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一株猪源鼠伤寒沙门氏菌的耐药性鉴定及其消除
被引量：
24
1
作者
贾爱卿
刘维红
+1 位作者
郭爱珍
陈焕春
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期789-795,共7页
猪源鼠伤寒沙门氏菌临床分离株17Y,检测其对19种抗生素的耐药性,结果耐14种抗生素。用高温及高浓度SDS处理后,获得对11种抗生素的敏感性,该菌株命名为17S1。PCR检测证明,大部分耐药基因存在于质粒上,包括I型整合子携带耐药基因,且随着...
猪源鼠伤寒沙门氏菌临床分离株17Y,检测其对19种抗生素的耐药性,结果耐14种抗生素。用高温及高浓度SDS处理后,获得对11种抗生素的敏感性,该菌株命名为17S1。PCR检测证明,大部分耐药基因存在于质粒上,包括I型整合子携带耐药基因,且随着质粒的消除而被消除。所鉴定的耐药基因有blaTEM、blaOXA-1、cat1、tet(B)、aacC2、aadA8b、dhfrXⅡ和sul1等。喹诺酮类药物的靶基因gyrA与parC位于染色体上。GyrA在耐药决定区第87位氨基酸突变(N78D),导致了喹诺酮类药物的耐药性逆转。敏感菌中扩增不到质粒毒力基因spv与rck。耐药性消除后的菌株17S1对小鼠的毒力降低(LD50增加10倍),在小鼠体内的增长与散速度也显著降低(P<0.05)。以上证据表明,鼠伤寒沙门氏菌的多重耐药性主要由质粒决定,研究开发新型质粒消除剂将对克服鼠伤寒沙门氏菌多重耐药性具有重要意义。
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关键词
鼠伤寒沙门氏菌
耐药性
质粒消除
细菌毒力
整合子
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职称材料
副猪嗜血杆菌Flp-FRT双基因敲除方法的建立与优化
2
作者
肖静
肖坤雪
+3 位作者
王翘楚
陈焕春
蔡旭旺
徐晓娟
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期219-230,共12页
本研究旨在利用Flp-FRT位点特异性重组系统建立副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis)的无抗性标记基因敲除方法,为G.parasuis的毒力因子、致病机制和基因工程疫苗研究提供有力的遗传操作工具。首先利用λ噬菌体cI857/P_(RM)/P_(R)基因...
本研究旨在利用Flp-FRT位点特异性重组系统建立副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis)的无抗性标记基因敲除方法,为G.parasuis的毒力因子、致病机制和基因工程疫苗研究提供有力的遗传操作工具。首先利用λ噬菌体cI857/P_(RM)/P_(R)基因表达调控系统调控Flp重组酶的表达,实现抗性突变体中抗性基因的消除;然后将Flp表达质粒电转化引入G.parasuis CF7066,再自然转化介导同源重组的自杀性质粒获得有抗性标记的基因缺失突变株,调节Flp酶表达并筛选无抗突变株,提高培养温度消除表达Flp酶的温敏质粒;进一步通过筛选突变FRT位点以保证基因敲除的效率。结果表明成功构建了温敏穿梭质粒pSHG5C-Flp,证实了λcI857/P_(RM)/P_(R)表达系统可调控Flp重组酶在G.parasuis中表达并切除抗性突变株ΔnanH::Kan_(R)中的抗性基因;然后用Flp重组酶表达质粒pSHG5C-Flp电转化G.parasuis CF7066,再用自杀性质粒pKF-ΔnanH和pKF-Δapd2对其进行两次连续自然转化,依次在自然转化的初代转化子中筛选并获得了无抗的单基因缺失株ΔnanH和双基因缺失株ΔnanHΔapd,提高培养温度至42℃培养消除了Flp重组酶表达质粒。尽管该系统实现了G.parasuis两个基因的连续敲除,但敲除第2个基因时的效率明显下降,这很可能源于细菌细胞中Flp重组酶表达的积累,对转化质粒介导的同源重组产生了干扰。因此,作者筛选了突变的FRT位点、构建自杀性质粒pKFM-Δapd进行自然转化,显著提高了自然转化后获得突变株的效率,从而保证了该敲除系统的有效性和稳定性。本研究首次报道了可用于G.parasuis的无抗性标记双基因缺失突变系统,为其分子致病基因与基因工程疫苗的研究奠定了基础。
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关键词
副猪嗜血杆菌
表达调控
Flp-FRT
基因敲除
无抗缺失
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职称材料
畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的研究进展
被引量：
36
3
作者
王瑞
蔡文涛
+2 位作者
王喜亮
高瑾
黄曼
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期972-987,共16页
畜禽中药-益生菌复合微生态制剂是指采用现代发酵技术将益生菌与中药联合发酵,发挥两者的协同作用,以提高畜禽免疫功能、保护畜禽健康的一种新型动物微生态制剂。文中通过调研近几年关于益生菌及中药微生态制剂等方面的文献,综述了畜禽...
畜禽中药-益生菌复合微生态制剂是指采用现代发酵技术将益生菌与中药联合发酵,发挥两者的协同作用,以提高畜禽免疫功能、保护畜禽健康的一种新型动物微生态制剂。文中通过调研近几年关于益生菌及中药微生态制剂等方面的文献,综述了畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的产生背景及菌种特点,并重点阐述了畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的作用机制、在畜禽养殖中的应用及存在问题与建议,以期为畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的深入研究提供参考和依据。
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关键词
益生菌
中药
协同发酵
微生态制剂
原文传递
题名
一株猪源鼠伤寒沙门氏菌的耐药性鉴定及其消除
被引量：
24
1
作者
贾爱卿
刘维红
郭爱珍
陈焕春
机构
华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北省预防兽医学重点实验室
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期789-795,共7页
基金
国家自然科学基金(30571386)
中国教育部留学回国人员科研基金(教外司留[2004]176号)~~
文摘
猪源鼠伤寒沙门氏菌临床分离株17Y,检测其对19种抗生素的耐药性,结果耐14种抗生素。用高温及高浓度SDS处理后,获得对11种抗生素的敏感性,该菌株命名为17S1。PCR检测证明,大部分耐药基因存在于质粒上,包括I型整合子携带耐药基因,且随着质粒的消除而被消除。所鉴定的耐药基因有blaTEM、blaOXA-1、cat1、tet(B)、aacC2、aadA8b、dhfrXⅡ和sul1等。喹诺酮类药物的靶基因gyrA与parC位于染色体上。GyrA在耐药决定区第87位氨基酸突变(N78D),导致了喹诺酮类药物的耐药性逆转。敏感菌中扩增不到质粒毒力基因spv与rck。耐药性消除后的菌株17S1对小鼠的毒力降低(LD50增加10倍),在小鼠体内的增长与散速度也显著降低(P<0.05)。以上证据表明,鼠伤寒沙门氏菌的多重耐药性主要由质粒决定,研究开发新型质粒消除剂将对克服鼠伤寒沙门氏菌多重耐药性具有重要意义。
关键词
鼠伤寒沙门氏菌
耐药性
质粒消除
细菌毒力
整合子
Keywords
Salmonella typhimurium
Plasmid elimination
Antibiotic resistance
Integron
Bacterial virulence
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
副猪嗜血杆菌Flp-FRT双基因敲除方法的建立与优化
2
作者
肖静
肖坤雪
王翘楚
陈焕春
蔡旭旺
徐晓娟
机构
华中农业大学
动物
医学院
农业
微生物学
国家
重点
实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期219-230,共12页
基金
湖北省科技创新专项(66)。
文摘
本研究旨在利用Flp-FRT位点特异性重组系统建立副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis)的无抗性标记基因敲除方法,为G.parasuis的毒力因子、致病机制和基因工程疫苗研究提供有力的遗传操作工具。首先利用λ噬菌体cI857/P_(RM)/P_(R)基因表达调控系统调控Flp重组酶的表达,实现抗性突变体中抗性基因的消除;然后将Flp表达质粒电转化引入G.parasuis CF7066,再自然转化介导同源重组的自杀性质粒获得有抗性标记的基因缺失突变株,调节Flp酶表达并筛选无抗突变株,提高培养温度消除表达Flp酶的温敏质粒;进一步通过筛选突变FRT位点以保证基因敲除的效率。结果表明成功构建了温敏穿梭质粒pSHG5C-Flp,证实了λcI857/P_(RM)/P_(R)表达系统可调控Flp重组酶在G.parasuis中表达并切除抗性突变株ΔnanH::Kan_(R)中的抗性基因;然后用Flp重组酶表达质粒pSHG5C-Flp电转化G.parasuis CF7066,再用自杀性质粒pKF-ΔnanH和pKF-Δapd2对其进行两次连续自然转化,依次在自然转化的初代转化子中筛选并获得了无抗的单基因缺失株ΔnanH和双基因缺失株ΔnanHΔapd,提高培养温度至42℃培养消除了Flp重组酶表达质粒。尽管该系统实现了G.parasuis两个基因的连续敲除,但敲除第2个基因时的效率明显下降,这很可能源于细菌细胞中Flp重组酶表达的积累,对转化质粒介导的同源重组产生了干扰。因此,作者筛选了突变的FRT位点、构建自杀性质粒pKFM-Δapd进行自然转化,显著提高了自然转化后获得突变株的效率,从而保证了该敲除系统的有效性和稳定性。本研究首次报道了可用于G.parasuis的无抗性标记双基因缺失突变系统,为其分子致病基因与基因工程疫苗的研究奠定了基础。
关键词
副猪嗜血杆菌
表达调控
Flp-FRT
基因敲除
无抗缺失
Keywords
Glaesserella parasuis
expression regulation
Flp-FRT
gene knockout
markerless deletion
分类号
S852.613 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的研究进展
被引量：
36
3
作者
王瑞
蔡文涛
王喜亮
高瑾
黄曼
机构
湖北
大学
生命科学
学院
省部共建
生物
催化与酶工程
国家
重点
实验室
药物高通量筛选技术
国家
地方联合工程研究中心
生物
资源绿色转化
湖北省
协同创新中心中药
生物
技术省
重点
实验室
华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北省预防兽医学重点实验室
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期972-987,共16页
基金
国家重点研发计划(Nos.2017YFD0501000,2017YFD0501500)资助~~
文摘
畜禽中药-益生菌复合微生态制剂是指采用现代发酵技术将益生菌与中药联合发酵,发挥两者的协同作用,以提高畜禽免疫功能、保护畜禽健康的一种新型动物微生态制剂。文中通过调研近几年关于益生菌及中药微生态制剂等方面的文献,综述了畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的产生背景及菌种特点,并重点阐述了畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的作用机制、在畜禽养殖中的应用及存在问题与建议,以期为畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的深入研究提供参考和依据。
关键词
益生菌
中药
协同发酵
微生态制剂
Keywords
probiotics
traditional Chinese medicine
synergistic fermentation
microecological preparations
分类号
S816.7 [农业科学—饲料科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一株猪源鼠伤寒沙门氏菌的耐药性鉴定及其消除
贾爱卿
刘维红
郭爱珍
陈焕春
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
24
下载PDF
职称材料
2
副猪嗜血杆菌Flp-FRT双基因敲除方法的建立与优化
肖静
肖坤雪
王翘楚
陈焕春
蔡旭旺
徐晓娟
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
下载PDF
职称材料
3
畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的研究进展
王瑞
蔡文涛
王喜亮
高瑾
黄曼
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
36
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