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人11β-羟基类固醇脱氢酶基因克隆与表达的实验研究 被引量:1
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作者 胡蒙亮 徐杰 +5 位作者 任航江 韩亭亭 满永 唐蔚青 黎健 李国平 《心肺血管病杂志》 2018年第11期1019-1022,共4页
目的:构建人Ⅰ型11β羟基类固醇脘氢酶(11β-HSD1)原核表达载体并表达目的蛋白,为代谢综合征的研究奠定基础。方法:从Hep G2细胞系中提取细胞总RNA,经反转录合成c DNA第一链后再以其为模版,扩增11β-HSD1基因。p ET32a原核表达载体和PC... 目的:构建人Ⅰ型11β羟基类固醇脘氢酶(11β-HSD1)原核表达载体并表达目的蛋白,为代谢综合征的研究奠定基础。方法:从Hep G2细胞系中提取细胞总RNA,经反转录合成c DNA第一链后再以其为模版,扩增11β-HSD1基因。p ET32a原核表达载体和PCR扩增出的产物经过Bam HI和Xho I双酶切后,在16℃过夜的条件下用T4 DNA连接酶连接上述酶切产物,然后用该产物转化Top10大肠杆菌感受态细胞,挑克隆后进行测序。将克隆成功的11β-HSD1重组质粒转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),分别用不同浓度、不同时间的IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖)诱导其表达,并优化诱导条件。表达的蛋白采用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合考马斯亮蓝染色的方法观察目的基因的表达情况。结果:挑选的克隆经测序证实p ET32a-11β-HSD1重组质粒构建成功,11β-HSD1基因与携带有6×His-tag标签和肠激酶识别位点的硫氧还蛋白trx A基因融合,在IPTG浓度为10μM,诱导时间为5小时时,上清中有明显的分子量约为52 k Da的重组蛋白产生,且目的蛋白分子量的大小与预期一致。结论:本实验成功构建了人p ET32a-11β-HSD1蛋白原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后成功诱导了其融合表达。目的蛋白主要以可溶性蛋白的形式存在于上清中,为进一步研究其结构、功能、制备抗体等奠定了基础。 展开更多
关键词 I型11β羟基类固醇脱氢酶 原核表达 硫氧还蛋白 融合表达
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11β-羟基类固醇脱氢酶诱发脂质蓄积的实验研究 被引量:1
2
作者 胡蒙亮 高丰衣 +4 位作者 任航江 韩亭亭 满永 李国平 黎健 《心肺血管病杂志》 2018年第7期692-696,共5页
目的:探讨I型11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD1)对脂质蓄积的影响及机制。方法:构建I型11β-羟基类固醇脱氢酶腺病毒(Ad-11β-HSD1),并在293A细胞中进行扩增和纯化;C57BL/6小鼠按随机数字表法分组,实验组10只,通过尾静脉注射Ad-11β-HS... 目的:探讨I型11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD1)对脂质蓄积的影响及机制。方法:构建I型11β-羟基类固醇脱氢酶腺病毒(Ad-11β-HSD1),并在293A细胞中进行扩增和纯化;C57BL/6小鼠按随机数字表法分组,实验组10只,通过尾静脉注射Ad-11β-HSD1,对照组10只。2周后采集小鼠血浆,收集肝脏组织。油红O染色观察肝脏组织脂质蓄积情况;酶法测定血脂以及肝脏中脂质含量;利用实时荧光定量聚合酶链式反应技术分析和蛋白免疫印迹,分析脂代谢相关基因和蛋白表达情况;分析AKT/GSK胰岛素信号通路的改变。结果:与对照组相比,2周后实验组肝脏脂质蓄积,脂滴富集明显,脂质定量显著增加[(59.61±3.21)vs.(80.47±5.1)μg/mg,P<0.05];实验组脂肪酸合成通路主调控因子SREBP1及其合成通路相关蛋白FAS、SCD1和ACC1的表达水平均不同程度升高(P<0.05),而基因表达水平无差异。胰岛素信号通路受损,p-AKT,p-GSK水平降低(P<0.05)。血浆中TG和TC水平无差异。结论:11β-HSD1可能通过损伤胰岛素信号通路,并激活脂肪酸合成通路而促进小鼠脂肪肝形成。 展开更多
关键词 Ⅰ型11β-羟基类固醇脱氢酶 脂肪肝 腺病毒 C57BL/6小鼠
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老年人血清25-羟基维生素D水平与亚临床动脉粥样硬化的关系 被引量:7
3
作者 王思明 王欣越 +6 位作者 董军 王默 李红霞 杨睿悦 王抒 陈文祥 季福绥 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1201-1205,共5页
目的研究老年人血清25-羟基维生素D水平与亚临床动脉粥样硬化的关系,探讨其在动脉粥样硬化临床应用中的价值,为早期预防动脉粥样硬化提供数据支持。方法采用横断面调查方法,收集60岁及以上老年体检人群186例,对其进行问卷调查、体... 目的研究老年人血清25-羟基维生素D水平与亚临床动脉粥样硬化的关系,探讨其在动脉粥样硬化临床应用中的价值,为早期预防动脉粥样硬化提供数据支持。方法采用横断面调查方法,收集60岁及以上老年体检人群186例,对其进行问卷调查、体格检查、血液检查和颈动脉B型超声检测,以颈动脉内膜中层厚度(cIMT)作为评价亚临床动脉粥样硬化的指标;采用同位素稀释液相色谱串联质谱法测定血清25-羟基维生素D。和25-羟基维生素D2,用以评价体内维生素D状态,分析血清25-羟基维生素D水平与clMT的关系。结果186例老年体检人群血清总25一OHVitD浓度为22.76(18.17~28.23)μg/L,参考区间(2.5%~97.5%百分位数)9.74~40.33μg/L;男性血清总25-OH VitD水平[23.78(19.00~28.81)μg/L]显著高于女性[20.98(17.24~26.52)μg/L](Z=-2.059,P=0.040)。亚临床动脉粥样硬化组(cIMT〉1.0mm)的血清总25-OH Vit D水平[20.77(16.87~27.03)μg/L3明显低于对照组[24.61(20.18~29.31)μg/L](Z=-2.832,P=0.005)。非参数相关性分析结果显示,25—0HVitD水平与cIMT呈显著负相关(r=-0.178,P=0.016)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清总25-OHVitD水平降低和性别与亚临床动脉粥样硬化独立相关,血清25-OHVitD最高四分位水平人群发生亚临床动脉粥样硬化的风险是最低四分位水平的22.1%(OR=0.221,95%CI:0.07640.642)。结论血清25—OH VitD水平降低可能会增加亚临床动脉粥样硬化的风险。 展开更多
关键词 维生素D 动脉粥样硬化
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同位素稀释质谱法在美国CDC-CRMLN计划中的比对结果分析 被引量:3
4
作者 周伟燕 李红霞 +8 位作者 张传宝 杨睿悦 张江涛 张天娇 闫颖 曾洁 王抒 陈文祥 董军 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第9期690-695,共6页
目的总结并回顾性分析同位素稀释质谱法在美国疾病预防控制中心(CDC)胆固醇参考方法实验室网络(CRMLN)中的比对结果,为我国血脂测定提供质量保证。方法采用我国建立的同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)测定血清总胆固醇(TC)和三... 目的总结并回顾性分析同位素稀释质谱法在美国疾病预防控制中心(CDC)胆固醇参考方法实验室网络(CRMLN)中的比对结果,为我国血脂测定提供质量保证。方法采用我国建立的同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)测定血清总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)的方法参加CRMLN比对。2016年之前每3个月1次,每次4种样品,测定2批。2016年之后每半年比对1次,每次4种样品,测定2批。每次测定中至少同时测定2个有证标准物质作为质控品。结果 15次TC比对结果显示,本血脂参考实验室(以下简称"本室")平均CV为0.43%,CDC各参加实验室间CV为0.42%,本室与实验室间总体均值的偏移为0.22%,与CDC靶值的偏移为0.58%。15次TG比对结果显示,本室平均CV为0.62%,本室测定TG的结果与实验室间均值的偏移为-0.98%,与CDC靶值的偏移为-0.80%。TC和TG各60个比对结果中,98%(59/60)的TC测定CV满足CDC的精密度要求,70%(42/60)的测定满足TC准确度要求(TC:CV≤1%,偏移≤1%);92%(55/60)的TG测定准确度满足CDC的要求(TG:偏移≤2.55%)。结论 ID-LC/MS/MS测定血清TC和TG的方法在CRMLN比对中数据良好,与CDC及各网络实验室测定结果一致,有望在我国血脂标准化中发挥重要作用并为参考测量比对计划提供经验和技术支持。 展开更多
关键词 美国疾病预防控制中心 胆固醇参考方法实验室网络 胆固醇 三酰甘油 同位素稀释液相色谱串联质谱
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miR-301a调节小鼠巨噬细胞中炎症因子的表达 被引量:1
5
作者 窦琳 黄秀清 +2 位作者 沈涛 李林芳 黎健 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第5期447-451,共5页
目的探讨miR-301a对巨噬细胞炎症因子表达水平的影响,从microRNA角度阐明动脉粥样硬化的发病机制,为动脉粥样硬化的防治提供新的思路。方法高脂喂养Apo E-/-小鼠建立动脉粥样硬化模型,收集小鼠主动脉血管,利用real-time PCR检测组织中mi... 目的探讨miR-301a对巨噬细胞炎症因子表达水平的影响,从microRNA角度阐明动脉粥样硬化的发病机制,为动脉粥样硬化的防治提供新的思路。方法高脂喂养Apo E-/-小鼠建立动脉粥样硬化模型,收集小鼠主动脉血管,利用real-time PCR检测组织中miR-301a的表达水平;利用脂质体在RAW264.7细胞中转染miR-301a mimic和miR-301a inhibitor,用real-time PCR检测细胞中miR-301a水平,并检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达水平,用Western blot检测NF-κB抑制因子(NKRF)蛋白水平,用免疫荧光染色检测p65细胞定位。结果在高脂喂养的Apo E-/-小鼠主动脉血管壁组织中miR-301a的表达水平升高;在RAW264.7细胞中过表达miR-301a可抑制NKRF蛋白水平,促进p65细胞核定位,升高细胞中TNF-α、IL-6和MCP-1的mRNA表达;在RAW264.7细胞中低表达miR-301a可升高NKRF蛋白水平,促进p65细胞质定位,减少细胞中TNF-α、IL-6和MCP-1的mRNA表达。结论在高脂喂养的Apo E-/-小鼠主动脉血管壁组织中miR-301a表达水平升高;在RAW264.7细胞中miR-301a通过调节NKRF的表达影响p65活性进而调控TNF-α、IL-6和MCP-1的mRNA表达,提示microRNA在动脉粥样硬化发病的炎症机制中具有重要作用。 展开更多
关键词 miR-301a 肿瘤坏死因子Α 白细胞介素6 单核细胞趋化蛋白1 NF-κB抑制因子
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人骨形成因子7基因慢病毒载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达 被引量:1
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作者 屈彦纯 王爱香 +4 位作者 郭嘉宁 王嘉南 杨阔 朱小泉 杨泽 《中国老年保健医学》 2018年第4期21-25,共5页
BMP7是骨形成因子家族的一个成员,它不仅是一个重要的成骨生长因子,而且在糖尿病肾脏损伤保护和逆转中扮演重要的角色。干细胞治疗已经逐渐发展为糖尿病肾病治疗的一种有效手段,骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是BMP7的... BMP7是骨形成因子家族的一个成员,它不仅是一个重要的成骨生长因子,而且在糖尿病肾脏损伤保护和逆转中扮演重要的角色。干细胞治疗已经逐渐发展为糖尿病肾病治疗的一种有效手段,骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是BMP7的体内天然分泌细胞。本研究旨在通过构建BMP7重组慢病毒表达载体,感染MSCs,并进行鉴定,从而建立BMP7高表达的MSCs细胞系。首先通过PCR法扩增BMP7基因的蛋白编码序列,并克隆入pCDH-BMP7慢病毒载体,其后与包装质粒共转染293T细胞包装病毒,将慢病毒感染小鼠MSCs,荧光显微镜下鉴定感染率。最后,采用定量PCR和Western blot检测BMP7的表达。测序结果表明pCDH-BMP7慢病毒载体构建成功,包装病毒产生的病毒液滴度为5×10~8TU/ml,慢病毒感染小鼠MSCs的转染率高于75%,定量PCR和Western blot结果均显示BMP7表达比对照组显著升高。结果表明BMP7重组慢病毒载体构建成功,包装得到高浓度滴度病毒液,感染小鼠MSCs能稳定过表达BMP7蛋白,为进一步探索高表达BMP7的MSCs治疗糖尿病肾脏损伤的研究提供实验基础。 展开更多
关键词 慢病毒 BMP7 骨髓间充质干细胞 糖尿病肾病
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国内7省市老年人抑郁症的检出率及影响因素分析 被引量:16
7
作者 胡雅娴 罗森林 +8 位作者 庞婧 于建民 宫环 曾平 韩怡文 张延 张恩毅 黎健 张铁梅 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第7期1272-1277,1313,共7页
目的:调查分析国内7省市老年人抑郁症的检出率及特点,并从老年人基本情况、躯体健康、认知功能等方面综合分析抑郁症的影响因素。方法:采用GDS-30量表分析2011-2012年在北京、上海、哈尔滨、西安、成都、长沙和重庆市及周边乡镇的9200... 目的:调查分析国内7省市老年人抑郁症的检出率及特点,并从老年人基本情况、躯体健康、认知功能等方面综合分析抑郁症的影响因素。方法:采用GDS-30量表分析2011-2012年在北京、上海、哈尔滨、西安、成都、长沙和重庆市及周边乡镇的9200名60岁以上老年抑郁症的发生情况,并分析影响抑郁检出率的相关因素。结果:调查老年对象的抑郁症检出率为17.2%,其中男性为15%,女性为19.6%。女性老年人在各个年龄段的抑郁症检出率均高于男性。抑郁症检出率随着年龄的增加逐渐增加。文化水平、健康自评、认知功能与抑郁症检出率密切相关。结论:抑郁症是国内7省市老年人常见的心理疾病,女性、高龄、低文化水平、健康自评差、认知功能障碍的老年人患抑郁症的几率更高。 展开更多
关键词 抑郁症 老年人 影响因素
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赖氨大黄酸对KK/HlJ糖尿病小鼠胰岛素抵抗的改善作用及其机制 被引量:6
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作者 李彩 魏洁 +4 位作者 甄永占 代明鹤 胡刚 郭立新 林雅军 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1074-1079,共6页
目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对链脲佐菌素(STZ)诱导的KK/HlJ糖尿病(DM)小鼠胰岛素抵抗的改善作用,并阐明其作用机制。方法:腹腔注射STZ(50mg·kg^(-1))并给予DM专属饲料制备KK/HlJ小鼠DM模型。将48只小鼠分为正常对照组、模型组、低剂... 目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对链脲佐菌素(STZ)诱导的KK/HlJ糖尿病(DM)小鼠胰岛素抵抗的改善作用,并阐明其作用机制。方法:腹腔注射STZ(50mg·kg^(-1))并给予DM专属饲料制备KK/HlJ小鼠DM模型。将48只小鼠分为正常对照组、模型组、低剂量RHL治疗组(25mg·kg^(-1))和高剂量RHL治疗组(50mg·kg^(-1)),每组12只,共治疗16周。采用葡萄糖氧化酶法检测各组小鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平,HE染色观察小鼠胰腺组织形态表现,免疫组织化学法检测小鼠胰岛组织中胰岛素水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清胰岛素、C反应蛋白(CRP)和肝脏组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)水平,Western blotting法检测小鼠肝脏组织中糖原合成相关基因(PI3K、AKT和GSK-3β)的磷酸化表达水平。结果:与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠FBG、TG和TC水平降低(P<0.05),胰岛素水平无明显变化(P>0.05)。与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠血清CRP水平和肝脏组织中TNF-α和IL-6水平降低(P<0.01)。HE染色,与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠胰岛形态有一定恢复,偶见炎症浸润;免疫组织化学染色,与模型组比较,低剂量RHL治疗组小鼠棕色颗粒状物质明显减少,而高剂量RHL治疗组小鼠胰岛中未见棕色颗粒状物质。与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠糖原合成相关基因PI3K、AKT和GST-3β磷酸化表达水平升高(P<0.01)。结论:RHL对STZ所致KK/HlJ DM小鼠胰岛素抵抗有改善作用,其机制可能与RHL促进糖原合成有关。 展开更多
关键词 赖氨大黄酸 小鼠 KK/HlJ 胰岛素抵抗 磷酯酰肌醇3-激酶
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黄芪注射液对人脐静脉内皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用 被引量:3
9
作者 姚赫 陈冰 +2 位作者 魏洁 胡刚 林雅军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第20期2018-2025,共8页
目的探讨黄芪注射液对缺氧复氧(anoxia-reoxygenation,AR)所致的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的保护作用及其作用机制。方法缺氧条件下(95%N2,5%CO2)培养第10代HUVECs(AR组)6 h,随后在正常培... 目的探讨黄芪注射液对缺氧复氧(anoxia-reoxygenation,AR)所致的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的保护作用及其作用机制。方法缺氧条件下(95%N2,5%CO2)培养第10代HUVECs(AR组)6 h,随后在正常培养条件下(20%O2,5%CO2)继续复氧培养细胞2 h,并在期间同时应用5、10、20 mg/mL黄芪注射液进行干预,以正常条件下培养的第10代HUVECs作为对照组。通过MTT法测定细胞活性,光学显微镜下观察细胞形态以及细胞SA-β-gal染色情况,ELISA检测细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutases,SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,RT-PCR检测细胞KNDC1 mRNA转录水平,Western blot检测细胞中p53、p-p53、p21和KNDC1蛋白表达。结果黄芪注射液可改善AR所致的细胞增殖抑制、细胞SOD、GSH-Px活性降低及细胞损伤,并在所研究的剂量范围内具有明显的剂量-效应关系(P<0.05)。AR可导致KNDC1 mRNA及蛋白表达明显升高,同时上调其下游p53/p21通路蛋白的表达(P<0.05)。黄芪注射液呈浓度依赖性降低AR导致的KNDC1 mRNA及KNDC1、p53、p-p53和p21蛋白表达的升高(P<0.05)。结论黄芪注射液通过抑制KNDC1/p53通路的过度激活,提高细胞的活力及抗氧化能力,改善AR所致的HUVECs损伤。 展开更多
关键词 黄芪注射液 KNDC1 缺氧复氧 细胞损伤 人脐静脉内皮细胞
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基于深度森林的量表数据挖掘方法 被引量:4
10
作者 佟彤 罗森林 +1 位作者 潘丽敏 张铁梅 《电子设计工程》 2020年第13期88-91,96,共5页
在数据挖掘领域中,量表是间接获取样本属性数据的重要工具。针对量表数据离散、稀疏、二值化的特点,导致其难以进行分析挖掘的问题。文中采用了基于深度森林的量表数据挖掘方法,实验分别对老年健康综合评估数据库中的两个量表进行对比... 在数据挖掘领域中,量表是间接获取样本属性数据的重要工具。针对量表数据离散、稀疏、二值化的特点,导致其难以进行分析挖掘的问题。文中采用了基于深度森林的量表数据挖掘方法,实验分别对老年健康综合评估数据库中的两个量表进行对比分析。实验结果表明,在所选取的两个量表中,提取到的关键属性数量相比于原始量表属性数量分别下降了30%和40%,且比基线模型下降了16%和18%。同时,提出的方法可在保证分类性能基本不变的情况下,进一步降低提取到的关键属性数量。 展开更多
关键词 深度森林 量表数据 数据挖掘 属性提取
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中老年男性迟发型性腺功能减退症的研究进展 被引量:14
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作者 高丰衣 李国平 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1267-1270,共4页
男性迟发性性腺功能减退症(LOH)是与年龄相关并具有典型临床症状的综合征,严重影响男性的生殖健康与生活,睾酮相对缺乏是其最主要的特征。Leydig细胞数量的减少和功能的下降是LOH发生的核心机制。雄性激素生物活性的改变、雄激素受... 男性迟发性性腺功能减退症(LOH)是与年龄相关并具有典型临床症状的综合征,严重影响男性的生殖健康与生活,睾酮相对缺乏是其最主要的特征。Leydig细胞数量的减少和功能的下降是LOH发生的核心机制。雄性激素生物活性的改变、雄激素受体异常和下丘脑-垂体-睾丸轴反馈调节功能障碍等为LOH发病诱因。寻找安全有效的LOH的治疗方法具有非常积极的意义。 展开更多
关键词 性腺功能减退症 睾酮
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肝脏特异性Ⅰ型11β-羟基类固醇脱氢酶转基因小鼠肝脏核糖核酸测序差异表达基因分析研究 被引量:2
12
作者 胡蒙亮 任航江 +3 位作者 韩亭亭 满永 黎健 李国平 《心肺血管病杂志》 2019年第7期781-787,共7页
目的:本研究通过对肝脏特异性Ⅰ型11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD1)转基因小鼠进行表型分析,并对其肝脏组织进行RNA测序(RNA-seq),获得长链非编码RNA(lncRNA)和信使RNA(mRNA)表达谱,重点分析与脂质代谢相关的mRNA和lncRNA的差异表达基... 目的:本研究通过对肝脏特异性Ⅰ型11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD1)转基因小鼠进行表型分析,并对其肝脏组织进行RNA测序(RNA-seq),获得长链非编码RNA(lncRNA)和信使RNA(mRNA)表达谱,重点分析与脂质代谢相关的mRNA和lncRNA的差异表达基因。方法:构建肝脏特异性11β-HSD1转基因小鼠;收集野生型和肝脏特异性11β-HSD1转基因小鼠的肝脏组织;油红O染色观察肝脏组织脂质蓄积情况;酶法测定肝脏组织三酰甘油含量;利用蛋白免疫印迹检测脂代谢相关蛋白表达情况;提取两组小鼠肝脏RNA,通过RNA-seq构建mRNA和lncRNA差异表达谱;通过GO和KEGG PATHWAY分析对差异表达的基因进行生物学过程的富集和脂质代谢通路的分析,筛选出与脂代谢相关的差异显著的mRNA和lncRNA;通过实时荧光定量PCR验证肝脏组织中部分差异显著的与脂代谢相关的基因表达水平。结果:肝脏特异性11β-HSD1转基因小鼠相比野生型小鼠,肝脏高度表达11β-HSD1蛋白,模型构建成功。与野生型小鼠相比,肝脏特异性11β-HSD1转基因小鼠肝脏脂质蓄积,脂质合成通路激活。RNA-seq测序显示,两组样本中有323条差异表达的lncRNA和825条差异表达的mRNA。其中123条lncRNA表达上调,200条lncRNA表达下调;表达上调和下调的mRNA数目分别为376和449。进一步对其进行GO富集分析,结果显示差异表达的RNA主要参与脂质代谢、脂质生物合成和脂肪酸代谢等生物学过程。实时荧光定量PCR验证部分基因表达水平的结果与RNA-seq测序一致。结论:本研究获取了全面的肝脏特异性11β-HSD1转基因小鼠转录组信息,加深了对肝脏特异性11β-HSD1转基因小鼠肝脏脂质蓄积的理解,为脂肪肝的防治提供理论依据。 展开更多
关键词 Ⅰ型11β-羟基类固醇脱氢酶 核糖核酸测序 信使核糖核酸 长链非编码核糖核酸 非酒精性脂肪肝
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细胞程序性坏死在动脉粥样硬化中作用的研究进展 被引量:3
13
作者 于晓雪 沈涛 《心肺血管病杂志》 2019年第11期1192-1195,1203,共5页
真核细胞死亡的机制是高度进化保守的,在维持机体发育、生理平衡和疾病发生过程中具有重要意义。成年人体内每天约有100~1 000亿个细胞死亡,而后被新生的健康细胞所代替,以维持整个机体的稳态[1]。《cell death&differentiation》... 真核细胞死亡的机制是高度进化保守的,在维持机体发育、生理平衡和疾病发生过程中具有重要意义。成年人体内每天约有100~1 000亿个细胞死亡,而后被新生的健康细胞所代替,以维持整个机体的稳态[1]。《cell death&differentiation》期刊细胞死亡命名委员会(nomenclature committee on cell death,NCCD)依据细胞死亡的形态学特点,将细胞死亡分为三大经典类型:凋亡、自噬和坏死[2]。既往研究认为,细胞凋亡和自噬是主动的可被调控的细胞死亡过程,而细胞坏死是被动的不可调控的细胞死亡形式。 展开更多
关键词 程序性坏死 动脉粥样硬化 受体相互作用蛋白激酶 混合系列蛋白激酶结构域样蛋白
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8-异丙前列烷与血清氧化和生化指标的相关性
14
作者 代明鹤 甄永占 +2 位作者 魏洁 胡刚 林雅军 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第6期835-836,共2页
氧化应激参与了疾病发生、发展及机体衰老进程。氧化应激是由活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成过多或体内抗氧化系统失衡引起的。ROS水平过高可能会引起炎性反应和细胞毒性反应,从而引起细胞衰老或死亡。
关键词 氧化应激 生化指标 相关性 血清 细胞毒性反应 疾病发生 衰老进程 系统失衡
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长链非编码RNA在心肌肥厚中的研究现状及进展
15
作者 王确 沈涛 黎健 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期257-261,共5页
长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)的结构、功能存在多样性,参与多种生理及病生理过程,具有重要的功能,是近期的生物医学研究热点之一。长链非编码RNA与多种心血管疾病密切相关,最新的报道发现长链非编码RNA在心肌肥厚的发... 长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)的结构、功能存在多样性,参与多种生理及病生理过程,具有重要的功能,是近期的生物医学研究热点之一。长链非编码RNA与多种心血管疾病密切相关,最新的报道发现长链非编码RNA在心肌肥厚的发生和发展中发挥重要作用。本文主要结合长链非编码RNA在心肌肥厚领域的研究现状,综述其在疾病发生发展中的作用和意义。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 心肌肥厚
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KNDC1功能的研究进展
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作者 孙靖玉 林雅军 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第9期1999-2001,共3页
激酶非催化C-叶结构域蛋白( KNDC)1又称V-KNDC1 ( KIND )、RASGEF2、C10 orf23、Very-KIND、bB439 H18. 3 ,是近年来发现的新基因,在脑的不同区域表达水平不同,尤其在小脑颗粒细胞中表达最高〔1〕.其在许多信号传导通路的蛋白间分子识... 激酶非催化C-叶结构域蛋白( KNDC)1又称V-KNDC1 ( KIND )、RASGEF2、C10 orf23、Very-KIND、bB439 H18. 3 ,是近年来发现的新基因,在脑的不同区域表达水平不同,尤其在小脑颗粒细胞中表达最高〔1〕.其在许多信号传导通路的蛋白间分子识别和功能调控中扮演重要角色〔2〕.研究表明, KNDC1与神经元树突的生长、人脐静脉内皮细胞( HUVEC)的衰老及纤维核心蛋白的修饰有关,有望成为新的研究热点.本文将 KNDC1 这一新调控因子的结构特点与其功能作用及其机制进行综述. 展开更多
关键词 KNDC1 Ras鸟苷酸交换因子 神经元树突 衰老 纤维核心蛋白
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微流控技术在临床检验中的应用 被引量:7
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作者 邹丽辉 李英 肖飞 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期631-633,共3页
目前,临床检验正在向两种不同方向发展,一种是高度流水线化的中心实验室,一种是高度集成的便携式检测系统.后者从早期的单个项目检测,逐渐演化为基于微流控技术的集成平台,可以同时执行多个实验步骤和测试,进而形成包括生化、免疫、微... 目前,临床检验正在向两种不同方向发展,一种是高度流水线化的中心实验室,一种是高度集成的便携式检测系统.后者从早期的单个项目检测,逐渐演化为基于微流控技术的集成平台,可以同时执行多个实验步骤和测试,进而形成包括生化、免疫、微生物、细胞学检测的全套微型实验体系,这些基于微流控技术的快速诊断系统将伴随我国的医改进程,下沉到基层的医疗机构甚至家庭.本文综述了目前微流控技术在临床检验领域的应用现状以及未来发展趋势. 展开更多
关键词 芯片分析技术 微流体学 临床实验室技术
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斑蝥素诱导HCT116细胞形态改变及脱黏附机制 被引量:6
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作者 张鑫 赵慧 +3 位作者 魏洁 郭君 胡刚 林雅军 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期20-25,共6页
目的:探讨斑蝥素(cantharidin,CTD)引起人结肠癌HCT116细胞形态改变及脱黏附作用的分子机制与抑制肿瘤转移的相关性,为CTD的临床使用提供新依据。方法:将HCT116细胞接种于6孔板后,每孔加入不同浓度CTD (0,2. 5,5,10,15,20μmol·L^(... 目的:探讨斑蝥素(cantharidin,CTD)引起人结肠癌HCT116细胞形态改变及脱黏附作用的分子机制与抑制肿瘤转移的相关性,为CTD的临床使用提供新依据。方法:将HCT116细胞接种于6孔板后,每孔加入不同浓度CTD (0,2. 5,5,10,15,20μmol·L^(-1))培养7~10 d,使用结晶紫染色液染色,对形成的克隆进行计数及统计分析,确定CTD对HCT116细胞的抑制效果;使用鬼笔环肽(phalloidin)特异性染色检测10μmol·L^(-1)CTD对HCT116细胞聚合态微丝骨架(F-actin)的影响,间接免疫荧光染色法观察CTD作用后整合素蛋白含量的改变;蛋白免疫印迹法分析10μmol·L^(-1)CTD作用前后Rho家族RhoA,Rho B,Rho C,Cdc42,Rac1/2/3蛋白表达量变化,根据实验结果确定RhoA为研究目标蛋白;使用质粒瞬时转染方法构建过表达RhoA的HCT116结肠癌细胞,观察10μmol·L^(-1)CTD对过表达细胞骨架形态及黏附的影响。结果:CTD可引起HCT116结肠癌细胞微丝骨架重构及整合素含量减少; RhoA蛋白是CTD作用后含量变化最大的Rho酶家族成员,构建的RhoA过表达细胞中带绿色荧光的转染细胞比例约为60%,与野生型细胞相比,目标蛋白含量显著增高(P <0. 01),CTD通过降低RhoA含量,逆转这一过表达效应(P <0. 01),对细胞的形态及黏附均产生影响。结论:CTD可通过抑制RhoA蛋白的表达,引起HCT116结肠癌细胞形态改变及与基底的黏附减弱,游离的肿瘤细胞无法锚定于继发部位,从而抑制细胞迁移。 展开更多
关键词 斑蝥素 人结肠癌HCT116细胞 细胞骨架 黏附 RHOA
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环状RNA hsa_circ_0031739与2型糖尿病关系的初步研究 被引量:3
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作者 房远 王晓霞 +5 位作者 潘琦 李文卿 金军华 张恩毅 邹丽辉 肖飞 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期863-869,共7页
目的筛选高糖处理人脐静脉内皮细胞中差异表达环状RNA,分别在细胞模型中和2型糖尿患者外周血中进行验证,为探索2型糖尿病的生物学诊断标志物奠定基础。方法以脐静脉内皮细胞作为实验模型,设置对照组(n=3)与高糖组(n=3),分别... 目的筛选高糖处理人脐静脉内皮细胞中差异表达环状RNA,分别在细胞模型中和2型糖尿患者外周血中进行验证,为探索2型糖尿病的生物学诊断标志物奠定基础。方法以脐静脉内皮细胞作为实验模型,设置对照组(n=3)与高糖组(n=3),分别使用正糖(5.5 mmol/L)及高糖(30.0 mmol/L)条件进行处理,运用高通量测序技术初步筛选差异表达环状RNA。通过PCR和实时定量PCR(q-PCR)技术,在内皮细胞模型中对差异表达环状RNA进行验证。随后,在2型糖尿患者外周血(n=32)及正常人外周血(n=28)中,进一步验证上述差异表达环状RNA。运用t-检验、相关性分析和ROC曲线,对实验结果进行分析。结果高通量测序共筛选出1 087个差异表达环状RNA,其中554个上调,533个下调。从中挑选出6个上调环状RNA在脐静脉内皮细胞模型中初步验证,发现,PCR结果及q-PCR结果与测序结果基本一致。再从中挑选出3个上调最为明显的环状RNA在外周血中进一步验证。本研究发现,环状hsa_circ_0031739在外周血样本中的差异表达也具有统计学意义(0.015±0.002 5 vs. 0.006±0.001 3,P=0.005 9〈0.05),ROC曲线下面积为0.730,并且与血糖和糖化血红蛋白水平正相关(r=0.317,P=0.013 7〈0.05;r=0.348,P=0.006 4〈0.05)。结论人脐静脉内皮细胞作为糖尿病研究中常用的细胞模型,高糖处理后存在差异表达环状RNA谱。环状RNA hsa_circ_0031739在细胞模型和2型糖尿病外周血样本中的差异表达均具有统计学意义,与血糖及糖化血红蛋白相关,具有一定的诊断意义。因此,环状RNA hsa_circ_0031739有望成为糖尿病新型生物学诊断标志物,有助于2型糖尿病的综合诊断和疾病机理研究。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 RNA 生物标记 高通量核苷酸序列分析
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