和含0.3％甲酸的水为流动相进行梯度洗脱分离，流速为0.3 mL / min。在电喷雾电离（ESI）正、负离子切换模式下，采用多重反应监测模式进行检测。结果表明，原儿茶酸、原儿茶醛、绿原酸、野黄芩苷、异绿原酸 C、黄芩苷、木犀草素、芹菜素、白术内酯 III、白术内酯 I 的线性范围分别为0.00300～24.0 mg / L、0.0170～2.00 mg / L、0.0150～30.0 mg / L、0.00400～30.0 mg / L、0.0105～24.0 mg / L、0.00300～30.0 mg / L、0.00300～5.00 mg / L、0.00600～5.00 mg / L、0.00150～4.00 mg / L、0.000600～0.900 mg / L；检出限分别为1.0、11、5.0、1.5、3.5、1.0、1.0、2.0、0.50、0.20μg / L。10种成分的加样回收率为92.5％～106％，相对标准偏差均不大于3.2％。该方法快速简便、灵敏度高、重复性好，已成功用于实际样品的分析。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-串联质谱 有效成分 复方杏香兔耳风胶囊 ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry( UPLC-MS MS)
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以产业化促进物种保护和可持续利用的新模式：以兰花为例 被引量：14
14
作者 刘虹 罗毅波 刘仲健 《生物多样性》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期132-135,共4页
如何平衡野生植物的保护与开发的关系已成为亟需解决的社会问题。本文以药用兰科植物铁皮石斛(Dendrobium catenatum)为例,提出在发达地区建立生产和深加工基地,建立公司+林场+农户参与栽培的组织体系,利用铁皮石斛特性促进岩溶和丹霞... 如何平衡野生植物的保护与开发的关系已成为亟需解决的社会问题。本文以药用兰科植物铁皮石斛(Dendrobium catenatum)为例,提出在发达地区建立生产和深加工基地,建立公司+林场+农户参与栽培的组织体系,利用铁皮石斛特性促进岩溶和丹霞地貌生态保护,即在岩溶和丹霞贫困地区自然环境下进行种群野外回归增加资源存量,并实施可持续性收获,增加栖息地的保护动力。这种经济利益引导的保护模式与西方发达国家的濒危物种保护模式有别,但更适合中国国情,可在实现经济效益的同时促进兰科物种恢复和保护。 展开更多
关键词 兰科植物 DENDROBIUM catenatum 保护 产业开发 模式
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TSA和VPA处理对食蟹猴-猪异种体细胞核移植胚胎早期发育的影响 被引量：3
15
作者 秦祖兴 黄高波 +3 位作者 罗军 宁淑芳 卢晟盛 卢克焕 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期342-347,共6页
食蟹猴-猪异种体细胞核移植(Interspecies somatic cell nuclear transfer,iSCNT)研究旨在由iSCNT胚胎建立具有与人类相似遗传背景的胚胎干细胞(ESCs),作为医学和基础科学研究的实验材料。文章探讨了两种组蛋白脱乙酰化酶抑制剂(HDACi)T... 食蟹猴-猪异种体细胞核移植(Interspecies somatic cell nuclear transfer,iSCNT)研究旨在由iSCNT胚胎建立具有与人类相似遗传背景的胚胎干细胞(ESCs),作为医学和基础科学研究的实验材料。文章探讨了两种组蛋白脱乙酰化酶抑制剂(HDACi)Trichostatin A(TSA)和Valproic acid(VPA)处理浓度、时间与培养液(PZM-3和HECM-10)组合对食蟹猴-猪iSCNT胚胎早期发育的影响。结果表明,在PZM-3中添加10 nmol/L TSA处理48 h组的囊胚率显著高于对照组(22.78%vs 9.86%,P<0.05)。但是,不管在PZM-3或是HECM-10中,添加2～10mmol/L VPA处理均不能提高iSCNT胚胎早期发育能力。文章证明了TSA处理可以提高食蟹猴-猪iSCNT胚胎早期发育能力。 展开更多
关键词 组蛋白脱乙酰化酶抑制剂(HDACi) 食蟹猴 猪 异种核移植 胚胎发育
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供体细胞、去核方法以及TSA处理对巴马小型猪手工克隆胚胎发育的影响 被引量：1
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作者 苏克同 燕志光 +1 位作者 孙如玉 卢晟盛 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期296-302,共7页
本文用不同的供体细胞、去核方法以及TSA处理浓度研究其对巴马小型猪手工克隆胚发育的影响,试验结果发现:克隆胚的发育率在相同代次的不同供体细胞之间,极体定向和化学辅助去核法之间均无显著性差异(p>0.05);TSA浓度为40nmol/L时克... 本文用不同的供体细胞、去核方法以及TSA处理浓度研究其对巴马小型猪手工克隆胚发育的影响,试验结果发现:克隆胚的发育率在相同代次的不同供体细胞之间,极体定向和化学辅助去核法之间均无显著性差异(p>0.05);TSA浓度为40nmol/L时克隆胚的囊胚率最高,但与对照组相比无显著性差异(p>0.05)。这说明三种供体细胞均能支持巴马小型猪克隆胚的早期发育,化学辅助和极体定向去核法均为较好的去核方法。 展开更多
关键词 供体类型 去核方法 TSA 手工核移植 巴马小型猪
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精子脱尾温育降低小鼠卵胞浆内单精子显微注射的受精率 被引量：1
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作者 苗聪秀 燕志光 +5 位作者 杨红梅 龙慧 梁红星 于莎 匡延平 吕祁峰 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期1-4,共4页
目的脱尾的精子头注射是小鼠显微授精的一种常用方法,脱尾对精子造成的膜损伤是否影响卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)的受精率和卵裂率尚不清楚,该研究拟初步探索精子的机械脱尾等膜损伤以及不同温育条件对ICSI的受精率和卵裂率的影响。... 目的脱尾的精子头注射是小鼠显微授精的一种常用方法,脱尾对精子造成的膜损伤是否影响卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)的受精率和卵裂率尚不清楚,该研究拟初步探索精子的机械脱尾等膜损伤以及不同温育条件对ICSI的受精率和卵裂率的影响。方法首先,用机械吹打法处理小鼠精子悬液,使得部分精子脱尾,于不同温度下孵育,观察孵育温度对ICSI的受精率和卵裂率的影响;然后比较精子化学破膜与吹打脱尾处理后温育一定时间对显微授精的受精率、卵裂率的影响。结果相对于对照组,对小鼠精子进行吹打脱尾,经37℃下温育12 h后的显微授精双原核形成率和卵裂率显著下降(75.6%vs 15.1%,P<0.01;91.1%vs 18.9%,P<0.01),而4℃下温育12 h的结果未见正常受精率和卵裂率受显著影响。用Triton-100精子进行化学破膜后温育,尽管其没有机械脱尾法效果显著,也同样明显降低了受精率和卵裂率(P<0.01)。结论该研究初步提示,精子脱尾等破膜损伤在经37℃较长时间温育后会降低小鼠ICSI的受精率,常规小鼠ICSI操作中小鼠精子批量脱尾处理后不宜在37℃下放置过久。 展开更多
关键词 卵胞浆内单精子显微注射(ICSI) 受精率 卵裂率 脱尾 小鼠
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液质联用法分析王老吉凉茶中的3种有效成分 被引量：2
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作者 朱平川 岑卫健 范晓苏 《湖北大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第2期123-126,131,共5页
建立同时测定王老吉凉茶中的绿原酸、异绿原酸C、甘草酸3种有效成分含量的超高效液相色谱一串联质谱（UPLC-MS／MS）分析方法．用Agilent Zorbax RRHD Eclipse PlusC18（50mm×2．1mm，1．8μm）色谱柱，以甲醇-0．1％甲酸的水溶液... 建立同时测定王老吉凉茶中的绿原酸、异绿原酸C、甘草酸3种有效成分含量的超高效液相色谱一串联质谱（UPLC-MS／MS）分析方法．用Agilent Zorbax RRHD Eclipse PlusC18（50mm×2．1mm，1．8μm）色谱柱，以甲醇-0．1％甲酸的水溶液为流动相，流速为0．30mL／min在电喷雾电离（ESI）模式下，采用的是多重反应监测模式（MRM）进行检测，绿原酸、异绿原酸C、甘草酸的线性范围分别为0．030～4．500mg／L、0．045～4．500mg／L、0．016～2．000mg／L；检出限分别为10、12、3μg／L；3种成分的加样回收率为94．7％～103％，RSD均不大于1．9％.该方法简便、准确、快速、高灵敏度，已成功地用于实际的样品分析． 展开更多
关键词 王老吉凉茶 有效成分 超高效液相色谱一串联质谱(UPLC-MS MS)
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UPLC-MS/MS法同时测定川黄口服液中的5种有效成分 被引量：1
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作者 岑卫健 朱平川 +1 位作者 范晓苏 莫琪红 《湖北大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第2期119-122,131,共5页
建立同时测定川黄口服液中的原儿茶醛、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA5种有效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS／MS）分析方法．用C18（50mmx2．1mm，1．8μm）分析柱，乙腈-0．1％甲酸水为流动相，流速为0．3... 建立同时测定川黄口服液中的原儿茶醛、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA5种有效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS／MS）分析方法．用C18（50mmx2．1mm，1．8μm）分析柱，乙腈-0．1％甲酸水为流动相，流速为0．35mL／min．在电喷雾电离（ESI）正离子和负离子模式下，采用的是多重反应监测模式（MRM）进行检测．结果表明，原儿茶醛、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的线性范围分别为0．3～12．0mg／L、0．3～7．2mg／L、0．15～6．00mg／L、0．005～2．000mg／L、0．005～1．000mg／L；5种成分的加样回收率为78．5％～102．0％；相对标准偏差均不大于4．01％．本方法简便、准确、快速、重复性好，高灵敏度，可作为川黄口服液质量评价指标之一． 展开更多
关键词 川黄口服液 有效成分 超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS MS)
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水牛转录因子Klf4基因编码区序列克隆及在真核细胞中表达研究
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作者 邓彦飞 石德顺 +3 位作者 刘庆友 邓海莹 罗婵 杨素芳 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期713-718,共6页
Krüppel样因子4(Klf4)在调控细胞增殖、分化和胚胎发育中有重要作用,也是生产诱导多能干细胞(iPSC)重要的转录因子之一。本研究对水牛Klf4进行克隆和表达研究,为生产水牛iPSC和研究其在体细胞重编程中的机理奠定基础。采用RT-PCR... Krüppel样因子4(Klf4)在调控细胞增殖、分化和胚胎发育中有重要作用,也是生产诱导多能干细胞(iPSC)重要的转录因子之一。本研究对水牛Klf4进行克隆和表达研究,为生产水牛iPSC和研究其在体细胞重编程中的机理奠定基础。采用RT-PCR克隆并分析水牛Klf4编码区序列(CDS);mRNA水平和蛋白水平检测Klf4在水牛胎儿成纤维细胞(BFF)和胃上皮细胞(BSEC)中的表达情况;构建表达水牛Klf4的逆转录病毒载体(pMX-Klf4)、病毒感染BFF、免疫荧光技术分析外源Klf4在BFF中的表达情况。结果表明:水牛CDS全长1 434 bp,氨基酸序列与牛、猪、人和鼠相应氨基酸序列的相似性分别为99%、97%、92%和92%,蛋白结构保守;内源Klf4在BFF和BSEC中都有表达,pMX介导的外源Klf4能在BFF中表达。 展开更多
关键词 水牛 KLF4 编码区序列 真核表达
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