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中国临床微生物实验室应对重大传染病疫情能力建设指导原则 被引量：6
1
作者 无 马筱玲 +2 位作者 胡继红 王瑶 徐英春 《中国医院》 2020年第8期18-22,共5页
近年来,重大传染病疫情在全球范围内时有发生,临床微生物实验室在重大传染病的诊断、治疗和防控工作中具有至关重要的作用。本指导原则结合当前新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情及中国临床微生物实验室现状,针对临床微生物实验室应对重... 近年来,重大传染病疫情在全球范围内时有发生,临床微生物实验室在重大传染病的诊断、治疗和防控工作中具有至关重要的作用。本指导原则结合当前新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情及中国临床微生物实验室现状,针对临床微生物实验室应对重大传染病疫情应具备的综合能力,从实验室建筑布局、实验室管理及生物安全、技术平台建设、人员能力建设、质量保证和临床研究能力提升等方面,提供了指导意见。以实现平战结合,在加强临床微生物实验室能力建设的基础上,满足重大传染疫情突发和常态化检验需求。 展开更多
关键词 重大传染病 突发疫情 临床微生物 实验室检测
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人白细胞介素-6重组蛋白的制备 被引量：1
2
作者 单晨 张超 张传宝 《中国医药生物技术》 2024年第3期240-245,共6页
目的利用大肠杆菌原核表达系统制备人白细胞介素-6(IL-6)重组蛋白,并对蛋白进行纯化,为后期制备IL-6标准物质和质控品提供候选物质基础。方法以现有IL-6原核表达质粒6His-IL-6-pET-28a(+)为模板,通过PCR扩增目的片段,并在其N端添加His... 目的利用大肠杆菌原核表达系统制备人白细胞介素-6(IL-6)重组蛋白,并对蛋白进行纯化,为后期制备IL-6标准物质和质控品提供候选物质基础。方法以现有IL-6原核表达质粒6His-IL-6-pET-28a(+)为模板,通过PCR扩增目的片段,并在其N端添加His标签。通过酶切连接的方式,将该段基因克隆至pRSFDuet载体,随后转化BL21感受肽获得表达菌株。利用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导,得到IL-6重组蛋白,利用镍柱亲和层析技术对蛋白进行纯化,并比对两个表达菌株的蛋白表达量,选择高表达菌株进行后续实验。结果成功构建6His-IL-6-pRSFDuet原核表达质粒,根据蛋白表达比对情况选择6His-IL-6-pET-28a(+)质粒进行后续实验,确定最适IPTG诱导浓度(0.2 mmol/L)、诱导温度(20℃)、诱导时间(20 h)等条件,在BL21中高效表达重组IL-6蛋白,纯化后的蛋白不仅可通过临床检测,且稀释倍数与检测结果之间呈线性关系。结论成功获得低成本、高浓度、高纯度的IL-6重组蛋白,为后续IL-6标准物质和质控品的制备奠定了基础。 展开更多
关键词 白介素-6 重组蛋白 原核表达 标准物质 质控品
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基于我国WS/T促甲状腺激素受体抗体检测方法的性能验证
3
作者 吴秀镯 齐天琪 +2 位作者 曾洁 刘雪凯 刘艳娟 《标记免疫分析与临床》 CAS 2024年第1期162-166,184,共6页
目的 基于我国卫生行业标准(WS/T)对迈瑞高敏磁微粒化学发光法(CLIA)检测TRAb进行性能验证。方法 参照最新WS/T文件,以Roche Cobase 601电化学发光法(ECLIA)作为已验证的检测方法,对迈瑞CLIA的精密度、基于患者血清的正确度、线性、检... 目的 基于我国卫生行业标准(WS/T)对迈瑞高敏磁微粒化学发光法(CLIA)检测TRAb进行性能验证。方法 参照最新WS/T文件,以Roche Cobase 601电化学发光法(ECLIA)作为已验证的检测方法,对迈瑞CLIA的精密度、基于患者血清的正确度、线性、检出限、参考区间进行验证,评价迈瑞与Roche的诊断符合率。结果 迈瑞CLIA检测TRAb的批内CV为1.56%~4.60%,实验室内CV为1.65%~5.19%;与Roche ECLIA的实验室相对差值为-3.6%;在0.02~44.00IU/L范围内线性拟合方程Y=1.040X+0.636,线性系数R2=0.990;24个检出限临界值数据22个(91.7%)≤0.3IU/L;20个健康体检者血清TRAb检测结果仅1个超出参考区间≤1.9IU/L;与Roche ECLIA的诊断总符合率90%,阳性符合率75%,阴性符合率100%,Kappa检验值0.7826(P<0.001)。结论 迈瑞高敏磁微粒CLIA的精密度、基于患者血清的正确度、线性范围、检出限均符合厂家声明,参考区间经验证可转移至我实验室使用,与Roche的诊断符合率较好,该方法性能能满足本医院临床检验需求。 展开更多
关键词 促甲状腺激素受体抗体 高敏磁微粒化学发光法 性能验证 符合率
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亲和标签在重组蛋白纯化领域的应用与进展
4
作者 单晨 张超 张传宝 《中国医药生物技术》 2023年第5期435-439,共5页
近年来,随着生物制药、体外诊断和一些新兴技术领域的快速发展,高纯度、高活性蛋白的需求量也在不断增加,但由于蛋白质本身的复杂性与现有技术的局限性,大规模回收和纯化目的蛋白仍然面临很大挑战。目前,利用亲和标签来辅助蛋白质纯化... 近年来,随着生物制药、体外诊断和一些新兴技术领域的快速发展,高纯度、高活性蛋白的需求量也在不断增加,但由于蛋白质本身的复杂性与现有技术的局限性,大规模回收和纯化目的蛋白仍然面临很大挑战。目前,利用亲和标签来辅助蛋白质纯化是学术研究和工业生产的首选方法,借助合适的标签设计可以为最终的蛋白产物提供足够高的纯度和产量,同时保留其固有的结构和功能,大大节省了蛋白质生产过程中的时间和成本。但由于不同的亲和标签各有其优点和局限性,因此常常需要根据所表达蛋白的特点进行合理的选择。此外,随着生物信息学和材料科学的飞速发展,研究人员不仅对现有标签纯化系统进行了优化. 展开更多
关键词 体外诊断 纯化系统 工业生产 蛋白质纯化 生物制药 活性蛋白 材料科学 学术研究
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产前诊断实验室质量指标专家共识 被引量：2
5
作者 无 强荣 +4 位作者 陶炯 王莉 范歆 张瑞雪 王治国 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2020年第12期1321-1325,共5页
产前诊断是指对胎儿进行先天性缺陷和遗传性疾病的诊断,涉及遗传咨询、医学影像、生化免疫、细胞和分子遗传学技术等内容。本文主要讨论产前遗传学诊断,即通过有创的方法,如绒毛取材术、羊膜腔穿刺术和脐血管穿刺术等,获得胎儿样本进行... 产前诊断是指对胎儿进行先天性缺陷和遗传性疾病的诊断,涉及遗传咨询、医学影像、生化免疫、细胞和分子遗传学技术等内容。本文主要讨论产前遗传学诊断,即通过有创的方法,如绒毛取材术、羊膜腔穿刺术和脐血管穿刺术等,获得胎儿样本进行细胞遗传学和分子遗传学分析,最终确定胎儿是否患有某种遗传性疾病。产前诊断流程复杂,包括检测前的遗传咨询与知情同意、标本采集与递送、实验室检测与质量控制、报告发放与解读、报告后的遗传咨询与随访等,参与的机构和人员多,是需要多部门、多学科协作的系统工程。此外,产前诊断实验室的质量控制难以量化,因此迫切需要规范其流程,通过评价流程中各个环节的工作质量,进而对不同的地区进行同质化管理。 展开更多
关键词 先天性缺陷 羊膜腔穿刺术 产前诊断 遗传性疾病 遗传学诊断 遗传咨询 多学科协作 细胞遗传学
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