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简并PCR结合RACE技术克隆申克孢子丝菌未知过氧化氢酶基因 被引量：3
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作者 王晓慧 刘伟 李若瑜 《中国真菌学杂志》 2011年第5期271-275,共5页
目的克隆孢子丝菌未知过氧化氢酶基因,命名为Sscat基因。方法根据生物信息库中7种已知真菌过氧化氢酶氨基酸序列的高度保守区域设计简并引物,PCR扩增获得部分Sscat基因cDNA片段,随后应用RACE技术分别扩增其3'端和5'端未知序列... 目的克隆孢子丝菌未知过氧化氢酶基因,命名为Sscat基因。方法根据生物信息库中7种已知真菌过氧化氢酶氨基酸序列的高度保守区域设计简并引物,PCR扩增获得部分Sscat基因cDNA片段,随后应用RACE技术分别扩增其3'端和5'端未知序列。结果 Sscat基因cDNA序列全长1 746 bp,其中包括5'端121 bp的非编码区、1 500 bp的编码区和109 bp的3'端非编码区。该基因编码499个氨基酸,分子量为56.07 kDa,其氨基酸序列与其他真菌过氧化氢酶氨基酸高度同源,其中与米曲霉、黑曲霉同源性分别为66.3%和56.6%,Sscat基因为申克孢子丝菌过氧化氢酶cDNA。结论简并PCR结合RACE技术成功克隆了孢子丝菌未知过氧化氢酶基因。 展开更多
关键词 孢子丝菌 过氧化氢酶 简并PCR 快速cDNA末端扩增
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