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微卫星不稳定性的生物学意义及其应用前景 被引量:10
1
作者 丁一 童坦君 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期292-296,共5页
微卫星为遍布于人类基因组中的简单重复序列。在人群中,它们呈现高度多态性,并且稳定遗传。微卫星的高度多态性是微卫星不稳定性的表现,它与错配修复基因的缺陷有关。微卫星不稳定性已广泛应用于肿瘤学的研究,并依此提出了肿瘤发生... 微卫星为遍布于人类基因组中的简单重复序列。在人群中,它们呈现高度多态性,并且稳定遗传。微卫星的高度多态性是微卫星不稳定性的表现,它与错配修复基因的缺陷有关。微卫星不稳定性已广泛应用于肿瘤学的研究,并依此提出了肿瘤发生的“增变基因”途径。在遗传学、老年病学及其它一些生命科学,微卫星不稳定性同样具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 微卫星不稳定性 错配修复基因 增变基因
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生物医学发展的一个新动向——蛋白质组研究现状和展望 被引量:6
2
作者 梁玉 王新娟 《北京生物医学工程》 2000年第3期185-189,192,共6页
关键词 生物医学 发展 蛋白质组 基因组 研究
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真核生物DNA复制起始调控
3
作者 窦亚丽 童坦君 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第6期492-497,共6页
复制起始调控是真核生物复制调控机制的重要环节,也是细胞生长调控的核心问题.对SV40病毒和酵母体系的研究为阐明真核生物的复制起始机制及其与细胞周期的关系提供了线索.目前,与DNA复制起始有关的多种蛋白质因子(如核蛋白... 复制起始调控是真核生物复制调控机制的重要环节,也是细胞生长调控的核心问题.对SV40病毒和酵母体系的研究为阐明真核生物的复制起始机制及其与细胞周期的关系提供了线索.目前,与DNA复制起始有关的多种蛋白质因子(如核蛋白P1,DNA单链结合蛋白,DNA聚合酶α,增殖细胞核抗原等)的作用机理逐渐明朗,周期依赖的调控特点得到了证实文章着重介绍了DNA复制起始在细胞周期中的两个调控点及各种周期蛋白在该点的作用。 展开更多
关键词 DNA 真核生物 复制起始
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分子伴侣的多重功能 被引量:36
4
作者 俞峻 马康涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第2期106-110,共5页
分子伴侣(molecularchaperone)在原核生物和真核生物的细胞中广泛存在.分子伴侣可稳定未折叠或部分折叠的多肽,并防止不适当的多肽链内或链间相互作用;有些分子伴侣也可与天然构象的蛋白质相互作用以促使寡聚态... 分子伴侣(molecularchaperone)在原核生物和真核生物的细胞中广泛存在.分子伴侣可稳定未折叠或部分折叠的多肽,并防止不适当的多肽链内或链间相互作用;有些分子伴侣也可与天然构象的蛋白质相互作用以促使寡聚态蛋白质发生结构重排.基于分子伴侣能识别并调节细胞内多肽的折叠,因此它们还具有介导线粒体蛋白跨膜转运,调控信息传导通路和转录、复制,以及参与微管形成与修复等功能. 展开更多
关键词 分子伴侣 跨膜转运 信息传递 多重功能
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鼠毛及脑线粒体DNA片段缺失与增龄的关系 被引量:14
5
作者 曾昭惠 段建明 +1 位作者 张宗玉 童坦君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期320-327,共8页
以聚合酶链反应(PCR)技术检测不同年龄Balb/c小鼠脑细胞线粒体DNA片段缺失与增龄的关系.发现老年鼠脑细胞线粒体3867bp片段缺失率为50%;而断奶鼠与青年鼠均无此缺失片段出现;用鼠毛为材料进行无损伤检测亦获... 以聚合酶链反应(PCR)技术检测不同年龄Balb/c小鼠脑细胞线粒体DNA片段缺失与增龄的关系.发现老年鼠脑细胞线粒体3867bp片段缺失率为50%;而断奶鼠与青年鼠均无此缺失片段出现;用鼠毛为材料进行无损伤检测亦获类似的结果. 展开更多
关键词 衰老 线粒体DNA 突变
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erbB-2与胃癌细胞恶性表型及其增殖调控的关系 被引量:7
6
作者 姜琨 童坦君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第4期457-462,共6页
应用基因重组、基因转染、Southern杂交、Northern杂交、细胞生长曲线测定及裸鼠成瘤观察了反义erbB-2逆转录病毒重组载体的转染对人胃癌细胞中erbB-2过度表达的影响及其对EGF的反应性.研究结果显示,... 应用基因重组、基因转染、Southern杂交、Northern杂交、细胞生长曲线测定及裸鼠成瘤观察了反义erbB-2逆转录病毒重组载体的转染对人胃癌细胞中erbB-2过度表达的影响及其对EGF的反应性.研究结果显示,erbB-2的表达被其反义重组子特异抑制,伴有细胞增殖能力的下降及致瘤性的下降;在EGF的刺激下,erbB-2高表达肿瘤细胞生长速度提高的幅度显著大于erbB-2反义重组载体转染细胞;EGF促细胞增殖及促基因表达的功能在erbB-2反义重组子转染后受到抑制,提示erbB-2在细胞增殖调控中具有重要功能. 展开更多
关键词 胃癌 ERBB-2 P21 增殖调控 生长因子 恶性表型
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小鼠阿片肽δ受体多肽片段的单克隆抗体细胞系的建立 被引量:2
7
作者 李孟森 杨非易 +3 位作者 沈黎阳 葛韵琴 杜国光 李刚 《海南医学院学报》 CAS 1997年第3期103-104,134,共3页
本实验选用一段合成的小鼠阿片肽δ受体的多肽片段,通过与牛血清清蛋白连接,免疫小鼠,经细胞融合后,检测出抗该多肽片段抗体,从而建立了抗多肽片段单克隆抗体的细胞系。
关键词 阿片肽受体 多肽 单克隆抗体 细胞系 小鼠
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衰老分子机理研究新进展 被引量:18
8
作者 张宗玉 范新青 《实用老年医学》 CAS 1994年第3期97-99,共3页
衰老分子机理研究新进展北京医科大学生物化学与分子生物学系衰老分子机理研究室(100083)张宗玉,范新青衰老机理较为复杂,涉及面广,一直是老年医学、生物学研究前沿。当前衰老机理研究已从整体水平、器官水平、细胞水平进而... 衰老分子机理研究新进展北京医科大学生物化学与分子生物学系衰老分子机理研究室(100083)张宗玉,范新青衰老机理较为复杂,涉及面广,一直是老年医学、生物学研究前沿。当前衰老机理研究已从整体水平、器官水平、细胞水平进而发展到分子水平,进行基本原理探索。... 展开更多
关键词 衰老 分子生物学 老年医学
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甲硫氨酸脑啡肽和抗δ阿片受体抗体对小鼠骨髓瘤细胞信号传递系统的作用 被引量:5
9
作者 黄冬爱 杨非易 +3 位作者 李平风 李刚 葛韵琴 杜国光 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第5期660-664,共5页
为了探讨阿片肽与细胞表面受体结合后所产生的生物效应及其机制 ,用不同浓度甲硫氨酸脑啡肽 ( MENK)及抗 δ阿片受体单克隆抗体处理小鼠的骨髓瘤细胞 ( NS- 1 ) ,然后测定蛋白激酶A( PKA) ,蛋白激酶 C( PKC)活性及三磷酸肌醇 ( IP3 )含... 为了探讨阿片肽与细胞表面受体结合后所产生的生物效应及其机制 ,用不同浓度甲硫氨酸脑啡肽 ( MENK)及抗 δ阿片受体单克隆抗体处理小鼠的骨髓瘤细胞 ( NS- 1 ) ,然后测定蛋白激酶A( PKA) ,蛋白激酶 C( PKC)活性及三磷酸肌醇 ( IP3 )含量 .研究结果表明 ,NENK可升高细胞胞浆及胞膜 PKA的活性 ,且这一作用可被抗δ阿片受体抗体所拮抗 .MENK对 PKC影响呈双向反应 ,0 .1 μmol/L MENK可以升高胞浆 PKC活性 ,但却明显降低胞膜 PKC活性 ;在 MENK浓度为 1 0μmol/L时则情况刚好相反 .1 μmol/L的 MENK可明显降低胞浆及胞膜 PKC活性 ,抗体可拮抗这种下调作用 .MENK可降低细胞内 IP3 的含量 ,且这一作用可被抗δ阿片受体抗体所拮抗 .由此可以推论 :MENK在与 δ阿片受体结合后 ,可以经过多种信号传导系统来调节细胞功能 ,从而产生不同的生物效应 . 展开更多
关键词 MENK 抗δ阿片受体 PKA PKC 骨髓瘤 信号转导
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分子克隆人血小板生成素基因 被引量:6
10
作者 侯纬敏 陆爱丽 +1 位作者 岱美茹 董冬生 《北京医科大学学报》 CSCD 1996年第1期1-3,共3页
目的:克隆人血小板生成素基因,方法:采用RT一PCR的方法。结果:从人胎肝中克隆出全长的血小板生成素(TPO)基因,并亚克隆至PUCll8载体中。该cDNA全长1062BP,编码353个氨基酸,经序列测定与Bartl... 目的:克隆人血小板生成素基因,方法:采用RT一PCR的方法。结果:从人胎肝中克隆出全长的血小板生成素(TPO)基因,并亚克隆至PUCll8载体中。该cDNA全长1062BP,编码353个氨基酸,经序列测定与Bartley等人报道的完全一致[1]。结论:已获得人血小板生成素基因,此项工作为基因工程生产TPO奠定了良好基础。 展开更多
关键词 分子克隆 基因 血小板生成素
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人乳腺癌MCF-7细胞系凋亡过程中bcl-2基因的结合蛋白 被引量:2
11
作者 王文恭 童坦君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期655-657,共3页
M C F7 是 p53 为野生型的人乳腺癌细胞系.为探讨该细胞系凋亡过程中 bcl2 基因的下调机制,以 5氟尿嘧啶(5 Fu)诱导凋亡,用 P C R 技术扩增出人 bcl2(hbcl2)基因调控区长度为 558b... M C F7 是 p53 为野生型的人乳腺癌细胞系.为探讨该细胞系凋亡过程中 bcl2 基因的下调机制,以 5氟尿嘧啶(5 Fu)诱导凋亡,用 P C R 技术扩增出人 bcl2(hbcl2)基因调控区长度为 558bp 的片段,经亚克隆后的序列分析证实其准确性.用此 P C R 产物作为探针与 5 Fu 刺激 12 h 后的 M C F7 核内蛋白质粗提物进行 Southw estern 印迹及凝胶阻滞( E M S A)分析.以未用 5 Fu 刺激者为对照.结果显示,细胞核内一分子量为 53 k D 的结合蛋白与 bcl2 调控区的结合信号明显增强,而一种20 k D 的 D N A 结合蛋白与该区的结合信号明显减弱.这些结果提示p53 蛋白有可能是bcl2 的负转录因子,20 k D 的 D N A 结合蛋白有可能是bcl2 的正转录因子. 展开更多
关键词 细胞凋亡 BCL-2 转录因子 乳腺癌
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erbB-2表达抑制与表皮生长因子刺激对信号转导与转录激活分子及细胞周期蛋白D1的影响 被引量:5
12
作者 姜琨 秦樾 童坦君 《北京医科大学学报》 CSCD 1998年第3期205-206,286,共3页
目的:观察胃癌细胞内原癌基因erbB2表达降低前后信号转导与转录激活分子(STAT1)和细胞周期蛋白D1(cyclinD1)对表皮生长因子(EGF)刺激的反应性。方法:采用Westernbloting检测erbB... 目的:观察胃癌细胞内原癌基因erbB2表达降低前后信号转导与转录激活分子(STAT1)和细胞周期蛋白D1(cyclinD1)对表皮生长因子(EGF)刺激的反应性。方法:采用Westernbloting检测erbB2表达下调前后及EGF刺激前后STAT1和cyclinD1水平。结果:erbB2表达抑制对STAT1的EGF反应性无显著影响;erbB2表达下调后cyclinD1的EGF可诱导性显著降低。结论:erbB2表达降低可抑制EGF对cyclinD1的诱导效应。 展开更多
关键词 胃肿瘤 原癌基因 表皮生长因子 细胞周期蛋白
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rhTPO的分子克隆表达及活性测定 被引量:2
13
作者 陆爱丽 岱美茹 +3 位作者 董冬生 侯纬敏 许尉林 马明信 《北京医科大学学报》 CSCD 1997年第3期196-197,共2页
目的;分子克隆并表达具有生物学活性的人血小板生成素(rhTPO)。方法:采用PCR、序列测定、原核表达及亲和层析法。结果:以人全长的TPOCDNA为模板[1],用PCR法获得了编码195个氨基酸残基的hTPO195cDNA并克隆至原核表达质粒pMal-p2... 目的;分子克隆并表达具有生物学活性的人血小板生成素(rhTPO)。方法:采用PCR、序列测定、原核表达及亲和层析法。结果:以人全长的TPOCDNA为模板[1],用PCR法获得了编码195个氨基酸残基的hTPO195cDNA并克隆至原核表达质粒pMal-p2中,以麦芽糖融合蛋白(MBP)方式进行了表达。经Amylose树脂系和层析纯化获得了较高纯度的rhTPO195融合蛋白。生物学活性测定结果显示,其促进体外培养的巨核细胞集落形成与日本麒麟(Kirin)公司产品类似。结论;获得了具有天然生物学活性rhTPO,并在原核细胞中获得表达。 展开更多
关键词 血小板生成素 分子克隆 巨核细胞
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线粒体DNA突变与衰老及退行性疾病的关系 被引量:3
14
作者 段建明 钱马懿 张宗玉 《国外医学(老年医学分册)》 1997年第3期106-110,共5页
线粒体DNA突变与生物衰老以及老年退行性疾病的发生、发展均密切相关,阐明线粒体DNA突变的规律及其与衰老及老年退行性疾病的关系将为预防和诊治这些疾病提供分子水平的理论依据,并将在提高人类生命质量、延缓人类衰老的进程中起重要作用。
关键词 线粒体 DNA 突变 衰老 退行性疾病 老年病学
原文传递
野生型p53对胃癌细胞系的生长抑制作用
15
作者 王丽君 邹卫 张乃衡 《北京医科大学学报》 CSCD 1997年第1期18-20,共3页
目的:观察野生型p53对胃癌细胞系的生长抑制作用。方法:以逆转录病毒为载体将野生型p53基因导入胃癌细胞系MKN28和BGC823,检测p53对肿瘤细胞的影响。结果:p53在转染细胞中表达水平提高。外源性p53的导入使肿瘤细胞增殖细胞核抗原(P... 目的:观察野生型p53对胃癌细胞系的生长抑制作用。方法:以逆转录病毒为载体将野生型p53基因导入胃癌细胞系MKN28和BGC823,检测p53对肿瘤细胞的影响。结果:p53在转染细胞中表达水平提高。外源性p53的导入使肿瘤细胞增殖细胞核抗原(PCNA)水平明显降低;G0/G1期细胞数增加,S期降低。转染p53基因的MKN28细胞探鼠体内成瘤能力明显下降。结论:野生型p53基因参与调节DNA复制及细胞周期,抑制癌细胞过度增殖。 展开更多
关键词 胃肿瘤 基因疗法 P53基因
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胆碱能系统大细胞基底核介导认知过程
16
作者 关宝祥 贾弘 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期338-340,共3页
前脑基底-大细胞基底核-新皮层是胆碱类物质作用的中枢。乙酰胆碱在此区域接受刺激并提供信息到大脑皮层和杏仁核,介导认知过程的产生。采用基因转移技术将果蝇胆碱乙酰基转移酶基因植入基因工程细胞载体──纤维母细胞,后者经脑内... 前脑基底-大细胞基底核-新皮层是胆碱类物质作用的中枢。乙酰胆碱在此区域接受刺激并提供信息到大脑皮层和杏仁核,介导认知过程的产生。采用基因转移技术将果蝇胆碱乙酰基转移酶基因植入基因工程细胞载体──纤维母细胞,后者经脑内移植作用于大细胞基底核神经元,释放乙酰胆碱或胆碱。从动物行为能力,组织化学诸方面研究表明:胆碱类物质与胆碱能系统共同参与认知过程中的注意力、学习和记忆行为。 展开更多
关键词 胆碱能系统 大细胞基底核 认知
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FHIT: 一个将脆弱位点与肿瘤相联系的抑癌基因 被引量:5
17
作者 黄佳鹏 王新娟 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期253-255,共3页
FHIT位于3p14.2区域,此区域内有脆弱位点FRA3B。FHIT编码一个与酵母APH1有69%同源性,可能具有水解Ap4A功能的蛋白质。FHIT在多种肿瘤中,包括食道癌、胃癌、结肠癌、肺癌及乳腺癌,存在多种类型的... FHIT位于3p14.2区域,此区域内有脆弱位点FRA3B。FHIT编码一个与酵母APH1有69%同源性,可能具有水解Ap4A功能的蛋白质。FHIT在多种肿瘤中,包括食道癌、胃癌、结肠癌、肺癌及乳腺癌,存在多种类型的高比例缺失突变。FHIT是第一个将脆弱位点与肿瘤相联系的抑癌基因。 展开更多
关键词 肿瘤 抑癌基因 脆弱位点 FHIT
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DNA损伤修复与大鼠平阳霉素性白内障的关系 被引量:3
18
作者 李显喜 何海鹰 +3 位作者 王波 张家萍 梁康 张昌颖 《北京医科大学学报》 CSCD 1996年第3期177-179,共3页
目的:观察平阳霉素诱发的大鼠白内障模型晶体上皮细胞DNA损伤及修复的动态过程。方法:单细胞电泳法(Singlecellgelassay,SCG)。结果:首次注射平阳霉素12h即出现严重的DNA单链断裂(DNAsing... 目的:观察平阳霉素诱发的大鼠白内障模型晶体上皮细胞DNA损伤及修复的动态过程。方法:单细胞电泳法(Singlecellgelassay,SCG)。结果:首次注射平阳霉素12h即出现严重的DNA单链断裂(DNAsinglestrandbreaks,SSB),直至白内障产生,SSB仍很严重,该DNA损伤较其它模型更严重,其晶体囊内容物在致障过程中出现明显的液化与崩解。结论:平阳霉素性白内障模型在致障过程中有较其它模型更严重的DNA单链损伤,且可能有不尽相同的机理存在。 展开更多
关键词 修复 平阳霉素 白内障 DNA
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人淀粉样前体蛋白基因C端在SH-SY5Y细胞系中的稳定表达及其对细胞生长发育的影响 被引量:1
19
作者 乌永中 马康涛 张迺蘅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期223-227,共5页
淀粉样前体蛋白(APP)是阿尔茨海默氏病(AD)病因学中重要的分子,但其正常的生理功能尚不清楚.为了研究细胞内过量产生其各种片段对细胞生理机能的影响.将人APP695cDNA中编码C端105个氨基酸残基的DNA片段重... 淀粉样前体蛋白(APP)是阿尔茨海默氏病(AD)病因学中重要的分子,但其正常的生理功能尚不清楚.为了研究细胞内过量产生其各种片段对细胞生理机能的影响.将人APP695cDNA中编码C端105个氨基酸残基的DNA片段重组到真核表达载体pDORneo中形成重组质粒pDOR-neo-CT.然后用脂质体将其转染到人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中.用800μg/mlG418筛选获得了在mRNA和蛋白质水平均表达相应片段的稳定细胞系.MTT和LDH分析表明,APPC端的表达未能对SH-SY5Y细胞产生明显的毒性作用. 展开更多
关键词 APP基因 C端片段 SH-SY5Y细胞 细胞毒性
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RT-PCR方法检测非神经元、类神经元、神经元细胞系中淀粉样前体蛋白基因表达 被引量:1
20
作者 乌永忠 马康涛 张迺蘅 《北京医科大学学报》 CSCD 1999年第1期17-19,共3页
目的与方法:根据人淀粉样前体蛋白(amyloidprecursorprotein,APP)基因cDNA序列设计的引物,提取总RNA,利用RTPCR方法检测非神经、类神经及神经细胞系APP基因的表达。结果:利用专门设... 目的与方法:根据人淀粉样前体蛋白(amyloidprecursorprotein,APP)基因cDNA序列设计的引物,提取总RNA,利用RTPCR方法检测非神经、类神经及神经细胞系APP基因的表达。结果:利用专门设计的引物不能检测野生型COS7细胞中APP基因的表达,但可以检测转染人APP基因的非神经元类COS7细胞,类神经元的野生型PC12及人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y细胞中APP基因的表达。 展开更多
关键词 早老性痴呆 病因学 基因表达 RT-PCR APP基因
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