美国养禽业促进计划(NPIP)对我国动物疫病防控工作的借鉴性 被引量：2

1

作者 陈继明 赵永刚 +1 位作者 宋翠平 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第2期7-8,共2页

关键词 美国 养禽业促进计划 NPIP 动物疫病防控工作 经验借鉴 宏观调控 市场机制 源头治理

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动物疫病检测新技术展望 被引量：4

2

作者 魏荣 王志亮 陈继明 《中国动物检疫》 CAS 2003年第12期28-29,共2页

随着现代物理学、生物化学和分子生物学的不断发展,动物疫病检测技术也在常规的传统技术层面上不断得到了延伸、拓宽、衍化和派生,诞生了许多新方法新技术,有不少进入了应用研究阶段.这些新技术大致可分两类,一类为免疫检测技术;另一类... 随着现代物理学、生物化学和分子生物学的不断发展,动物疫病检测技术也在常规的传统技术层面上不断得到了延伸、拓宽、衍化和派生,诞生了许多新方法新技术,有不少进入了应用研究阶段.这些新技术大致可分两类,一类为免疫检测技术;另一类为分子生物学技术.在此,本文将简单介绍一些新技术,并对这些技术应用于动物疫病检测的前景作一些前瞻性认识. 展开更多

关键词 动物疫病 检测技术 免疫检测 分子生物学技术

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动物保健品应用趋势

3

作者 王志亮 《中国家禽》 北大核心 2003年第3期1-4,共4页

关键词 动物保健品 应用趋势 生物制品 抗菌药

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动物保护品应用趋势

4

作者 王志亮 《畜牧市场》 2003年第3期9-12,共4页

关键词 动物保健品 应用趋势 生物制品 抗菌药

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猪繁殖与呼吸综合征的诊断 被引量：1

5

作者 王君玮 徐天刚 +5 位作者 许立华 张新云 吴延功 王志亮 赵建梅 宋芳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第12期12-13,共2页

关键词 猪 繁殖与呼吸综合征 诊断 发病特点 临床症状 剖检病变

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口蹄疫鉴别诊断方法的确认与标化问题探讨 被引量：1

6

作者 王君玮 王志亮 姜平 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第5期50-51,共2页

关键词 口蹄疫 诊断方法 世界动物卫生组织 鉴别 远距离传播 交叉保护性 病毒感染 动物疫病 国际贸易 动物产品 FMDV and 接触性 血清型 成员国 消费者 限制 发病

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猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒Ⅱ型混合感染的诊断 被引量：2

7

作者 王君玮 孙承英 +5 位作者 赵永刚 徐伟 李开福 徐天刚 宋芳 任炜杰 《猪业科学》 2006年第5期29-31,共3页

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)在我国规模化猪场的传播与蔓延愈演愈烈,给养猪企业、尤其是给种猪场带来了难以估算的损失。其病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒,主要引起母猪繁殖障碍和各日龄猪呼吸疾病。

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 猪圆环病毒Ⅱ型 混合感染 SYNDROME 诊断 规模化养猪场 实验室检测 山东半岛 临床症状 病理剖检

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猪繁殖与呼吸综合征的诊断 被引量：1

8

作者 王君玮 徐天刚 +5 位作者 许立华 张新云 吴延功 王志亮 赵建梅 宋芳 《养殖与饲料》 2004年第4期40-42,共3页

2002年10月胶东某规模化猪场发生以娃振母猪流产、产死胎,仔猪出现以呼吸道症状为主的疾病,经流行病学分析、症状观察、病理剖检、病毒分离及ELISA、PCR检测确诊为猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PR... 2002年10月胶东某规模化猪场发生以娃振母猪流产、产死胎,仔猪出现以呼吸道症状为主的疾病,经流行病学分析、症状观察、病理剖检、病毒分离及ELISA、PCR检测确诊为猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS).现将该场PRRS的诊治情况报告如下. 展开更多

关键词 猪 繁殖与呼吸综合征 诊断 发病特点 临床症状 剖检病变

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单抗介导牛海绵状脑病免疫组化检测方法的建立及其应用 被引量：8

9

作者 王志亮 吴晓东 +3 位作者 刘雨田 邹艳丽 鲍恩东 王长杰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期634-638,共5页

中国鲁西黄牛重组 PrPc成熟蛋白免疫 PrPc基因敲除小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,经免疫组织化学试验筛选出单抗4C11可特异识别牛海绵状脑病标准阳性牛脑样品上PrPSc核心片段。以单抗4C11为核心试剂,建立了单抗介导牛海绵状脑病免疫组织... 中国鲁西黄牛重组 PrPc成熟蛋白免疫 PrPc基因敲除小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,经免疫组织化学试验筛选出单抗4C11可特异识别牛海绵状脑病标准阳性牛脑样品上PrPSc核心片段。以单抗4C11为核心试剂,建立了单抗介导牛海绵状脑病免疫组织化学检测方法,并已颁布成为中华人民共和国国家标准 GB/T19180-2003(牛海绵状脑病诊断技术)。已应用于中国牛海绵状脑病的持续监测,至 2002 年底共检测了全国各地 3344 份牛脑样品,结果全为阴性,且每批次所设的阳性对照样品检测结果均呈阳性,与 Roche 公司单抗 6H4 检测结果的符合率为 100%。 展开更多

关键词 单抗 介导 免疫组化检测 牛海绵状脑病 免疫组织化学检测 阴性 阳性 牛脑 PrP^c成熟蛋白 PrP^Sc

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在中国可以传播西尼罗河病毒的蚊虫种类 被引量：25

10

作者 魏荣 王志亮 李其平 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2004年第1期65-66,共2页

关键词 中国 传播 西尼罗河病毒 蚊虫 西尼罗河热 黄病毒 感染

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猪链球菌2型四川分离株猪体回归试验 被引量：13

11

作者 王君玮 王志亮 +7 位作者 赵永刚 赵云玲 郑东霞 王伟伟 王涛 刘华雷 陈义平 王珊 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期508-511,共4页

选用35～38日龄的健康断奶仔猪21头，分3组，用2005四川分离株SSsc0501分别经静脉、肌肉注射和口服3种途径感染，进行猪体回归试验。肌肉注射组（含菌0．6×10^8个／mL）16h开始出现症状，至36h全部死亡，发病率、病死率均为100％... 选用35～38日龄的健康断奶仔猪21头，分3组，用2005四川分离株SSsc0501分别经静脉、肌肉注射和口服3种途径感染，进行猪体回归试验。肌肉注射组（含菌0．6×10^8个／mL）16h开始出现症状，至36h全部死亡，发病率、病死率均为100％；静脉注射组（含菌0．2×10^8个／mL）25h开始出现症状，48h内全部死亡，发病率和病死率均为100％；口服攻毒组（含菌2×10^8个／mL）90h后开始有发病症状，第9天有1头死亡，发病率75％，病死率33％。从感染病死猪的肝脏、脾脏、肾脏、心血、大脑、脑脊液、淋巴结、肺脏和关节液中均分离到链球菌，经鉴定为试验攻毒的目的菌，表明猪体能够很好地用于猪链球菌2型动物感染模型，同时说明该菌侵害器官广泛，为进一步探讨该病的综合防制提供了重要技术依据。 展开更多

关键词 猪链球菌2型 回归试验 PCR试验 毒力因子

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山东省部分地区猪繁殖与呼吸综合征的血清学调查 被引量：27

12

作者 王君玮 徐天刚 +2 位作者 吴延功 王志亮 宋芳 《畜牧与兽医》 北大核心 2004年第4期32-33,共2页

应用ELISA方法对山东省部分地区猪群的猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS)流行情况进行初步的血清学调查。结果表明 ,在调查的 61个猪场中 ,PRRS阳性猪场 46个 ,占 75 4%。检测血清 2 1 70份 ,其中阳性 1 4 0 6份 ,阳性率 64 8%。分别用 2种不同... 应用ELISA方法对山东省部分地区猪群的猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS)流行情况进行初步的血清学调查。结果表明 ,在调查的 61个猪场中 ,PRRS阳性猪场 46个 ,占 75 4%。检测血清 2 1 70份 ,其中阳性 1 4 0 6份 ,阳性率 64 8%。分别用 2种不同ELISA试剂盒检测同组血清样品 ,结果显示本诊断中心建立的PRRSELISA试剂盒与IDEXX公司生产的ELISA试剂盒的符合率为 94 3 %。 展开更多

关键词 山东 猪繁殖与呼吸综合征 血清学 ELISA PRRS 抗体

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我国尼帕病毒病风险与防控措施初步分析 被引量：9

13

作者 陈继明 王志亮 +3 位作者 赵永刚 宋翠平 王君玮 魏荣 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第1期42-44,共3页

1 尼帕病毒病概况[1-5] 1998年9月到1999年4月,马来西亚出现260多例流行病学异常的脑炎病人,死亡100多人,死亡率高达48%,康复的病人多数有一定的神经性后遗症.后来研究确诊这是一种新的副粘病毒感染导致的疾病.

关键词 尼帕病毒病 传染源 传播途径 危害 风险分析 防控措施 应急处理方案 人畜共患病

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猪附红细胞体病研究进展 被引量：25

14

作者 王君玮 王志亮 +1 位作者 张喜悦 徐培莲 《中国动物检疫》 CAS 2003年第7期44-46,共3页

关键词 猪 附红细胞体病 病原学 流行病学 临床症状 剖检变化 诊断 治疗

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热休克蛋白70研究新进展 被引量：12

15

作者 孙培明 王志亮 +1 位作者 李金明 鲍恩东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期284-288,共5页

关键词 热休克蛋白70 细胞凋亡 肿瘤 传染性疾病

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水牛朊蛋白成熟片段基因的克隆与原核表达 被引量：4

16

作者 袁志栋 王志亮 +3 位作者 刘雨田 吴晓东 赵永刚 刘海生 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期2590-2596,共7页

目的克隆、分析水牛朊蛋白(prionprotein,PrP)成熟片段基因,并获取纯化的表达产物。方法将应用PCR技术扩增的水牛成熟PrP的核酸序列克隆到表达载体pET-32a,并分析其序列;把阳性克隆质粒pET-32a-BPrP转化表达菌BL21(DE3),鉴定纯化的表达... 目的克隆、分析水牛朊蛋白(prionprotein,PrP)成熟片段基因,并获取纯化的表达产物。方法将应用PCR技术扩增的水牛成熟PrP的核酸序列克隆到表达载体pET-32a,并分析其序列;把阳性克隆质粒pET-32a-BPrP转化表达菌BL21(DE3),鉴定纯化的表达产物。结果水牛朊蛋白成熟片段核酸序列及其推导的氨基酸序列与已知其他牛科动物的成熟PrP核酸、氨基酸序列间的相似性分别在97.1%和97.2%以上,并且发现水牛成熟PrP有5个重复序列,编码的氨基酸序列其中有2个九肽和3个八肽重复序列。具有较高的表达水平的PrP融合蛋白被纯化后,用Western印迹实验证明该蛋白具有PrP抗原活性。结论首次报道了克隆、分析水牛朊蛋白成熟片段基因,发现水牛成熟PrP有5个重复序列,并获得了具PrP抗原活性的水牛成熟PrP融合蛋白。 展开更多

关键词 水牛成熟PrP 克隆 序列分析 原核表达

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四川猪链球菌Ⅱ型分离株生物学特性的初步研究 被引量：3

17

作者 刘华雷 王君玮 +4 位作者 赵永刚 赵云玲 范伟兴 陈义平 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第10期20-22,共3页

猪链球菌Ⅱ型是导致许多国家猪链球菌病的主要病原,自90年代晚期江苏发生猪链球菌Ⅱ型感染 以来已成为我国引起人畜共患病的一种重要的新病原菌。最近在四川省部分地区发生了不明原因的猪源人畜 共患病,且具有较高的死亡率。我们从病死... 猪链球菌Ⅱ型是导致许多国家猪链球菌病的主要病原,自90年代晚期江苏发生猪链球菌Ⅱ型感染 以来已成为我国引起人畜共患病的一种重要的新病原菌。最近在四川省部分地区发生了不明原因的猪源人畜 共患病,且具有较高的死亡率。我们从病死猪的病料中成功分离到三株猪链球菌分离株,经革兰氏染色、生化试 验、血清凝集试验和PCR鉴定,最终证实为猪链球菌Ⅱ型。通过对其毒力因子进行鉴定,结果发现MRP和EF 均为阳性。进一步的药敏试验证实:分离菌株对氨苄青霉素、先锋霉素Ⅵ、羧苄青霉素、复方新诺明、头孢肤肟 等抗菌药高度敏感。 展开更多

关键词 猪链球菌Ⅱ型 毒力因子 MRP EF 猪链球菌病 分离株 四川省 生物学特性 Ⅱ型 人畜共患病

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一株水貂犬瘟热病毒的分离与鉴定 被引量：4

18

作者 袁小远 单虎 +4 位作者 王志亮 吴延功 陈继明 张倩 王永明 《经济动物学报》 CAS 2006年第4期189-192,共4页

为寻找免疫失败的原因,有效防治犬瘟热的流行,对临床一水貂犬瘟热疑似病例,取其肝、脾、脑等组织研磨后接种Vero和BHK细胞分离病毒,并对分离毒株进行一系列鉴定。通过电镜观察,发现了大小约150 nm的副黏病毒样粒子。结果表明,分离株对... 为寻找免疫失败的原因,有效防治犬瘟热的流行,对临床一水貂犬瘟热疑似病例,取其肝、脾、脑等组织研磨后接种Vero和BHK细胞分离病毒,并对分离毒株进行一系列鉴定。通过电镜观察,发现了大小约150 nm的副黏病毒样粒子。结果表明,分离株对鹅、鸡、小鼠、家兔、山羊、猪红细胞均无凝集性,该分离株的毒价TCID50为10-4.87;分离株病毒对乙醚、氯仿敏感,病毒的核酸型为RNA。经间接免疫荧光试验,接种病毒的BHK细胞出现特异性的亮绿色荧光。对分离株和对照毒株分别提取RNA进行RT-PCR扩增,最后得到与预期扩增片段(294 bp)相符的核酸电泳带,充分证明分离病毒为犬瘟热病毒。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 水貂 分离 鉴定

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肉鸡HSP70的基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备 被引量：3

19

作者 孙培明 吴晓东 +3 位作者 赵永刚 刘雨田 王志亮 鲍恩东 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期2154-2161,共8页

【目的】制备高特异性的肉鸡热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)单克隆抗体,研究肉鸡HSP70与热应激损伤的关系。【方法】利用RT-PCR方法扩增肉鸡HSP70mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步... 【目的】制备高特异性的肉鸡热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)单克隆抗体,研究肉鸡HSP70与热应激损伤的关系。【方法】利用RT-PCR方法扩增肉鸡HSP70mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70。以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP70具有很好的免疫原性。以纯化的重组肉鸡HSP70免疫Balb/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。【结果】获得2株分泌肉鸡HSP70单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步通过免疫印迹分析筛选出1株高特异性的肉鸡HSP70单克隆抗体,命名为BH70-1。【结论】免疫组织化学结果显示,单克隆抗体BH70-1是一种理想的抗体。 展开更多

关键词 热休克蛋白70 原核表达 单克隆抗体制备 肉鸡

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马动脉炎病毒RT-PCR检测方法的建立 被引量：3

20

作者 杜建 王志亮 +2 位作者 陈继明 金宁一 张念祖 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第5期28-30,共3页

根据已报道的马动脉炎病毒基因组保守基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地从病毒感染的细胞中扩增出约200bp的片段,与理论设计值(204bp)大小一致。而正常的RK-13、BHK-21和Vero细胞和同为动脉炎病... 根据已报道的马动脉炎病毒基因组保守基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地从病毒感染的细胞中扩增出约200bp的片段,与理论设计值(204bp)大小一致。而正常的RK-13、BHK-21和Vero细胞和同为动脉炎病毒科的猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)作为对照的扩增结果均为阴性。敏感性试验表明,该方法可以检测出10-4个TCID50的病毒含量,说明具有较好的敏感性。 展开更多

关键词 PCR检测方法 马动脉炎病毒 RT 呼吸道综合征 Vero细胞 TCID50 核苷酸序列 病毒基因组 PCR扩增 敏感性试验 病毒感染 病毒含量 设计值 猪繁殖

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