转基因水稻中GUS蛋白质的检测及其表达特征 被引量：10

1

作者 牛东东 郝育杰 +13 位作者 荣瑞娟 韦汉福 兰金苹 史佳楠 魏健 李雪姣 杨烁 奚文辉 武鹏程 刘丽娟 吴琳 刘斯奇 尹长城 刘国振 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期2715-2722,共8页

【目的】建立转基因水稻中GUS蛋白质的免疫学检测方法,并了解花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子驱动的GUS蛋白质在转基因水稻中的表达特征。【方法】以细菌基因组DNA为模板,PCR扩增GUS基因后克隆到表达载体pET30a中,测序验证的重组子转入... 【目的】建立转基因水稻中GUS蛋白质的免疫学检测方法,并了解花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子驱动的GUS蛋白质在转基因水稻中的表达特征。【方法】以细菌基因组DNA为模板,PCR扩增GUS基因后克隆到表达载体pET30a中,测序验证的重组子转入大肠杆菌表达菌BL21中,IPTG诱导获得重组表达的GUS蛋白质,用HIS-tag beads纯化后作为免疫原免疫小鼠制备GUS蛋白质特异的抗体,通过免疫印迹分析筛选高特异性的单克隆抗体,用Broadford法对重组的GUS蛋白质进行定量,对不同浓度的GUS蛋白质进行免疫印迹分析,绘制检测GUS蛋白质的标准曲线,通过与标准曲线的比较对水稻叶片中GUS蛋白质进行定量分析。提取不同时期、不同部位的水稻总蛋白质,包括苗期的地上部、地下部,分蘖期的茎、茎节、叶鞘、叶枕、叶片上部、叶片中部和叶片下部,孕穗期的茎、穗轴、叶鞘、叶枕、叶片、幼穗(长度分别为1、2、10和20 cm),开花期的茎、穗轴、叶鞘、叶片、穗子,成熟期的茎、叶片、授粉后不同时期的种子(分别为授粉后10、20、30和40 d)、乳熟期的胚、胚乳和颖壳、成熟种子的全种子、胚、胚乳和颖壳以及不同时期的叶片和根部材料等。SDS-PAGE分离后用抗体检测其GUS蛋白质的丰度。【结果】筛选获得了高特异性的抗GUS单克隆抗体(编号为#27),用该抗体检测转基因水稻中及重组的GUS蛋白质均呈现特异条带,没有可见的背景信号,用本研究建立的免疫印迹方法对重组GUS蛋白质的检测下限约为4 ng,可检出转基因水稻单粒大米2.5%样品中(约0.6 mg)的GUS蛋白质。在不同时期的转基因水稻叶片中GUS蛋白质的表达丰度基本稳定,而在水稻根部的GUS丰度随生长急剧减少,5叶期根中的表达量不到3叶期的三分之一,到6叶期检测不到GUS蛋白质。在水稻苗期叶片中,GUS蛋白质约占鲜重的0.02‰。另外,除分蘖期以后的根部之外,GUS蛋白质几乎在所有的水稻组织部位中呈组成型表达,只是不同组织中的表达量略有差异,如在孕穗期和开花期的茎及颖壳中的表达量较低。【结论】建立了具有应用价值的对转基因水稻中GUS蛋白质丰度检测的免疫印记方法。该方法特异性高、样品用量少、不依赖于GUS蛋白质的酶活性、测定结果易于在不同实验室间比较。证明了35S启动子驱动的GUS蛋白质在转基因水稻中基本呈组成型表达。 展开更多

关键词 水稻 转基因植物 CaMV 35S启动子 GUS蛋白质 免疫印迹

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转基因水稻中CAS9蛋白质的免疫印迹检测 被引量：7

2

作者 郭亚璐 马晓飞 +12 位作者 史佳楠 张柳 张剑硕 黄腾 武鹏程 康昊翔 耿广荟 陈浩 魏健 窦世娟 李莉云 尹长城 刘国振 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第19期3631-3639,共9页

【目的】制备抗CAS9蛋白质的单克隆抗体,建立转基因水稻中CAS9蛋白质的免疫印迹检测方法,了解CAS9蛋白质在转基因水稻中的表达特征。【方法】以带Cas9的质粒DNA为模板,PCR扩增Cas9 5′端810 bp片段后克隆到p ET30a载体中,将酶切验证且... 【目的】制备抗CAS9蛋白质的单克隆抗体,建立转基因水稻中CAS9蛋白质的免疫印迹检测方法,了解CAS9蛋白质在转基因水稻中的表达特征。【方法】以带Cas9的质粒DNA为模板,PCR扩增Cas9 5′端810 bp片段后克隆到p ET30a载体中,将酶切验证且序列正确的重组质粒转入表达菌Condon Plus中,经IPTG诱导表达CAS9蛋白质(N端270氨基酸),用纯化的重组蛋白质作为免疫原免疫小鼠,制备单克隆抗体,用免疫印迹分析筛选特异性和灵敏度高的抗体细胞株。用特异性引物PCR扩增转基因水稻的Cas9,用免疫印迹检测转基因水稻中的CAS9蛋白质。将重组CAS9蛋白质和带有CAS9的水稻苗期叶片蛋白质进行平行免疫印迹分析,用Image J软件采集信号绘制CAS9蛋白质的标准曲线,进而对水稻叶片中的CAS9蛋白质进行定量分析。提取单粒稻米的总蛋白质,稀释后用免疫印迹分析CAS9蛋白质的检测下限,提取多个时期、部位的水稻材料的总蛋白质,包括苗期的地上部和地下部,分蘖期的茎、茎节、叶鞘、叶片等,用SDS-PAGE分离后免疫印迹检测比较CAS9蛋白质的表达特征。【结果】通过体外克隆、诱导表达获得了纯化的重组CAS9蛋白质N端片段,免疫小鼠后得到42株阳性杂交瘤细胞株,经筛选鉴定到#12D2细胞株对水稻样品的检测具有较好的特异性和灵敏度。用该抗体通过免疫印迹检测了转基因水稻,所建立的免疫印迹方法对重组CAS9蛋白质的检测下限约为0.25 ng。在水稻苗期叶片中,CAS9蛋白质约占鲜重的0.00005%,可检出单粒稻米8%样品(约2 mg)中的CAS9蛋白质。在苗期地上部CAS9蛋白质的表达丰度高于地下部,分蘖期茎和叶片中表达量较高,根和叶鞘表达量较低。【结论】获得特异性强、灵敏度高的抗CAS9单克隆抗体,建立了检测转基因水稻中CAS9蛋白质的免疫印记方法,揭示了CAS9蛋白质在水稻不同部位的表达特征,并展示了在其他植物中的应用潜力。 展开更多

关键词 水稻 转基因植物 CAS9蛋白质 单克隆抗体 免疫印迹

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NPTⅡ蛋白质在转基因水稻中的表达特征研究 被引量：5

3

作者 兰金苹 武鹏程 +11 位作者 郭美岑 史佳楠 韦汉福 荣瑞娟 郝育杰 杨烁 白影影 李莉云 吴琳 刘斯奇 尹长城 刘国振 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第3期268-276,共9页

nptⅡ编码新霉素磷酸转移酶,是转基因实验中最常用的筛选标记基因之一.本研究中,表达了重组新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)蛋白质,制备了单克隆抗体,建立了用免疫印迹检测转基因水稻中NPTⅡ蛋白质的方法,调查了NPTⅡ蛋白质的表达特征,包括遗... nptⅡ编码新霉素磷酸转移酶,是转基因实验中最常用的筛选标记基因之一.本研究中,表达了重组新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)蛋白质,制备了单克隆抗体,建立了用免疫印迹检测转基因水稻中NPTⅡ蛋白质的方法,调查了NPTⅡ蛋白质的表达特征,包括遗传特征、表达时空特征、表达丰度和亚细胞定位等.结果表明,该方法可检测到单粒稻米的0.25%(约0.025 mg)样品中的NPTⅡ蛋白质,NPTⅡ的表达符合显性遗传规律,根据NPTⅡ的表达可对转基因T1代种子进行阴阳性及纯合株系的鉴定,对T1幼苗中NPTⅡ丰度的分析可为纯合单株的鉴定提供参考信息.定量分析表明苗期叶片中NPTⅡ蛋白质的含量约为鲜重的0.08‰.在Ca MV-35S启动子驱动下NPTⅡ蛋白质在水稻苗期、成株期的叶片和根部组织中表达量较高,而在分蘖期、孕穗期较低,NPTⅡ在不同时期的根、茎、叶、穗子、花及种子等组织中均有表达,只是在分蘖节、茎节、穗轴和花药等组织中表达量相对较低.此外,NPTⅡ蛋白质的表达主要定位在细胞质中.综上所述,本研究建立了具有应用价值的检测NPTⅡ蛋白质的免疫印记方法并系统揭示了其在水稻中的表达特征. 展开更多

关键词 转基因水稻 CaMV-35S启动子 NPTⅡ蛋白质 免疫印迹技术

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转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的检测及其表达特征研究 被引量：7

4

作者 柴帅杰 武鹏程 +9 位作者 荣瑞娟 郝育杰 史佳楠 郭亚璐 丁国涛 韩宇宁 赵志静 魏健 尹长城 刘国振 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期44-50,共7页

为了建立转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的免疫学检测方法,并了解其在水稻生长过程中的表达特征,本研究在大肠杆菌中表达了CP4-EPSPS蛋白质,纯化后以其为免疫原免疫小鼠,经筛选获得了可识别CP4-EPSPS的单克隆抗体。建立了用免疫印记技术... 为了建立转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的免疫学检测方法,并了解其在水稻生长过程中的表达特征,本研究在大肠杆菌中表达了CP4-EPSPS蛋白质,纯化后以其为免疫原免疫小鼠,经筛选获得了可识别CP4-EPSPS的单克隆抗体。建立了用免疫印记技术检测转基因水稻中CP4-EPSPS蛋白质的方法,该方法可以从单粒稻米的0.63%材料中检测到CP4-EPSPS信号。对水稻不同发育时期代表性组织的检测结果表明,CP4-EPSPS蛋白质呈组成型表达,在花药、穗轴、颖壳及不同时期的叶片中的表达量较高,但在分蘖期基部茎节、叶鞘及成熟期种子胚中的表达量稍低。本研究建立的免疫学方法在转基因水稻检测中具有潜在的应用价值。 展开更多

关键词 水稻 转基因 CP4-EPSPS 除草剂 免疫印迹

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多维离子交换色谱分离和串联质谱鉴定在小鼠肝脏膜蛋白质组分析中的应用 被引量：2

5

作者 王灼维 彭福利 +4 位作者 王媛 童维 任艳 徐宁志 刘斯奇 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期115-122,共8页

膜蛋白质在变性剂作用下能够较充分地溶解。根据这一特点,我们试图在变性剂溶液中采用串联离子交换色谱法分离小鼠肝脏膜蛋白质。将小鼠肝脏膜蛋白质溶解于含有4mol/L尿素,20mmol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液(pH9.0)中,用Q-Seph... 膜蛋白质在变性剂作用下能够较充分地溶解。根据这一特点,我们试图在变性剂溶液中采用串联离子交换色谱法分离小鼠肝脏膜蛋白质。将小鼠肝脏膜蛋白质溶解于含有4mol/L尿素,20mmol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液(pH9.0)中,用Q-SepharoseFF和SephacrylS-200HR树脂组成的色谱柱结合大部分溶解的膜蛋白质,然后采用氯化钠线性梯度洗脱蛋白质,分步收集后采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进一步分离洗脱组分的蛋白质。利用胶内胰蛋白酶消化技术将SDS-PAGE胶内分离的蛋白质降解为相应的肽段,然后以反相高效液相色谱分离和离子阱质谱仪鉴定肽段。根据文献报道和蛋白质的功能分类,在所鉴定的392个蛋白质中有306个可能为膜蛋白质或膜结合蛋白质。蛋白质的疏水性计算表明,GRAVY(grandaverageofhydropathicity)得分大于或等于0.00的蛋白质有83个。综上所述,我们有理由认为本实验方法基本符合小鼠肝脏膜蛋白质组学研究的要求。 展开更多

关键词 多维离子交换色谱 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 反相高效液相色谱 串联质谱 膜蛋白质 小鼠肝脏

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转基因水稻中HPT蛋白质的检测及表达特征研究 被引量：5

6

作者 杨烁 郝育杰 +7 位作者 兰金苹 韦汉福 魏健 荣瑞娟 武鹏程 刘国振 尹长城 李莉云 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期61-67,共7页

hpt是转基因植物中最常用的筛选标记基因之一,建立了HPT蛋白质免疫印迹检测技术、了解其在转基因植物中的表达特征具有重要的理论意义和应用价值。在大肠杆菌中进行了HPT蛋白质的重组表达,利用纯化的HPT蛋白质制备了其特异性的单克隆抗... hpt是转基因植物中最常用的筛选标记基因之一,建立了HPT蛋白质免疫印迹检测技术、了解其在转基因植物中的表达特征具有重要的理论意义和应用价值。在大肠杆菌中进行了HPT蛋白质的重组表达,利用纯化的HPT蛋白质制备了其特异性的单克隆抗体,采用免疫印迹学方法对转基因水稻4021中HPT蛋白质的表达情况进行了检测,该方法可检测出单粒稻米的10%(约1.5mg)所含的HPT蛋白质。定量分析发现水稻苗期HPT蛋白质含量约占鲜重的0.01‰。对Ca MV35S启动子驱动下的转基因水稻中HPT蛋白质的表达谱进行分析,发现其在苗期和成株期的叶片中表达量较高,在灌浆期的种子中呈现不断增加的趋势,而在茎、分蘖节、茎节、叶鞘、叶枕和根等组织中表达量较低。建立了完整的利用免疫印迹方法检测HPT蛋白质的技术,同时系统分析了HPT蛋白质在转基因水稻中的表达谱。 展开更多

关键词 转基因水稻 HPT蛋白质 免疫印迹技术 筛选标记基因

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利用血清蛋白质组学技术筛选银屑病相关蛋白 被引量：2

7

作者 蔡大幸 谭凤吉 +2 位作者 马伟元 钟华 孙青 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期168-171,共4页

目的研究常见亚型银屑病患者血清中差异表达蛋白，筛选银屑病特异性蛋白质标记物。方法收集首次发病进展期寻常性银屑病6例、红皮病性银屑病5例及健康人6例的血清，分别将各组标本混合，并去除高丰度白蛋白和免疫球蛋白IgG后，应用双向... 目的研究常见亚型银屑病患者血清中差异表达蛋白，筛选银屑病特异性蛋白质标记物。方法收集首次发病进展期寻常性银屑病6例、红皮病性银屑病5例及健康人6例的血清，分别将各组标本混合，并去除高丰度白蛋白和免疫球蛋白IgG后，应用双向电泳技术分离血清，比较差异蛋白点。利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱，对候选差异表达蛋白点进行肽质量指纹图谱分析，通过NCBI数据库搜索鉴定蛋白。结果获得了3组较好的血清双向电泳图谱。应用胶图分析软件分析，发现寻常性银屑病组、红皮病性银屑病组与健康对照组间差异蛋白点分别为33个和17个，寻常性银屑病组和红皮病性银屑病组之间差异蛋白点26个。共鉴定得到14种蛋白。在银屑病组中表达升高的有补体成分3、白介素16、维生素D结合蛋白、仅1抗胰蛋白酶等；红皮病组中补体成分3、补体因子H、仅1抗胰蛋白酶、血液结合素、触珠蛋白的表达量高于健康人对照，a1抗胰蛋白酶、补体因子H、补体成分4和触珠蛋白的表达量高于寻常性银屑病组。在红皮病性患者血清中表达下降的有血清淀粉样蛋白P。结论寻常性银屑病、红皮病性银屑病与健康人对照间血清蛋白表达谱存在差异。 展开更多

关键词 银屑病 蛋白质组学 质谱分析法 电泳 凝胶 双向

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基于抗体的水稻蛋白质组学理论与实践

8

作者 刘国振 李莉云 +58 位作者 窦世娟 杨明 李晓明 张剑硕 侯明明 曹英豪 刘丽娟 魏健 郭亚璐 史佳楠 陈悦 王田幸子 范伟 张柳 马金姣 张彤 刘玉晴 燕高伟 徐珊 杨烁 周艳 杜铁民 牛东东 荣瑞娟 黄腾 柴帅杰 郭美岑 缪刘杨 李雪姣 徐文静 关明俐 贾霖 贾盟 曾祥然 高庆华 刘钊 王宪云 刘雨萌 兰金苹 白辉 刘斯奇 尹长城 吴琳 韦汉福 韩宇宁 赵丽英 杨春霞 武鹏程 马晓飞 赵志静 潘秦 郝育杰 陈浩 赵磊 康昊翔 耿广荟 孔令男 史晓儒 奚文辉 《中国科技成果》 2022年第24期10-11,共2页

水稻是最重要的粮食作物之一,不仅是世界上一半以上的人口以水稻作为主粮,也是基础研究的模式植物。项目团队在前人研究的基础上,结合蛋白质研究的需求和发展趋势,凝练提出了“基于抗体的水稻蛋白质组学”概念,十多年来,不断优化技术路... 水稻是最重要的粮食作物之一,不仅是世界上一半以上的人口以水稻作为主粮,也是基础研究的模式植物。项目团队在前人研究的基础上,结合蛋白质研究的需求和发展趋势,凝练提出了“基于抗体的水稻蛋白质组学”概念,十多年来,不断优化技术路线,积极拓展和丰富相关理论并开展实践。1主要创新点1.1首次提出了“基于抗体的水稻蛋白质组学”概念。 展开更多

关键词 蛋白质组学 结合蛋白质 理论与实践 项目团队 主要创新点 开展实践 发展趋势 抗体

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稳定同位素标记试剂DiART在蛋白质组中的定量特征研究 被引量：1

9

作者 姜翠翠 吕晓磊 +4 位作者 吴迪 李杨 董宇升 张纪彬 王全会 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2018年第2期224-231,共8页

等重同位素标记方法,如同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ),可以对肽段进行化学标记,之后通过质谱分析得到的报告离子的强度信息而实现对肽段的定量.目前,这种标记技术在定量蛋白质组学研究中有广泛应用.DiART也是一种等重同位素标记方法... 等重同位素标记方法,如同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ),可以对肽段进行化学标记,之后通过质谱分析得到的报告离子的强度信息而实现对肽段的定量.目前,这种标记技术在定量蛋白质组学研究中有广泛应用.DiART也是一种等重同位素标记方法,且与iTRAQ的定量原理类似,但是其化学结构组成与iTRAQ有所不同,因而其定量特征有其独特表现.本研究通过对DiART标记的简单蛋白样品、复杂蛋白样品以及复杂样品中目标蛋白的定量情况进行了分析,从而对DiART的定量特征进行了研究,并同时与iTRAQ进行了比较.结果表明,DiART方法在定量稳定性、准确性及动态范围方面均更具优势. 展开更多

关键词 DiART ITRAQ 定量蛋白质组

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转基因大米中氨基酸含量超高效液相色谱定量 被引量：10

10

作者 傅博强 唐治玉 +1 位作者 王晶 尹长城 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期110-115,共6页

建立了一种6-氨基喹啉基--羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（AQC）柱前衍生，超高效液相色谱（UPLC）对大米中17种氨基酸进行快速定量的方法。优化了6M盐酸和0．2％苯酚的加入量、水解时间等大米水解条件，采用1．7txm粒径的AccQ·TagULTRA... 建立了一种6-氨基喹啉基--羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（AQC）柱前衍生，超高效液相色谱（UPLC）对大米中17种氨基酸进行快速定量的方法。优化了6M盐酸和0．2％苯酚的加入量、水解时间等大米水解条件，采用1．7txm粒径的AccQ·TagULTRAC18色谱柱分离，260nnl检测，可在9．5rain内实现17种氨基酸衍生物的分离。结果表明，17种氨基酸的标准工作曲线的线性回归相关系数（r）均大于0．999，加标回收率在85．9％～102％之间，日内相对标准偏差（RSD）（n=5）2．64％-4．59％，日间相对标准偏差（n=3）1．43％-5．06％，方法简单、准确、快速、重复性和再现性良好。将该方法用于大米中氨基酸含量的分析，比较了4对转基因大米及其非转亲本之间氨基酸含量的差异，检验结果表明，所取样分析的转基因大米及其亲本之间在氨基酸含量上没有显著性差异。 展开更多

关键词 转基因大米 氨基酸 超高效液相色谱 定量

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肉及肉制品中大鼠成分PCR检测方法研究 被引量：5

11

作者 李宗梦 赵良娟 +5 位作者 马兴 赵宏 郑文杰 张宏伟 武鹏程 尹长城 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2016年第24期109-113,共5页

我国肉类掺假现象屡禁不止,尤以使用来源不明的鼠肉冒充高价肉贩卖最为恶劣。褐家鼠(Rattus norvegicus)俗称大鼠,由于分布广、数量多、体型较大的特点最容易成为肉类掺假的来源。针对我国缺乏肉及肉制品中大鼠成分检测方法的问题,本研... 我国肉类掺假现象屡禁不止,尤以使用来源不明的鼠肉冒充高价肉贩卖最为恶劣。褐家鼠(Rattus norvegicus)俗称大鼠,由于分布广、数量多、体型较大的特点最容易成为肉类掺假的来源。针对我国缺乏肉及肉制品中大鼠成分检测方法的问题,本研究针对包括大鼠在内的共17种动物线粒体cytb基因序列进行分析比对,设计特异性检测引物。该方法特异性好,可检出混合样品中低至0.1%的大鼠成分,灵敏度较高。结果表明,本方法对热处理混合肉样品和市售样品也具有较好的检测能力,灵敏度达到0.1%。本研究为肉类食品安全监管提供了新方法。 展开更多

关键词 肉制品 PCR 大鼠 食品掺假

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药用昆虫金环胡蜂及其混伪品DNA条形码鉴别研究 被引量：6

12

作者 许凯歌 陈壮志 +4 位作者 杨自忠 郭云胶 李成功 赵昱 张成桂 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 2017年第2期313-318,共6页

目的:以COI序列作为DNA条形码对药用昆虫金环胡蜂及其混伪品进行物种鉴别,探讨快速、准确鉴别金环胡蜂及其混伪品的方法。方法:以COI条形码序列为基础,对金环胡蜂及其近缘种混伪品黄纹大胡蜂进行总DNA提取、PCR扩增和双向测序,并比对Gen... 目的:以COI序列作为DNA条形码对药用昆虫金环胡蜂及其混伪品进行物种鉴别,探讨快速、准确鉴别金环胡蜂及其混伪品的方法。方法:以COI条形码序列为基础,对金环胡蜂及其近缘种混伪品黄纹大胡蜂进行总DNA提取、PCR扩增和双向测序,并比对Gen Bank中金环胡蜂及其混伪品的COI序列,继而用MEGA6.06软件对所有序列进行分析、计算种内及种间遗传距离,并用邻接(Neighbor-Joining,NJ)法构建出系统进化树。结果:金环胡蜂及黄纹大胡蜂COI序列扩增成功。金环胡蜂与其混伪品COI序列种间最小遗传距离为0.152±0.017,远大于金环胡蜂种内的最大遗传距离0.009±0.004。构建出的系统进化树图也明确显示,各物种都形成了独立的分支。结论:基于COI序列的DNA条形码技术可有效鉴别药用昆虫金环胡蜂及其混伪品,为其质量控制和市场监管提供了新的技术手段,保证金环胡蜂相关药材的安全性。 展开更多

关键词 金环胡蜂 DNA条形码 COI序列 物种鉴别

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生物医药企业开展全面预算管理的难点及措施 被引量：5

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作者 贾玉丰 《财会学习》 2020年第9期96-98,共3页

生物医药产业是现代医药产业的重要支柱,关系到国家的发展与人民的生活。生物医药企业是构成这一产业的基本单位,更是产业的源头。在市场经济改革的发展背景下,生物医药市场初步形成了多元竞争格局。我国生物医药企业要在激烈的市场竞... 生物医药产业是现代医药产业的重要支柱,关系到国家的发展与人民的生活。生物医药企业是构成这一产业的基本单位,更是产业的源头。在市场经济改革的发展背景下,生物医药市场初步形成了多元竞争格局。我国生物医药企业要在激烈的市场竞争环境中取得一席之地,并获得长远发展,就要加快改革企业管理,形成自身竞争优势。全面预算管理作为企业内控的有效手段,对生物医药企业实施管理改革有重要作用。现阶段,我国生物医药企业有多数已经将全面预算管理应用到了实际管理当中。本文主要讨论生物医药企业开展全面预算管理的现状、难点与措施,以供参考。 展开更多

关键词 生物医药企业 全面预算管理 难点 措施

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转基因植物核酸成分检测技术研究进展 被引量：22

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作者 邓汉超 尹长城 +2 位作者 刘国振 林健荣 邓平建 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期86-95,共10页

首先对转基因核酸成分检测的靶序列特征进行了阐述,对转基因植物核酸成分的定性、定量检测技术研究进展进行了综述,包括基于PCR的检测技术、基于等温核酸扩增的检测技术、基因芯片检测技术、基于高通量测序和新型转基因核酸检测技术(如... 首先对转基因核酸成分检测的靶序列特征进行了阐述,对转基因植物核酸成分的定性、定量检测技术研究进展进行了综述,包括基于PCR的检测技术、基于等温核酸扩增的检测技术、基因芯片检测技术、基于高通量测序和新型转基因核酸检测技术(如生物传感器技术、毛细管电泳技术和纳米刻度技术等),重点介绍了各种检测技术的原理、特点、研究现状和发展动态,并对各种方法的优缺点进行了比较。 展开更多

关键词 转基因核酸成分 PCR 核酸等温扩增 基因芯片 生物传感器

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