紫龙金抑制人乳腺癌细胞系MCF-7生长的体内外实验研究 被引量：4

1

作者 田志华 梁云燕 +1 位作者 李振甫 王代树 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1292-1296,共5页

目的探讨复方中药紫龙金在体内和体外对MCF-7人乳腺癌细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 (1)台盼蓝拒染法和双层软琼脂克隆形成法检测紫龙金对MCF-7细胞增殖活性和克隆形成的影响;(2)Westernblot法检测紫龙金对p-ERK1/2蛋白表达的影... 目的探讨复方中药紫龙金在体内和体外对MCF-7人乳腺癌细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 (1)台盼蓝拒染法和双层软琼脂克隆形成法检测紫龙金对MCF-7细胞增殖活性和克隆形成的影响;(2)Westernblot法检测紫龙金对p-ERK1/2蛋白表达的影响;(3)17-β-雌二醇缓释药片包埋法构建MCF-7细胞的BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,并检测紫龙金(实验组灌胃生药20g紫龙金/kg体重)对肿瘤生长的抑制效应。结果 (1)紫龙金降低MCF-7细胞的存活率,并呈剂量和时间依赖性;(2)紫龙金组MCF-7细胞克隆形成率显著低于对照组,且随着浓度的增加,克隆形成能力明显降低[0.75、1.5、3.0、6.0mg/mL紫龙金组细胞克隆形成抑制率分别为(12.66±1.54)%、(88.83±2.13)%、100%、100%],克隆直径也明显减小或无克隆形成;(3)紫龙金下调p-ERK1/2蛋白的表达;(4)实验组裸鼠与对照组裸鼠4周后移植瘤的平均体积分别为(0.73±0.58)cm3、(1.36±0.64)cm3,平均瘤重分别为(1.02±0.25)g、(1.66±0.09)g,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),实验组抑瘤率为38.55%。结论紫龙金可显著抑制MCF-7细胞的体内和体外增殖、转化和致瘤性,这可能与p-ERK1/2蛋白的表达下调有关。 展开更多

关键词 紫龙金 人乳腺癌细胞系MCF-7 软琼脂克隆形成 P-ERK1/2 裸鼠成瘤性

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Ig启动子有效启动肿瘤抑制基因的表达研究 被引量：1

2

作者 何峙峤 毋丽娜 +2 位作者 朱晓辉 马腾 邱晓彦 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期136-141,共6页

免疫球蛋白(Ig)启动子在多种上皮性肿瘤细胞具有高启动活性。采用PCR方法获得了Ig重链VH6-1启动子,用该启动子DNA序列替换真核表达载体(PDC316)中巨细胞白血病病毒启动子(CMV)序列,构建了Ig启动子/人增殖抑制基因(hHSG)/PDC316表达载体... 免疫球蛋白(Ig)启动子在多种上皮性肿瘤细胞具有高启动活性。采用PCR方法获得了Ig重链VH6-1启动子,用该启动子DNA序列替换真核表达载体(PDC316)中巨细胞白血病病毒启动子(CMV)序列,构建了Ig启动子/人增殖抑制基因(hHSG)/PDC316表达载体。结果显示,与CMV启动子相比,Ig启动子能够更有效地启动hHSG基因的表达,并显示其生长抑制作用和诱导凋亡作用。提示Ig启动子可作为肿瘤靶向治疗载体中的启动子,在肿瘤基因治疗研究中具有较好的应用前景。 展开更多

关键词 肿瘤基因治疗 免疫球蛋白启动子 表达载体

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围术期胃肠道恶性肿瘤患者自体输血对凝血功能和血清炎性因子水平的影响 被引量：12

3

作者 张春丽 张改英 田慧芳 《检验医学与临床》 CAS 2016年第23期3342-3344,共3页

目的研究围术期胃肠道恶性肿瘤患者自体输血对凝血功能和血清炎性因子水平的影响。方法选择2012年8月至2014年8月的98例胃肠道恶性肿瘤患者,所有患者均在手术期间进行输血,按随机数字表法分为两组,各组49例。其中自体输血患者作为试验组... 目的研究围术期胃肠道恶性肿瘤患者自体输血对凝血功能和血清炎性因子水平的影响。方法选择2012年8月至2014年8月的98例胃肠道恶性肿瘤患者,所有患者均在手术期间进行输血,按随机数字表法分为两组,各组49例。其中自体输血患者作为试验组,异体输血患者作为对照组,观察两组患者凝血功能和血清炎性因子水平情况。结果两组患者手术前凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血小板计数(PLT)及纤维蛋白原(FIB)差异均无统计学意义(P>0.05),试验组手术后PT、APTT、PLT、FIB显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);手术前两组患者白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及前列腺素E2(PGE2)水平差异均无统计学意义(P>0.05);手术后试验组患者IL-6水平与对照组差异无统计学意义(P<0.05),IL-2、TNF-α及PGE2水平与对照组差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者不良反应包括发热、过敏、感染等。试验组不良反应发生率及生存率分别为6.12%、93.88%,对照组分别为22.45%、79.59%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论自体输血对胃肠道恶性肿瘤患者免疫功能抑制不明显,术后并发症较少,明显提高了患者生存期限。 展开更多

关键词 自体输血 恶性肿瘤 围术期 凝血功能 炎性因子

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38例肺结核手术标本结核菌代谢状态的研究 被引量：1

4

作者 李强 沈靖 高孟秋 《北京医学》 CAS 2015年第5期494-495,共2页

结核病病程漫长、易复发,且目前抗痨治疗至少需要6个月,重要原因是结核分枝杆菌（M.tuberculo-sis,MTB）具有持留性。本研究选取2008年10月至2009年6月于我院行手术治疗、术后病理确诊肺结核的患者38例,将肺组织匀浆、改良罗氏（Lowen-s... 结核病病程漫长、易复发,且目前抗痨治疗至少需要6个月,重要原因是结核分枝杆菌（M.tuberculo-sis,MTB）具有持留性。本研究选取2008年10月至2009年6月于我院行手术治疗、术后病理确诊肺结核的患者38例,将肺组织匀浆、改良罗氏（Lowen-stein-Jensen,L-J）培养及选择性7H9液体培养,并接种豚鼠,以探究病灶中MTB的代谢状态,报告如下。 展开更多

关键词 代谢状态 肺结核 手术标本 结核菌 结核分枝杆菌 液体培养 2009年 肺组织匀浆

原文传递

^(99)Tc^m-Herceptin的放射性标记与显像研究

5

作者 翟士桢 王雪鹃 +4 位作者 谢卿 赵起超 张宏 杜进 杨志 《标记免疫分析与临床》 CAS 2012年第6期366-370,共5页

目的探索HER2阳性胃癌显像剂99Tcm-Herceptin的标记方法,并进行荷瘤动物模型的显像研究。方法分别采用2-巯基乙醇(2-mercaptoethanol,2-ME)法和2-亚氨基噻吩(2-iminothiolane,2-IT)法标记赫赛汀(Herceptin)。评价不同标记方法对抗体活... 目的探索HER2阳性胃癌显像剂99Tcm-Herceptin的标记方法,并进行荷瘤动物模型的显像研究。方法分别采用2-巯基乙醇(2-mercaptoethanol,2-ME)法和2-亚氨基噻吩(2-iminothiolane,2-IT)法标记赫赛汀(Herceptin)。评价不同标记方法对抗体活性和标记率的影响。通过高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定标记抗体99Tcm-2-IT-Herceptin的体外稳定性。建立HER2阳性胃癌动物模型,并进行显像研究。结果 2-IT法标记Herceptin具有较高的标记率(>95%),且不会破坏抗体的完整性。标记抗体具有较高的体外稳定性。荷瘤动物模型注射99Tcm-2-IT-Herceptin 24h后,可以得到清晰的肿瘤显像结果。结论 99Tcm-2-IT-Herceptin具有较高的标记效率和体外稳定性,对所采用的HER2阳性动物模型具有靶向性,可能进一步开发成为新型HER2阳性胃癌显像剂。 展开更多

关键词 人表皮生长因子受体2 赫赛汀 胃癌

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血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤临床与分子病理学特征分析

6

作者 时云飞 王豪杰 +7 位作者 刘卫平 米岚 龙孟平 刘雁飞 赖玉梅 周立新 刁新婷 李向红 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期521-529,共9页

目的:分析血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)病理学特征、基因改变及预后的影响因素。方法:选择北京大学肿瘤医院病理科2007年6月至2021年11月明确诊断且有完整随访信息的AITL患者病例资料进行回... 目的:分析血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)病理学特征、基因改变及预后的影响因素。方法:选择北京大学肿瘤医院病理科2007年6月至2021年11月明确诊断且有完整随访信息的AITL患者病例资料进行回顾性分析,对病例进行形态学分型[Ⅰ型:淋巴结反应性增生(lymphoid tissue reactive hyperplasia,LRH)样;Ⅱ型:边缘区淋巴瘤(marginal zone lymphoma,MZL)样;Ⅲ型:外周T细胞淋巴瘤非特指型(peripheral T-cell lymphoma,not specified,PTCL-NOS)样]。结合免疫组化染色评估肿瘤有无滤泡辅助T细胞(follicular helper T cell,TFH)表型,生发中心(germinal center,GC)外滤泡树突细胞(follicular dendritic cells,FDC)增生,Hodgkin和Reed-Sternberg(HRS)样细胞及大B(细胞淋巴瘤)转化;计数每个高倍视野(high power field,HPF)Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr virus,EBV)阳性细胞含量;按需要完善T细胞受体(T-cell receptor,TCR)/免疫球蛋白(immunoglobulin,IG)基因重排检测和靶向外显子二代测序(targeted exome sequencing,TES)检测。结果:共收集患者61例,形态分型Ⅰ型7例(11.4%)、Ⅱ型31例(50.8%)、Ⅲ型23例(37.8%),51例(83.6%)具有明确TFH表型,有不同程度GC外FDC网架增生(中位20.0%),14例(23.0%)有HRS样细胞,7例(11.5%)有大B转化。42.6%(26/61)的病例属于EBV高含量(>10个/HPF)。TCR/IG重排分析57.9%TCR^(+)/IG^(-)(11/19),26.3%TCR^(+)/IG^(+)(5/19),10.5%TCR^(-)/IG^(-)(2/19),5.3%TCR^(-)/IG^(+)(1/19)。TES检测RHOA突变66.7%(20/30),IDH2突变23.3%(7/30),TET2突变80.0%(24/30),DNMT3A突变33.3%(10/30)。TES检测30例患者分为(1)IDH2和RHOA共突变组(7例):Ⅱ型6例,Ⅲ型1例,具典型TFH表型,未见HRS细胞和大B转化;(2)单RHOA突变组(13例):Ⅰ型1例,Ⅱ型6例,Ⅲ型6例,不具典型TFH表型5例,伴HRS细胞6例,伴大B转化2例,TCR^(-)/IG^(-)1例,TCR^(-)/IG^(+)1例,TCR^(+)/IG^(+)1例;(3)仅TET2和/或DNMT3A突变组(7例):Ⅱ型3例,Ⅲ型4例,均具典型TFH表型,伴HRS细胞2例,伴大B转化2例;(4)无突变组(3例),均为Ⅱ型,TFH表型典型,FDC网架增生,TCR^(-)/IG^(-)1例。单因素生存分析证实EBV阳性细胞含量高为总生存和无进展生存的不良预后因素(P=0.017及P=0.046)。结论:AITL组织病理学难以诊断主要见于形态Ⅰ型,伴HRS样细胞,大B转化;此时TCR/IGH重排检测对诊断有帮助但价值有限;增加TES检测RHOA、IDH2、TET2、DNMT3A等基因突变可有效辅助AITL疑难病例的组织病理学诊断。肿瘤组织中EBV阳性细胞含量升高提示预后不良。 展开更多

关键词 T细胞 淋巴瘤 病理学 基因突变 预后

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用DAPI和Hoechst33342染色法检测DNA的流式细胞方法探讨 被引量：21

7

作者 刘锡娟 丁慧荣 张宏 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期480-484,共5页

目的:探索利用DAPI和Hoechst33342两种荧光染料检测DNA的流式细胞技术。方法:分别用DAPI、Hochest和PI3种荧光染料标记HT-29细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较3种方法测定结果。用标准荧光微球和DNA质量控... 目的:探索利用DAPI和Hoechst33342两种荧光染料检测DNA的流式细胞技术。方法:分别用DAPI、Hochest和PI3种荧光染料标记HT-29细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较3种方法测定结果。用标准荧光微球和DNA质量控制试剂盒做测试质控。结果:质控实验显示,紫外激光的变异系数(CV)为2.4;DAPI和Hoechst33342标记的小鸡红细胞核(chicken erythrocyte nuclei,CEN)出现4个峰,第2、第3和第4峰所在道数的平均值与第1峰的比值为2、3、4,且第1峰的CV均为2.4。DAPI、Hoechst33342标记小牛胸腺细胞核(calf thymocyte nuclei,CTN)出现2个峰,G2/G1为1.97,且G0/G1峰的CV为2.4。DAPI、Hoechst33342和PI3种染料标记的HT-29细胞呈现完整的细胞周期峰,结果分别为CV值3.40、3.02和4.42,G0/G1期含量为60.86%、60.22%和60.81%,S期含量为28.85%、29.70%和29.82%,G2/M期含量为10.29%、9.09%和9.37%,3种标记法测定结果一致。结论:本文探索的DAPI和Hoechst33342标记法简单易行,可作为具备紫外激光器的流式细胞仪的首选DNA荧光染料。 展开更多

关键词 染色与标记 流式细胞术 DNA 细胞周期

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FACSAria流式细胞仪无菌操作分选高纯度细胞亚群 被引量：7

8

作者 刘锡娟 丁慧荣 +2 位作者 田志华 韩海勃 张宏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第12期1811-1815,共5页

BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和... BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和阴性细胞亚群。将所有分选的细胞进行培养检测无菌状态,并观察细胞生长情况。FACSAria流式细胞仪分选得到的GFP阳性细胞群的分选纯度达99.6%,GFP阴性细胞群的分选纯度达98.8%,同时激光共聚焦荧光显微镜显示分选后的GFP阳性细胞明显富集;分选后的BGC823细胞和SMMC7721细胞常规培养,细胞均无污染且生长状态良好。 展开更多

关键词 流式细胞仪 无菌分选 高纯度

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双功能试剂与螯合金属元素标记多肽新技术的建立

9

作者 田慧芳 徐庆春 +5 位作者 丁慧荣 田志华 张宏 朱华 王昕 沈靖 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1022-1028,共7页

建立了双功能试剂2-[(4-异硫氰基苯基)甲基]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(p-SCN-Bn-DOTA)与标准肽段反应的新方法,测定了反应产物与镧系金属Eu(Ⅲ)的螯合效率,探索了其作为靶向探针和蛋白定量标记试剂性能。考察了不同缓... 建立了双功能试剂2-[(4-异硫氰基苯基)甲基]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(p-SCN-Bn-DOTA)与标准肽段反应的新方法,测定了反应产物与镧系金属Eu(Ⅲ)的螯合效率,探索了其作为靶向探针和蛋白定量标记试剂性能。考察了不同缓冲体系的浓度及pH值、p-SCN-Bn-DOTA量与肽段相对量、反应体系中有机相与水相比例,反应温度与反应时间对偶联效率的影响。实验结果显示:p-SCN-Bn-DOTA量为肽段的32倍,缓冲体系为0.2 mol/L TEAB(pH 8.5),60℃反应60 min,有机相与水相之比为4.4∶1(V/V)时标记效率高;在HCl/Na Ac缓冲体系(pH 4.0)中60℃反应60 min,金属离子鳌合反应效率高达94%。本研究建立了一种新的基于双功能试剂p-SCN-Bn-DOTA的标记方法,并成功用于RGD肽等的标记。 展开更多

关键词 双功能试剂 标记 多肽 蛋白定量 质谱

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不同恶化程度胃癌细胞系的细胞间隙连接通讯功能及Cx43表达的差异 被引量：5

10

作者 田志华 丁慧荣 +2 位作者 张宏 张伟 李振甫 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期63-68,0+2,共6页

以人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1和不同恶化程度的人胃癌细胞系(低恶化AGS细胞系、中恶化SGC-7901细胞系、高恶化BGC-823细胞系)为研究对象,采用激光共聚焦显微镜的荧光漂白恢复技术及划痕标记荧光染料示踪技术研究不同恶化程度的胃癌细... 以人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1和不同恶化程度的人胃癌细胞系(低恶化AGS细胞系、中恶化SGC-7901细胞系、高恶化BGC-823细胞系)为研究对象,采用激光共聚焦显微镜的荧光漂白恢复技术及划痕标记荧光染料示踪技术研究不同恶化程度的胃癌细胞系细胞间隙连接通讯(Gap junctional intercellular communication,GJIC)功能的差异;采用荧光定量PCR技术和间接免疫荧光技术检测间隙连接蛋白(Connexin43,Cx43)基因在mRNA和蛋白水平的表达差异,探求其与胃癌恶性程度的相关性.结果表明,在正常胃细胞系和低、中及高恶化胃腺癌细胞系中,细胞间的GJIC功能随着恶性程度的升高而减弱(AGS、SGC-7901)或消失(BGC-823),且Cx43蛋白及mRNA的表达量随着恶性程度的升高而下调(AGS、SGC-7901)或缺失(BGC-823).这提示胃癌恶性程度与胃癌细胞的GJIC功能显著相关(P<0.05),GJIC在胃癌发生中起重要作用. 展开更多

关键词 胃癌细胞系 细胞间隙连接通讯(GJIC) 间隙连接蛋白(Cx43) 荧光漂白恢复技术 划痕标记荧光染料示踪技术 荧光定量PCR技术

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白及颗粒对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织α-1 antitrypsin、Neutrophil Elastase及MPO表达的影响 被引量：3

11

作者 程芳 武尚亮 赵丽华 《天津中医药》 CAS 2021年第2期233-239,共7页

[目的]研究白及颗粒对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)横型的治疗作用及作用机制。[方法]60只SPF级SD大鼠分为空白对照组、模型对照组、羧甲司坦片组(0.14 g/kg)、白及颗粒高剂量组(5.4 g生药/kg)、白及颗粒中剂量组(3.6 g生药/kg)、白及颗... [目的]研究白及颗粒对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)横型的治疗作用及作用机制。[方法]60只SPF级SD大鼠分为空白对照组、模型对照组、羧甲司坦片组(0.14 g/kg)、白及颗粒高剂量组(5.4 g生药/kg)、白及颗粒中剂量组(3.6 g生药/kg)、白及颗粒低剂量组(1.8 g生药/kg)。除空白对照组外其余大鼠于实验第1、15天经气管注入0.2 mL脂多糖(LPS)溶液。第15天除外第2~28天每天给予烟熏。记录0.3 s内最大呼气容积与肺活量比值(FEV 0.3/FVC%),采用苏木精-伊红(HE)染色及免疫组化染色观察各组大鼠肺组织的病理改变。[结果]与空白对照组比较,模型对照组FEV 0.3/FVC%显著降低(P<0.01),与模型对照组比较,白及颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组FEV 0.3/FVC%显著增加(P<0.01);病理检测结果显示:与空白对照组比较,模型对照组HE染色病理分级显著增加(P<0.01),与模型对照组比较,白及颗粒中剂量组、高剂量组HE染色炎症分级显著降低(P<0.01);与空白对照组比较,模型对照组肺脏细胞α-抗胰蛋白酶(α-1 antitrypsin)表达显著增加(P<0.05);与模型对照组比较,白及颗粒剂低剂量组、中剂量组和高剂量组大鼠肺脏细胞α-1 antitrypsin表达显著增加(P<0.05);与空白对照组比较,模型对照组肺脏细胞中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)表达显著增加(P<0.05),与模型对照组比较,白及颗粒中剂量组、高剂量组大鼠肺脏细胞NE表达显著降低(P<0.05);与空白对照组比较,模型对照组肺脏细胞髓过氧化物酶(MPO)表达显著增加(P<0.05),与模型对照组比较,白及颗粒低剂量组、中剂量组和高剂量组大鼠肺脏细胞MPO表达显著降低(P<0.05)。蛋白印迹检测结果显示:与空白对照组比较,模型对照组肺组织NE及MPO表达显著增加(P<0.05);与模型对照组比较,白及颗粒中剂量组、高剂量组大鼠肺组织内NE及MPO表达显著降低(P<0.05)。[结论]白及颗粒可能通过增加慢阻肺模型大鼠肺脏α-1 antitrypsin表达,降低NE及MPO的表达,起到减轻慢阻肺模型大鼠肺组织细胞炎症反应,最终产生改善COPD模型大鼠肺功能的药理作用。 展开更多

关键词 白及颗粒 慢性阻塞性肺疾病 α-抗胰蛋白酶 中性粒细胞弹性蛋白酶 髓过氧化物酶

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111In-DOTA-mAb109单克隆抗体探针的制备及其分子显像的研究 被引量：4

12

作者 朱华 李囡 +3 位作者 张宏 林新峰 李振甫 杨志 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第1期36-40,共5页

以具有肿瘤靶向的新型单克隆抗体m Ab109,借助其表面的氨基偶联双功能螯合剂获得可用于放射标记的DOTA-m Ab109,制备了111In-DOTA-m Ab109分子探针.Radio-HPLC分析结果表明,其标记率96%,放化纯度大于98%.体外稳定性实验结果表明111In-DO... 以具有肿瘤靶向的新型单克隆抗体m Ab109,借助其表面的氨基偶联双功能螯合剂获得可用于放射标记的DOTA-m Ab109,制备了111In-DOTA-m Ab109分子探针.Radio-HPLC分析结果表明,其标记率96%,放化纯度大于98%.体外稳定性实验结果表明111In-DOTA-m Ab109在Na Ac、PBS缓冲溶液以及5%人血清白蛋白溶液中均具有很高的稳定性.建立PANC-1胰腺癌裸鼠模型,通过Nano-SPECT设备观察其在模型动物体内的代谢情况:在静脉注射18.5 MBq111In-DOTA-m Ab109探针分别于24 h,48 h,72 h进行SPECT/CT的显像,随着时间的延长,其在肿瘤组织表现出代谢摄取的增高.通过断层显像,进一步分析,可见从特点层面观察到肿瘤组织具有明显的放射性摄取.上述研究结果表明,111In-DOTA-m Ab109分子探针有望发展成为一种具有肿瘤靶向性的新型分子探针. 展开更多

关键词 mAb109分子探针 肿瘤靶向 单光子发射断层显像 铟-111

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幽门螺杆菌阿莫西林耐药株缺乏青霉素结合蛋白基因外突变特征 被引量：3

13

作者 沈靖 邓大君 +1 位作者 柯杨 张建中 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期166-172,共7页

目的研究实验室诱导的耐阿莫西林（AMO）幽门螺杆菌（H．pylori）的青霉素结合蛋白基因（声幼）突变情况，探讨声幼基因突变与耐药性形成的关系，比较AMO耐药菌株和敏感菌株的蛋白表达谱，为筛选与H．pylori耐药相关的蛋白提供线索。方... 目的研究实验室诱导的耐阿莫西林（AMO）幽门螺杆菌（H．pylori）的青霉素结合蛋白基因（声幼）突变情况，探讨声幼基因突变与耐药性形成的关系，比较AMO耐药菌株和敏感菌株的蛋白表达谱，为筛选与H．pylori耐药相关的蛋白提供线索。方法体外诱导敏感菌株H．pylori26695产生AMO耐药，测定耐药菌株5个PBP的全基因的点突变情况；同时运用蛋白质组学技术，比较AMO耐药菌株和敏感菌株的蛋白表达谱。结果（1）体外诱导获得MIC为8μg／ml的耐药菌1株（AMO^r），其耐药表型经80℃冻存或在不含AMO的培养基上多次传代后会丧失；（2）AMO^r全部待测序列和出发菌株26695相应的靶序列完全相同，未检出基因点突变等结构变异；（3）对26695和AMO的蛋白表达图谱进行比较发现：11个蛋白斑点在表达量上有显著变化。结论H．pyloriAMO耐药性的形成主要是一种不稳定的表型变化，可能不是由加声基因结构变异所致。实验中耐药株和敏感株差异表达的蛋白在H．pylori的耐药形成过程中发挥着怎样的作用还有待进一步研究。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 阿莫西林 耐药性 点突变 蛋白质

原文传递

FACSAria流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法的优化和应用 被引量：10

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作者 刘锡娟 丁慧荣 张宏 《生物学通报》 北大核心 2010年第3期51-55,共5页

对FACSAria流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法进行优化和应用。通过对液流的调节,获得较稳定的分选设定值;在96孔微孔板盖上分选肉眼可见液滴,确定分选液滴在96孔微孔板每孔相对应的盖上的位置;分选结束后,计数单个细胞存在的细胞孔... 对FACSAria流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法进行优化和应用。通过对液流的调节,获得较稳定的分选设定值;在96孔微孔板盖上分选肉眼可见液滴,确定分选液滴在96孔微孔板每孔相对应的盖上的位置;分选结束后,计数单个细胞存在的细胞孔数;分选细胞培养7d后,记录单个细胞存在孔数及单克隆形成的数量。结果5个细胞形成的液滴即肉眼清晰可见;96微孔板有单个细胞的孔数为80～90个,单个细胞获得率为83.3%～93.7%,培养7d后,有活细胞存在的孔数为5～38孔,即单克隆形成率为6.3%～42.2%。分选前在96孔微孔板板盖上分选肉眼可见液滴的简单方法使得对液流位置的判断直观可见;流式细胞仪96孔微孔板单细胞分选是一种简单易行,准确有效地获得单个细胞和单克隆的方法。 展开更多

关键词 流式细胞仪 96孔微孔板 分选 单个细胞 自动细胞设置分选装置(ACDU)

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p27蛋白在Ⅱ期结肠癌组织中的表达及其意义

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作者 陈邦领 李明 +1 位作者 董彬 顾晋 《中华消化外科杂志》 CAS CSCD 2009年第1期57-59,共3页

目的探讨p27蛋白在Ⅱ期结肠癌组织中的表达意义。方法应用免疫组织化学方法结合组织芯片技术检测北京肿瘤医院57例Ⅱ期结肠癌组织中p27蛋白的表达情况，采用Kaplan-Meier法进行生存分析，Pearson X^2检验其相关性，Cox比例风险回归模型... 目的探讨p27蛋白在Ⅱ期结肠癌组织中的表达意义。方法应用免疫组织化学方法结合组织芯片技术检测北京肿瘤医院57例Ⅱ期结肠癌组织中p27蛋白的表达情况，采用Kaplan-Meier法进行生存分析，Pearson X^2检验其相关性，Cox比例风险回归模型进行多因素分析。结果在Ⅱ期结肠癌中p27蛋白的高表达率为60％（34／57），与结肠癌的分化程度、肿瘤部位、远处转移有关（X^2=5．97，5．93，5．05，P〈0．05）；与患者年龄、肿瘤大小、生长方式等无关（X^2=0．64，0．49，0．33，P〉0．05）；p27蛋白高表达患者5年生存率为94％（32／34），明显高于低表达患者的78％（18／23）（X^2=3．86，P〈0．05）。多因素分析显示：p27蛋白低表达和肿瘤穿透浆膜累及癌周是Ⅱ期结肠癌的独立不良预后因素。结论p27蛋白低表达是Ⅱ期结肠癌的独立不良预后因素之一，可以为临床筛选高危Ⅱ期结肠癌提供重要参考依据。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 Ⅱ期 P27蛋白 预后

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GFP/DNA双标记法流式细胞仪分析荧光补偿调节方法的建立

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作者 丁慧荣 刘锡娟 +1 位作者 田志华 张宏 《生物学通报》 2012年第6期54-58,共5页

用PI或Hoechst 33342标记表达GFP基因的BGH 823细胞DNA,流式检测分析时,需要做荧光补偿。以此为例,建立了线性(DNA含量)和对数(GFP表达量)放大信号之间的荧光补偿调节方法。结果表明,建立的补偿调节方法对于GFP/DNA双标记实验,完全适用... 用PI或Hoechst 33342标记表达GFP基因的BGH 823细胞DNA,流式检测分析时,需要做荧光补偿。以此为例,建立了线性(DNA含量)和对数(GFP表达量)放大信号之间的荧光补偿调节方法。结果表明,建立的补偿调节方法对于GFP/DNA双标记实验,完全适用和有效;它既实现了在同一散点图上同时呈现线性与对数放大,也提供了对数和线性2种不同荧光信号参数发生荧光重叠时进行补偿调节的方法。 展开更多

关键词 流式细胞术 绿色荧光蛋白(GFP)DNA含量 荧光补偿 对数放大 线性放大

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尾悬吊大鼠股直肌废用性肌萎缩的相关蛋白分析 被引量：1

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作者 任媛媛 周越 +2 位作者 田志华 吴金富 朱琳 《北京体育大学学报》 CSSCI 北大核心 2010年第11期50-53,共4页

目的:通过双向电泳技术分离骨骼肌蛋白质组份,探讨悬吊后肌萎缩组股直肌与正常骨骼肌的差异蛋白。方法:建立大鼠尾悬吊模型,使大鼠后肢去负荷,两周后取大鼠股直肌进行双向电泳技术分离,使用PDQuest软件对凝胶图像进行差异蛋白组学分析... 目的:通过双向电泳技术分离骨骼肌蛋白质组份,探讨悬吊后肌萎缩组股直肌与正常骨骼肌的差异蛋白。方法:建立大鼠尾悬吊模型,使大鼠后肢去负荷,两周后取大鼠股直肌进行双向电泳技术分离,使用PDQuest软件对凝胶图像进行差异蛋白组学分析。结果:研究发现在悬吊所致肌萎缩后有23个点发生了明显而稳定的改变,其中下调的蛋白有18个,上调的有5个。结论:悬吊致肌萎缩后,股直肌收缩蛋白、骨架蛋白、运输蛋白含量下调,而与代谢有关的蛋白或酶的表达有升有降,表现了在肌萎缩过程中代谢调节的复杂性。 展开更多

关键词 双向电泳 后肢悬吊 肌萎缩

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