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林甸鸡绿壳蛋、隐性白、快慢羽性状的遗传基础分析 被引量:11
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作者 张元良 王志鹏 +4 位作者 邱家维 冷丽 李玉茂 曹志平 李辉 《中国家禽》 北大核心 2015年第17期5-11,共7页
试验旨在研究影响绿壳蛋、隐性白和快慢羽性状的SLCO1B3、TYR和K基因型在林甸鸡群中的分布情况。通过PCR和电泳技术分别对影响林甸鸡绿壳蛋、隐性白和快慢羽性状的SLCO1B3、TYR和K基因突变位点进行分型工作,发现产绿壳蛋的林甸鸡携带SLC... 试验旨在研究影响绿壳蛋、隐性白和快慢羽性状的SLCO1B3、TYR和K基因型在林甸鸡群中的分布情况。通过PCR和电泳技术分别对影响林甸鸡绿壳蛋、隐性白和快慢羽性状的SLCO1B3、TYR和K基因突变位点进行分型工作,发现产绿壳蛋的林甸鸡携带SLCO1B3-O等位基因,SLCO1B3-OO型占12.5%,SLCO1B3-Oo型占87.5%;林甸鸡中白羽个体基因型为TYR-cc,非白羽个体中有19.3%的鸡携带TYR-c等位基因,基因型为TYR-Cc;在林甸鸡中检测到慢羽型鸡占7.8%,快羽型鸡占92.2%。通过追溯试验群体的系谱结构,发现影响林甸鸡绿壳蛋性状SLCO1B3基因、隐性白性状的TYR基因和快慢羽性状的K基因的突变位点在上下代传递过程中符合孟德尔遗传规律。 展开更多
关键词 林甸鸡 SLCO1B3基因 TYR基因 K基因
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白羽快大型肉鸡育种的过去、现在和将来 被引量:9
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作者 李辉 杜志强 +1 位作者 王守志 冷丽 《中国家禽》 北大核心 2016年第19期1-8,共8页
文章回顾了国际白羽快大型肉鸡育种的发展历史,分析了当前国际白羽快大型肉鸡的育种现状和存在问题,并对未来国际白羽快大型肉鸡育种的发展趋势进行了探讨和展望,以期为我国白羽快大型肉鸡的育种工作和产业发展提供一些可供参考的信息... 文章回顾了国际白羽快大型肉鸡育种的发展历史,分析了当前国际白羽快大型肉鸡的育种现状和存在问题,并对未来国际白羽快大型肉鸡育种的发展趋势进行了探讨和展望,以期为我国白羽快大型肉鸡的育种工作和产业发展提供一些可供参考的信息和线索。 展开更多
关键词 白羽肉鸡 育种 历史 现状 未来
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中国白羽快大型肉鸡育种战略研究报告 被引量:2
3
作者 李辉 冷丽 《中国家禽》 北大核心 2012年第13期5-8,共4页
文章针对我国白羽快大型肉鸡祖代鸡完全依赖进口的现状及我国开展白羽快大型肉鸡育种工作的必要性,从国家战略需求、现状与发展趋势、发展思路、战略目标与任务、重点任务安排、相关建议等方面对我国开展白羽快大型肉鸡育种工作进行了... 文章针对我国白羽快大型肉鸡祖代鸡完全依赖进口的现状及我国开展白羽快大型肉鸡育种工作的必要性,从国家战略需求、现状与发展趋势、发展思路、战略目标与任务、重点任务安排、相关建议等方面对我国开展白羽快大型肉鸡育种工作进行了探讨。 展开更多
关键词 白羽肉鸡 育种 战略研究
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鸡PPARγ基因的表达特性及其对脂肪细胞增殖分化的影响 被引量:38
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作者 王丽 那威 +5 位作者 王宇祥 王彦博 王宁 王启贵 李玉茂 李辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期454-464,共11页
为分析鸡PPARγ基因的组织表达特性及其在脂肪细胞增殖和分化过程中的功能,文章以东北农业大学高、低腹脂双向选择品系肉鸡为实验材料,利用Western blotting方法,检测PPARγ基因的组织表达特性及其在高、低脂系肉鸡腹部脂肪组织间的表... 为分析鸡PPARγ基因的组织表达特性及其在脂肪细胞增殖和分化过程中的功能,文章以东北农业大学高、低腹脂双向选择品系肉鸡为实验材料,利用Western blotting方法,检测PPARγ基因的组织表达特性及其在高、低脂系肉鸡腹部脂肪组织间的表达差异;采用RNAi技术,在鸡原代脂肪细胞中抑制PPARγ基因的表达后,通过MTT和油红O提取比色的方法,研究鸡PPARγ基因对脂肪细胞增殖和分化的调控作用;利用Real-timePCR和Western blotting技术,分析PPARγ基因表达下调后,其他脂肪细胞分化转录因子以及与脂肪细胞分化相关的重要基因的表达变化情况。结果表明,PPARγ基因在7周龄高脂系肉鸡腹部脂肪组织、肌胃、脾脏、肾脏组织中表达量较高,在心脏中表达量较低,在肝脏、胸肌、腿肌、十二指肠中未检测到表达信号;与高脂系相比,PPARγ基因在5和7周龄低脂系肉鸡腹部脂肪组织中的表达量较低(P<0.05);PPARγ基因的表达量下降后,鸡脂肪细胞的增殖能力增强,分化能力减弱;同时,C/EBPα、SREBP1、A-FABP、Perilipin1、LPL、IGFBP-2基因的表达量均下降(P<0.05)。由此可见,PPARγ基因的表达可能与肉鸡腹部脂肪的沉积有一定的关系,该基因可能是调控鸡脂肪细胞增殖与分化的关键因子。 展开更多
关键词 PPARΓ基因 脂肪细胞增殖分化 组织表达 RNAI
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过表达鸡Gata2或Gata3基因抑制Pparγ基因的转录 被引量:9
5
作者 张志威 陈月婵 +2 位作者 裴文宇 王宁 李辉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期835-842,共8页
脂肪细胞分化是脂肪组织发育的一个重要过程.目前,鸡脂肪细胞分化的分子调控机制还不十分清楚.哺乳动物的研究结果表明,转录因子GATA结合蛋白2(Gata2)和GATA结合蛋白3(Gata3)具有抑制脂肪细胞分化的功能,它们在白色脂肪组织和棕色脂肪... 脂肪细胞分化是脂肪组织发育的一个重要过程.目前,鸡脂肪细胞分化的分子调控机制还不十分清楚.哺乳动物的研究结果表明,转录因子GATA结合蛋白2(Gata2)和GATA结合蛋白3(Gata3)具有抑制脂肪细胞分化的功能,它们在白色脂肪组织和棕色脂肪组织中的表达模式不同.鸡没有棕色脂肪组织,目前还没有关于Gata2和Gata3作用于鸡脂肪细胞分化的研究报道.本研究利用半定量RT-PCR的方法分析了Gata2和Gata3基因在鸡腹部脂肪组织和前脂肪细胞中的表达规律,发现鸡腹部脂肪组织中高水平表达Gata2基因,低水平表达Gata3基因;鸡前脂肪细胞中Gata2基因的表达水平远高于Gata3基因的表达水平,油酸诱导分化后的鸡前脂肪细胞Gata2基因的表达水平明显下调.此外,鸡过氧化物酶体增殖体激活受体γ(Pparγ)启动子(-1985/-89)报告基因荧光素活性分析和半定量RT-PCP发现,在DF1细胞中过表达Gata2或Gata3抑制鸡PPARγ基因的转录.本研究结果为进一步研究鸡脂肪细胞分化的分子调控机制和Gata2和Gata3基因的生物学功能提供了参考. 展开更多
关键词 GATA结合蛋白2(Gata2) GATA结合蛋白3(Gata3) 过氧化物酶体增殖体激活受体γ(Pparγ) 转录
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肉鸡腹脂率双向选择系群体表型数据库(NEAUHLFPD)的设计及其功能实现 被引量:5
6
作者 李敏 董翔宇 +5 位作者 梁浩 冷丽 张慧 王守志 李辉 杜志强 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期430-437,共8页
表型性状的准确记录及其有效管理和分析是选育优良畜禽品种(系)工作的重要内容。东北农业大学肉鸡腹脂率双向选择系(Northeast Agricultural University High and Low Fat,NEAUHLF)经过20年的选育工作积累了大量与肉鸡脂肪沉积的分子遗... 表型性状的准确记录及其有效管理和分析是选育优良畜禽品种(系)工作的重要内容。东北农业大学肉鸡腹脂率双向选择系(Northeast Agricultural University High and Low Fat,NEAUHLF)经过20年的选育工作积累了大量与肉鸡脂肪沉积的分子遗传基础研究相关的表型数据。为了有效并系统地存储、管理和分析利用这些表型数据,本研究建立了东北农业大学肉鸡腹脂率双向选择系表型数据库(The NEAUHLF Phenome Database,NEAUHLFPD)管理系统。NEAUHLFPD主要涵盖以下表型记录和信息:1~19世代系谱记录和29项表型数据(分别为鸡体尺性状、体重性状、屠体性状及相应的率性状信息等)。该表型数据库的架构和设计过程具体如下:(1)架构信息。WEB服务器—Apache;数据库—MySQL;数据库管理工具—Navicat;用于动态交互性站点创建的服务器端脚本语言—PHP;超文本标记语言—HTML。(2)结构信息。主界面上有数据库整体组成及功能的详细介绍,以及数据库各部分基本结构的索引按钮。功能模块主要包含两方面内容:第一模块,表型(phenotype)数据的物理存储空间,可实现数据指标的选定、筛选、范围设定和查找等功能;第二模块,表型数据的基本描述性统计计算(descnptlve statlstms),可对条件筛选后的数据进行基本统计量的计算,同时还可实现对筛选数据的按条件排序等功能。NEAUHLFPD不仅能有效储存和管理表型数据,还可以兼容高通量基因组学数据,有利于今后进一步开展鸡脂肪组织生长发育的分子遗传基础研究以及推进低脂肉鸡的选育工作。 展开更多
关键词 肉鸡 腹脂率 双向选择 表型 数据库
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CRISPR/Cas9介导RB1基因敲除及其在鸡前脂肪细胞分化、增殖中的功能研究 被引量:9
7
作者 张琦 黄娇娇 +4 位作者 杨彩侠 王宇祥 张慧 赵建国 李辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1775-1784,共10页
旨在研究RB1基因在鸡前脂肪细胞分化和增殖过程中的功能,本研究利用CRISPR/Cas9系统在鸡前脂肪细胞中敲除RB1基因,检测鸡前脂肪细胞的分化和增殖能力及相关标志基因的表达水平。结果表明,CRISPR/Cas9系统能够有效介导RB1基因的敲除并引... 旨在研究RB1基因在鸡前脂肪细胞分化和增殖过程中的功能,本研究利用CRISPR/Cas9系统在鸡前脂肪细胞中敲除RB1基因,检测鸡前脂肪细胞的分化和增殖能力及相关标志基因的表达水平。结果表明,CRISPR/Cas9系统能够有效介导RB1基因的敲除并引起RB1基因翻译的提前终止,敲除效率可以达到10%。油红O提取比色和CCK-8的结果显示,敲除RB1基因后,鸡前脂肪细胞的分化能力减弱、增殖能力增强;qRT-PCR结果显示,RB1基因敲除之后脂肪细胞分化标志基因G0S2、FAS、A-FABP的mRNA表达水平下降,尤其是G0S2基因的表达水平在前脂肪细胞分化的各个阶段都表现为显著的下降。同时RB1基因敲除还引起细胞周期相关基因CyclinD1、E2F1、Ki67、PCNA的mRNA表达水平升高。初步推断,RB1基因可能是调控鸡前脂肪细胞分化和增殖的关键调节因子。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 RB1 脂肪沉积 分化 增殖
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鸡KLF3基因的表达规律及其对脂肪细胞分化的影响研究 被引量:6
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作者 王海霞 张志威 +4 位作者 贺綦 王宁 王宇祥 曹志平 李辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期26-31,共6页
为研究鸡KLF3(Gallus gallus Krüppel-like factor 3,gKLF3)基因的表达规律及其对脂肪细胞分化的影响,利用qRT-PCR检测了其在肉鸡脂肪组织和脂肪细胞中的表达特点,并利用基因过表达技术研究gKLF3基因对脂肪细胞分化的影响。结果显... 为研究鸡KLF3(Gallus gallus Krüppel-like factor 3,gKLF3)基因的表达规律及其对脂肪细胞分化的影响,利用qRT-PCR检测了其在肉鸡脂肪组织和脂肪细胞中的表达特点,并利用基因过表达技术研究gKLF3基因对脂肪细胞分化的影响。结果显示,gKLF3在2~10周龄肉鸡腹部脂肪组织中持续表达,10周龄高脂肉鸡腹部脂肪组织gKLF3表达量显著高于低脂肉鸡(P<0.05);gKLF3在鸡成熟脂肪细胞的表达量低于前脂肪细胞(P<0.01);体外培养的鸡前脂肪细胞经油酸诱导分化后,gKLF3基因表达量均有低于对照组的趋势;过表达gKLF3基因有抑制脂肪细胞分化,以及抑制C/EBPα、FAS基因表达(P<0.01)的趋势。研究结果表明,gKLF3基因在鸡腹部脂肪组织生长发育过程中发挥重要作用,其可能是通过抑制C/EBPα、FAS基因表达进而抑制脂肪细胞分化实现的。 展开更多
关键词 KLF3基因 脂肪细胞分化 基因表达
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HOPX基因过表达对鸡前脂肪细胞增殖的影响 被引量:5
9
作者 史洪岩 贺綦 +3 位作者 程敏 孙婴宁 李辉 王宁 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1624-1631,共8页
【目的】构建鸡HOPX基因(homeodomain only protein X)全长编码区(coding region sequence,CDS)的真核表达载体,转染鸡原代前脂肪细胞,探讨HOPX基因过表达对鸡原代前脂肪细胞增殖的影响。【方法】利用Primer Premier 5.0软件设计鸡HOPX... 【目的】构建鸡HOPX基因(homeodomain only protein X)全长编码区(coding region sequence,CDS)的真核表达载体,转染鸡原代前脂肪细胞,探讨HOPX基因过表达对鸡原代前脂肪细胞增殖的影响。【方法】利用Primer Premier 5.0软件设计鸡HOPX基因CDS区上、下游引物,以AA肉鸡腹部脂肪组织的c DNA为模板,采用PCR扩增、克隆鸡HOPX基因全长CDS区,并将其亚克隆至真核表达载体(p CMV-HA vector),获得HOPX基因的真核表达载体p CMV-HA-HOPX。采用双酶切鉴定、测序及Western blotting方法分析鉴定p CMV-HA-HOPX。采用胶原酶法分离培养12日龄AA商品肉仔鸡腹部脂肪组织原代前脂肪细胞,瞬时转染p CMV-HA-HOPX,转染6 h时后消化细胞,按照每孔50 000个细胞数接种12孔培养板,并在细胞贴壁0、24、48和72 h,分别采用显微镜观察和CCK-8细胞增殖检测试剂盒分析HOPX基因过表达对鸡原代前脂肪细胞增殖的影响;同时,利用TRIzol法提取组织和细胞总RNA,并反转录合成c DNA,采用Real-time RT-PCR方法分析细胞增殖标志基因Cyclin D1和PCNA的m RNA表达。【结果】测序结果显示,鸡HOPX基因的全长CDS区大小为222 bp,与NCBI发布的鸡HOPX基因m RNA序列(NM_204556)一致;利用HA标签抗体的Western blotting分析显示,真核表达载体p CMV-HA-HOPX能够表达出预期大小的蛋白分子(约9.5k D),表明鸡HOPX基因的真核表达载体p CMV-HA-HOPX构建成功。显微镜观察发现,转染p CMV-HA-HOPX载体的细胞(HOPX过表达组)在细胞贴壁后培养24和48 h的细胞数量低于转染p CMV-HA vector空载体(空载体对照组)的细胞数量;CCK-8检测分析发现,转染p CMV-HA-HOPX载体细胞的吸光度值(OD值)在细胞贴壁后培养24、48和72 h都极显著低于空载体对照组(P<0.01)。与细胞增殖检测结果相一致,细胞增殖标志基因表达检测分析发现,在细胞贴壁后培养24 h后,HOPX过表达组细胞Cyclin D1基因的m RNA表达量显著低于空载体对照组(P<0.05);在细胞贴壁后培养48 h时,HOPX过表达组的PCNA基因的m RNA表达量显著低于空载体对照组(P<0.05);在细胞贴壁后培养72 h时,HOPX过表达组的PCNA和Cyclin D1基因的表达量均极显著低于空载体对照组(P<0.01)。【结论】HOPX基因过表达在体外抑制鸡原代前脂肪细胞的增殖。 展开更多
关键词 HOPX 前脂肪细胞 增殖
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高、低脂鸡脂肪组织ATGL基因的表达及其激素调控的差异分析 被引量:7
10
作者 史铭欣 荣恩光 +3 位作者 周纬男 史洪岩 李辉 王宁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1874-1881,共8页
为研究脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)在鸡脂肪沉积中的作用,并分析肾上腺素和胰高血糖素对高、低脂鸡脂肪组织和脂肪细胞ATGL基因表达的影响,本研究利用半定量RT-PCR分析鸡ATGL基因的组织表达谱;利用Real-timeRT-PCR分析ATGL基因及其... 为研究脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)在鸡脂肪沉积中的作用,并分析肾上腺素和胰高血糖素对高、低脂鸡脂肪组织和脂肪细胞ATGL基因表达的影响,本研究利用半定量RT-PCR分析鸡ATGL基因的组织表达谱;利用Real-timeRT-PCR分析ATGL基因及其活化因子Comparative gene identification-58(CGI-58)基因在1~7周龄东北农业大学肉鸡高、低腹脂双向选择品系(NEAUHLF)第16世代鸡群脂肪组织中的表达差异,以及肾上腺素和胰高血糖素对高、低脂系肉鸡脂肪组织和脂肪细胞ATGL基因表达的影响。结果显示,ATGL基因在鸡腹部脂肪、皮下脂肪、嗉囊周围脂肪、肌胃周围脂肪、肾脏及肝脏中表达量较高;低脂系肉鸡腹部脂肪组织ATGL和CGI-58基因的表达总体均高于高脂系鸡,且均在第2周龄达到显著性差异(P%0.05);肾上腺素和胰高血糖素都能够上调高脂系鸡脂肪组织和脂肪细胞ATGL基因的表达,并促进机体的脂肪分解,暗示高脂系鸡对2种激素的刺激相对敏感。本研究结果为揭示高、低脂肉鸡脂肪性状差异的原因以及ATGL在鸡脂肪沉积中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 肉鸡 ATGL基因 基因表达 肾上腺素 胰高血糖素
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鸡前脂肪细胞中A-FABP基因表达的变化对PPARγ、perilipin和E-FABP表达的影响 被引量:5
11
作者 张庆秋 石慧 +2 位作者 王宇祥 李辉 王启贵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1531-1538,共8页
本研究以鸡原代前脂肪细胞为实验材料,探讨A-FABP基因在鸡脂类代谢过程中的功能以及该基因与脂类代谢相关7个基因间的调控关系。利用A-FABP基因的shRNA干扰载体和真核表达载体对该基因进行干扰和过表达,分别在干扰和过表达后24、36、48... 本研究以鸡原代前脂肪细胞为实验材料,探讨A-FABP基因在鸡脂类代谢过程中的功能以及该基因与脂类代谢相关7个基因间的调控关系。利用A-FABP基因的shRNA干扰载体和真核表达载体对该基因进行干扰和过表达,分别在干扰和过表达后24、36、48、60和72h时检测脂类代谢相关基因的表达情况。结果表明,干扰A-FABP后,鸡前脂肪细胞中PPARγ和perilipin基因的表达量在24和36h时显著低于对照组,在48h时显著高于对照组,在48和72h时,E-FABP基因表达量显著低于对照组;过表达A-FABP后,鸡前脂肪细胞中PPARγ和perilipin基因的表达量在24和36h时显著高于对照组,在48h时显著低于对照组,在所有检测的时间点E-FABP基因表达均显著下调。结果显示,在前脂肪细胞中,鸡A-FABP表达量的变化影响PPARγ、perilipin和E-FABP的表达。 展开更多
关键词 A-FABP基因 PPARΓ基因 perilipin基因 E-FABP基因 脂肪细胞
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鸡IGFBP2基因3′UTR区1196C>A单核苷酸多态性的功能性鉴定及分析 被引量:6
12
作者 于莹莹 乔书培 +5 位作者 孙婴宁 宋鹤 张潇飞 闫晓红 李辉 王宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1163-1172,共10页
鸡IGFBP2基因3′非编码区(3′UTR)1196C>A单核苷酸多态性(SNP)与鸡的腹脂重和腹脂率显著相关.生物信息学分析显示,该SNP恰好位于gga-mi R-456-3p的一个潜在靶基因结合位点处,提示IGFBP2基因可能是gga-mi R-456-3p的一个靶基因,且该SN... 鸡IGFBP2基因3′非编码区(3′UTR)1196C>A单核苷酸多态性(SNP)与鸡的腹脂重和腹脂率显著相关.生物信息学分析显示,该SNP恰好位于gga-mi R-456-3p的一个潜在靶基因结合位点处,提示IGFBP2基因可能是gga-mi R-456-3p的一个靶基因,且该SNP位点可能影响gga-mi R-456-3p对IGFBP2基因表达的调控作用.为鉴定SNP 1196C>A是否为功能性SNP,本研究分别构建了包含该SNP位点C或A等位基因的双荧光素酶报告基因载体,比较分析这两个等位基因在鸡胚成纤维细胞系(DF1)和鸡前脂肪细胞中对报告基因活性和表达的影响;利用mi RNA mimics和inhibitor分析gga-mi R-456-3p对不同等位基因报告基因活性以及内源性IGFBP2表达的影响.结果发现,在DF1细胞和鸡前脂肪细胞中,A等位基因的报告基因活性和表达均显著高于C等位基因(P<0.05);gga-mi R-456-3p仅影响C等位基因的报告基因活性和表达,而对A等位基因的报告基因活性没有明显影响;gga-mi R-456-3p调控细胞内源性IGFBP2基因的m RNA和蛋白质表达.本研究证实IGFBP2基因是gga-mi R-456-3p的靶基因,其3′UTR区SNP 1196C>A是一个功能性SNP,它影响gga-mi R-456-3p对鸡IGFBP2基因的表达调控作用.本研究结果对于鸡的分子辅助选择育种及IGFBP2基因在脂肪沉积中调控机制的阐明具有重要意义. 展开更多
关键词 IGFBP2基因 单核苷酸多态性 3′非编码区 gga-mi R-456-3p
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鸡Perilipin1基因启动子的克隆及分析 被引量:4
13
作者 周纬男 史铭欣 +2 位作者 乔书培 史洪岩 王宇祥 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期249-259,共11页
旨在研究鸡脂滴包被蛋白基因(Perilipin1,Plin)启动子的结构及特征。本研究采用PCR方法扩增了鸡Perilipin1基因5′侧翼区约2kb的DNA片段,并对其进行了克隆、测序及生物信息学分析;同时,构建了其全长及系列截短突变的报告基因表达载体,... 旨在研究鸡脂滴包被蛋白基因(Perilipin1,Plin)启动子的结构及特征。本研究采用PCR方法扩增了鸡Perilipin1基因5′侧翼区约2kb的DNA片段,并对其进行了克隆、测序及生物信息学分析;同时,构建了其全长及系列截短突变的报告基因表达载体,瞬时转染鸡胚成纤维细胞系(DF-1),用双荧光素酶报告基因系统测定了荧光素酶活性,确定了该基因的核心启动子区域。生物信息学分析结果表明,鸡Perilipin1基因的启动子区不存在典型的TATA box结构和CpG岛,但可能存在TFIID、Sp1、AP2、PPAR、RXR、SREBP1、C/EBP、GATA、ER、KLF5等多个转录因子结合位点;报告基因分析结果表明,本研究克隆的鸡Perilipin1基因启动子能够极显著地启动报告基因的表达(P<0.01),并且随着启动子片段由5′端逐渐截短,报告基因活性表现出逐渐增强的趋势,其中-360/-11片段具有最强的报告基因活性。综上表明,鸡Perilipin1基因-360/-11区域的启动子片段具有最强的转录活性,包含该基因的核心启动子序列。 展开更多
关键词 脂滴包被蛋白 启动子 克隆 分析
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鸡mir-17-92基因簇的结构、功能及其调控 被引量:6
14
作者 闫晓红 王志鹏 王宁 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期455-462,共8页
mir-17-92基因簇(mir-17-92cluster)是脊椎动物的一个保守miRNA基因簇,在哺乳动物细胞增殖、分化、凋亡及发育等多种生物学过程中起重要的调控作用。同时,mir-17-92基因簇又是一个癌基因,在多种肿瘤中表达。尽管对mir-17-92基因簇的研... mir-17-92基因簇(mir-17-92cluster)是脊椎动物的一个保守miRNA基因簇,在哺乳动物细胞增殖、分化、凋亡及发育等多种生物学过程中起重要的调控作用。同时,mir-17-92基因簇又是一个癌基因,在多种肿瘤中表达。尽管对mir-17-92基因簇的研究非常广泛,但其作用机制还不完全清楚。鸡mir-17-92基因簇的结构组成特点、功能及其作用机制尚未见研究报道。该文根据同一miRNA基因簇的miRNAs在功能上相关的特点,以鸡mir-17-92基因簇序列为研究对象,采用生物信息学研究方法和手段,开展了鸡mir-17-92基因簇的基因组结构、miRNAs序列组成、靶生物学过程和信号通路以及miRNAs结合位点分布特点等分析研究。结果发现,鸡mir-17-92基因簇调控MAPK、Wnt和TGF-β等多个重要细胞信号通路;miRNA结合位点分布分析显示,该miRNA基因簇多个成员共同作用于同一个靶基因,提示该基因簇的miRNAs成员以组合和协同的方式调控靶基因。该研究为深入了解mir-17-92基因簇如何调控癌症和发育中的关键细胞过程奠定了基础。 展开更多
关键词 mir-17-92基因簇 细胞信号通路 功能 调控
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鸡BMP4的结构与功能分析 被引量:8
15
作者 程博涵 冷丽 李辉 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期18-22,共5页
基于NCBI数据库上骨形态发生蛋白4(BMP4)的氨基酸序列,运用生物信息学方法从蛋白理化性质、信号肽、结构域、Motif、三维结构及物种间进化关系等方面对鸡BMP4的结构和功能进行分析。结果表明,鸡BMP4具有信号肽、TGF-β结构域和潜在的糖... 基于NCBI数据库上骨形态发生蛋白4(BMP4)的氨基酸序列,运用生物信息学方法从蛋白理化性质、信号肽、结构域、Motif、三维结构及物种间进化关系等方面对鸡BMP4的结构和功能进行分析。结果表明,鸡BMP4具有信号肽、TGF-β结构域和潜在的糖基化、磷酸化等位点,无跨膜区,成熟肽与模板2h62B有91.18%的氨基酸序列一致,物种间BMP4相似性为90.65%。鸡BMP4具有BMPs家族典型结构,本研究可为BMP4在软骨和骨形成、原始卵泡发育、干细胞向脂肪细胞定向分化以及早期胚胎发育过程中发挥作用奠定基础。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白4 结构与功能 生物信息学
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鸡miR-20a靶基因TP53INP1鉴定 被引量:3
16
作者 王宁 段逵 +6 位作者 宋鹤 张潇飞 张天目 张文建 闫晓红 王守志 李辉 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期69-74,共6页
前期研究发现,过表达mi R-17-92基因簇能促进鸡前脂肪细胞增殖,但作用机制尚不清楚。生物信息学分析发现,TP53INP1是mi R-17-92基因簇成员mi R-17-5p和mi R-20a的潜在靶基因,研究采用荧光素酶报告基因技术和基因过表达技术开展该靶基因... 前期研究发现,过表达mi R-17-92基因簇能促进鸡前脂肪细胞增殖,但作用机制尚不清楚。生物信息学分析发现,TP53INP1是mi R-17-92基因簇成员mi R-17-5p和mi R-20a的潜在靶基因,研究采用荧光素酶报告基因技术和基因过表达技术开展该靶基因的验证。结果表明,过表达mi R-17-92基因簇能显著抑制TP53INP1的3'UTR报告基因活性;而转染mi R-20a抑制剂能显著提高TP53INP1的3'UTR报告基因活性。将mi RNA抑制剂分别转染到DF1细胞和鸡前脂肪细胞中,采用real-time RT-PCR方法检测细胞TP53INP1基因表达变化。结果显示,mi R-20a抑制剂能促进TP53INP1表达,TP53INP1是mi R-20a的一个靶基因。 展开更多
关键词 miR-17-92基因簇 前脂肪细胞 TP53INP1 基因表达
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BMP7基因多态性与肉鸡生长和体组成性状的关联研究 被引量:6
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作者 程博涵 冷丽 +2 位作者 王守志 陈曦 李辉 《中国家禽》 北大核心 2013年第3期6-10,共5页
为探讨鸡BMP7基因多态性对肉鸡生长和体组成性状的影响,选用东北农业大学肉鸡高、低脂双向选择品系(第6、8、10世代)、AA肉鸡随机群体为试验材料,分析了BMP7基因多态性与肉鸡生长和体组成性状的相关。结果发现在BMP7基因编码区第567bp... 为探讨鸡BMP7基因多态性对肉鸡生长和体组成性状的影响,选用东北农业大学肉鸡高、低脂双向选择品系(第6、8、10世代)、AA肉鸡随机群体为试验材料,分析了BMP7基因多态性与肉鸡生长和体组成性状的相关。结果发现在BMP7基因编码区第567bp处存在1个C→T的变异位点。关联分析结果表明,该变异位点在第8世代高脂系群体中对跖骨长有极显著影响(P<0.01);在第10世代高脂系群体中对腺胃重、腺胃比率、胸宽、大胸肌重有显著影响(P<0.05),对股骨重有极显著影响(P<0.01)。因此,BMP7基因可能是影响肉鸡骨骼性状的重要基因之一。 展开更多
关键词 BMP7基因 肉鸡 单核苷酸多态性 生长 体组成性状
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鸡miR-19a、miR-19b通过靶向抑制LIN9促进前脂肪细胞增殖 被引量:4
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作者 宋鹤 张潇飞 +4 位作者 褚衍凯 邢天宇 闫晓红 李辉 王宁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期943-952,共10页
miR-17-92基因簇编码包括miR-19a、miR-19b在内的至少6个miRNA,在鸡细胞的增殖、分化、凋亡及发育等多种生物学过程中发挥重要作用,但其作用机制尚不清楚。生物信息学分析显示,细胞周期调控子LIN9是miR-17-92基因簇成员miR-19a和miR-19... miR-17-92基因簇编码包括miR-19a、miR-19b在内的至少6个miRNA,在鸡细胞的增殖、分化、凋亡及发育等多种生物学过程中发挥重要作用,但其作用机制尚不清楚。生物信息学分析显示,细胞周期调控子LIN9是miR-17-92基因簇成员miR-19a和miR-19b的潜在靶点。为验证这一预测,构建含野生型LIN9 3'-UTR荧光素酶报告基因载体(psi-CHECK2-LIN9-3'-UTR-WT)及突变型报告基因载体(psi-CHECK2-LIN9-3'-UTR-MUT),开展靶标LIN9的鉴定。复合转染结合报告基因酶活性测定结果表明,过表达miR-19a和miR-19b能显著抑制含野生型LIN9 3'-UTR的报告基因表达,而过表达miR-19a和miR-19b抑制剂显著提高野生型LIN9 3'-UTR报告基因的表达。实时定量PCR(RT-q PCR)证明,miR-19a和miR-19b抑制剂对内源性LIN9 mRNA的表达没有影响,提示miR-19a和miR-19b可能不是通过降解mRNA调控LIN9表达。转染结合CCK-8细胞增殖分析显示,在鸡前脂肪细胞过表达LIN9明显抑制细胞增殖。与此相一致的是,细胞增殖标志分子Cyclin D1、c-Myc、PCNA、Ki67的mRNA表达量明显降低。本研究证实,LIN9是miR-17-92基因簇成员miR-19a和miR-19b的靶标,同时证实,LIN9抑制鸡前脂肪细胞的增殖。是否miR-17-92基因簇编码的其它mi-RNA成员也以LIN9为靶标尚不得而知,我室正在研究中。 展开更多
关键词 miR-17-92基因簇 LIN9 细胞增殖 鸡前脂肪细胞
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鸡miR-17-92基因簇上游调控区功能分析 被引量:4
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作者 程敏 张文建 +4 位作者 邢天宇 闫晓红 李玉茂 李辉 王宁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期724-735,共12页
miR-17-92基因簇(miR-17-92 cluster)在细胞增殖、分化、凋亡、动物发育以及肿瘤发生等过程中发挥重要作用。目前,人和小鼠等哺乳动物miR-17-92基因簇的转录调控已有深入研究,但该基因簇在鸡等鸟类中的转录调控研究还未见报道,主要原因... miR-17-92基因簇(miR-17-92 cluster)在细胞增殖、分化、凋亡、动物发育以及肿瘤发生等过程中发挥重要作用。目前,人和小鼠等哺乳动物miR-17-92基因簇的转录调控已有深入研究,但该基因簇在鸡等鸟类中的转录调控研究还未见报道,主要原因在于鸟类miR-17-92基因簇上游的基因组序列都存在一个gap,且该基因簇启动子的位置和序列也还不清楚。为此,本研究采用染色体步移的方法获得鸡miR-17-92基因簇上游gap区序列,并采用生物信息学分析和报告基因及截短突变技术开展该gap区的功能分析。染色体步移分析发现,鸡miR-17-92基因簇上游gap区全长1704 bp,GC含量达80.11%。生物信息学分析显示,鸡miR-17-92基因簇上游gap区内1段200 bp的序列与人、牛、小鼠等9种动物miR-17-92基因簇上游序列保守性较高,且该区域为人和小鼠等哺乳动物miR-17-92基因簇宿主基因的核心启动子区。将克隆的gap区序列插入pGL3 basic荧光素酶报告基因载体,构建成启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-cMIR17HG(-4228/-2506)。荧光素酶报告基因活性分析表明,p GL3-c MIR17HG(-4228/-2506)报告基因的活性是pGL3 basic空载体活性的417倍,证明所克隆的gap区片段是鸡miR-17-92基因簇宿主基因的启动子。为进一步分析该启动子的结构和功能,构建gap区片段的5'端缺失突变(缺失448 bp)和3'端缺失突变(缺失894 bp)的荧光素酶报告基因载体。与pGL3-cMIR17HG(-4228/-2506)相比,5'端和3'端缺失突变分别使启动子报告基因活性降低19.82%和60.14%。这些数据提示,鸡miR-17-92基因簇宿主基因启动子的重要调控区位于-3400/-2506。本研究结果为进一步开展鸡miR-17-92基因簇的转录调控奠定了基础。 展开更多
关键词 miR-17-92基因簇 启动子 转录调控
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转录因子互作调控鸡脂肪细胞分化研究 被引量:5
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作者 武春艳 张志威 +4 位作者 王秋实 王宇祥 王宁 李玉茂 李辉 《中国家禽》 北大核心 2014年第8期8-13,共6页
哺乳动物的CAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、CAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)、过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)和胆固醇调节元件结合蛋白质1(SREBP1)是脂肪细胞分化调控的重要因子,鸟类脂肪细胞分化的分子调控网络目前还不清楚... 哺乳动物的CAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、CAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)、过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)和胆固醇调节元件结合蛋白质1(SREBP1)是脂肪细胞分化调控的重要因子,鸟类脂肪细胞分化的分子调控网络目前还不清楚。本研究利用荧光素酶报告基因检测发现,C/EBPα、C/EBPβ和SREBP1过表达促进鸡PPARγ基因启动子活性(P<0.05);C/EBPβ和SREBP1过表达抑制鸡C/EBPα基因启动子活性(P<0.05);PPARγ过表达促进鸡FAS基因启动子的活性(P<0.05),并抑制鸡LPL和AFABP基因启动子活性(P<0.05),但对鸡C/EBPα基因启动子活性没有显著影响(P>0.05)。本研究结果为进一步阐明鸡脂肪细胞分化的转录调控网络奠定了基础。 展开更多
关键词 CAAT增强子结合蛋白α(C EBPα) CAAT增强子结合蛋白β(C EBPβ) 过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ) 胆固醇调节元件结合蛋白质1(SREBP1) 启动子活性
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