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结核分枝杆菌DNA三价苗的细胞与体液应答研究
被引量:
3
1
作者
蔡宏
田霞
+2 位作者
李淑霞
胡勤
朱玉贤
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2003年第5期22-26,共5页
本文构建了含分枝杆菌抗原Ag85B(30kDa) ,MPT - 83(2 6kDa)和ESAT - 6 (6kDa)分泌蛋白的真核表达载体pJW 4 30 3,酶切鉴定和序列分析 ,确定含有正确的读码框。重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达 ,证明上述三种重组质粒能在COS7细胞...
本文构建了含分枝杆菌抗原Ag85B(30kDa) ,MPT - 83(2 6kDa)和ESAT - 6 (6kDa)分泌蛋白的真核表达载体pJW 4 30 3,酶切鉴定和序列分析 ,确定含有正确的读码框。重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达 ,证明上述三种重组质粒能在COS7细胞中表达出特异蛋白。三种重组表达质粒同时肌注免疫小鼠 ,首免 ,二免和三免小鼠后 2 1dAg85B抗体平均滴度分别为 1∶32 0 0 ,1∶5 12 0 0和 1∶10 2 4 0 0 ,MPT - 83抗体平均滴度二次免疫和三次免疫后 2 1d测得为 1∶2 5和 1∶5 0 ,三次免疫后均未检测到ESAT - 6特异性抗体。在三免后 2 1dAg85B和MPT - 83的特异性细胞因子γ -干扰素的浓度分别 2 75 pg/ml±16 5 ,2 2 0 pg/ml± 19 8;而ESAT - 6的γ -干扰素浓度为 2 2 0 pg/ml± 9 9。本研究表明 ,多价核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答 ,可能有利于增强疫苗对抗结核病的抗性。
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关键词
结核分枝杆菌
三价DNA疫苗
细胞
体液
免疫应答
AG85B
MPT-83
ESAT-6
下载PDF
职称材料
结核分枝杆菌ESAT-6 DNA疫苗的细胞和体液应答及保护效率研究
被引量:
1
2
作者
蔡宏
田霞
+2 位作者
呼西旦
李淑霞
朱玉贤
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第4期279-283,共5页
构建了含分枝杆菌抗原ESAT_6( 6kDa)分泌蛋白 (结构基因 )的真核表达载体pJW43 0 3 ,进行了酶切鉴定和序列分析 ,确定含有正确的读码框。用脂质体介导法将重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达 ,收集表达细胞或浓缩上清液 ,进行SDS_PAG...
构建了含分枝杆菌抗原ESAT_6( 6kDa)分泌蛋白 (结构基因 )的真核表达载体pJW43 0 3 ,进行了酶切鉴定和序列分析 ,确定含有正确的读码框。用脂质体介导法将重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达 ,收集表达细胞或浓缩上清液 ,进行SDS_PAGE电泳 ,用结核杆菌特异性抗体进行免疫印迹检测 ,证明上述重组质粒能在哺乳动物细胞中表达出特异蛋白。重组表达质粒肌注免疫小鼠 ,首免后 2 1d,未检测到特异性抗体 ,二免和三免 2 1d后ESAT_6的特异性抗体平均效价分别为 1∶40 0和 1∶80 0。三免后 2 1dESAT_6的特异性细胞因子γ_干扰素的浓度为 1 2 .8± 0 .4ng/mL,而阴性对照空载体DNA组三免后只诱导产生 <0 .1ng/mL的γ_干扰素。三免后经静脉强毒攻击 ,免疫组小鼠肺脏的细菌数比对照空载体组减少了 90 %以上。本研究表明 ,该核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞和体液免疫应答并获得较高的保护效率。
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关键词
结核分枝杆菌
ESAT-6分泌蛋白抗原
ESAT-6
DNA疫苗
免疫原性
保护
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职称材料
河蚌C反应蛋白一级结构分析
被引量:
1
3
作者
夏东元
姚仁杰
张龙翔
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
2000年第2期215-223,共9页
经亲和层析纯化的河蚌 C反应蛋白 ( CRP)具有 SDS- PAGE纯度 ,用经改进的双偶联 Ed-man方法测得其 N端残基为谷氨酸 ,而不是高等动物 (人与家兔 ) C反应蛋白 N端的焦谷氨酸 .河蚌 C反应蛋白 N端的一级结构由固相 Edman方法测得 ,依次为 ...
经亲和层析纯化的河蚌 C反应蛋白 ( CRP)具有 SDS- PAGE纯度 ,用经改进的双偶联 Ed-man方法测得其 N端残基为谷氨酸 ,而不是高等动物 (人与家兔 ) C反应蛋白 N端的焦谷氨酸 .河蚌 C反应蛋白 N端的一级结构由固相 Edman方法测得 ,依次为 H2 N- E- T- A- Y- S- C- I- T- A- V- ;C端的一级结构由羧肽酶 A降解法测得 ,依次为 - L/V- S- S- T- Y- COOH,也不同于人和家兔的 C反应蛋白 .在河蚌 CRP的胰蛋白酶酶解肽段中 ,其 N端及 C端的结构也得到了证实 .河蚌 C反应蛋白经 V8蛋白内切酶酶解 ,溴化氰裂解 ,肽段经 HPLC反相柱分离 ,共得到 35个肽段 ,所有肽段的氨基酸序列均由气相氨基酸自动分析仪测得 .结合河蚌 C反应蛋白的胰蛋白酶酶解肽段的分析结果 ,其一级结构已初步拼接完成 .在其一级结构中发现有类似于其它 CRP的 Ca2 + 结合部位和磷酸胆碱结合部位 .河蚌 C反应蛋白的分子结构中存在微观不均一性 .从已知河蚌 C反应蛋白的分子特点 ,包括分子量 ,糖基化比例 ,一级结构不均一等特点 ,可以推测它与高等动物的免疫蛋白有许多相关之处 .对于河蚌 C反应蛋白分子结构的分析 ,将有助于免疫系统蛋白的发生 。
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关键词
C反应蛋白
河蚌
一级结构
免疫蛋白
血液蛋白
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职称材料
题名
结核分枝杆菌DNA三价苗的细胞与体液应答研究
被引量:
3
1
作者
蔡宏
田霞
李淑霞
胡勤
朱玉贤
机构
北京大学生命科学学院生化与分子生物学系
新疆畜牧
科学
院兽医研究所
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2003年第5期22-26,共5页
基金
国家高技术研究发展计划 ( 863计划 )资助项目 (批准号 :2 0 0 1AA2 13 14 1)
文摘
本文构建了含分枝杆菌抗原Ag85B(30kDa) ,MPT - 83(2 6kDa)和ESAT - 6 (6kDa)分泌蛋白的真核表达载体pJW 4 30 3,酶切鉴定和序列分析 ,确定含有正确的读码框。重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达 ,证明上述三种重组质粒能在COS7细胞中表达出特异蛋白。三种重组表达质粒同时肌注免疫小鼠 ,首免 ,二免和三免小鼠后 2 1dAg85B抗体平均滴度分别为 1∶32 0 0 ,1∶5 12 0 0和 1∶10 2 4 0 0 ,MPT - 83抗体平均滴度二次免疫和三次免疫后 2 1d测得为 1∶2 5和 1∶5 0 ,三次免疫后均未检测到ESAT - 6特异性抗体。在三免后 2 1dAg85B和MPT - 83的特异性细胞因子γ -干扰素的浓度分别 2 75 pg/ml±16 5 ,2 2 0 pg/ml± 19 8;而ESAT - 6的γ -干扰素浓度为 2 2 0 pg/ml± 9 9。本研究表明 ,多价核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答 ,可能有利于增强疫苗对抗结核病的抗性。
关键词
结核分枝杆菌
三价DNA疫苗
细胞
体液
免疫应答
AG85B
MPT-83
ESAT-6
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
Ag85B,MPT-83,ESAT-6,triplevalent DNA vaccines
immunogenicity
分类号
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
结核分枝杆菌ESAT-6 DNA疫苗的细胞和体液应答及保护效率研究
被引量:
1
2
作者
蔡宏
田霞
呼西旦
李淑霞
朱玉贤
机构
北京大学生命科学学院生化与分子生物学系
新疆畜牧
科学
院兽医研究所
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第4期279-283,共5页
基金
国家高技术研究发展计划 ( 863计划 )资助项目 (批准号 :2 0 0 1AA2 1 3 1 41 )
文摘
构建了含分枝杆菌抗原ESAT_6( 6kDa)分泌蛋白 (结构基因 )的真核表达载体pJW43 0 3 ,进行了酶切鉴定和序列分析 ,确定含有正确的读码框。用脂质体介导法将重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达 ,收集表达细胞或浓缩上清液 ,进行SDS_PAGE电泳 ,用结核杆菌特异性抗体进行免疫印迹检测 ,证明上述重组质粒能在哺乳动物细胞中表达出特异蛋白。重组表达质粒肌注免疫小鼠 ,首免后 2 1d,未检测到特异性抗体 ,二免和三免 2 1d后ESAT_6的特异性抗体平均效价分别为 1∶40 0和 1∶80 0。三免后 2 1dESAT_6的特异性细胞因子γ_干扰素的浓度为 1 2 .8± 0 .4ng/mL,而阴性对照空载体DNA组三免后只诱导产生 <0 .1ng/mL的γ_干扰素。三免后经静脉强毒攻击 ,免疫组小鼠肺脏的细菌数比对照空载体组减少了 90 %以上。本研究表明 ,该核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞和体液免疫应答并获得较高的保护效率。
关键词
结核分枝杆菌
ESAT-6分泌蛋白抗原
ESAT-6
DNA疫苗
免疫原性
保护
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
secreted protein of ESAT_6
ESAT_6 DNA vaccine
immunogenicity
protective effectiveness
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
河蚌C反应蛋白一级结构分析
被引量:
1
3
作者
夏东元
姚仁杰
张龙翔
机构
北京大学生命科学学院生化与分子生物学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
2000年第2期215-223,共9页
文摘
经亲和层析纯化的河蚌 C反应蛋白 ( CRP)具有 SDS- PAGE纯度 ,用经改进的双偶联 Ed-man方法测得其 N端残基为谷氨酸 ,而不是高等动物 (人与家兔 ) C反应蛋白 N端的焦谷氨酸 .河蚌 C反应蛋白 N端的一级结构由固相 Edman方法测得 ,依次为 H2 N- E- T- A- Y- S- C- I- T- A- V- ;C端的一级结构由羧肽酶 A降解法测得 ,依次为 - L/V- S- S- T- Y- COOH,也不同于人和家兔的 C反应蛋白 .在河蚌 CRP的胰蛋白酶酶解肽段中 ,其 N端及 C端的结构也得到了证实 .河蚌 C反应蛋白经 V8蛋白内切酶酶解 ,溴化氰裂解 ,肽段经 HPLC反相柱分离 ,共得到 35个肽段 ,所有肽段的氨基酸序列均由气相氨基酸自动分析仪测得 .结合河蚌 C反应蛋白的胰蛋白酶酶解肽段的分析结果 ,其一级结构已初步拼接完成 .在其一级结构中发现有类似于其它 CRP的 Ca2 + 结合部位和磷酸胆碱结合部位 .河蚌 C反应蛋白的分子结构中存在微观不均一性 .从已知河蚌 C反应蛋白的分子特点 ,包括分子量 ,糖基化比例 ,一级结构不均一等特点 ,可以推测它与高等动物的免疫蛋白有许多相关之处 .对于河蚌 C反应蛋白分子结构的分析 ,将有助于免疫系统蛋白的发生 。
关键词
C反应蛋白
河蚌
一级结构
免疫蛋白
血液蛋白
Keywords
Anodonta, C reactive protein, Primary structure
分类号
Q510.1 [生物学—生物化学]
Q592.1 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
结核分枝杆菌DNA三价苗的细胞与体液应答研究
蔡宏
田霞
李淑霞
胡勤
朱玉贤
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2003
3
下载PDF
职称材料
2
结核分枝杆菌ESAT-6 DNA疫苗的细胞和体液应答及保护效率研究
蔡宏
田霞
呼西旦
李淑霞
朱玉贤
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
1
下载PDF
职称材料
3
河蚌C反应蛋白一级结构分析
夏东元
姚仁杰
张龙翔
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
2000
1
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职称材料
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