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题名枣不同组织提取RNA方法的比较及优化
被引量：8
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作者
康亚璇
陈武
庞晓明
李颖岳
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机构
北京林业大学林木育种国家工程实验室生物科学与技术学院林木与花卉育种教育部重点实验室
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出处
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期2871-2882,共12页
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基金
"十二五"国家科技支撑项目(2013BAD14B0302)
国家自然科学基金(31400578)共同资助
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文摘
为了获得高质量的枣RNA,本研究从所得RNA的纯度与浓度、操作时间和成本等方面比较了Trizol试剂法、传统CTAB法、热硼酸法、试剂盒法以及改良CTAB法5种方法提取枣不同组织总RNA的效果,并筛选出了最适合提取枣不同组织样品RNA的具体方法。结果表明:(1)在本研究试验的5种提取方法中,枣不同的组织RNA提取需要不同的方法。枣组培苗RNA提取的最佳方法是热硼酸法,枣芽和幼叶是试剂盒法,花和果实需要用改良CTAB法。(2)通过正交试验,得出枣树花和果实RNA提取适宜的改良CTAB法为在原有CTAB法的基础上水浴20 min、加入Na Ac的p H值为4.8、加入2倍体积的异丙醇。(3)枣RNA提取过程中的其他条件包括:RNA储存液保存的材料提取出的RNA质量最高,使用TBE缓冲液替代TAE进行电泳可以提高RNA的电泳亮度,4℃低温离心更有利于组培苗和芽的总RNA的提取,而叶片、花以及果实的RNA提取室温即可。
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关键词
枣(Ziziphus
JUJUBA
Mill.)
总RNA
组织
改良CTAB
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Keywords
Chinese jujube(Ziziphus jujuba Mill.)
Total RNA
Plant tissue
Improved CTAB method
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分类号
S665.1
[农业科学—果树学]
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