目的采用聚合酶链反应（PCR）配合限制性酶切片段多态性（restriction fragment length polymorphism，RFLP）分析检测下呼吸道感染的常见病原菌，探讨其在临床快速诊断细菌感染中的应用价值。方法在下呼吸道感染的住院患者中筛选出合...目的采用聚合酶链反应（PCR）配合限制性酶切片段多态性（restriction fragment length polymorphism，RFLP）分析检测下呼吸道感染的常见病原菌，探讨其在临床快速诊断细菌感染中的应用价值。方法在下呼吸道感染的住院患者中筛选出合格痰标本125例，分为2份，1份行痰培养作为对照，另1份以16SrRNA基因为靶序列，在其保守区建立通用引物进行PCR扩增，再分别用限制性内切酶HaeⅢ、MnlⅠ、AluⅠ、DdeⅠ和BstBI酶切，进一步行RFLP分析，根据下呼吸道常见病原菌建立的特异酶切图谱诊断鉴定细菌，比较两种方法的检测结果。结果125例合格痰标本中，PCR配合RFLP检测阳性85例，阳性率为68．0％，痰培养阳性72例，阳性率为57．6％，前者明显高于痰培养（P〈0．01），其中肺炎链球菌及流感嗜血杆菌阳性率明显高于痰培养，部分革兰阴性杆菌阳性率也高于培养组，但部分革兰阳性球菌（溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌及屎肠球菌）阳性率较培养组低于痰培养。结论PCR配合RFLP分析方法检测下呼吸道感染病原菌较常规培养方法敏感快捷，是一种具有临床应用价值的快速诊断方法。展开更多
文摘目的采用聚合酶链反应（PCR）配合限制性酶切片段多态性（restriction fragment length polymorphism，RFLP）分析检测下呼吸道感染的常见病原菌，探讨其在临床快速诊断细菌感染中的应用价值。方法在下呼吸道感染的住院患者中筛选出合格痰标本125例，分为2份，1份行痰培养作为对照，另1份以16SrRNA基因为靶序列，在其保守区建立通用引物进行PCR扩增，再分别用限制性内切酶HaeⅢ、MnlⅠ、AluⅠ、DdeⅠ和BstBI酶切，进一步行RFLP分析，根据下呼吸道常见病原菌建立的特异酶切图谱诊断鉴定细菌，比较两种方法的检测结果。结果125例合格痰标本中，PCR配合RFLP检测阳性85例，阳性率为68．0％，痰培养阳性72例，阳性率为57．6％，前者明显高于痰培养（P〈0．01），其中肺炎链球菌及流感嗜血杆菌阳性率明显高于痰培养，部分革兰阴性杆菌阳性率也高于培养组，但部分革兰阳性球菌（溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌及屎肠球菌）阳性率较培养组低于痰培养。结论PCR配合RFLP分析方法检测下呼吸道感染病原菌较常规培养方法敏感快捷，是一种具有临床应用价值的快速诊断方法。
