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橡胶树形成层组织的酵母双杂交cDNA文库构建及HbHDA6互作蛋白筛选
1
作者 张世鑫 吴绍华 +5 位作者 杨署光 晁金泉 史敏晶 葛立鑫 蒋毅 田维敏 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期245-256,共12页
次生乳管是天然橡胶合成和贮存的场所,是由橡胶树树干树皮中维管形成层细胞分裂分化而来。次生乳管的数量与天然橡胶产量直接相关,而这些乳管的数量取决于形成层分化次生乳管的频率(乳管分化能力),是橡胶树产量育种的主要指标。前期研究... 次生乳管是天然橡胶合成和贮存的场所,是由橡胶树树干树皮中维管形成层细胞分裂分化而来。次生乳管的数量与天然橡胶产量直接相关,而这些乳管的数量取决于形成层分化次生乳管的频率(乳管分化能力),是橡胶树产量育种的主要指标。前期研究中,我们发现组蛋白去乙酰化酶(HDA)抑制剂曲古抑菌素A(TSA)能诱导橡胶树乳管分化且组蛋白去乙酰化酶基因(HbHDA6)能够参与橡胶树乳管分化调控。由于组蛋白乙酰化修饰调控橡胶树次生乳管分化的分子机制尚未阐明,因此该文使用冠菌素(COR)诱导橡胶树形成层分化产生次生乳管的实验系统,以分离形成层组织为材料,构建酵母双杂交cDNA文库,以HbHDA6基因为诱饵来筛选酵母双杂交文库,确定与HbHDA6相互作用的蛋白。结果表明:(1)利用Gateway技术构建的均一化COR诱导橡胶树形成层组织的酵母双杂交cDNA文库,初级文库的容量为6.34×10^(6)CFU·mL^(-1),总单克隆数为1.27×10^(7),文库重组率为100%;次级文库的容量为7.72×10^(6)CFU·mL^(-1),总单克隆数为1.54×10^(7),文库重组率为100%。初级文库和次级文库的插入片段平均长度分别为1.1 kb和1.2 kb。(2)成功构建了筛选HbHDA6互作蛋白的pGBKT7-HbHDA6诱饵载体,并确认无自激活活性。(3)使用该诱饵载体对构建的酵母双杂交cDNA文库进行筛选,并通过NCBI_BLAST比对和去除重复以后,获得了22个与HbHDA6发生互作的蛋白,包括CLP1、ERF3、ERF4、HSP82、LARP6a、APT5、PP2A、FBA6等。该研究成果为解析组蛋白乙酰化修饰调控橡胶树次生乳管分化的分子机制提供了理论基础,为转基因改良橡胶树的产胶潜力提供了候选基因,为高性能天然橡胶遗传改良育种提供了新线索。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 次生乳管分化 维管形成层 酵母双杂交 HbHDA6
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橡胶树野生种质资源产量相关性状的灰色关联度分析
2
作者 胡彦师 周世俊 +2 位作者 刘晓东 涂敏 曾霞 《广东农业科学》 CAS 2023年第6期27-35,共9页
【目的】天然橡胶是重要的工业原料和战略物资,在国民经济发展中具有十分重要的地位和作用,属资源约束性产业,其主要来源于巴西橡胶树,在已知的产胶植物中以橡胶树的产胶量最高,质量最好。巴西橡胶树以收获胶乳为主要经济产出,胶乳产量... 【目的】天然橡胶是重要的工业原料和战略物资,在国民经济发展中具有十分重要的地位和作用,属资源约束性产业,其主要来源于巴西橡胶树,在已知的产胶植物中以橡胶树的产胶量最高,质量最好。巴西橡胶树以收获胶乳为主要经济产出,胶乳产量是受微效多基因控制的数量性状,影响因素较多,其表型值受遗传效应和环境效应影响,为全面了解橡胶树野生种质资源产量与主要相关农艺性状的关系,对橡胶树干胶产量及主要农艺性状进行研究,以期为橡胶树种质资源鉴定评价筛选以及新品种选育种研究提供科学依据。【方法】采用灰色关联度分析法,对种植于中国热带农业科学院试验场红星队的13份橡胶树野生种质资源产量及生长等相关农艺性状进行研究分析。【结果】与株次干胶产量相关的8个主要农艺性状的关联顺序为茎围>干胶含量>平均乳管个数>平均乳管列数>树皮厚度>茎围增长>侧脉胶等级>胶值比,对应权重分别为茎围0.1380、干胶含量0.1338、平均乳管个数0.1322、平均乳管列数0.1264、树皮厚度0.1205、茎围增长0.1182、侧脉胶等级0.1178、胶值比0.1143。综上,茎围、干胶含量、乳管数目、树皮厚度等性状与干胶产量的关联度较密切,对株次干胶产量影响较大。【结论】在橡胶树种质资源鉴定评价中,应以茎围、干胶含量、乳管数量等性状为重点,并兼顾其他性状对产量的潜在影响。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 野生种质资源 产量 相关性状 灰色关联度分析
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植物激素调控橡胶树产排胶机制研究进展
3
作者 郭冰冰 刘明洋 +2 位作者 代龙军 杨洪 王立丰 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期161-167,共7页
巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)是重要热带经济作物之一,其次生代谢产物天然橡胶(NR)是中国重要的工业原料及战略物资。植物激素对植物生长发育、萌发和环境应答等多方面均具有重要调控作用。本文详细介绍了乙烯、脱落酸、油菜素内酯... 巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)是重要热带经济作物之一,其次生代谢产物天然橡胶(NR)是中国重要的工业原料及战略物资。植物激素对植物生长发育、萌发和环境应答等多方面均具有重要调控作用。本文详细介绍了乙烯、脱落酸、油菜素内酯和赤霉素4种植物激素在橡胶树生长发育、橡胶生物合成、产排胶和品质形成等关键环节中应用的研究进展,并展望4种激素在提高橡胶树产排胶机制研究中的应用前景,为支撑橡胶产业发展提供理论支撑。 展开更多
关键词 橡胶树 排胶 植物激素 天然橡胶 生物合成
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橡胶树蛋白激酶基因SnRK2.7的克隆及表达
4
作者 刘云飞 李言 田维敏 《热带生物学报》 2024年第1期1-9,共9页
为了探索蔗糖非发酵相关蛋白激酶2(Sucrose non-fermentating1-related protein kinase 2,SnRK2)在巴西橡胶树响应低温胁迫应答中的作用,采用RT-PCR技术,从橡胶树抗寒无性系93-114的叶片中克隆了SnRK2亚家族的一个成员,命名为HbSnRK2.7... 为了探索蔗糖非发酵相关蛋白激酶2(Sucrose non-fermentating1-related protein kinase 2,SnRK2)在巴西橡胶树响应低温胁迫应答中的作用,采用RT-PCR技术,从橡胶树抗寒无性系93-114的叶片中克隆了SnRK2亚家族的一个成员,命名为HbSnRK2.7。该基因包含一个1095 bp的开放阅读框,编码364个氨基酸。HbSnRK2.7的分子量为41.39 kD,等电点为4.70,具有保守丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域,预测其能催化磷酸基从ATP转移到蛋白质底物上的丝氨酸/苏氨酸残基上,也是磷酸化位点的集中区域,还具有非生物胁迫所需的结构域和ABA(脱落酸)依赖的HbSnRK2.7激活所需结构域。q-PCR结果显示,HbSnRK2.7基因响应ABA诱导,呈下调表达模式。在ABA处理8 h时,表达量下调到最低点。在低温胁迫下,HbSnRK2.7的表达量极显著降低。低温胁迫4 h和8 h时,HbSnRK2.7持续下调表达,低温胁迫24 h时,HbSnRK2.7表达量下调到最低,大约为非胁迫表达量的1/2。而且,HbSnRK2.7在不抗寒种质中的表达量显著高于抗寒种质。这些结果表明,HbSnRK2.7可能作为负调控因子介导橡胶树依赖ABA的低温胁迫抗性形成。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 蔗糖非发酵相关蛋白激酶 荧光定量PCR 低温胁迫抗性 脱落酸信号途径
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农业科研实验室危化品安全管理实践与探析——以中国热带农业科学院橡胶研究所为例 被引量：1
5
作者 程琳琳 《农业科研经济管理》 2019年第4期38-42,共5页
实验室危化品管理是农业科研实验室安全管理的重要组成部分,是实验室安全事故的主要因素之一。以中国热带农业科学院橡胶研究所为例,结合实验室危化品采购、存储、领用及废弃物处置等现状,针对危化品管理各环节过程中存在的问题,提出了... 实验室危化品管理是农业科研实验室安全管理的重要组成部分,是实验室安全事故的主要因素之一。以中国热带农业科学院橡胶研究所为例,结合实验室危化品采购、存储、领用及废弃物处置等现状,针对危化品管理各环节过程中存在的问题,提出了健全相关规章制度、严格把控责任关、完善相关设施条件、强化安全教育、危化品废弃物处置的减量化与高效化等对策与建议,为农业科研实验室危化品安全管理提供参考。 展开更多
关键词 农业科研单位 危化品安全管理 实践与探索
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利用橡胶树来源β-石竹烯新合成酶构建工程酿酒酵母的研究
6
作者 石彬 娄晶 +1 位作者 杨竹如 邓小敏 《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第8期147-152,共6页
为了利用生物技术高效合成β-石竹烯,该研究从橡胶树(Hevea brasiliensis)中筛选并鉴定到β-石竹烯新合成酶,并构建高产β-石竹烯酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌株。结果表明,在橡胶树中筛选鉴定出一个新的β-石竹烯合成酶基... 为了利用生物技术高效合成β-石竹烯,该研究从橡胶树(Hevea brasiliensis)中筛选并鉴定到β-石竹烯新合成酶,并构建高产β-石竹烯酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌株。结果表明,在橡胶树中筛选鉴定出一个新的β-石竹烯合成酶基因,命名为HbBACS,其与已报道的β-石竹烯合成酶相比,编码蛋白的氨基酸序列同源性和相似性均较低。利用密码子优化的该基因构建工程酿酒酵母YCAR02,其β-石竹烯摇瓶发酵产量为206 mg/L。进一步对工程酿酒酵母YCAR02进行两阶段分批补料发酵,在添加10%肉豆蔻酸异丙酯覆盖剂的条件下,5 L发酵罐中β-石竹烯产量达到8.47 g/L。橡胶树来源的新β-石竹烯合成酶活性较高,这为利用合成生物技术规模化生产β-石竹烯提供了新的思路与方法。 展开更多
关键词 β-石竹烯 橡胶树 新合成酶 酿酒酵母 倍半萜 分批补料发酵
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六点始叶螨在7个橡胶树无性系上的生物学特性和药效试验 被引量：2
7
作者 苏雪芳 孙晶 +2 位作者 位明明 李维国 黄肖 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2022年第6期1214-1220,共7页
六点始叶螨(Eotetranychus sexmaculatuss)作为橡胶树的重要害螨,对橡胶树的生长发育产生巨大危害,严重影响橡胶树产量。为进一步明确六点始叶螨在不同橡胶树无性系上的发育和繁殖情况,以及不同螨态对杀螨剂的敏感程度。本研究以‘热研8... 六点始叶螨(Eotetranychus sexmaculatuss)作为橡胶树的重要害螨,对橡胶树的生长发育产生巨大危害,严重影响橡胶树产量。为进一步明确六点始叶螨在不同橡胶树无性系上的发育和繁殖情况,以及不同螨态对杀螨剂的敏感程度。本研究以‘热研87-6-62’‘热研87-6-47’‘热研93-59’‘热研87-4-19’‘热研89-4-51’‘PR107’‘RRIM600’7个橡胶树无性系稳定期叶片作为六点始叶螨的寄主,分析了各螨态的形态特征、发育历期以及繁殖能力。同时,采用浸叶蝶法、叶片残毒法、玻璃浸渍法测定了4种杀虫剂对六点始叶螨各螨态的活性。结果显示,在(28±1)℃、RH(75±5)%、光照[16(L)∶8(D)]条件下,六点始叶螨在以上7个橡胶树无性系上各螨态发育时间从长到短为:成螨期>后若螨→成螨>前若螨→后若螨>卵→前若螨,六点始叶螨各螨态在‘RRIM600’无性系上的发育历期最短,在‘热研87-6-62’和‘热研87-6-47’无性系上的发育历期相对较长;六点始叶螨在7个橡胶树无性系上的单雌产卵量由多到少依次为:‘PR107’>‘RRIM600’>‘热研89-4-19’>‘热研93-59’>‘热研89-4-51’>‘热研87-6-47’>‘热研87-6-62’,其中‘PR107’上单雌产卵量最多,平均单雌产卵量为12.17个,‘热研87-6-62’单雌产卵量最少,平均单雌产卵量为7.33个。筛选不同化学药剂对六点始叶螨进行防效试验,结果表明4种药剂在药后15 d的校正死亡率均在80%以上,其中15%哒螨灵乳油和1.8%阿维菌素·高效氯氰菊酯乳油的速效性较好,在施药3 d后死亡率可达80%以上。 展开更多
关键词 橡胶树无性系 六点始叶螨 生物学特性 药效试验
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死皮对橡胶树树皮线粒体超微结构及活性氧代谢的影响 被引量：2
8
作者 杨洪 王立丰 +1 位作者 代龙军 郭冰冰 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期69-75,共7页
为了解析橡胶树(Hevea brasiliensis)死皮的发生机制,有效进行死皮防治,以健康、轻度死皮、重度死皮橡胶树树皮为材料,研究死皮发生过程中树皮线粒体超微结构变化规律及活性氧(ROS)相关基因的表达模式变化。结果表明:死皮树线粒体超微... 为了解析橡胶树(Hevea brasiliensis)死皮的发生机制,有效进行死皮防治,以健康、轻度死皮、重度死皮橡胶树树皮为材料,研究死皮发生过程中树皮线粒体超微结构变化规律及活性氧(ROS)相关基因的表达模式变化。结果表明:死皮树线粒体超微结构发生不规则形变,膜内基质溶解,嵴消失,内腔空泡化等,且严重程度与死皮严重程度成正比。荧光定量PCR结果表明,过氧化物酶基因HbPOD2和HbPOD3在死皮树中的表达量高于健康树,可作为监测割胶强度、刺激强度和死皮发生的“标志”基因。植物细胞重要ROS清除酶过氧化氢酶基因HbCAT在死皮树中也下调表达,预示ROS产生与清除之间的平衡是影响橡胶树死皮发生的关键因素。橡胶树中重要抗氧化代谢物基因表达结果表明,HbGST1、HbGST2和HbPPO在死皮树中的表达量均高于健康树,可能与死皮发生过程胶乳原位凝固相关。本研究通过揭示死皮发生过程树皮超微结构和ROS相关基因表达模式变化,为阐明橡胶树死皮发生机制提供新观点,同时为进一步开发监测割胶强度、刺激强度和死皮发生的基因“标志”提供理论基础。 展开更多
关键词 橡胶树 死皮 超微结构 活性氧 基因表达
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橡胶树割面涂施制剂载体黏度及其成膜性比较研究 被引量：1
9
作者 胡义钰 刘辉 +3 位作者 冯成天 袁坤 何其光 王真辉 《应用化工》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2539-2541,2546,共4页
针对现有橡胶树割面涂施制剂,其载体成膜粘附性不是很理想,存在容易被雨水冲刷、成膜不均匀、容易干裂等缺陷。选择聚乙烯醇(17-88)、聚乙烯醇(24-88)、聚乙烯醇(22-99H)、壳聚糖、海藻酸钠、聚甲基纤维素钠6种常见的胶体制剂载体,对其... 针对现有橡胶树割面涂施制剂,其载体成膜粘附性不是很理想,存在容易被雨水冲刷、成膜不均匀、容易干裂等缺陷。选择聚乙烯醇(17-88)、聚乙烯醇(24-88)、聚乙烯醇(22-99H)、壳聚糖、海藻酸钠、聚甲基纤维素钠6种常见的胶体制剂载体,对其黏度及成膜性进行评价。评价结果表明,聚乙烯醇(17-88)、聚乙烯醇(24-88)、聚乙烯醇(22-99H)三种材料黏度及成膜性相对较好,适宜作为橡胶树割面涂施制剂载体,其中聚乙烯醇(24-88)载体最佳,其浓度为5%~10%适宜。聚乙烯醇(24-88)载体黏度适中,易于配制,成膜均匀,附着力强,耐折性好,机械性能稳定,是一种较理想的橡胶树割面涂施制剂载体。 展开更多
关键词 橡胶树 载体 涂施制剂 黏度 成膜性
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橡胶树膜系统酵母双杂交cDNA文库构建及HbSRPP7互作蛋白筛选 被引量：1
10
作者 聂智毅 康桂娟 +1 位作者 覃怀德 曾日中 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第9期1735-1744,共10页
橡胶树橡胶粒子上的蛋白质在橡胶生物合成一系列反应过程中起着关键作用,它们直接决定着橡胶烃分子的数量和大小,影响天然橡胶的产量和质量。小橡胶粒子蛋白(small rubber particle protein,SRPP)是丰度仅次于橡胶延伸因子(rubber elong... 橡胶树橡胶粒子上的蛋白质在橡胶生物合成一系列反应过程中起着关键作用,它们直接决定着橡胶烃分子的数量和大小,影响天然橡胶的产量和质量。小橡胶粒子蛋白(small rubber particle protein,SRPP)是丰度仅次于橡胶延伸因子(rubber elongation factor,REF)的橡胶粒子蛋白组分,与橡胶粒子发育和橡胶生物合成密切相关。目前已知橡胶粒子上存在多种SRPP家族蛋白,但大部分成员的功能尚不清楚。SRPP可能通过与其他橡胶粒子蛋白相互作用发挥功能。为了筛选SRPP蛋白家族成员之一Hb SRPP7的互作蛋白,本研究利用位点特异性重组技术构建了原始库容为1.5×10^(7)CFU的均一化橡胶树胶乳膜蛋白酵母双杂交系统(membrane yeast two-hybrid system,MYTH)cDNA文库,该文库插入片段平均长度大于1500 bp,重组率约为100%。构建了用于MYTH系统筛选HbSRPP7互作蛋白的pBT3STE-SRPP7和pBT3SUC-SRPP7诱饵载体并确认其能在NMY32酵母菌株中正确表达,无自激活活性。使用pBT3STE-SRPP7诱饵质粒对胶乳MYTHcDNA文库进行筛选,获得21个HbSRPP7候选互作的蛋白,包括3个REF家族蛋白(HbREF1、HbREF3和HbREF8)、2个SRPP家族蛋白(HbSRPP1、HbSRPP2)、2个活性氧清除相关蛋白(thioredoxin H-type-like、L-ascorbate peroxidase 2)以及5个胁迫相关蛋白(high mobility group Bprotein 2-like、RPM1-interacting protein 4-like、stress-related protein-like、salt stress-induced hydrophobic peptide ESI3-like和F-box/kelch-repeat protein)。结果显示HbSRPP7除了可能通过与橡胶生物合成相关的橡胶粒子蛋白互作参与橡胶生物合成,也可能通过与生物和非生物逆境胁迫相关蛋白互作,响应橡胶树乳管生物和非生物逆境胁迫系统信号,参与橡胶粒子上的橡胶生物合成调控。该研究结果有助于了解SRPP家族蛋白的功能,为揭示橡胶粒子上参与橡胶生物合成的蛋白复合体组成,阐明橡胶生物合成及其调控的分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 橡胶树 HbSRPP7 膜蛋白酵母双杂交系统 CDNA文库 互作蛋白
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不同氮水平下橡胶树氮素贮藏及翌年分配利用特性 被引量：12
11
作者 张永发 吴小平 +5 位作者 王文斌 陈艳彬 罗雪华 薛欣欣 王大鹏 赵春梅 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第12期2313-2320,共8页
以2年生幼龄橡胶树为试材,采用落叶期换土移栽法,利用^15N同位素示踪技术,研究了少量施氮(N28)、适量施氮(N56)和过量施氮(N84)3个氮素水平下幼树的生长差异及氮吸收、利用和分配特性。结果表明:适量施氮肥利于树体生长。以N28处理为对... 以2年生幼龄橡胶树为试材,采用落叶期换土移栽法,利用^15N同位素示踪技术,研究了少量施氮(N28)、适量施氮(N56)和过量施氮(N84)3个氮素水平下幼树的生长差异及氮吸收、利用和分配特性。结果表明:适量施氮肥利于树体生长。以N28处理为对照,N56和N84处理均通过促进根系生长进而促进地上部生长,且N56处理对地上部生长的促进作用较N84更为显著。N28、N56和N84处理橡胶树当年氮肥利用率分别为47.55%、46.83%、39.09%,在第2年春季第一蓬叶稳定期后,各处理氮肥利用率分别为44.49%、43.79%、38.17%。橡胶树氮素的主要贮藏部位为主干和根系,其^15N分配率为59.58%左右,主干木质部的^15N分配率最高,N28、N56和N84处理分别为24.65%、28.69%和25.50%;3个处理地上部枝干中的^15N分配率为76.85%(N28)、78.24%(N56)和75.51%(N84)。经过春季的重新再利用,第1年吸收贮藏的氮素由枝干和根系向新生器官(新梢木质部、新梢皮部、叶片及叶柄)大量运转,满足其生长发育的需要;N28、N56和N84处理新生器官中的Ndff%较高,分别为9.60%~11.31%、18.39%~21.43%和31.67%~34.04%,而主干木质部中的Ndff%较低,分别为3.86%、7.90%和13.77%。贮藏氮在橡胶树春季器官的生长发育中起到重要作用,3个处理新生器官中的^15N分配率为50.60%(N28)、53.98%(N56)和53.28%(N84)。适量施氮水平下^15N在地上部枝干中的贮藏比例较高,翌年新生器官中的分配率也高,有利于橡胶树氮素的季节性循环利用及生长发育的需要。 展开更多
关键词 幼龄橡胶树 ^15N-尿素 贮藏 分配利用
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死皮橡胶树恢复产胶过程中树皮结构及胶乳生理动态分析
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作者 袁坤 何晶 +4 位作者 冯成天 胡义钰 刘辉 何其光 王真辉 《西南林业大学学报（自然科学）》 CAS 北大核心 2023年第3期10-16,共7页
采用1-MCP促进死皮树恢复产胶,测定死皮树恢复产胶过程中树皮结构及胶乳产量、无机磷、硫醇、蔗糖、黄色体破裂指数等生理参数的变化。结果表明:促进死皮树恢复产胶过程中,死皮树的树皮结构发生明显变化,树皮中黄皮有效乳管列数增加,石... 采用1-MCP促进死皮树恢复产胶,测定死皮树恢复产胶过程中树皮结构及胶乳产量、无机磷、硫醇、蔗糖、黄色体破裂指数等生理参数的变化。结果表明:促进死皮树恢复产胶过程中,死皮树的树皮结构发生明显变化,树皮中黄皮有效乳管列数增加,石细胞和膨大乳管面积减少。从胶乳生理参数的变化来看,胶乳产量呈显著上升趋势,处理前死皮树的胶乳产量为19.89 mL,死皮树恢复产胶后胶乳产量显著增加至最大值,达151.17 mL;硫醇和无机磷含量均呈先下降后上升趋势。处理前死皮树硫醇和无机磷含量分别为0.64 mmol/L和11.26 mmol/L,死皮树恢复产胶后,硫醇和无机磷含量均显著增加至最大值,分别为1.19 mmol/L和14.56 mmol/L;蔗糖含量的变化趋势与胶乳产量的变化趋势一致,也呈显著上升趋势;黄色体破裂指数在死皮树恢复产胶后显著下降至最低值,为13.47%。总体来看,死皮树恢复产胶过程中,硫醇、无机磷和蔗糖含量的变化与胶乳产量的变化呈正相关,而黄色体破裂指数的变化则与产量呈负相关。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 死皮 产胶 树皮 胶乳 生理参数
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适合全周期间作的橡胶树品种热垦628花药再生体系研究
13
作者 成镜 黄天带 +1 位作者 戴雪梅 徐正伟 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第9期1794-1800,共7页
在橡胶树体胚发生再生体系研究中,如何快速获得胚性愈伤组织是能否成功建立再生体系的关键。本研究基于课题组前期的研究基础,以橡胶树花药为外植体,通过正交试验设计方案研究了毒莠定、KT、6-BA、IAA四种激素的不同浓度组合对橡胶树花... 在橡胶树体胚发生再生体系研究中,如何快速获得胚性愈伤组织是能否成功建立再生体系的关键。本研究基于课题组前期的研究基础,以橡胶树花药为外植体,通过正交试验设计方案研究了毒莠定、KT、6-BA、IAA四种激素的不同浓度组合对橡胶树花药胚性愈伤组织诱导的影响,结果表明:橡胶树花药愈伤组织诱导的最优组合培养基为MS基础培养基,硫胺素0.4 mg/L、天冬酰胺300 mg/L、水解酪蛋白100 mg/L、脯氨酸100 mg/L、精氨酸100 mg/L、谷氨酰胺100 mg/L、L-半胱氨酸-盐酸盐50 mg/L、蔗糖70 g/L、椰子水50 mL/L、植物凝胶2.2 g/L,并添加毒莠定浓度20 mg/L、KT浓度2 mg/L、6-BA浓度1 mg/L、IAA浓度0 mg/L,愈伤组织诱导率达73.3%~100%。所有处理在诱导愈伤组织25~28 d左右,愈伤组织达到快速增殖时期,对胚性愈伤组织的诱导起主要作用的是毒莠定浓度,其浓度在20~30 mg/L之间时,对胚性愈伤组织的诱导有促进作用。低浓度的毒莠定虽然也能诱导愈伤组织产生,但是这些愈伤组织几乎为无胚胎发生能力的非胚性愈伤组织。同时用获得的11个体胚进行植株再生,其中出苗2株,7个只长根不抽芽,2个既不抽芽也不长根,植株再生率达18%。因此,在此研究的基础上,对愈伤组织诱导培养基配方进行进一步优化,使其能够更快地从花药中诱导出胚性愈伤组织,缩短胚性愈伤组织的诱导时间,降低变异几率,可为RITA生物反应器提供更好条件的愈伤组织起始原料。 展开更多
关键词 橡胶树 花药 胚性愈伤组织 植株再生
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橡胶树树皮细胞木质素显示方法的比较分析
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作者 史敏晶 张世鑫 +2 位作者 丁欢 蒋毅 田维敏 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第10期2008-2015,共8页
巴西橡胶树是最重要的人工栽培产胶植物,树干割胶是当前从橡胶树乳管组织中获取天然橡胶的唯一途径。割胶后的排胶特性直接决定胶乳的产量,但其排胶机理目前尚不完全清楚。橡胶树树皮的膨压是乳管排胶的主要初动力,而细胞壁的主要成分... 巴西橡胶树是最重要的人工栽培产胶植物,树干割胶是当前从橡胶树乳管组织中获取天然橡胶的唯一途径。割胶后的排胶特性直接决定胶乳的产量,但其排胶机理目前尚不完全清楚。橡胶树树皮的膨压是乳管排胶的主要初动力,而细胞壁的主要成分木质素含量的高低与膨压密切相关。目前关于橡胶树树干树皮细胞中木质素含量的研究较少,缺乏通过形态结构研究分析木质素含量高低的研究。以橡胶树RY8-79和PR107成龄树树皮为研究材料,制备石蜡切片,分别以Wiesner反应方法、Maule反应方法以及番红染色结合荧光显色的方法对树皮组织中的木质素进行了染色定位分析。研究结果表明:光镜明场下,Wiesner反应方法和Maule反应方法能显色薄壁细胞壁中的木质素成分,但颜色浅淡,很难区分不同品系之间的差异;番红染色后能观察到薄壁细胞中浅紫红色的木质素成分,但不同组织以及不同品系之间同样很难区分;番红显色后结合546 nm绿光激发则能观察到木质素组织明显的红色荧光,不同细胞类型和不同品系之间差异明显,RY8-79薄壁细胞中木质素荧光明显弱于PR107,表明该品系中木质素的含量低于PR107。碘-溴染色显示次生乳管的结果表明,次生乳管分布的位置和木质素显色较深尤其是荧光强的部位一致。由此推测乳管及其周围的细胞中木质素含量较高,这一现象在PR107中尤其明显。此外,Wiesner反应和Maule反应不仅需要间苯三酚、盐酸和高锰酸钾(KMnO_(4))等危险化学试剂,而且反应时间不好把控,切片容易从载玻片上脱落以及细胞壁易破损;而番红染色结合荧光观察所用试剂则是安全无毒的且细胞结构完整。综合比较不同的方法,番红染色结合荧光显色是当前最适合橡胶树树皮组织细胞中木质素显色的方法,不仅能清晰区分木质素含量的高低,而且安全、简便易操作。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 木质素 番红染色 薄壁细胞 荧光
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橡胶树种质资源的倍性鉴定 被引量：4
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作者 张源源 濮寿琴 +4 位作者 胡彦师 方家林 黄肖 李维国 黄华孙 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期457-463,共7页
倍性鉴定是橡胶树种质资源鉴定评价的基础工作之一。本研究利用流式细胞仪对国家橡胶树种质资源圃内的橡胶树种质资源进行全面的倍性鉴定,对嵌合体的四倍体细胞比例进行分析,并比较不同倍性的气孔性状差异。从5177份野生种质中发现三倍... 倍性鉴定是橡胶树种质资源鉴定评价的基础工作之一。本研究利用流式细胞仪对国家橡胶树种质资源圃内的橡胶树种质资源进行全面的倍性鉴定,对嵌合体的四倍体细胞比例进行分析,并比较不同倍性的气孔性状差异。从5177份野生种质中发现三倍体11份,四倍体1份。从552份魏克汉种质中发现,三倍体9份,四倍体2份,嵌合体14份。14份嵌合体的四倍体细胞比例在49.06%~78.26%之间。不同倍性间的气孔长度、宽度和密度差异均极显著,气孔长度和宽度的排序为四倍体>三倍体>嵌合体,气孔密度的排序相反。研究结果对利用四倍体种质资源开展橡胶树倍性间杂交育种具有重要应用价值。 展开更多
关键词 橡胶树 种质资源 多倍体 流式细胞仪 气孔性状
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利用SSR荧光标记构建37个中国橡胶树栽培品种指纹图谱 被引量：3
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作者 位明明 黄肖 +1 位作者 李维国 黄华孙 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2022年第8期1565-1576,共12页
以37个橡胶树栽培品种为材料,利用SSR荧光标记技术进行DNA指纹图谱的构建和遗传关系分析,构建我国橡胶树栽培品种的SSR指纹图谱。共计筛选和确定出34对SSR引物作为构建橡胶树品种DNA指纹图谱库的核心引物,其中30对SSR引物可用于品种鉴... 以37个橡胶树栽培品种为材料,利用SSR荧光标记技术进行DNA指纹图谱的构建和遗传关系分析,构建我国橡胶树栽培品种的SSR指纹图谱。共计筛选和确定出34对SSR引物作为构建橡胶树品种DNA指纹图谱库的核心引物,其中30对SSR引物可用于品种鉴定,4对SSR引物可作为备选引物用于后续新选育品种的鉴定。筛选和确定出的核心SSR引物表现出较高的多态性信息含量(PIC值),其中PIC值高于0.5的引物高达97%,PIC值大于0.7的引物多达12对,PIC值大于0.8的引物有2对。引物rbm28的多态性最高,可作为最佳引物用于鉴定中国橡胶树主栽品系的遗传多样性,其他4条引物HESR025、HESR163、H-084、H-122同时具备较高的杂合率和多态性,可考虑作为备选引物。34对核心SSR引物在37个橡胶树品种中共检测到161个等位变异,平均每对引物检测到5.4个等位基因,平均PIC值为0.65,表现出高度多态性。利用30对核心SSR引物对37份橡胶树品种进行扩增,得到相关品种的准确SSR位点信息,获得包含37个橡胶树品种的标准DNA指纹图谱库,其中33个橡胶树品种均具有唯一的DNA特征指纹,可作为各品种特定的图谱,为橡胶树品种鉴定和育种实践提供依据。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 品种鉴定 SSR荧光标记 DNA指纹图谱
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非生物胁迫对橡胶树热激转录因子家族成员表达的影响 被引量：2
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作者 李言 余文才 +2 位作者 陆庆志 杨署光 田维敏 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2021年第8期2119-2125,共7页
热激转录因子(heat shock transcription factor,Hsf)是一类重要的调节因子,能够使植物响应多种逆境胁迫,赋予植物多种抗逆性。通过qPCR技术,分析了30个橡胶树HbHsf家族成员在低温胁迫下橡胶树‘93-114’和‘热垦501’叶片中的表达模式... 热激转录因子(heat shock transcription factor,Hsf)是一类重要的调节因子,能够使植物响应多种逆境胁迫,赋予植物多种抗逆性。通过qPCR技术,分析了30个橡胶树HbHsf家族成员在低温胁迫下橡胶树‘93-114’和‘热垦501’叶片中的表达模式,结果显示多个HbHsfs基因可被低温诱导上调表达,尤其是HbHsfA4a、HbHsfA4d、HbHsfA9b、HbHsfC1a和HbHsfC1b在低温胁迫下‘93-114’叶片中的表达量显著高于‘热垦501’。此外,HbHsfA4a和HbHsfA4d在干旱和高盐胁迫下显著上调表达,HbHsfA9b在干旱条件下极显著上调表达,HbHsfC1a和HbHsfC1b响应高盐胁迫上调表达。橡胶树HbHsfs基因响应多种逆境交叉胁迫,暗示着基因功能的多样性和复杂性。本研究为进一步解析Hsf家族成员的抗逆机理提供理论依据。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 热激转录因子 非生物胁迫 低温胁迫 干旱胁迫 高盐胁迫
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橡胶树橡胶生物合成调控相关基因的表达相关性分析 被引量：1
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作者 杨署光 杨秀光 +5 位作者 赵悦 史敏晶 李言 邓小敏 晁金泉 田维敏 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1790-1799,共10页
该文通过q PCR获得了正常割胶条件下,9个茉莉酸信号途径关键环节基因Hb COI1、Hb JAZ1、Hb JAZ2、Hb JAZ3、Hb MYC1、Hb MYC2、Hb MYC3、Hb MYC4、Hb MYC5和6个橡胶生物合成相关基因Hb HRT2、Hb SRPP、HbREF、Hb HMGR1、Hb HRT1、Hb GA... 该文通过q PCR获得了正常割胶条件下,9个茉莉酸信号途径关键环节基因Hb COI1、Hb JAZ1、Hb JAZ2、Hb JAZ3、Hb MYC1、Hb MYC2、Hb MYC3、Hb MYC4、Hb MYC5和6个橡胶生物合成相关基因Hb HRT2、Hb SRPP、HbREF、Hb HMGR1、Hb HRT1、Hb GAPDH在5个橡胶树魏克汉种质和5个1981’IRRDB种质胶乳中的表达数据;通过皮尔逊相关系数分析了这15个基因彼此间的表达相关性,分别获得105对基因的双变量相关系数(r12)和偏相关系数(r12.3),所有105对基因的双变量相关系数(︱r12︱)和偏相关系数(︱r12.3︱)的平均值分别为0.486±0.220和0.304±0.211,达到0.05的差异显著水平。其中,r12与r12.3方向相同的63对(60%),方向相反的42对(40%);︱r12︱<︱r12.3︱的23对(21.905%),︱r12︱>︱r12.3︱的82对(78.095%);双变量相关显著性P<0.05的76对(72.38%),P<0.01的59对(56.19%);偏相关显著性P<0.05的21对(20%),P<0.01的16对(15.24%)。结果显示,这两条途径中的基因表达彼此相关,这为基因表达谱分析中普遍采用的前提假设"功能相关基因的表达相关"提供了进一步的实验证据,可用于挖掘、筛选和预测与橡胶生物合成相关的未知基因,为研究橡胶树产量形成的分子调控机理提供理论基础。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 割胶 茉莉酸信号途径 橡胶生物合成 基因表达 Pearson相关
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国家橡胶树种质资源圃资源安全保存 被引量：1
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作者 胡彦师 周世俊 +6 位作者 安泽伟 张晓飞 方家林 涂敏 程汉 曾霞 黄华孙 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2022年第1期78-86,共9页
橡胶树种质资源是橡胶科技创新和天然橡胶产业发展的基础,对促进我国橡胶树新品种选育种研究和热区农业经济发展发挥着重要的支撑作用。国家橡胶树种质资源圃构建了初级核心种质库,建立了苗圃保存和大田鉴定评价相结合的橡胶树种质资源... 橡胶树种质资源是橡胶科技创新和天然橡胶产业发展的基础,对促进我国橡胶树新品种选育种研究和热区农业经济发展发挥着重要的支撑作用。国家橡胶树种质资源圃构建了初级核心种质库,建立了苗圃保存和大田鉴定评价相结合的橡胶树种质资源保存体系,确保了资源安全保存,推动了资源鉴定评价;近20年种质圃共收集优异资源256份,在支撑基础研究、新品种选育等方面发挥了重要作用。本文系统阐述了国家橡胶树种质资源圃资源安全保存的主要技术与方法,简要介绍了橡胶树种质资源的有效利用并提出了我国橡胶树种质资源今后工作重点,旨在加强我国橡胶树种质资源的长期安全保存与创新利用。 展开更多
关键词 橡胶树 种质资源 安全保存 利用
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海南橡胶树混交林土壤微生物功能研究 被引量：2
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作者 李子敏 全飞 +3 位作者 兰国玉 吴志祥 祁栋灵 李海健 《热带农业科学》 2020年第12期73-79,共7页
为了探讨橡胶树混交林对橡胶树土壤微生物功能的影响,对海南文昌种植的单一橡胶林(CK)、橡胶树和‘米老排’混交(处理1)、橡胶树和‘火力楠’混交(处理2)的土壤微生物生物功能进行研究,测定土壤理化性质、养分和微生物生物功能,分析3种... 为了探讨橡胶树混交林对橡胶树土壤微生物功能的影响,对海南文昌种植的单一橡胶林(CK)、橡胶树和‘米老排’混交(处理1)、橡胶树和‘火力楠’混交(处理2)的土壤微生物生物功能进行研究,测定土壤理化性质、养分和微生物生物功能,分析3种种植模式下林地表层土壤(0~10、10~20、20~30 cm)微生物功能。结果表明:硝化作用、固氮作用和氨化作用与不同土壤深度无显著差异;不同种植模式的硝化作用、固氮作用和氨化作用也无显著差异;3种种植模式下,混交林的呼吸作用和纤维素分解作用强度高于CK,说明不同的植被类型对土壤微生物功能有显著影响;呼吸作用与含水率存在显著负相关关系,说明土壤理化性质对土壤微生物功能有显著影响。 展开更多
关键词 橡胶 混交林 土壤微生物 生物功能
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