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黄芩甙体外诱导大鼠骨髓基质细胞向神经干细胞的分化 被引量:3
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作者 张雷 张媛 +1 位作者 倪红霞 陈立梅 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第27期5054-5057,共4页
背景:已有实验表明,骨髓基质细胞具有分化为骨骼、神经干细胞及造血干细胞的巨大潜能,而黄芩甙具有诱导细胞分化的作用。目的:探讨黄芩甙体外诱导骨髓基质细胞分化为神经干细胞的可能性。方法:分离培养Wistar纯系大鼠骨髓基质细胞,... 背景:已有实验表明,骨髓基质细胞具有分化为骨骼、神经干细胞及造血干细胞的巨大潜能,而黄芩甙具有诱导细胞分化的作用。目的:探讨黄芩甙体外诱导骨髓基质细胞分化为神经干细胞的可能性。方法:分离培养Wistar纯系大鼠骨髓基质细胞,并将分离的骨髓基质细胞分为实验组和对照组,对照组不干预,实验组用黄芩甙(350-400μmol/L)诱导,2组的培养环境相同。持续诱导6d后选取生长良好的细胞进行蛋白质印迹和反转录PCR(RT-PCR)法检测。结果与结论:黄芩甙诱导7d后,骨髓基质细胞形成较典型的神经细胞形态。诱导前骨髓基质细胞不表达神经细胞标记蛋白mRNA和蛋白;诱导6d表达神经细胞标记蛋白和mRNA;对照组不表达神经细胞标记蛋白和mRNA。证实黄芩甙在体外可诱导成年大鼠骨髓基质细胞分化为神经样细胞。 展开更多
关键词 黄芩甙 骨髓基质细胞 神经干细胞 巢蛋白 诱导
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成人自体血清体外扩增培养骨髓间充质干细胞的生物学特性分析 被引量:2
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作者 张媛 陈立梅 +1 位作者 张雷 倪红霞 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第28期5523-5526,共4页
目的:为避免种子细胞培养过程中应用异体或异种血清的排斥及伦理问题,制备成人自体血清体外扩增培养骨髓间充质干细胞,观察其增殖及生长特征。方法:实验于2005-01/2006-01在北华大学医学院细胞生物实验室完成。①细胞来源:选取北华大学... 目的:为避免种子细胞培养过程中应用异体或异种血清的排斥及伦理问题,制备成人自体血清体外扩增培养骨髓间充质干细胞,观察其增殖及生长特征。方法:实验于2005-01/2006-01在北华大学医学院细胞生物实验室完成。①细胞来源:选取北华大学医学院附属医院收治的行骨髓干细胞保健治疗的成年志愿者3名,25~30岁,对本实验均知情同意。②实验方法:空腹无菌采集志愿者外周静脉血40mL,4℃静置4h,37℃静置4h,500g离心30min,吸取上清,即自体血清。从骨髓血中提取间充质干细胞,利用DMEM/F12培养基添加自体血清进行黏附培养和扩增。原代记为P1,按1∶3进行传代接种,第2代记为P2,以此类推。每次传代培养的细胞接种密度严格控制与原代培养接种密度相同的水平。③实验评估:倒置光学显微镜下观察骨髓间充质干细胞生长和形态变化,计数和MTT法观察原代和传代培养的增殖及生长特征,免疫组化法分析骨髓间充质干细胞纯度。结果:①原代及传代培养的成人骨髓间充质干细胞的光镜观察:原代培养24h后可见贴壁细胞,部分细胞有伪足伸展,第3天换液时有散在克隆生长,第5天呈克隆式增殖,10~12d可达90%细胞融合,基本铺满孔底面,呈骨髓间充质干细胞特征性的旋涡状生长,排列有方向性,旋涡中心细胞呈多层分布,细胞界限不清,细胞形态多呈梭形。传代细胞的生长较原代快,4h内即发现有贴壁细胞,24h内完全贴壁并伸展,第6~8天即可达到80%以上融合。②成人骨髓间充质干细胞的生长曲线分析:原代接种后2~6d为生长潜伏期,第7天开始形成大小不一的多个细胞克隆,至第9天细胞克隆进一步扩大,细胞数目呈指数级递增,为对数增殖期;第10~12天细胞生长进入平台期,原代培养结束。传至5代内的细胞生长旺盛,生长特性基本与第1代一致。③成人骨髓间充质干细胞免疫组化鉴定结果:P0、P1、P3、P5代细胞CD34染色呈阴性,而CD105染色阳性细胞在95%以上。结论:以自体血清体外扩增培养的骨髓间充质干细胞纯度高、增殖活性强,且至少在5代内生长旺盛并维持其生物特性。 展开更多
关键词 骨髓 间充质干细胞 体外培养
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大黄及其提取物对糖尿病肾病治疗研究现状 被引量:1
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作者 张轶伦 马晶 刘立民 《中国民康医学》 2006年第24期1002-1003,共2页
关键词 肾病治疗 糖尿病 提取物 大黄 泻下作用 前期准备 消渴 中药
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