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菠菜胆碱单氧化酶(CMO)基因的克隆及在大肠杆菌中的诱导表达
被引量:
5
1
作者
申晓辉
陆海
+3 位作者
王沙生
蒋湘宁
Yill Sung Park
M.K.Mahedrappa
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期6-9,共4页
甘氨酸甜菜碱是一种非毒性的渗透调节物质 ,在植物体内是以胆碱为底物 ,经两步氧化而合成的 .菠菜中 ,催化第一步反应的酶为胆碱单氧化酶 (CholineMonooxygenase ,CMO) .为了研究胆碱单氧化酶基因的功能以及转基因植物的抗逆能力 ,在 30...
甘氨酸甜菜碱是一种非毒性的渗透调节物质 ,在植物体内是以胆碱为底物 ,经两步氧化而合成的 .菠菜中 ,催化第一步反应的酶为胆碱单氧化酶 (CholineMonooxygenase ,CMO) .为了研究胆碱单氧化酶基因的功能以及转基因植物的抗逆能力 ,在 30 0mmol L高盐浓度 (n(NaCl)∶n(CaCl2 ) =5 7∶1)的条件下 ,作者分离纯化了菠菜mRNA ,经RT PCR得到全长 (1.3kb)胆碱单氧化酶 (CMO)cDNA ,与已经报道的基因序列相比较 ,同源性为 99% .根据其核苷酸序列推导得到了氨基酸序列 .将PCR纯化产物与pET 30a+ 连接 ,构建了重组表达载体pETCMO ,并转化到大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导获得高效表达 .
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关键词
菠菜
CMO
胆碱单氧化酶
基因克隆
基因表达
甘氨酸甜菜碱
抗逆性
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职称材料
红松体细胞胚胎培养技术体系的建立
被引量:
20
2
作者
申晓辉
蒋湘宁
+1 位作者
Yill Sung Park
Mahedrappa M K
《成都大学学报(自然科学版)》
2005年第1期11-14,共4页
以5个红松家系未成熟合子胚为材料,首次建立了红松体细胞胚胎(somaticembryo,SE)培养体系,为红松人工种子培育苗及基因转化奠定了基础实验表明:在GLH培养基上黑暗培养约6周后,5个红松家系未成熟胚的SE诱导率分别为46.31%、28.2%、26.57%...
以5个红松家系未成熟合子胚为材料,首次建立了红松体细胞胚胎(somaticembryo,SE)培养体系,为红松人工种子培育苗及基因转化奠定了基础实验表明:在GLH培养基上黑暗培养约6周后,5个红松家系未成熟胚的SE诱导率分别为46.31%、28.2%、26.57%、17.81%、9.652% 红松遗传类型、合子胚发育程度对SE诱导率影响均达到极显著的水平;遗传类型和合子胚发育程度之间的交互作用达到极显著水平,但合子胚发育程度与培养基类型间。
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关键词
红松
体细胞胚胎
诱导率
培养技术
培养基
遗传类型
胚发育
未成熟
合子
家系
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职称材料
题名
菠菜胆碱单氧化酶(CMO)基因的克隆及在大肠杆菌中的诱导表达
被引量:
5
1
作者
申晓辉
陆海
王沙生
蒋湘宁
Yill Sung Park
M.K.Mahedrappa
机构
北京
林业
大学生物科学与技术学院
加拿大林务局大西洋林业中心
出处
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期6-9,共4页
基金
"九五"国家科技攻关重点资助项目 (96 0 0 7 0 0 1 0 5 )
文摘
甘氨酸甜菜碱是一种非毒性的渗透调节物质 ,在植物体内是以胆碱为底物 ,经两步氧化而合成的 .菠菜中 ,催化第一步反应的酶为胆碱单氧化酶 (CholineMonooxygenase ,CMO) .为了研究胆碱单氧化酶基因的功能以及转基因植物的抗逆能力 ,在 30 0mmol L高盐浓度 (n(NaCl)∶n(CaCl2 ) =5 7∶1)的条件下 ,作者分离纯化了菠菜mRNA ,经RT PCR得到全长 (1.3kb)胆碱单氧化酶 (CMO)cDNA ,与已经报道的基因序列相比较 ,同源性为 99% .根据其核苷酸序列推导得到了氨基酸序列 .将PCR纯化产物与pET 30a+ 连接 ,构建了重组表达载体pETCMO ,并转化到大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导获得高效表达 .
关键词
菠菜
CMO
胆碱单氧化酶
基因克隆
基因表达
甘氨酸甜菜碱
抗逆性
Keywords
Choline Monooxygenase (CMO), molecular cloning, expression
分类号
Q554 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
红松体细胞胚胎培养技术体系的建立
被引量:
20
2
作者
申晓辉
蒋湘宁
Yill Sung Park
Mahedrappa M K
机构
上海交通大学农业与生物学院
北京
林业
大学生物科学与技术学院
加拿大林务局大西洋林业中心
出处
《成都大学学报(自然科学版)》
2005年第1期11-14,共4页
文摘
以5个红松家系未成熟合子胚为材料,首次建立了红松体细胞胚胎(somaticembryo,SE)培养体系,为红松人工种子培育苗及基因转化奠定了基础实验表明:在GLH培养基上黑暗培养约6周后,5个红松家系未成熟胚的SE诱导率分别为46.31%、28.2%、26.57%、17.81%、9.652% 红松遗传类型、合子胚发育程度对SE诱导率影响均达到极显著的水平;遗传类型和合子胚发育程度之间的交互作用达到极显著水平,但合子胚发育程度与培养基类型间。
关键词
红松
体细胞胚胎
诱导率
培养技术
培养基
遗传类型
胚发育
未成熟
合子
家系
Keywords
Korean pine
somatic embryogenisis
culture
分类号
S791.247 [农业科学—林木遗传育种]
S651 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
菠菜胆碱单氧化酶(CMO)基因的克隆及在大肠杆菌中的诱导表达
申晓辉
陆海
王沙生
蒋湘宁
Yill Sung Park
M.K.Mahedrappa
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
5
下载PDF
职称材料
2
红松体细胞胚胎培养技术体系的建立
申晓辉
蒋湘宁
Yill Sung Park
Mahedrappa M K
《成都大学学报(自然科学版)》
2005
20
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职称材料
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