硒是双刃剑?——谈微生物中的硒代谢 被引量：49

1

作者 郑世学 粟静 +1 位作者 王瑞 王革娇 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1-8,共8页

硒位于元素周期表第Ⅵ主族,是一种生命必需的微量元素,是第21位氨基酸硒代半胱氨酸、硒代甲硫氨酸和含硒酶的必需组分。硒在人体免疫系统、抗癌、抗氧化等方面发挥重要作用,缺硒会导致40种以上的疾病。硒以Se(-Ⅱ)、Se(0)、Se(+Ⅳ)和Se(... 硒位于元素周期表第Ⅵ主族,是一种生命必需的微量元素,是第21位氨基酸硒代半胱氨酸、硒代甲硫氨酸和含硒酶的必需组分。硒在人体免疫系统、抗癌、抗氧化等方面发挥重要作用,缺硒会导致40种以上的疾病。硒以Se(-Ⅱ)、Se(0)、Se(+Ⅳ)和Se(+Ⅵ)4种价态存在,所有价态间的转化都有微生物的参与。本文主要综述最近几年国内外微生物代谢硒的研究进展,包括硒对生命体的重要作用与机制,硒的化学性质与生物地球化学循环,硒的氧化、还原和甲基化等多样的代谢硒的微生物类群,微生物代谢硒的分子机制;并探讨了微生物代谢硒在未来的关注点和实际应用。阐明微生物代谢硒在生物地球化学循环、生物多样性、植物富硒、人类健康和环境污染治理等方面都发挥着重要作用。 展开更多

关键词 硒 微生物代谢硒 硒的同化 硒还原 硒氧化 硒甲基化

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微生物对锑的代谢机制研究进展 被引量：11

2

作者 李明顺 李洁 王革娇 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期15-19,共5页

锑(Sb)是一种自然界普遍存在的剧毒重金属,随着工业生产的日趋发展,我国部分地区土壤、水体及农产品受到严重的锑污染。作为环境污染物,锑中毒会导致人类心肌衰竭,肝坏死等疾病。自然界中的某些生物,特别是微生物却可以在极高锑浓度下生... 锑(Sb)是一种自然界普遍存在的剧毒重金属,随着工业生产的日趋发展,我国部分地区土壤、水体及农产品受到严重的锑污染。作为环境污染物,锑中毒会导致人类心肌衰竭,肝坏死等疾病。自然界中的某些生物,特别是微生物却可以在极高锑浓度下生长,甚至可以利用这种元素作为能源物质,因此,微生物在锑的地球物质循环中起着重要的作用。研究生物对锑的代谢机制,对于保护环境与人体健康具有重要的现实意义。本文对锑在环境中的分布、污染状况、微生物对锑的代谢以及生物修复等方面的研究现状进行了综述。同时建议今后应加强以下三方面的研究:(1)筛选更多抗锑微生物或氧化锑的微生物;(2)发掘更多锑抗性基因或氧化基因;(3)开发锑污染土壤及水体的微生物修复技术。 展开更多

关键词 锑 微生物 代谢 外排 氧化

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深海盐单胞菌产生的微生物絮凝剂HBF-3对刚果红模拟染料废水脱色的研究 被引量：5

3

作者 邹娟 赵妮 +3 位作者 张吉斌 邵宗泽 刘子铎 喻子牛 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期181-184,共4页

以深海盐单胞菌V3a′(Halomonas sp.V3a′)合成的新型微生物絮凝剂HBF-3对刚果红模拟染料废水进行脱色试验,探讨HBF-3加入量、溶液pH、温度对脱色效果的影响,并与活性炭和壳聚糖对刚果红染料的脱色效果进行对比。结果表明:增加HBF-3的... 以深海盐单胞菌V3a′(Halomonas sp.V3a′)合成的新型微生物絮凝剂HBF-3对刚果红模拟染料废水进行脱色试验,探讨HBF-3加入量、溶液pH、温度对脱色效果的影响,并与活性炭和壳聚糖对刚果红染料的脱色效果进行对比。结果表明:增加HBF-3的加入量可以提高对刚果红溶液的脱色效果,HBF-3质量浓度为100mg/L时对200mg/L刚果红的去除率达83.7%;HBF-3对染料废水脱色效果受pH值的影响大,pH值在5.0～6.0时,HBF-3对刚果红溶液的脱色效果较弱,为41.1%左右;pH值在7.0～9.0之间变化时,脱色率稳定在88.7%左右;在10～70℃范围内絮凝率随温度变化而改变的幅度小。 展开更多

关键词 深海微生物 盐单胞菌 微生物絮凝剂 刚果红 脱色

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锰氧化菌及其生物锰氧化物在环境污染修复中的应用研究进展 被引量：7

4

作者 廖水姣 王革娇 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期9-14,共6页

目前,重金属和有毒有机污染物的环境污染受到社会广泛的关注。已有的研究表明,环境中广泛存在的锰氧化菌能修复环境中的Mn(Ⅱ)污染及生产锰氧化物(简称生物锰氧化物);生物锰氧化物较化学合成氧化锰矿物结晶弱,粒径小,Mn价态高,结构中八... 目前,重金属和有毒有机污染物的环境污染受到社会广泛的关注。已有的研究表明,环境中广泛存在的锰氧化菌能修复环境中的Mn(Ⅱ)污染及生产锰氧化物(简称生物锰氧化物);生物锰氧化物较化学合成氧化锰矿物结晶弱,粒径小,Mn价态高,结构中八面体空穴多,比表面积大,具有比化学合成锰氧化物更强的吸附、氧化和光还原溶解特性;生物锰氧化物能吸附Cu(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Pb(Ⅱ)、Co(Ⅲ)、Cd(Ⅱ)、Hg(Ⅱ)等多种重金属,氧化Co(Ⅱ)、As(Ⅲ)、Cr(Ⅲ)、U(Ⅳ)、Ce(Ⅲ)等低价重金属离子,降解乙炔基雌二醇等有机污染物,是具有广泛应用前景的环境材料。 展开更多

关键词 锰氧化菌 生物锰氧化物 锰 重金属 有毒有机污染物

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桑黄多糖抗疲劳及耐缺氧实验研究 被引量：24

5

作者 郭俊平 赵述淼 +1 位作者 马姝萍 梁运祥 《中国食用菌》 2012年第3期42-46,共5页

研究采用水提醇沉法得到桑黄菌丝多糖(大分子量粗多糖),通过小鼠抗疲劳、耐缺氧能力实验,研究桑黄菌丝多糖的生理活性。以小鼠游泳力竭时间、游泳前后血乳酸、肝糖原以及血清尿素氮含量的变化为指标,考察桑黄多糖抗疲劳能力,以小鼠在缺... 研究采用水提醇沉法得到桑黄菌丝多糖(大分子量粗多糖),通过小鼠抗疲劳、耐缺氧能力实验,研究桑黄菌丝多糖的生理活性。以小鼠游泳力竭时间、游泳前后血乳酸、肝糖原以及血清尿素氮含量的变化为指标,考察桑黄多糖抗疲劳能力,以小鼠在缺氧和亚硝酸钠中毒环境下的存活时间为指标,考察桑黄多糖耐缺氧能力。结果表明,灌胃桑黄多糖可以显著延长小鼠游泳时间达70.62%,降低游泳后乳酸曲线下面积22.89%,提高肝糖原储备33.36%,减少游泳后血清尿素氮含量23.17%,延长小鼠在缺氧环境下42.08%和亚硝酸钠中毒环境下35.29%的存活时间。因此,桑黄多糖具有提高小鼠抗疲劳和耐缺氧能力的作用,且在一定剂量范围内,实验效果与灌胃剂量呈正效应关系。 展开更多

关键词 桑黄多糖 抗疲劳 常压耐缺氧 亚硝酸钠中毒

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运用Gibson克隆技术构建蒺藜苜蓿成熟根瘤的酵母AD-cDNA文库 被引量：1

6

作者 陈琳 余海翔 张忠明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期23-27,共5页

以蒺藜苜蓿(A17)的成熟根瘤为材料,联合应用Gibson克隆技术和SMART cDNA技术构建cDNA文库,其转化效率达到7.74×10~5cfu/3μg pGADT7-Rec-New。随机菌落PCR检测结果表明,插入DNA片段的大小为0.5~2.0kb,其中插入片段>0.75kb的占45... 以蒺藜苜蓿(A17)的成熟根瘤为材料,联合应用Gibson克隆技术和SMART cDNA技术构建cDNA文库,其转化效率达到7.74×10~5cfu/3μg pGADT7-Rec-New。随机菌落PCR检测结果表明,插入DNA片段的大小为0.5~2.0kb,其中插入片段>0.75kb的占45.6%,文库的重组效率达到91.7%,构建的cDNA文库以质粒形式保藏备用。采用此法不仅可以构建用于酵母单杂交或双杂交的文库,同样也适用于其他质粒文库的构建。利用酵母单杂交技术,以在根瘤中高表达基因启动子元件为诱饵,筛选构建的文库,得到拟似与DNA互作的蛋白质。 展开更多

关键词 蒺藜苜蓿 根瘤 AD-cDNA文库 Gibson克隆技术

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利用赖氨酸芽孢杆菌产生的生物锰氧化物吸附和回收金离子 被引量：2

7

作者 王惠 裴媛筠 +2 位作者 熊丹丹 廖水姣 王革娇 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期29-33,共5页

研究了1株从锰污染的土壤中分离的细菌M14,初步鉴定其为赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sp.)。该菌在生长过程中可以将Mn(Ⅱ)氧化成不溶于水的以Mn(Ⅳ)为主的生物锰氧化物。再利用这种生物锰氧化物去吸附和解析溶液中的金离子,从而达到... 研究了1株从锰污染的土壤中分离的细菌M14,初步鉴定其为赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sp.)。该菌在生长过程中可以将Mn(Ⅱ)氧化成不溶于水的以Mn(Ⅳ)为主的生物锰氧化物。再利用这种生物锰氧化物去吸附和解析溶液中的金离子,从而达到了贵重金属回收再利用的目的。该菌保藏于中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:M2012084。本研究结果在净化和回收采矿等废水方面具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 锰氧化细菌 生物锰氧化物 赖氨酸芽孢杆菌 金吸附 解吸

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8株优良大豆根瘤菌与不同地区27个大豆主栽品种的匹配性研究 被引量：26

8

作者 伍惠 钟喆栋 +5 位作者 樊伟 彭亚齐 杜思 陈大松 王学路 李友国 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期405-418,共14页

大豆是我国重要的油料作物和高蛋白粮饲兼用作物,具有与根瘤菌共生固氮的能力。近十几年来,我国大豆品种更新快,导致大豆根瘤菌株与新品种匹配能力差、接种效果不明显。筛选与主栽大豆品种匹配性好、固氮效率高的广谱性优良菌株,可为针... 大豆是我国重要的油料作物和高蛋白粮饲兼用作物,具有与根瘤菌共生固氮的能力。近十几年来,我国大豆品种更新快,导致大豆根瘤菌株与新品种匹配能力差、接种效果不明显。筛选与主栽大豆品种匹配性好、固氮效率高的广谱性优良菌株,可为针对性的施用大豆根瘤菌接种剂提供菌种资源和方案。选取本实验室前期分离保存的6个优良快生型大豆根瘤菌株和2个慢生型大豆根瘤菌株,在砂培盆栽条件下与不同地区的27个大豆主栽品种进行匹配试验。测定分析了植株地上部分生物量、高度、根瘤数量、根瘤生物量和根瘤固氮酶活指标。结果表明:不同大豆根瘤菌之间结瘤固氮能力存在极显著的差异;供试根瘤菌均能够与国内24个大豆品种结瘤,广谱性较好;植株地上部分高度、根瘤数量、根瘤生物量和根瘤固氮酶活与地上部分生物量呈显著相关;大部分接种根瘤菌后的植物生物量显著高于CK;HN01、GR3、HH29、HH103匹配性和固氮效率均不逊色于USDA110,具有在东北地区、黄淮海地区、长江流域、东南地区推广的潜能;从品种来看,中豆39、BD2、天隆1号与8株供试大豆根瘤菌的匹配接种表现出高生物量特点。此外,本文还筛选出大豆-大豆根瘤菌的表型最佳匹配组合中豆39-GR3,适合长江流域地区;同样筛选到东北地区、黄淮海地区、东南地区最佳匹配组合,分别是HN01-辽豆14、HN01-徐豆14、HN01-BD2。本文初步建立了优良根瘤菌与大豆主栽品种的匹配关系,为在田间试验中进一步筛选和应用这些优良菌株提供了材料和指导。 展开更多

关键词 优良大豆根瘤菌 大豆 主栽品种 匹配性 共生固氮作用

原文传递

1株解淀粉芽孢杆菌发酵条件的优化及其对油茶炭疽病的防效 被引量：29

9

作者 信珊珊 祁高富 +7 位作者 朱发银 逯晋忠 李菁菁 王圣英 柳艳军 陈京元 王义勋 赵秀云 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期411-415,共5页

以从水稻根部分离到的1株解淀粉芽孢杆菌WH1为材料,通过红外吸收光谱对其发酵液中的抗菌活性物质进行了鉴定,并通过平板抑制试验和离体叶片防治试验,研究其发酵液对油茶炭疽病的抑制作用。结果表明:WH1发酵液中的抗菌活性物质为脂肽,该... 以从水稻根部分离到的1株解淀粉芽孢杆菌WH1为材料,通过红外吸收光谱对其发酵液中的抗菌活性物质进行了鉴定,并通过平板抑制试验和离体叶片防治试验,研究其发酵液对油茶炭疽病的抑制作用。结果表明:WH1发酵液中的抗菌活性物质为脂肽,该成分能够使油茶炭疽病菌丝畸形,高稀释倍数的发酵液对离体油茶叶片上的炭疽病仍然有显著的防效。以WH1作为防治油茶炭疽病的生物农药,通过Plackett-Burman设计和田口设计对WH1的发酵条件进行了优化,使抗菌脂肽产量大幅上升。在3、20、500 L的发酵罐上进行放大,控制溶氧在30%以上,成功的完成250 mL摇瓶到500 L罐的放大。500 L罐上培养48 h后发酵液10倍稀释液在PDA平板上的抑菌率为50.8%,对发酵液进行喷雾干燥后药效存留率为86.2%。 展开更多

关键词 解淀粉芽孢杆菌 脂肽 油茶炭疽病 抗菌活性 生物农药

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油菜内生真菌的分离鉴定及抑菌作用 被引量：20

10

作者 兰楠 祁高富 +1 位作者 喻子牛 赵秀云 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期270-275,共6页

从油菜幼苗中通过PDA培养基分离出9株内生真菌,通过形态观察和18S rRNA基因序列分析,其中6株鉴定为链格孢菌(Alternaria alternata),1株鉴定为球毛壳菌(Chaetomium globosum),1株属于镰刀菌属(Fusarium),1株属于炭角菌目(Xylariales)。... 从油菜幼苗中通过PDA培养基分离出9株内生真菌,通过形态观察和18S rRNA基因序列分析,其中6株鉴定为链格孢菌(Alternaria alternata),1株鉴定为球毛壳菌(Chaetomium globosum),1株属于镰刀菌属(Fusarium),1株属于炭角菌目(Xylariales)。从鉴定出的油菜内生真菌中,筛选出1株有抑菌活性的生防真菌——球毛壳菌(Chaetomium globosum)YY-11,此菌株对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、油菜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、小麦赤霉菌(Fusarium graminearum)等有不同程度的抑制作用。球毛壳菌YY-11对立枯丝核菌的玻片对峙镜检结果显示:在对立枯丝核菌的抑制过程中,球毛壳的拮抗机理主要是重寄生作用。 展开更多

关键词 内生真菌 18S rRNA球毛壳菌 抑菌作用

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苏云金素发酵培养基的优化设计 被引量：17

11

作者 常亚飞 陈守文 喻子牛 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2006年第3期190-194,共5页

采用Plackett-Burman设计对出发培养基各种成分影响苏云金芽孢杆菌中华亚种CT43发酵合成苏云金素的效应进行评价,筛选出有显著影响效应的因素为葡萄糖和黄豆饼粉。利用最陡爬坡路径试验逼近最大苏云金素产出区域,找到后续试验中心点。... 采用Plackett-Burman设计对出发培养基各种成分影响苏云金芽孢杆菌中华亚种CT43发酵合成苏云金素的效应进行评价,筛选出有显著影响效应的因素为葡萄糖和黄豆饼粉。利用最陡爬坡路径试验逼近最大苏云金素产出区域,找到后续试验中心点。综合中心组合设计和响应面分析法确定显著因素的最佳浓度。优化后培养基组成为(g/L):葡萄糖22.8g、黄豆饼粉32.5g、酵母抽提物3.0g、蛋白胨4.5g、玉米浆3.0g、KH2PO42.0g、MgSO4.7H2O 0.15g、MnSO4.H2O0.02g,苏云金素产量可达3.2g/L,比出发培养基提高2倍以上。 展开更多

关键词 苏云金素 试验设计 发酵培养基 优化

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在苏云金芽胞杆菌中高效和稳定表达AiiA蛋白 被引量：6

12

作者 吴怀光 叶伟星 +1 位作者 喻子牛 孙明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期2221-2226,共6页

【目的】摸索提高AiiA蛋白对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力的方法。【方法】苏云金芽胞杆菌的AiiA蛋白是一种胞内蛋白,能降解参与诱导调控多种植物病原菌致病基因表达的N-乙酰高丝氨酸内酯信... 【目的】摸索提高AiiA蛋白对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力的方法。【方法】苏云金芽胞杆菌的AiiA蛋白是一种胞内蛋白,能降解参与诱导调控多种植物病原菌致病基因表达的N-乙酰高丝氨酸内酯信号分子。本文采用两种方式来提高AiiA蛋白的活性,即利用苏云金芽胞杆菌S-层蛋白在细胞表面表达该蛋白以及利用苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因cry3Aa启动子来提高aiiA基因的表达量。为此构建该蛋白基因与细胞表面S-层蛋白的锚定区结合而成的融合蛋白基因slh-aiiA以及带有基因cry3Aa启动子的融合基因pro3A-aiiA。为了提高表达的稳定性以及去掉重组菌中非苏云金芽胞杆菌片段,本文构建了解离载体pBMB5401,并将上述两个融合基因单独或同时装入解离载体pBMB5401,分别得到重组质粒pBMBcaiiA,pBMB3aiiA和pBMB3439。转化苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171,随后导入温度敏感型辅助质粒pEG922,重组质粒在整合酶的作用下发生体内重组,消除了抗性基因等非必需片段。【结果】得到3个重组菌BMBcaiiAR,BMB3aiiAR和BMB3439R,在无抗性选择压力下的稳定性均在90%以上。融合蛋白SLH-AiiA及pro3A-AiiA在解离后的重组菌中得到表达,具有对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力。【结论】在苏云金芽胞杆菌中高效和稳定表达AiiA蛋白,可增强其对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力,当同时结合两种方式来表达AiiA蛋白时效果最好。 展开更多

关键词 苏云金芽胞杆菌 AiiA蛋白 融合蛋白 解离载体

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内生成团泛菌HAUM1对宿主水稻的定殖及促生作用 被引量：8

13

作者 刘佳 林会 赵斌 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第23期4820-4824,共5页

从水稻中分离出一株具有解磷能力的内生成团泛菌HAUM1,将菌株HAUM1进行gfp基因标记后,结合激光共聚焦扫描技术与平板计数法,研究其对宿主水稻的侵染、定殖及分布规律,结果表明大量菌体以特殊的Symplasmata结构由根部侵入宿主,并逐渐扩... 从水稻中分离出一株具有解磷能力的内生成团泛菌HAUM1,将菌株HAUM1进行gfp基因标记后,结合激光共聚焦扫描技术与平板计数法,研究其对宿主水稻的侵染、定殖及分布规律,结果表明大量菌体以特殊的Symplasmata结构由根部侵入宿主,并逐渐扩散到茎、叶组织中。在对HAUM1促生作用的研究中,将HAUM1与两株解磷菌PA10(Agrobacterium sp.)、P11(Pantoea agglomerans)同时进行接种处理,结果证明前者在提高宿主水稻的生物量、叶绿素及磷含量方面都具有显著优势,且HAUM1的吲哚乙酸生产能力高达23.9 mg/L。表明HAUM1对生态型农业具有重要的应用潜力。 展开更多

关键词 解磷作用 内生细菌 侵染 定殖 扩散 促生

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百脉根AD-cDNA文库的构建及与结瘤因子受体NFR1相互作用蛋白的鉴定 被引量：3

14

作者 朱浩 朱辉 +2 位作者 杨绮 陈春芬 张忠明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期793-798,共6页

以豆科植物百脉根为材料,构建了AD-cDNA表达文库。其库容量达到每3μg DNA 2×106酵母转化子,空载率为12.5%,平均片段长度为1.5 kb。以百脉根结瘤因子受体激酶基因1(nod factor receptor kinase,NFR1)蛋白激酶结构域的DNA片段(NFR1-... 以豆科植物百脉根为材料,构建了AD-cDNA表达文库。其库容量达到每3μg DNA 2×106酵母转化子,空载率为12.5%,平均片段长度为1.5 kb。以百脉根结瘤因子受体激酶基因1(nod factor receptor kinase,NFR1)蛋白激酶结构域的DNA片段(NFR1-PK)为诱饵,利用酵母双杂技术,筛选与NFR1相互作用的基因。结果在含X-gal的四缺选择性培养基上筛选到120个克隆。经质粒抽取、PCR鉴定、回转酵母验证得到80个阳性克隆。对26个确定阳性克隆的外源片段进行测序和同源性分析,通过NCBI数据库比对分析鉴定含有JAB1、AT-RICH结构域等4个与NFR1-PK相互作用的不同基因。通过半定量RT-PCR观察在百脉根中这些基因的表达情况,其结果可为进一步研究NFR1基因的功能和调控机制提供材料。 展开更多

关键词 百脉根 AD-cDNA文库 NFR1 酵母双杂交

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油菜花粉黄酮的提取与纯化 被引量：9

15

作者 王芙蓉 梁运祥 《湖北农业科学》 北大核心 2007年第2期290-292,共3页

对油菜花粉黄酮的提取与纯化工艺进行了系统的研究。结果表明,在95℃水浴条件下,按1∶35的固液比加入95%乙醇提取2h为最佳,破壁花粉黄酮得率3.167%,较未破壁花粉提高了50.6%;8种大孔树脂中DM-130型树脂为纯化的最适树脂,在最佳上样量16.... 对油菜花粉黄酮的提取与纯化工艺进行了系统的研究。结果表明,在95℃水浴条件下,按1∶35的固液比加入95%乙醇提取2h为最佳,破壁花粉黄酮得率3.167%,较未破壁花粉提高了50.6%;8种大孔树脂中DM-130型树脂为纯化的最适树脂,在最佳上样量16.78mg,并用最佳洗脱液50mL50%乙醇洗脱的情况下,产品黄酮纯度达到60.5%。 展开更多

关键词 油菜花粉 黄酮 提取 纯化

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苏云金芽胞杆菌对云斑天牛杀虫活性的体外检测 被引量：1

16

作者 逯晋忠 李菁菁 +3 位作者 张献芳 祁髙富 陈京元 赵秀云 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期681-686,共6页

模拟自然界中云斑天牛Batocera horsfieldi(Hope)成虫的生活状态,建立室内人工饲养及生测方法,对苏云金芽胞杆菌(Bt)的杀虫活性进行测定。将苏云金芽胞杆菌菌悬剂涂抹在野蔷薇枝条表面,饲喂云斑天牛成虫,20 d后统计死亡率、体质量变化... 模拟自然界中云斑天牛Batocera horsfieldi(Hope)成虫的生活状态,建立室内人工饲养及生测方法,对苏云金芽胞杆菌(Bt)的杀虫活性进行测定。将苏云金芽胞杆菌菌悬剂涂抹在野蔷薇枝条表面,饲喂云斑天牛成虫,20 d后统计死亡率、体质量变化及产卵数量。在室内测定了80株苏云金芽胞杆菌的活性,通过1次初筛和2次复筛,筛选到1株对云斑天牛成虫有较高致死率的菌株ZQ-51。该菌株处理云斑天牛成虫后平均死亡率为53.33%,平均体质量减少率和平均产卵减少率分别是5.67%和12.48%,与对照差异均极显著。从感染死亡的成虫肠道中重新分离了该菌株,并验证分离的菌株与ZQ-51具有相似的形态特征和杀虫活性,表明苏云金芽胞杆菌可通过云斑天牛取食进入肠道而发挥杀虫作用。 展开更多

关键词 苏云金芽胞杆菌 云斑天牛 杀虫活性

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苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1518的插入突变体库的构建及芽胞萌发突变株的筛选 被引量：6

17

作者 巫益鸣 阮丽芳 +2 位作者 彭东海 刘国强 孙明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期577-581,共5页

通过携带Mini-Tn10转座子的温度敏感性质粒载体pIC333构建了苏云金芽胞杆菌YBT-1518菌株的插入突变体库。从突变体库中筛选得到1株芽胞不能在萌发剂L-丙氨酸诱导下萌发的突变株(命名为MA1),进一步的试验表明该突变株菌株的芽胞在其他氨... 通过携带Mini-Tn10转座子的温度敏感性质粒载体pIC333构建了苏云金芽胞杆菌YBT-1518菌株的插入突变体库。从突变体库中筛选得到1株芽胞不能在萌发剂L-丙氨酸诱导下萌发的突变株(命名为MA1),进一步的试验表明该突变株菌株的芽胞在其他氨基酸L-苯丙氨酸、L-缬氨酸和L-亮氨酸以及糖类萌发剂葡萄糖、果糖和蔗糖的诱导下也都不能萌发,表明MA1很可能属于新型的芽胞萌发缺陷突变株。 展开更多

关键词 苏云金芽胞杆菌 转座子 突变体库 L-丙氨酸 芽胞萌发

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2株内生细菌在油菜体内的定殖、促生长及抗虫性检测 被引量：6

18

作者 张献芳 文凯 +3 位作者 逯晋忠 王圣英 祁高富 赵秀云 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期143-147,共5页

以水稻和油菜为试验材料,对内生菌YY-23和SJ-10进行定殖范围的测定、促生长及抗虫试验,结果表明:2株内生菌YY-23和SJ-10均能在水稻、油菜、小麦、玉米、红菜薹、萝卜等植物体内定殖;菌液浸种24 h后播种,20 d后经YY-23和SJ-10浸种后的油... 以水稻和油菜为试验材料,对内生菌YY-23和SJ-10进行定殖范围的测定、促生长及抗虫试验,结果表明:2株内生菌YY-23和SJ-10均能在水稻、油菜、小麦、玉米、红菜薹、萝卜等植物体内定殖;菌液浸种24 h后播种,20 d后经YY-23和SJ-10浸种后的油菜鲜质量分别比对照增加了113.5%、52.5%;SJ-10在饲喂第6天时存活率比对照明显降低,差异显著(P<0.05),而YY-23无抗虫活性。 展开更多

关键词 内生细菌 定殖 促生长 抗蚜虫

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黑曲霉内切β-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的高效表达 被引量：9

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作者 黄君 张昌毅 +1 位作者 赵述淼 梁运祥 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期611-615,共5页

利用RT-PCR技术,提取黑曲霉(Aspergillusniger)L3的总RNA进行反转录,并通过PCR扩增得到去除天然信号肽的β-1,4-葡聚糖酶基因egⅠ,将其插入到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,使之位于α-因子信号肽下游,并与之同框,构建重组表达质粒pPIC9k-eg... 利用RT-PCR技术,提取黑曲霉(Aspergillusniger)L3的总RNA进行反转录,并通过PCR扩增得到去除天然信号肽的β-1,4-葡聚糖酶基因egⅠ,将其插入到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,使之位于α-因子信号肽下游,并与之同框,构建重组表达质粒pPIC9k-egⅠ,电击转化毕赤酵母GS115,经MM、MD、CMC-Na和G418平板筛选,得到重组毕赤酵母工程菌1#和5#,在摇瓶中β-1,4-葡聚糖酶酶活分别达到1456U/mL和1928U/mL。重组酶最适温度为70℃,最适pH为5.0。 展开更多

关键词 黑曲霉 β-1 4-内切葡聚糖酶 毕赤酵母 表达

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三价砷氧化细菌Acidovorax sp.GW2中As(Ⅲ)氧化酶基因和调控序列的克隆鉴定 被引量：4

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作者 赵凯 黄银燕 +1 位作者 王倩 王革娇 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期23-29,共7页

通过反向PCR和细菌Fosmid文库筛选,克隆得到1株三价砷[As(Ⅲ)]氧化细菌Acidovorax sp.GW2的As(Ⅲ)氧化酶Aox基因簇,包括aoxRSXABCD7个基因,分别预测编码双组分信号传导系统转录调控子AoxR(同源性68%),周质感应组氨酸激酶AoxS(同源性55%)... 通过反向PCR和细菌Fosmid文库筛选,克隆得到1株三价砷[As(Ⅲ)]氧化细菌Acidovorax sp.GW2的As(Ⅲ)氧化酶Aox基因簇,包括aoxRSXABCD7个基因,分别预测编码双组分信号传导系统转录调控子AoxR(同源性68%),周质感应组氨酸激酶AoxS(同源性55%),周质结合蛋白AoxX(同源性55%),砷氧化酶AoxAB(同源性分别为74%和71%),硝基还原酶AoxC(同源性46%),细胞色素c AoxD(同源性63%)。反转录PCR结果显示,编码双组分系统的aoxRS基因共转录,而与之转录方向相反的结构基因aoxABCD处于同一操纵子中,aoxX基因和aoxRS基因不在同一操纵子中。通过对aoxS、aoxX、aoxD的基因敲除功能研究发现aoxS和aoxX基因为GW2三价砷氧化的必需基因,aoxD的功能丧失减慢了三价砷的氧化速率,但非关键基因。 展开更多

关键词 Acidovorax sp.GW2 三价砷 三价砷氧化菌 三价砷氧化酶基因簇 双组分系统

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